臨床微生物學(xué)檢驗4完整版

臨床微生物學(xué)檢驗題型單選（ 4選1）多選（ 5選多）判斷改錯（錯誤的并改正）簡答（適當(dāng)解釋說明）論述（案例分析，具體闡述）革蘭氏染色屬復(fù)染法，初染，媒染，脫色，復(fù)染 4個過程革蘭陽性（呈紫色）革蘭陰性（呈紅色）第二章.細菌大小以微米（wm）為測量單位。.細菌結(jié)構(gòu)：①附屬結(jié)構(gòu)：鞭毛、菌毛（光鏡下看不見，不能作為鑒定依據(jù)，沒鑒定價值）或纖毛；②表層結(jié)構(gòu)：糖萼（莢膜或粘液層）；③內(nèi)部結(jié)構(gòu)：細胞質(zhì)、質(zhì)粒、芽抱。.細菌功能：①動力（鞭毛是細菌的運動器官），觀察細菌動力可用懸滴法或壓滴法在顯微鏡下直接觀察其運動，也可將細菌穿刺接種半固體培養(yǎng)基 觀察動力。鞭毛具有鑒定價值，采用鞭毛特殊染色（如鍍銀染色）可觀察有無鞭毛及鞭毛數(shù)量、分布；一般染色不能看見鞭毛（如革蘭氏染色 ）。.芽抱的功能：①對熱力、干燥、輻射、化學(xué)消毒劑等 具有強大抵抗力；②以是否殺死芽孢作為物品消毒滅菌判斷效果的指標(biāo) 。③芽抱在菌體的位置和直徑大小隨菌種不同，這種形態(tài)特點有助于細菌鑒別。.細菌生長曲線（要求整個過程，結(jié)合生長曲線記憶 4個時期比較容易，可能是簡答題）細菌二分裂方式進行繁殖。以傾注平板法計數(shù) 孵育后的菌落數(shù)換算菌落形成單位（CFU）。生長曲線：連續(xù)檢測細菌不同培養(yǎng)時間的CFU,以CFU為縱坐標(biāo)，培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo)作出一條反映細菌生長數(shù)變化的規(guī)律曲線。典型的生長曲線分為遲緩期、對數(shù)生長期、穩(wěn)定期、衰亡期。①遲緩期。也稱為準(zhǔn)備時期，是細菌適應(yīng)環(huán)境的過程。特點：細菌的核酸、蛋白質(zhì)、輔酶等物質(zhì)合成增加，細胞體積增大，細菌數(shù)量恒定或極少量增加。②對數(shù)生長期。特點：細菌以最大的速率生長和分裂， 細菌數(shù)量成對數(shù)增加。細菌代謝活躍、穩(wěn)定， 其大小、形態(tài)、染色性 和生化反應(yīng)典型，對外界因素反應(yīng)敏感，是檢測細菌生物學(xué)性狀和進行藥物敏感性試驗的適宜階段。不添加培養(yǎng)基下一般細菌對數(shù)期維持 4~8h。③穩(wěn)定期。特點：由于培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)消耗、有害代謝產(chǎn)物積累和 Ph等環(huán)境變化，細菌生長速率降低，細菌死亡數(shù)增加使生長繁殖菌數(shù)和死亡菌數(shù)處于動態(tài)平衡，細菌數(shù)量達到最大，即處于穩(wěn)定期。此時期細菌合成代謝產(chǎn)物較多，通常維持10ho向培養(yǎng)基系統(tǒng)中補充營養(yǎng)物質(zhì)，取走代謝產(chǎn)物，改善培養(yǎng)條件，可延長穩(wěn)定期。由于代謝產(chǎn)物較多，是細菌生化反應(yīng)試驗鑒定的最佳時期。④衰亡期。特點：細菌死亡速率逐步增加，活菌數(shù)減少，死亡數(shù)大于增加數(shù)，細菌形態(tài)不典型，甚至出現(xiàn)自溶，該時期的細菌不能用于細菌的鑒定和研究工作。.細菌的生化反應(yīng)：由于不同細菌所具有的酶系統(tǒng)各不相同，對營養(yǎng)物質(zhì)的分解能力也不一致，因而其代謝產(chǎn)物不同。根據(jù)此特點，利用生化試驗的方法來檢測細菌對各種基質(zhì)的代謝作用及其代謝產(chǎn)物，從而鑒別細菌的反應(yīng)。.滅菌：破壞和去除物體上所有微生物（包括病原微生物和非病原微生物）和細菌芽孢的方法。消毒：是破壞物體上活的病原微生物的方法，但不包括細菌芽孢和非病原微生物。防腐：直接使用防腐劑破壞或抑制活病原微生物的方法。無菌：防止感染病原體進入滅菌組織或物品的操作技術(shù)稱為無菌操作，無菌即不存在活微生物。第四章.病毒的大小以納米（nm）測量單位。.