定量檢驗(yàn)方法學(xué)的分析性能驗(yàn)證淺析

王青女，1972年出生，遺傳學(xué)碩士，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心常規(guī)檢測實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人、技術(shù)主管，ISO15189質(zhì)量管理體系，具有較為扎實(shí)的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)及遺傳學(xué)專業(yè)知識。《醫(yī)學(xué)（IOS15189:2007）第5.5“5W+1H六個方面，對定量檢驗(yàn)方法學(xué)的性能驗(yàn)證進(jìn)行匯總，供大家探討和交流。一、為什么要做性能驗(yàn)證？性能驗(yàn)證是為了確保實(shí)驗(yàn)室開展的檢驗(yàn)項(xiàng)目，所應(yīng)用的檢測系統(tǒng)的分析性能或檢驗(yàn)項(xiàng)目的方法學(xué)能夠滿足檢測及臨床要求，從而保證患者標(biāo)本檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。二、進(jìn)行性能驗(yàn)證的場所？按照實(shí)驗(yàn)室管理辦法和認(rèn)可準(zhǔn)則的要求，醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)承擔(dān)所開展檢驗(yàn)項(xiàng)目的性能驗(yàn)證工作。三、何時需要做性能驗(yàn)證？1、以下情況應(yīng)完成初次性能驗(yàn)證：新安裝的儀器擬開展的項(xiàng)目；新開展項(xiàng)目；同一項(xiàng)目的試劑變更廠家或檢驗(yàn)方法發(fā)生變更時可能對結(jié)果產(chǎn)生較大的影響時，可選擇其所開展的部分檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行分析性能證。2、何時需要做性能評估/評價?12個月進(jìn)行一次評估，可通過評估如CV、均值等室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)的變化趨勢（批間精密度）、室間質(zhì)評項(xiàng)目的結(jié)果的可接受性（正確度）、臨床醫(yī)護(hù)人員對結(jié)果的反饋（可報告范圍）方式進(jìn)行。若評估的結(jié)果不可接受，則需重新進(jìn)行性能驗(yàn)證。四、哪些人員可以進(jìn)行性能驗(yàn)證試驗(yàn)?性能驗(yàn)證試驗(yàn)應(yīng)由實(shí)驗(yàn)室有資質(zhì)的檢驗(yàn)人員完成，必要時可由技術(shù)支持人員協(xié)助完成試驗(yàn)；而性能驗(yàn)證報告必須由資深的檢驗(yàn)人員完成，并經(jīng)科室主任審核后歸檔保存。五、性能驗(yàn)證包括哪些方面？定量項(xiàng)目性能驗(yàn)證的內(nèi)容包括但不限于：精密度（批內(nèi)、批間）；正確度；檢測低限（靈敏度）；攜帶污染率；線性范圍；可報告范圍；生物參考區(qū)間；檢驗(yàn)結(jié)果量值溯源；測量不確定度；等。六、如何實(shí)施性能驗(yàn)證？1、性能驗(yàn)證試驗(yàn)的準(zhǔn)備工作（尤其是各項(xiàng)性能參數(shù)的判斷標(biāo)準(zhǔn)的制定及其依據(jù)。驗(yàn)均需在室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果在控的情況下方可進(jìn)行。2、性能驗(yàn)證試驗(yàn)主要討論精密度、正確度、攜帶污染率、線性范圍、可報告范圍的試驗(yàn)方法。精密度主要包括批內(nèi)精密度和批間精密度兩項(xiàng)批內(nèi)精密度標(biāo)本選擇：選擇低、中、高三個濃度或中、高兩個濃度的新鮮標(biāo)本/質(zhì)控品；試驗(yàn)方法：連續(xù)重復(fù)測定20/21次；20次檢測結(jié)果的SD和CV；TE或者符合試劑說明書的要求。供的標(biāo)本濃度。批間精密度標(biāo)本選擇：選擇低、中、高三個濃度或中、高兩個濃度的新鮮標(biāo)本/質(zhì)控品；12021045天;20次檢測結(jié)果的SD和判斷標(biāo)準(zhǔn)：<1/3TEa；或者符合試劑說明書的要求。注意事項(xiàng)：若選擇標(biāo)本，首先應(yīng)考慮檢測物的穩(wěn)定性，濃度要求同批內(nèi)精密度；若檢測物不穩(wěn)定，則必須使用質(zhì)控品進(jìn)行該試驗(yàn)。正確度可采用以下七種方法進(jìn)行正確度評價：①分析已知值的參考物質(zhì)：因?qū)嶒?yàn)室不易得到參考物質(zhì)，較少使用。爭議，較少使用。不宜采用。④方法學(xué)比對試驗(yàn)；適用于引進(jìn)新方法時，可以與原有的方法進(jìn)行比較，最少分析20個新鮮標(biāo)本，要求濃度覆蓋線性范圍，用兩種方法同時測定同樣的樣品（偏倚<1/2Tea），進(jìn)行相關(guān)回歸分析?；虻膶?shí)驗(yàn)室，或與使用配套分析系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行比對，結(jié)果滿意。⑥分析室間質(zhì)評物：最為常用。檢測衛(wèi)生部臨檢中心質(zhì)評物，檢測結(jié)果均在允許范圍內(nèi)。BAB615次檢測結(jié)果的平均值，要求每次檢測廠家提供的校準(zhǔn)品B類不確定度）作為評價標(biāo)準(zhǔn)。攜帶污染率（加樣針）標(biāo)本選擇：取高濃度室內(nèi)質(zhì)控品或高濃度新鮮標(biāo)本，混合均勻后放置于1、2、3杯位置，再取去離子水或生理鹽水放置于4、5、6杯位置；6H1H2L1L2L3；結(jié)果計算：攜帶污染率（L1L3）100%（HL）；判斷標(biāo)準(zhǔn)：生化檢驗(yàn)項(xiàng)目<2%。線性評價標(biāo)本可使用添加物或校準(zhǔn)品；上述條件均無法滿足時，可選用滿足臨床需求的高值標(biāo)本。試驗(yàn)方法：標(biāo)本分別按、1：4（20%）、0：5（0%）的比例進(jìn)行稀釋，每個稀釋度重復(fù)測定3次計算均值。結(jié)果計算：將實(shí)測值與理論值作比較（偏離應(yīng)小于10%），計算Y=bX范圍。判斷標(biāo)準(zhǔn)：b在0.97～1.03范圍內(nèi)，a接近于0?？蓤蟾娣秶m用于實(shí)驗(yàn)室開展的線性范圍不能滿足臨床標(biāo)本檢測結(jié)果需求的定量檢驗(yàn)項(xiàng)目。標(biāo)本選擇：取一份接近線性范圍高限值濃度的病人標(biāo)本，用去離子水、生理鹽水、低值血清或廠商推薦的稀釋液進(jìn)行系列稀釋，稀釋比例參照廠商提供的機(jī)內(nèi)稀釋倍數(shù)。試驗(yàn)方法：每個濃度重復(fù)測定