植物化學(xué)成分分離法

關(guān)于植物化學(xué)成分分離法第一頁，共四十三頁，2022年，8月28日對溶劑的要求：

a.對所需成分溶解度大，對雜質(zhì)溶解度小，或反之；

b.不與所需成分起化學(xué)反應(yīng)，即使反應(yīng)也是可逆的；

c.經(jīng)濟易得，并具有一定安全性；

d.沸點適中，便于回收反復(fù)使用。第二頁，共四十三頁，2022年，8月28日常用提取溶劑分二大類：惰性溶劑——水、乙醇、甲醇、苯、氯仿、乙酸乙酯、丙酮等反應(yīng)溶劑——稀酸、稀堿的水溶液或醇溶液第三頁，共四十三頁，2022年，8月28日

二、提取方法

a.浸漬法

b.滲漉法

c.煎煮法

d.回流提取法

e.連續(xù)回流提取法第四頁，共四十三頁，2022年，8月28日采用幾種不同極性的溶劑分步提取

常用系統(tǒng)：己烷—乙醚—甲醇—水己烷—二氯甲烷—甲醇—水提供生物試驗樣品第五頁，共四十三頁，2022年，8月28日單一溶劑提取水：

a.胺型生物堿、甙類、有機酸可直接用水提取；

b.雜質(zhì)較多，分離困難——加戊醇、辛醇;薄膜濃縮；

c.易發(fā)霉發(fā)酵——加甲苯、甲醛、氯仿等防腐劑。有機溶劑（最常用乙醇）：

a.冷提雜質(zhì)較少；

b.熱提效率高，但雜質(zhì)亦較多。第六頁，共四十三頁，2022年，8月28日多種溶劑處理利用所含成分在某種溶劑中溶解度的差異而達到分離的目的。

例：苦楝皮磨粉苯液醇液油脂類川楝素

苯濃縮石油醚溶解結(jié)晶60%乙醇減壓濃縮氯仿提取第七頁，共四十三頁，2022年，8月28日第二節(jié)兩相溶劑萃取法混合物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中，由于分配系數(shù)不同而達到分離的目的。用于脂溶性成分和水溶性成分的分離。分離生物堿時常用pH梯度萃取。第八頁，共四十三頁，2022年，8月28日

例：從蛔蒿中提取驅(qū)蛔有效成分山道年第九頁，共四十三頁，2022年，8月28日第三節(jié)吸附法吸附法的目的：吸附除去雜質(zhì)（鞣質(zhì)色素）吸附所需物質(zhì)常用吸附劑：氧化鋁、氧化鎂、酸性白土、活性炭第十頁，共四十三頁，2022年，8月28日例：羊角拗甙的提取羊角拗種子石油醚脫脂95%乙醇醇提液蒸餾至干水溶液熱水溶解濾液粗強心甙粗甙乙酸鉛除雜質(zhì)脫鉛硫酸銨濾液乙醚氧化鎂拌勻乙醇丙酮回流總甙第十一頁，共四十三頁，2022年，8月28日第四節(jié)沉淀法利用某些成分與某些試劑產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)而得到分離或除去雜質(zhì)的方法。對所需成分來說，沉淀反應(yīng)是可逆的。最常用的是鉛鹽法。脫鉛方法可通硫化氫氣體，也可用硫酸、磷酸、硫酸鈉、磷酸鈉等。第十二頁，共四十三頁，2022年，8月28日幾種實驗室常用的沉淀劑常用的沉淀劑化合物中性乙酸鉛酸性，鄰位酚羥基化合物，有機酸，蛋白質(zhì)，黏液質(zhì)，鞣質(zhì)，樹脂，酸性皂甙，部分黃酮甙堿式乙酸鉛上述物質(zhì)，某些甙類，生物堿等堿性物質(zhì)明礬黃芩甙雷氏銨鹽生物堿碘化鉀季胺生物堿咖啡堿、明膠、蛋白鞣質(zhì)膽固醇皂甙苦味酸、苦酮酸生物堿氯化鈣、石灰有機酸第十三頁，共四十三頁，2022年，8月28日第五節(jié)透析法利用小分子物質(zhì)在溶液中可通過半透膜，而大分子物質(zhì)不能通過半透膜的性質(zhì)達到分離的方法。

