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文檔簡介
專題整合訓練(十五)(本欄目內(nèi)容,在學生用書中以獨立形式分冊裝訂!)[全員必做題]1.(2019·福建泉州一模)干擾素是一類幾乎能抵抗所有病毒的糖蛋白,可利用基因工程技術進行制備。請回答:(1)利用mRNA的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可構(gòu)建________文庫,進而獲得干擾素目的基因,該文庫不同于基因組文庫的特點是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出兩點)。(2)將干擾素目的基因?qū)氪竽c桿菌實現(xiàn)轉(zhuǎn)化時,首先應用________處理大腸桿菌,使之處于________態(tài)。大腸桿菌剛表達出的干擾素一般沒有活性,原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)利用基因工程生產(chǎn)的干擾素在體外往往不易保存,可通過________________________工程對其進行改造以延長保存時間。解析:(1)部分基因文庫是利用細胞內(nèi)的mRNA反轉(zhuǎn)錄形成的基因構(gòu)成的,只含有該生物的部分基因,故部分基因文庫比較小,另外cDNA文庫是由反轉(zhuǎn)錄形成的,故基因中無啟動子、內(nèi)含子等序列。(2)大腸桿菌作為受體細胞時,因其為微生物,故需要采用鈣離子處理大腸桿菌,讓其處于感受態(tài)。大腸桿菌是原核生物,沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等復雜的細胞器,無法對蛋白質(zhì)進行加工,故其剛表達出的干擾素一般沒有生物活性。(3)蛋白質(zhì)工程可以根據(jù)人們的預期對基因進行改造,從而生產(chǎn)出符合人們需要的蛋白質(zhì),對于不易保存的干擾素,可以采用蛋白質(zhì)工程進行改造。答案:(1)cDNA(或部分基因)文庫較小、基因中沒有啟動子、基因中沒有內(nèi)含子、只含有某種生物的部分基因、全部基因可在物種間進行交流(2)CaCl2(Ca2+)感受大腸桿菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細胞器,不能對翻譯后的蛋白質(zhì)進行加工(3)蛋白質(zhì)2.(2019·安徽黃山二模)反義基因是通過產(chǎn)生的mRNA分子,與相關基因產(chǎn)生的mRNA進行互補,來阻斷非正常蛋白質(zhì)合成。圖1為不同的限制酶及相應的切割位點。圖2為科學實驗中利用小分子量的A反義基因的實例。據(jù)圖回答下列問題:(1)基因工程中,A基因可以用____________(儀器)合成,利用該儀器還可以合成________等。若想將圖2中的A基因反向連接到結(jié)構(gòu)甲中,應該用________________限制酶切割A基因和結(jié)構(gòu)甲。DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,______________________可以“縫合”平末端和黏性末端。(2)用含A反義基因的農(nóng)桿菌感染植物細胞的原生質(zhì)體后,可用含有________的培養(yǎng)基進行篩選。培養(yǎng)一段時間后,在較高濃度的蔗糖溶液中,觀察細胞____________________來鑒別細胞壁是否再生。(3)導入的A反義基因能轉(zhuǎn)錄A反義RNA,且能與正常RNA互補,抑制A基因表達過程中的________。解析:(1)基因工程中,利用化學方法人工合成目的基因常使用的儀器是DNA合成儀,利用該儀器還可以合成引物(或探針)等。A基因和結(jié)構(gòu)甲都有EcoRⅠ和BamHⅠ的切割位點,切割A基因,不破壞目的基因,切割結(jié)構(gòu)甲不破壞標記基因,故將圖2中的A基因反向連接到結(jié)構(gòu)甲中,應該用EcoRⅠ和BamHⅠ限制酶切割A基因和結(jié)構(gòu)甲。T4DNA連接酶可以“縫合”平末端和黏性末端。(2)結(jié)構(gòu)甲中含有抗生素抗性基因,用含A反義基因的農(nóng)桿菌感染植物細胞的原生質(zhì)體后,可用含有抗生素的培養(yǎng)基進行篩選。培養(yǎng)一段時間后,在較高濃度的蔗糖溶液中,觀察細胞是否發(fā)生質(zhì)壁分離來鑒別細胞壁是否再生。(3)基因的表達分為轉(zhuǎn)錄和翻譯,翻譯是以mRNA作為模板,氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程,導入的A反義基因能轉(zhuǎn)錄A反義RNA,且能與正常RNA互補,使其不能提供翻譯模板,以抑制A基因的翻譯。答案:(1)DNA合成儀引物(或探針)EcoRⅠ、BamHⅠT4DNA連接酶(2)抗生素是否發(fā)生質(zhì)壁分離(3)翻譯3.(2019·廣東肇慶二模)含有限制酶的細胞中通常還具有相應的甲基化酶,這兩種酶對DNA分子有相同的作用序列,但具有不同的催化功能。甲基化酶可以對DNA序列進行修飾,使限制酶不能對這一序列進行識別和切割。回答下列問題:(1)目前,基因工程中使用的__________________主要是從原核生物中分離純化獲得的。