微生物實(shí)驗(yàn)室消毒與環(huán)境控制

微生物實(shí)驗(yàn)室消毒與環(huán)境控制摘要：微生物實(shí)驗(yàn)室是從事與微生物有關(guān)實(shí)驗(yàn)研究工作的實(shí)驗(yàn)室，由于操作對象的潛在威脅，必須采取消毒滅菌與環(huán)境控制措施，以防止受到微生物的感染，本文因此對相關(guān)內(nèi)容進(jìn)行了分析。關(guān)鍵詞：微生物實(shí)驗(yàn)室；消毒；環(huán)境控制微生物實(shí)驗(yàn)室又稱為生物安全實(shí)驗(yàn)室，是指按照規(guī)范設(shè)計(jì)建造并配置實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，使用個人防護(hù)裝備，嚴(yán)格遵從標(biāo)準(zhǔn)化操作與管理程序，保證工作人員、周圍環(huán)境及實(shí)驗(yàn)因子安全的實(shí)驗(yàn)室［1］。根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489-2008）第4章的規(guī)定，按照生物安全防護(hù)水平，微生物實(shí)驗(yàn)室分為一級到四級（BSL-1?BSL-4）,—級實(shí)驗(yàn)室防護(hù)水平最低，四級實(shí)驗(yàn)室防護(hù)水平最高。目前我國也只有中科院武漢國家生物安全實(shí)驗(yàn)室按四級標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)，今年剛?cè)〉脟艺J(rèn)證。用于環(huán)境監(jiān)測的微生物實(shí)驗(yàn)室通常接觸的是對人類、動物或環(huán)境不產(chǎn)生嚴(yán)重疾病的微生物，防護(hù)水平不超過二級，應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)的微生物進(jìn)行操作，并在開放的臺面上工作，一般不需要特殊的安全措施，對于可能產(chǎn)生傳染性氣溶膠或飛濺物的實(shí)驗(yàn)應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。只要是微生物實(shí)驗(yàn)室就需要按照相關(guān)程序進(jìn)行消毒滅菌和環(huán)境控制，因此本文對這方面的內(nèi)容進(jìn)行了分析。微生物實(shí)驗(yàn)室消毒與滅菌方法1.1消毒與滅菌概念消毒與滅菌是兩個不同的概念。前者是指殺滅或清除傳播媒介上的有害微生物（如病原微生物），以實(shí)現(xiàn)無害化的處理方法；后者是指殺滅或清除傳播媒介上的一切微生物的方法?？梢?，滅菌比消毒更嚴(yán)格，或者說消毒比滅菌的范圍更寬。常用消毒與滅菌的方法物理消毒法熱力消毒法利用干熱或濕熱進(jìn)行消毒。干熱法是利用160?180C的干熱空氣加熱2?4h來殺滅細(xì)菌。利用焚燒也是干熱的一種方法。濕熱法是利用壓力蒸汽滅菌器進(jìn)行消毒，適用于耐高溫、高濕物品的消毒。射線消毒法主要包括紫外線消毒和輻射消毒兩類。紫外線消毒法是利用紫外線燈產(chǎn)生的紫外線進(jìn)行消毒，適用于不耐熱物品的消毒，可用來對實(shí)驗(yàn)室中的空氣、實(shí)驗(yàn)臺面、桌椅、器皿等進(jìn)行消毒。消毒劑量可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室面積、細(xì)菌數(shù)量及菌種等因素來確定，例如空氣消毒常用1.5W/m3。輻射消毒法是利用電離輻射消毒的方法,如伽瑪射線、微波輻射、遠(yuǎn)紅外輻射等，可以用于大量一次性物品的消毒，但成本較高，且操作復(fù)雜。其他物理消毒法例如等離子體消毒法、過濾除菌法等。等離子體消毒是利用高電壓使空氣電離形成等離子體消毒的方法，具有殺菌效率高、無有毒物質(zhì)殘留等優(yōu)點(diǎn)，適用于醫(yī)療機(jī)構(gòu)、食品制藥、實(shí)驗(yàn)室、公共場所等。過濾除菌法是利用阻留方法除去空氣或液體中的細(xì)菌，適用于空氣凈化，工作人員佩戴的防護(hù)口罩也是依據(jù)這個原理制成的?；瘜W(xué)消毒法化學(xué)消毒即利用化學(xué)藥物進(jìn)行消毒，主要種類如下：1.2.2.1高效消毒劑主要有過氧化物類、含氯類消毒劑和醛類消毒劑。過氧化物類有過氧化氫、過氧化乙酸、臭氧等；含氯類消毒劑有次氯酸鈉、二氧化氯、二氯異氰尿酸鈉等；醛類消毒劑有甲醛、戊二醛、鄰苯二甲醛等。1.2.2.2中效消毒劑主要有碘類消毒劑、醇類消毒劑和酚類消毒劑。碘類消毒劑有碘制劑、碘伏消毒劑等；醇類消毒劑有乙醇、異丙醇等；酚類消毒劑有苯酚、對氯間二甲苯酚等。1.2.2.3其他消毒劑雜環(huán)類消毒劑（如環(huán)氧乙烷）、季銨鹽類消毒劑（如苯扎溴銨）等。1.3實(shí)驗(yàn)室消毒流程與方法1.3.1實(shí)驗(yàn)室環(huán)境消毒實(shí)驗(yàn)室空氣可采用紫外線消毒，在每天早上工作前開啟紫外線燈15min進(jìn)行消毒。對于實(shí)驗(yàn)室地面、臺面、座椅、柜子、門把等，可采用2?5g/L過氧乙酸或1?2g/L有機(jī)氯消毒劑噴施或擦拭來消毒，時間不應(yīng)少于15min。實(shí)驗(yàn)室儀器消毒顯微鏡、離心機(jī)等貴重儀器可采用75%乙醇或醇類復(fù)方消毒劑擦拭消毒，應(yīng)該擦拭2次以上。污染嚴(yán)重的儀器可采用甲醛熏蒸消毒。實(shí)驗(yàn)室人員消毒實(shí)驗(yàn)室應(yīng)備有內(nèi)裝75%乙醇或醇類復(fù)方消毒劑的手消毒器，供工作人員進(jìn)行手消毒。