電透析示意圖第十四頁，共四十三頁，2022年，8月28日第六節(jié)升華法凡具有升華性質(zhì)的化合物，均可用此法進行純化。此法簡單易行，但往往不完全，常伴有分解現(xiàn)象，產(chǎn)率低。例：樟木中的樟腦、茶葉中的咖啡堿、植物中的苯甲酸等成分的純化。第十五頁，共四十三頁，2022年，8月28日

第七節(jié)結(jié)晶和重結(jié)晶

結(jié)晶的目的在于進一步分離純化，便于進行化學(xué)鑒定及結(jié)構(gòu)測定工作。純化合物的結(jié)晶有一定的熔點和結(jié)晶學(xué)特征，有利于化合物性質(zhì)的判斷。初析出的結(jié)晶總帶有一些雜質(zhì)，需反復(fù)結(jié)晶，才能得到純粹的單一晶體。第十六頁，共四十三頁，2022年，8月28日一、結(jié)晶的條件需要結(jié)晶的溶液往往呈過飽和狀態(tài)。通常是在加熱的情況下，使化合物溶解過濾除去不溶性雜質(zhì)，濃縮，放冷，析出。一般放置對形成結(jié)晶來說是一個重要條件。濃度適中，逐漸降溫，有可能析出純度較高的結(jié)晶。第十七頁，共四十三頁，2022年，8月28日二、結(jié)晶溶劑的選擇對所需成分的溶解度隨溫度的不同而有顯著的差別；不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；其沸點低于化合物的熔點。第十八頁，共四十三頁，2022年，8月28日三、制備結(jié)晶的方法結(jié)晶形成的二個步驟：晶核的形成結(jié)晶的增長化合物結(jié)晶溶解濃縮過濾靜置第十九頁，共四十三頁，2022年，8月28日如無結(jié)晶析出，可采?。?/p>

a.松動瓶塞；

b.加入少量晶種；

c.用玻璃棒摩擦玻璃容器內(nèi)壁；

d.用干冰降溫；

e.加有機可溶性鹽類鹽析。第二十頁，共四十三頁，2022年，8月28日四、不易結(jié)晶或非結(jié)晶體的處理若是由于純度不夠，夾雜不純物引起的，需要進一步分離純化。若是本身的性質(zhì)，往往需要制備結(jié)晶性的衍生物或鹽，然后用化學(xué)方法處理回復(fù)到原來的化合物。第二十一頁，共四十三頁，2022年，8月28日五、結(jié)晶純度的判斷結(jié)晶形狀：針狀、柱狀、棱柱狀、板狀、片狀、方晶、粒狀、簇狀、多邊形棱柱狀初步鑒定的依據(jù)：形狀、色澤、熔點薄層層析氣相層析高效液相層析波譜技術(shù)第二十二頁，共四十三頁，2022年，8月28日第八節(jié)層析分離方法一、基本原理

利用不同的物質(zhì)在兩相（固定相和移動相）中不同的平衡分配系數(shù)來進行分離。

k=CsCm固定相中的濃度移動相中的濃度第二十三頁，共四十三頁，2022年，8月28日二、層析法的分類根據(jù)兩相所處的狀態(tài)來劃分：液相層析——液-固層析、液-液層析氣相層析——氣-固層析、氣-液層析

根據(jù)層析過程的機理來劃分：吸附層析——液固吸附層析、氣固吸附層析分配層析——液液分配層析、氣液分配層析排阻層析——液固排阻層析、氣固排阻層析離子交換層析——有機離子交換樹脂、纖維素及無機高分子交換劑第二十四頁，共四十三頁，2022年，8月28日三、常用的層析方法