構(gòu)建“基因組文庫”和“cDNA文庫”的過程中需要使用DNA連接酶的是__________________(填“基因組文庫”“cDNA文庫”或“基因組文庫和cDNA文庫”)。(2)含有某種限制酶的細胞,可以利用該限制酶切割外源DNA,但不破壞細胞自身的DNA,其原因可能有①__________________________________________;②________________________________________。(3)利用PCR擴增目的基因的過程由高溫變性(90~95℃)、低溫復性(55~60℃)、適溫延伸(70~75℃)三個步驟構(gòu)成一個循環(huán),為使得________________酶能夠重復利用,選用的酶應在90~95℃處理后仍然具備催化活性。(4)在PCR擴增目的基因時,為實現(xiàn)序列中的腺嘌呤被放射性同位素標記,反應體系中添加的原料應包括堿基已被標記的________(填“腺嘌呤核糖核苷酸”“dATP”或“ATP”)。解析:(1)基因工程中的限制酶主要是從原核生物中分離純化獲得的。構(gòu)建“基因組文庫”和“cDNA文庫”的過程中都需要利用DNA連接酶將DNA片段與載體連接導入受體菌群而儲存,只不過兩者使用的DNA片段不同,cDNA文庫是利用反轉(zhuǎn)錄法獲得的DNA(部分基因),基因組文庫使用的是某種生物的全部DNA(全部基因)。(2)原核細胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列或者甲基化酶對細胞自身的DNA分子進行了修飾,這使含有某種限制酶的原核細胞,可以利用該限制酶切割外源DNA,但不破壞細胞自身的DNA。(2)PCR擴增目的基因的三個步驟是高溫變性(90~95℃)、低溫復性(55~60℃)和適溫延伸(70~75℃),該過程使用的DNA聚合酶需是熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。(4)在PCR擴增目的基因使用的是dATP、dTTP、dCTP和dGTP。答案:(1)限制酶(或限制性核酸內(nèi)切酶)基因組文庫和cDNA文庫(2)①細胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列②甲基化酶對細胞自身的DNA分子進行了修飾(3)熱穩(wěn)定DNA聚合(Taq)(4)dATP4.(2019·河北唐山一模)傳統(tǒng)的人工繁殖蘭花的方法是分株繁殖和用種子播種,隨著科學技術的進步,人們開始采用“組織培養(yǎng)繁殖蘭花”。(1)植物組織培養(yǎng)是在________和人工控制條件下,將________的植物組織、器官、細胞,培養(yǎng)在人工配制的________上,誘導其產(chǎn)生________、叢芽,最終形成完整植株的過程。(2)蘭花的葉肉細胞之所以能培養(yǎng)為新個體,是因為細胞中含有______________________,具有發(fā)育成完整個體的潛能,這種潛能叫____________。(3)有人想到利用植物體細胞雜交技術解決蘭花生根速度慢、幼苗生存能力弱的好辦法,但操作后得到的“韭菜—蘭花”,并沒有預想中的“繁殖容易,香氣濃郁”,可能的原因是__________________________________________________________________;培育該雜種植物的過程中,遺傳物質(zhì)的傳遞________(遵循/不遵循)孟德爾遺傳規(guī)律。解析:本題通過植物組織培養(yǎng)技術的原理與技術的分析,考查考生的科學思維素養(yǎng)。(1)植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下,將離體的植物器官、組織、細胞,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽,最終形成完整的植株。(2)蘭花葉肉細胞中含有本物種的全部遺傳信息,具有發(fā)育成完整個體的潛能,即具有細胞全能性,所以蘭花葉肉細胞能夠培養(yǎng)為新個體。(3)植物體細胞雜交技術獲得的“韭菜—蘭花”并沒有預想中的“繁殖容易,香氣濃郁”,可能是因為兩個物種之間的基因相互影響,使某些基因無法正常表達;孟德爾遺傳規(guī)律發(fā)生在減數(shù)分裂過程中,植物體細胞雜交技術過程中只進行有絲分裂,沒有發(fā)生減數(shù)分裂。答案:(1)無菌離體培養(yǎng)基愈傷組織(2)本物種的全部遺傳信息細胞的全能性(3)兩個物種之間的基因相互影響,導致某些基因無法正常表達不遵循5.(2019·河南南陽一中模擬)科學家培育轉(zhuǎn)乳糖分解酶基因奶牛的過程如圖所示。請回答下列問題:(1)圖中細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分與植物組織培養(yǎng)基成分最主要的區(qū)別在于前者含有________。在進行細胞原代培養(yǎng)時會出現(xiàn)________________________和細胞接觸抑制現(xiàn)象。為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的________________。(2)圖中將乳糖分解酶基因?qū)肱咛コ衫w維細胞中,最常用的方法是________________________________________________________________________。