每次實(shí)驗(yàn)完畢及離開實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)進(jìn)行手消毒。個人防護(hù)裝備可噴灑75%乙醇消毒，呼吸器可采用75%乙醇擦拭30min,可回收面具、眼罩采用200mg/L二氧化氯消毒劑浸泡30min，或按防護(hù)裝備說明書進(jìn)行消毒。實(shí)驗(yàn)室污染消毒實(shí)驗(yàn)室地面、臺面被微生物污染后，應(yīng)即刻停止實(shí)驗(yàn)，并噴灑過氧乙酸或有機(jī)氯消毒劑消毒30min，并將吸濕材料與實(shí)驗(yàn)樣品一起倒入耐壓污物袋中。離心管破碎，可在密閉靜置30min后放入75%乙醇中浸泡24h,再采用壓力蒸汽滅菌。實(shí)驗(yàn)室階段轉(zhuǎn)換消毒當(dāng)一個階段的實(shí)驗(yàn)結(jié)束，進(jìn)入下一階段實(shí)驗(yàn)時，應(yīng)進(jìn)行消毒。采用物理或化學(xué)消毒方法處理后才能移出實(shí)驗(yàn)室。采用過氧化氫噴霧、密閉60min以上，劑量應(yīng)達(dá)到30%過氧化氫12mL/m3以上。生物安全柜消毒常規(guī)消毒采用紫外線燈和75%乙醇擦拭，每次實(shí)驗(yàn)前后擦拭臺面及內(nèi)壁消毒，再用紫外線燈照射30min。但此法并不能徹底消除污染，還應(yīng)采用過氧化氫蒸汽霧法密閉消毒，劑量為30%過氧化氫12L/m3，作用時間120min。實(shí)驗(yàn)室廢棄物消毒實(shí)驗(yàn)室廢棄物應(yīng)消毒后密封處理，危險廢物應(yīng)經(jīng)過壓力蒸汽滅菌處理，再按有關(guān)廢物處理規(guī)定進(jìn)行集中處理。實(shí)驗(yàn)室潔凈度檢查無菌室實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期進(jìn)行潔凈度檢查，按照國家標(biāo)準(zhǔn)《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》GB/T16292-16294-1996進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室潔凈度驗(yàn)證，以確保潔凈度符合規(guī)定，并記錄并保存驗(yàn)證結(jié)果。微生物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制2.1通風(fēng)空調(diào)控制微生物實(shí)驗(yàn)室對室內(nèi)溫濕度并無特別的要求，而以實(shí)驗(yàn)人員環(huán)境舒適為準(zhǔn)。一般夏天控制室溫25?28°C，相對濕度50%?70%；冬季室溫18?20°C，相對濕度40%?60%。生物防護(hù)三、四級的實(shí)驗(yàn)室有氣流流向的要求，一、二級實(shí)驗(yàn)室沒有特別要求。一、二級實(shí)驗(yàn)室對換氣次數(shù)和通風(fēng)量沒有特別要求，可按照普通實(shí)驗(yàn)室規(guī)定取值［2］。實(shí)驗(yàn)室安全管理制度人員準(zhǔn)入制度微生物實(shí)驗(yàn)室難以避免不接觸病原微生物，所以存在感染的可能，因而不是所有人都可以隨意進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，必須制定準(zhǔn)入制度，未經(jīng)培訓(xùn)人員不得進(jìn)入，并且進(jìn)入的人員必須更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套，以便從源頭上防止微生物感染［3］。安全操作制度進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室開展微生物操作必須規(guī)范。例如不允許在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)食，保持實(shí)驗(yàn)臺面清潔和整齊，避免交叉污染和意外發(fā)生，污染物放入制定容器內(nèi)滅菌后帶出等。消毒滅菌制度本文上一章中已介紹了消毒滅菌的方法，然而僅僅掌握方法還不夠，還必須形成制度，根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)室實(shí)際情況制定相應(yīng)制度加以規(guī)范和約束。菌種保藏制度菌種保藏是為了保證菌種成活，同時不發(fā)生變異。隨著生物安全問題日益受到關(guān)注，對菌種保藏技術(shù)也提出了更高要求。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)微生物菌種危害性采取分級管理措施，并依照國家微生物菌種保藏管理辦法，制定適合本實(shí)驗(yàn)室實(shí)際情況的菌種保藏制度，并建立菌種目錄、使用記錄及防護(hù)措施等，防止微生物污染環(huán)境。結(jié)語微生物實(shí)驗(yàn)室也被稱為生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，就是為了消除微生物對實(shí)驗(yàn)室人員的感染威脅以及可能對環(huán)境造成的污染。為了達(dá)到生物安全的目的，除了安全隔離措施以外，就是要規(guī)范消毒滅菌程序，強(qiáng)化消毒意識和環(huán)境控制策略，這樣才能保障實(shí)驗(yàn)人員的身心健康。參考文獻(xiàn)：［1］魏秋華.生物安全實(shí)