病毒的結(jié)構(gòu) :分為基本結(jié)構(gòu)和輔助結(jié)構(gòu)。基本結(jié)構(gòu)：包括 核心（含一種類型核酸即DNA或RNA）和衣殼（蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)），二者構(gòu)成核衣殼。輔助結(jié)構(gòu)：包膜（功能：①維護病毒體結(jié)構(gòu)的完整性；②與宿主細胞膜親和及融合；③決定病毒種、型抗原的特異性）和其他輔助結(jié)構(gòu)（ 纖維刺突或纖突）。第七章.細菌標(biāo)本采集原則：①盡早采集。一旦懷疑細菌感染，應(yīng)及時采集標(biāo)本進行細菌學(xué)檢驗，對細菌感染的診斷和治療具有極其重要意義。②選擇不同采集時機和標(biāo)本種類。根據(jù)臨床癥狀和流行病學(xué)資料可預(yù)測感染性疾病的病原體，根據(jù)病程和感染部位的不同，選擇合適時機采集不同種類標(biāo)本。③在抗生素應(yīng)用前采集。感染可帶來生命危險，臨床醫(yī)生會在細菌學(xué)檢驗出結(jié)果之前使用抗生素治療，抗生素的使用將影響病原菌的檢出。因此應(yīng)盡可能在抗生素使用前留取標(biāo)本。④遵守?zé)o菌操作。在采取如腦脊液、血液或穿刺液等正常狀態(tài)下的無菌部位標(biāo)本，應(yīng)嚴(yán)格注意無菌操作，不得被其他部位細菌污染。在有正常菌群寄居的部位，如口咽部、鼻咽部和泌尿生殖道等部位應(yīng)采取措施避免正常菌群的和其他菌群的污染。盛放標(biāo)本的容器應(yīng)無菌。⑤正確保存和運送。采集的標(biāo)本均含有病原體或潛在的病原體，必須做好標(biāo)本的正確保存和運送，容器應(yīng)密封不易碎，標(biāo)本不得污染容器的口和外壁。采集的標(biāo)本應(yīng)及時運送，遠距離運送時，一般應(yīng)冷藏（但對腦膜炎和淋病奈瑟菌，需保溫 35~37℃）。.細菌的生理生化特征檢測（其中①②③為碳水化合物的代謝試驗，④為蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝試驗，⑤為碳源和氮源利用試驗）①氧化-發(fā)酵試驗（O-F試驗）。又稱Hugh-Leifson（HL）試驗。必須在有氧環(huán)境中才能分解葡萄糖的是專性需氧菌；無論在有氧或無氧的環(huán)境中都能分解葡萄糖的是兼性厭氧菌。細菌以分子氧作為電子受體分解葡萄糖的稱為氧化型；細菌以無氧降解的方式分解葡萄糖的稱為發(fā)酵型；不能分解葡萄糖的細菌稱為產(chǎn)堿型。利用此試驗可區(qū)分細菌的代謝類型 。用于細菌種屬間的鑒別。腸桿菌科細菌為發(fā)酵型，非發(fā)酵菌通常為氧化型或產(chǎn)堿型。微球菌屬可氧化葡萄糖，葡萄球菌屬能發(fā)酵葡萄糖。②甲基紅（ MR）試驗。原理：細菌在代謝過程中分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，某些細菌可進一步將丙酮酸分解為乳酸、乙酸、甲酸等，使培養(yǎng)基的pH下降至4.5以下，加入甲基紅指示劑出現(xiàn)紅色（陽性）。有些細菌分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或產(chǎn)生的酸進一步轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì)，培養(yǎng)基的酸堿度維持在 pH6.2以上，加入甲基紅指示劑呈黃色（陰性）。主要用于大腸埃希菌（陽性）和產(chǎn)氣腸桿菌（陰性）的鑒別。沙門菌屬、志賀菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬等為陽性，腸桿菌屬、克雷伯菌屬等為陰性。③V-P試驗。原理：細菌在葡萄糖的代謝過程中生成丙酮酸，有些細菌可將丙酮酸進一步脫酸產(chǎn)生乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在堿性溶液中被空氣中的氧氧化為二乙酰（丁二酮），進而與培養(yǎng)基中的精氨酸所含的胍基發(fā)生反應(yīng)，生成 紅色化合物（VP反應(yīng)陽性）。VP試驗常與與甲基紅試驗一起使用，兩試驗的結(jié)果陽性、陰性相反。即甲基紅試驗為陽性的細菌，在 VP試驗中則為陰性（如大腸埃希菌、沙門菌屬、志賀菌屬）；甲基紅試驗為陰性的細菌，在 VP試驗中則為陽性（沙雷菌屬、陰溝腸桿菌）。④吲哚試驗。原理：細菌分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚，與試劑中的對二甲氨基苯甲酸作用，形成紅色的玫瑰吲哚。主要用于腸桿菌科細菌的鑒定