(3)圖中的核移植操作需要將進行細胞培養(yǎng)獲得的供體細胞的細胞核注入去核的卵母細胞中,去掉卵母細胞細胞核的目的是________________________________________________________________________。而所用的供體細胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞,原因是________________________________________________________________________。(4)重組細胞2在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛體內(nèi)會生出與圖中的黑白花奶牛性狀并不完全相同的犢牛,原因可能有______________________________________________________________________________________________________________(至少答出兩點)。(5)轉(zhuǎn)乳糖分解酶基因奶牛的培育成功,說明了動物的______________________具有全能性。解析:本題通過動物細胞培養(yǎng)等的原理與技術的分析,考查考生的科學思維素養(yǎng)。(1)在動物細胞培養(yǎng)的合成培養(yǎng)基中,通常需加入動物的血清等天然成分,為動物細胞提供多種可促進細胞生長和增殖的物質(zhì)。在進行細胞原代培養(yǎng)時會出現(xiàn)細胞貼壁生長和細胞接觸抑制現(xiàn)象。向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素,可以防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染。(2)將目的基因?qū)雱游锛毎S蔑@微注射法。(3)核移植過程中,去掉卵母細胞細胞核的目的是保證克隆動物的核遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細胞的細胞核。原代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型,因此所用的供體細胞一般都選用原代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細胞。(4)生物的性狀由遺傳物質(zhì)和環(huán)境因素共同控制,生物的遺傳物質(zhì)主要存在于細胞核中,少數(shù)存在于細胞質(zhì)中,胚胎成纖維細胞的遺傳物質(zhì)有近一半來自配種的公牛等,因此重組細胞2在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛體內(nèi)會生出與圖中的黑白花奶牛性狀并不完全相同的犢牛。(5)將供體細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中,形成重組細胞2。重組細胞2培養(yǎng)成重組胚胎并最終發(fā)育成個體,說明動物的細胞核具有全能性。答案:(1)血清細胞貼壁生長抗生素(2)顯微注射法(3)保證克隆動物的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細胞的細胞核傳代10代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型(4)生物的性狀受細胞核和細胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)共同控制、生物的性狀還受環(huán)境因素的影響、胚胎成纖維細胞的遺傳物質(zhì)有近一半來自配種的公牛等(5)細胞核6.(2019·江西上饒中學開學檢測)如圖表示兩種制備單克隆抗體的實驗方案。已知調(diào)控細胞增殖的基因在骨髓瘤細胞的細胞質(zhì)中,回答相關問題:(1)體外培養(yǎng)動物細胞的條件有無菌無毒、營養(yǎng)條件、______________和____________。(2)若圖1中A是小鼠骨髓瘤細胞,則B細胞是取自____________________________動物體內(nèi)的B細胞,促進d過程的常用誘導劑是________________________________。(3)利用圖1制備單克隆抗體的方法中制備的原理是細胞膜流動性和________。(4)圖2以細胞核移植技術制備單克隆抗體,a為去核的________細胞,e是從d中分離出的胚胎干細胞,V過程類似于植物組織培養(yǎng)中的________過程。(5)單克隆抗體作為診斷試劑的優(yōu)點是________________________________________________________________________。解析:本題通過兩種制備單克隆抗體方案的對比分析,考查考生的科學思維素養(yǎng)。(1)動物細胞體外培養(yǎng)的條件除無菌無毒、營養(yǎng)條件外,還需要適宜的溫度和pH,需要一定的氣體環(huán)境(5%的二氧化碳,95%的空氣)。(2)若圖1中A是小鼠骨髓瘤細胞,則B細胞是從注射過特定抗原蛋白的動物中取出的B細胞,經(jīng)過特定抗原的刺激,對應的B細胞就能產(chǎn)生對應的特異性抗體,促進d動物細胞融合過程的常用誘導劑是聚乙二醇(PEG)或滅活的病毒。(3)圖1表示通過細胞融合獲得了雜交瘤細胞,要獲得更多的抗體需要將雜交瘤細胞進行培養(yǎng)增殖。