層析填料是決定柱效的主要因素。填料應(yīng)具有的性能是不溶于所使用的流動相中，不使欲分離的物質(zhì)破壞或分解，惰性大，可逆性強，吸附容量大，同時顆粒直徑范圍要窄。1.硅膠層析

層析硅膠為多孔性物質(zhì)，可用通式SiO2.xH2O表示。其表面有很多游離(Ⅰ)、鍵合(Ⅱ)和鍵合—活性(Ⅲ)狀態(tài)的硅醇基，通過氫鍵與極性或不飽和分子相互作用，同時能吸附多量的水分。第二十五頁，共四十三頁，2022年，8月28日硅膠含水量與活性的比較

活性加入水量（%）

Ⅰ0Ⅱ5Ⅲ15Ⅳ25Ⅴ38

硅膠的吸附性能取決于硅膠中硅醇基的數(shù)目，其次是含水量，它隨著水分的增加而降低。第二十六頁，共四十三頁，2022年，8月28日層析柱的制備與加樣

濕法裝柱；干法裝柱。樣品溶于移動相，柱頂加入；樣品溶于適當溶劑，拌硅膠，待溶劑揮發(fā)，加移動相上柱。應(yīng)用范圍廣，適用于非極性和極性化合物。層析溶劑的選擇

根據(jù)物質(zhì)的極性采用相應(yīng)的極性溶劑來洗脫。硅膠的再生

乙醇或甲醇洗滌，除去溶劑，烘干活化處理。第二十七頁，共四十三頁，2022年，8月28日2、氧化鋁層析最常用吸附劑之一，微堿性。氧化鋁含水量與活性的關(guān)系

活性加入水量（%）

Ⅰ0Ⅱ3Ⅲ6Ⅳ10Ⅴ15第二十八頁，共四十三頁，2022年，8月28日洗脫用溶劑

極性溶劑洗脫能力大。氧化鋁再生

甲醇、稀乙酸、稀氫氧化鈉、水依次洗滌，200℃活化。第二十九頁，共四十三頁，2022年，8月28日3、活性炭層析分離水溶性物質(zhì)的主要方法之一。吸附作用在水溶液中最強，在有機溶劑中較弱。對物質(zhì)的吸附力：芳香族化合物＞脂肪族化合物大分子化合物＞小分子化合物極性基團多的化合物＞極性基團少的化合物第三十頁，共四十三頁，2022年，8月28日4、離子交換層析影響離子交換的有關(guān)因素

a.

溶液的酸堿度

b.對交換離子的選擇性

c.被交換物質(zhì)在溶液中的濃度

d.溫度的影響

e.溶劑的影響第三十一頁，共四十三頁，2022年，8月28日第三十二頁，共四十三頁，2022年，8月28日5、大孔吸附樹脂層析不含交換基團的具有大孔結(jié)構(gòu)的高分子吸附劑，也是一種親脂性物質(zhì)。吸附力主要依靠分子中的親脂鍵、偶極離子及氫鍵作用。解吸容易，吸附容量大。第三十三頁，共四十三頁，2022年，8月28日6、凝膠層析

固定相——凝膠，具有許多孔隙的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的固體，有分子篩的作用。親水性凝膠——葡聚糖凝膠。

疏水性凝膠——在交聯(lián)葡聚糖分子上引如一個基團增大其親脂性

第三十四頁，共四十三頁，2022年，8月28日7、聚酰胺層析分子中含豐富的酰胺基，可與酚、酸、醌、硝基化合物等形成氫鍵結(jié)合而被吸附，與不能形成氫鍵的化合物分離?；衔锓肿又蟹恿u基數(shù)目越多，吸附力越強；芳香核、共軛雙鍵多的吸附力也大。易形成分子內(nèi)氫鍵的化合物，會使化合物的吸附力減弱。第三十五頁，共四十三頁，2022年，8月28日8、快速層析(加壓柱層析)硅膠顆粒400—230篩目干法裝柱第三十六頁，共四十三頁，2022年，8月28日9、離心液相層析優(yōu)點:a.分離周期短

b.操作簡便

離心液相層析分離程序第三十