第十三章基因診斷和基因治療

第十三章

基因診斷與基因治療

(genediagnosisandtherapy)

基因診斷概念：

利用現(xiàn)代分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的技術(shù)方法，直接檢測(cè)基因結(jié)構(gòu)及其表達(dá)水平是否異常，從而對(duì)疾病作出診斷的方法。第一節(jié)基因診斷基因診斷常用技術(shù)方法

核酸分子雜交技術(shù)聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)基因芯片技術(shù)

DNA測(cè)序

基因診斷的臨床應(yīng)用(一)遺傳病的基因診斷(二)腫瘤的基因診斷(三)感染性疾病的基因診斷(四）法醫(yī)鑒定鐮刀狀細(xì)胞貧血（sicklecellanemia）鐮刀狀細(xì)胞貧血的分子機(jī)制第一個(gè)成功在分子水平得以解釋的人類疾病鐮刀狀細(xì)胞貧血的分子診斷方法最常用的是限制性內(nèi)切酶法（RE）

正常人：1.15kb、0.2kb；

患者：1.35kb

第二節(jié)基因治療基因治療的主要策略基因治療的基本程序問題與展望基因治療概念將缺陷基因的野生型拷貝導(dǎo)入到患者細(xì)胞內(nèi)，使其在體內(nèi)發(fā)揮作用，最終達(dá)到治療疾病的目的。

（一）基因增補(bǔ)將正常基因?qū)牖颊唧w細(xì)胞內(nèi)，以補(bǔ)償缺陷基因的功能，但致病基因未去除。（二）基因置換用正?；蛲ㄟ^同源重組置換缺陷基因，使細(xì)胞DNA完全恢復(fù)正常狀態(tài)（置換效率低、目前難以實(shí)際應(yīng)用）。基因治療的主要策略（三）基因修復(fù)對(duì)于致病基因中的突變堿基進(jìn)行精確修復(fù)，使其恢復(fù)正常功能（技術(shù)困難、難以實(shí)現(xiàn)）。（四）基因干預(yù)

指阻遏致病基因的過度表達(dá)甚至使其沉默，以達(dá)到治療目的（抗腫瘤、抗病毒）。

反義RNA:干擾mRNA的互補(bǔ)RNA;

反義DNA:干擾DNA的互補(bǔ)DNA；

RNA干擾：降解致病mRNA（五）“自殺基因”的應(yīng)用自殺基因的表達(dá)產(chǎn)物對(duì)宿主細(xì)胞是致命的?？捎糜谥委熌[瘤和其他增生性疾病。

機(jī)理：（1）自殺基因?qū)胨拗骷?xì)胞后可產(chǎn)生一種酶，它可將原無毒性藥物前體轉(zhuǎn)化為細(xì)胞毒物質(zhì)，從而殺死細(xì)胞。（2）自殺基因?qū)胨拗骷?xì)胞后，編碼產(chǎn)物可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

（六）免疫基因治療

將某些細(xì)胞因子（IL-2、GM-CSF等）基因?qū)肽[瘤患者體內(nèi)，以增強(qiáng)患者的抵抗力。1、原因：ADA缺乏腺苷、脫氧腺苷堆積dATP堆積NDP還原酶活性受抑DNA合成受阻早期T、B細(xì)胞發(fā)育停滯T、B細(xì)胞功能障礙細(xì)胞、體液免疫缺陷嚴(yán)重聯(lián)