這種方法制備單克隆抗體需經(jīng)過細胞融合獲得雜交瘤細胞和雜交瘤細胞的培養(yǎng)兩個階段,兩個階段的原理分別是細胞膜流動性和細胞增殖。(4)骨髓瘤細胞具有無限增殖能力,且調(diào)控細胞增殖的基因在其細胞的細胞質(zhì)中,而圖2是借助核移植技術制備單克隆抗體,所以a為去核的骨髓瘤細胞。e是從d所示的早期胚胎中分離出的胚胎干細胞,通過V過程的培養(yǎng)得到的特定細胞f能分泌抗體,因此V過程類似于植物組織培養(yǎng)中的再分化過程。(5)由于單克隆抗體具有靈敏度高、特異性強、可大量制備的特點,所以單克隆抗體作為診斷試劑的優(yōu)點是準確、高效、簡易、快速。答案:(1)溫度和pH氣體環(huán)境(2)注射過特定抗原蛋白聚乙二醇(PEG)或滅活的病毒(3)細胞增殖(4)骨髓瘤再分化(5)準確、高效、簡易、快速[重點選做題]1.(2019·廣東惠州三模)據(jù)報道,世界首例基因編輯嬰兒——“露露”和“娜娜”于2018年11月在中國健康誕生,她們的基因已經(jīng)經(jīng)過人為修飾,能夠天然抵抗艾滋病?;卮鹣铝袉栴}:(1)目前艾滋病治療采用的“雞尾酒療法”是通過三種或三種以上的抗病毒藥物聯(lián)合使用來治療艾滋病的,________________能抑制病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄成DNA。研究人員發(fā)現(xiàn),能防止艾滋病病毒攜帶者轉(zhuǎn)化為艾滋病患者的強力藥物會損害病人體內(nèi)細胞儲存葡萄糖的能力,從而可能引發(fā)______________病。(2)研究人員使用CRISPR基因編輯技術來修飾人類胚胎基因,在此過程使用的工具酶有____________________和________________。該基因編輯嬰兒孕育過程中使用了____________________________________等生物技術。(3)目前國際上普遍不贊同對健康胚胎進行基因編輯,請你談談理由:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(談出一條即可)。解析:(1)抑制病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄成DNA的物質(zhì)可以是逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。若某強力藥物會損害病人體內(nèi)細胞儲存葡萄糖的能力,會使血液中的葡萄糖無法降低而可能引發(fā)糖尿病。(2)使用CRISPR基因編輯技術來修飾人類胚胎基因過程中使用的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)和DNA連接酶。需采用試管嬰兒技術獲得基因編輯嬰兒,試管嬰兒孕育過程中使用了體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等生物技術。(3)對健康胚胎進行基因編輯是不理智的,違反倫理的;基因編輯后她們的全身基因組可能造成突變;艾滋病病毒的高變性,基因編輯技術也無法完全阻斷艾滋病病毒感染,因此國際上普遍不贊同對健康胚胎進行基因編輯。答案:(1)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑糖尿(2)限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)DNA連接酶體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植(3)對健康胚胎進行基因編輯是不理智的,違反倫理的;基因編輯后她們的全身基因組可能造成突變;艾滋病病毒的高變性,基因編輯技術也無法完全阻斷艾滋病病毒感染2.菊天牛是菊花的主要害蟲之一,為達到防治目的,科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術培育出了抗蟲菊花。請回答下列問題:(1)可用____________處理土壤農(nóng)桿菌,使其處于____________以便吸收重組質(zhì)粒。(2)將重組質(zhì)粒導入土壤農(nóng)桿菌的目的是利用農(nóng)桿菌能夠______________________________的特點,使目的基因進入受體細胞中,并插入菊花細胞的____________上,最終形成轉(zhuǎn)基因植株。(3)用PCR技術擴增目的基因時,需根據(jù)______________________的脫氧核苷酸序列設計特異引物,以________________________為模板進行第一輪擴增。(4)將轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當比例混合后飼喂菊天牛2齡幼蟲,實驗結(jié)果如下表所示:組別實驗組轉(zhuǎn)基因植株2對照組死亡率(%)轉(zhuǎn)基因植株153.3360.0013.33①對照組應飼喂等量的________菊花嫩莖及葉片與人工飼料的混合物。②據(jù)表分析,實驗組與對照組________差異顯著,說明轉(zhuǎn)基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。解析:(1)通常用Ca2+處理細菌,使之處于感受態(tài)以便吸收重組質(zhì)粒。(2)根據(jù)農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的TDNA可以整合到受體細胞染色體的DNA上的特點,通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胧荏w細胞的染色體DNA上,最終形成轉(zhuǎn)基因植株。(3)利用PCR技術擴增目的基因時,需要根據(jù)目的基因的脫氧核苷酸序列設計特異引物,同時利用含有目的基因的DNA為模板進行擴增。(4)①實驗設計時應遵循對照原則、單一變量原則和等量原則等,因此對照組應該加入等量的非轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料的混合物。②根據(jù)實驗組比對照組的死亡率高,說明轉(zhuǎn)基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。答案:(1)Ca2+(或CaCl2)感受態(tài)(2)將TDNA轉(zhuǎn)移至受體細胞染色體DNA(3)抗蟲基因(或目的基因)轉(zhuǎn)基因菊花的DNA(或含目的基因的菊花DNA)(4)非轉(zhuǎn)基因死亡率3.(2019·廣東肇慶一模)“不務正業(yè)”的化學諾貝爾獎又頒給了生物學,2018年10月3日,諾貝爾化學獎授予了格雷戈里·溫特(GregoryP.Winter)等3位科學家,以表彰他們在酶的定向進化,肽類和噬菌體展示技術等方面的成績。噬菌體展示技術是將外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當位置,使外源基因隨外殼蛋白的表達而表達,同時,外源蛋白隨噬菌體的重新組裝而展示到噬菌體表面的生物技術。請根據(jù)材料回答下列問題:(1)T2噬菌體的遺傳物質(zhì)是______________,如噬菌體外殼蛋白展示胰島素蛋白原,構(gòu)建基因表達載體時,胰島素基因前還要插入________________________________________________________________________。(2)將外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因中,需要用到的工具酶有__________________。噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如圖:圖示末端為________________,為使外源蛋白DNA序列能與其相連,外源蛋白DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種酶切割,該酶必須具有的特點是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)從物質(zhì)基礎來看,不同生物之間能夠進行基因重組,原因是________________________________________________________________________。(4)雷格戈里·溫特發(fā)明了“擬人化”和全擬人化的噬菌體展示技術,并開發(fā)了制造人源化抗體以及在細菌中重組表達人源抗體的技術,這一技術解決了單克隆抗體傳統(tǒng)的制備過程中需要將______________和____________________相融合的需求。單克隆抗體常應用于分子靶向治療,其特點是________________________________________________________________________。解析:本題考查基因工程的綜合應用,屬于對科學思維和社會責任要素的考查。(1)T2噬菌體是一種DNA病毒,其遺傳物質(zhì)是DNA。如噬菌體外殼蛋白展示胰島素蛋白原,構(gòu)建基因表達載體時,胰島素基因前還要插入該基因的啟動子。(2)構(gòu)建基因表達載體時,首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運載體,其次還需要用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA。EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的末端為黏性末端。為使外源蛋白DNA序列能與其相連,外源蛋白DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種酶切割,但該酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的應相同,否則無法連接。(3)不同生物之間能夠進行基因重組的原因是DNA都是由四種脫氧核苷酸組成的。(4)單克隆抗體傳統(tǒng)的制備過程中需要將骨髓瘤細胞和已免疫的效應B細胞相融合。單克隆抗體的特點是:特異性強,靈敏度高,可大量制備。答案:(1)DNA(胰島素基因)啟動子(2)限制酶和DNA連接酶黏性末端切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同(3)DNA都是由四種脫氧核苷酸組成的(4)骨髓瘤細胞已免疫的效應B細胞特異性強,靈敏度高,可大量制備4.(2018·安徽宣城二模)轉(zhuǎn)基因技術的應用大大提高了動植物的品質(zhì),如圖是綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬培育示意圖,據(jù)圖和材料回答下列問題:(1)過程①需要的工具酶有________________________。綠色熒光蛋白基因需要導入成纖維細胞的____________上才有可能培育出綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬。(2)豬胎兒成纖維細胞培養(yǎng)過程中,為了防止培養(yǎng)過程中的污染,通常還要在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的________________________________________________________________________。(3)通過過程⑤將早期胚胎移植到受體母豬體內(nèi)能存活的原因是________________________________________________________________________。(4)若是想在短期內(nèi)獲得更多的相同的綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬該如何做?________________________________________________________________________。(5)科學家將反義F3H序列導入康乃馨中,降低了植株中F3H基因的表達量和酶活性,封鎖了花青素合成途徑,獲得花香物質(zhì)苯甲酸的釋放量大大增加的轉(zhuǎn)基因康乃馨。以上說明目的基因除了是編碼蛋白質(zhì)的基因,還可以是________________。將目的基因?qū)胫参锛毎S玫姆椒ㄊ莀___________________。解析:(1)圖中①表示基因表達載體的構(gòu)建,②表示超數(shù)排卵處理,③是核移植過程,④是早期胚胎培養(yǎng),⑤是胚胎移植過程,最后通過妊娠分娩獲得綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬。構(gòu)建基因表達載體時,需要的工具酶有限制酶和DNA連接酶。綠色熒光蛋白基因需要導入成纖維細胞的染色體DNA上才有可能培育出綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬。(2)豬胎兒成纖維細胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)液中通常加入抗生素的目的是防止培養(yǎng)液被污染,培養(yǎng)液含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。(3)早期胚胎移植時,受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應,這為胚胎在受體母豬體內(nèi)存活提供了可能。(4)來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì),所以將早期胚胎進行胚胎分割移植可以獲得更多相同的綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬。(5)科學家將反義F3H序列導入康乃馨中,降低了植株中F3H基因的表達量和酶活性,封鎖了花青素合成途徑,獲得花香物質(zhì)苯甲酸的釋放量大大增加的轉(zhuǎn)基因康乃馨。以上說明目的基因除了是編碼蛋白質(zhì)的基因,還可以是調(diào)控作用因子。因為導入的對象是植物細胞,而土壤農(nóng)桿菌易侵染植物細胞,故一般用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。答案:(1)限制酶和DNA連接酶染色體DNA(2)抗生素(3)受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(4)對早期胚胎進行分割移植(5)調(diào)控作用因子農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法5.現(xiàn)代生物科技日新月異,請據(jù)圖回答:(1)圖中的prG、生長激素基因都是目的基因,可從基因文庫或cDNA文庫獲得后,常用________技術擴增。擴增后,如何鑒定其化學本質(zhì),請簡要寫出實驗設計思路。________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)獲得轉(zhuǎn)生長激素基因牛的核心步驟是________________________________________________________________________,過程通常用________法把目的基因?qū)胧芫?;過程③若要得到兩頭基因型一樣的牛,可在________________階段采用胚胎分割技術獲得。(3)將prG導入漿細胞制備單克隆抗體,應進行多次專一性抗體檢測,Ⅰ到Ⅱ間檢測篩選的目的是______________________________________________________________。(4)簡述⑤的培養(yǎng)流程:______________________________________________________________________________________________________________________
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