⑤枸檬酸鹽利用試驗。當(dāng)細菌利用錢鹽作為唯一氮源，利用枸檬酸鹽作為唯一碳源時，可在枸檬酸鹽培養(yǎng)基上生長分解枸檬酸鈉，使培養(yǎng)基變堿變成藍色（陽性），不變色為陰性。有助于腸桿菌科細菌的鑒定。⑥氧化酶試驗。試驗結(jié)果未產(chǎn)生顏色反應(yīng)（如腸桿菌科）為陰性， 10S內(nèi)產(chǎn)生顏色反應(yīng)變?yōu)樯钭仙ɑ蛏钏{色）（如弧菌科、奈瑟菌屬）為陽性。⑦卵磷脂酶試驗。產(chǎn)生卵磷脂酶的細菌，會在菌落周圍形成乳白色混濁環(huán)并擴大（陽性）。用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的鑒定。⑧Optochin敏感試驗。用于肺炎鏈球菌和甲型鏈球菌的鑒別。肺炎鏈球菌為陽性，甲型鏈球菌為陰性。⑨桿菌肽敏感試驗。鑒別A群鏈球菌和非A群鏈球菌的重要試驗，A群鏈球菌為陽性，其他群鏈球菌為陰性。⑩凝固酶試驗。金黃色葡萄球菌產(chǎn)生凝固酶，使血漿凝固、不流動（陽性）。表皮及腐生葡萄球菌的凝固酶（陰性）。用于葡萄球菌的鑒定，常作為鑒定葡萄球菌致病性的重要指標(biāo)。IMViC（I指呷咪試驗，M指甲基紅試驗，V指V-P試驗，C指枸檬酸鹽利用試驗）試驗的兩種細菌的試驗結(jié)果：大腸埃希菌++一一廣氣腸桿菌一一++.病毒大小的測定方法：①電子顯微鏡直接測量；②超過濾法；③超速離心法。.分離培養(yǎng)病毒的方法主要有三種：①動物接種；②雞胚培養(yǎng)；③組織培養(yǎng)。組織培養(yǎng)為主要的病毒分離培養(yǎng)技術(shù)，廣泛使用的組織培養(yǎng)技術(shù)是細胞培養(yǎng)。根據(jù)細胞的來源、染色體特性和傳代次數(shù)的不同，分為：①原代和次代細胞培養(yǎng)（是正常細胞）②二倍體細胞培養(yǎng)（是正常細胞，廣泛用于病毒分離和疫苗制備）③傳代細胞培養(yǎng)（類似月中瘤細胞，常用于病毒的分離和鑒定，不能用于疫苗制備）.病毒的理化性狀的檢測：①有包膜病毒對乙醴、氯仿、膽鹽等脂溶劑均敏感，無包膜病毒對脂溶劑有抵抗。即乙醴敏感試驗中有包膜病毒為陽性，無包膜病毒為陰性 。②耐酸性試驗中，不同pH值下不同病毒會被很快滅活。如腸道病毒可耐pH3,鼻病毒在pH3-5環(huán)境中很快被滅活。6.試比較病毒與細菌的異同處?6.試比較病毒與細菌的異同處?區(qū)分細菌的芽抱和真菌的抱子（補充）7.真菌的培養(yǎng)方法：①試管培養(yǎng)法（最常用。常用于分離培養(yǎng)、菌種保存）；②大培養(yǎng)法（培養(yǎng)后菌落較大，用于觀察菌落，但該法容易污染，常用于純種的培養(yǎng)、研究）；③小培養(yǎng)法（又稱微量培養(yǎng)法，是觀察真菌結(jié)構(gòu)及生長發(fā)育的有效方法,用于菌種鑒定），其又分為：玻片法、瓊脂方塊培養(yǎng)法、小型蓋片直接培養(yǎng)法。第八章體外抗菌藥物的敏感試驗㈠紙片擴散法（又稱K-B法），被WHO推薦為定性藥敏試驗的基本方法。①原理：將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上，紙片中所含的藥物吸收瓊脂中的水分溶解后不斷地向紙片周圍擴散，形成遞減的濃度梯度。在紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)測定菌的生長被抑制，從而形成無菌生長的透明圈即抑菌圈。抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感性，并且抑菌圈與該藥物對測試菌的最低抑菌濃度 （MIC）呈負相關(guān)。②抗菌藥物紙片。選擇直徑6.35mm,吸水量20屋專用藥敏紙片，一20c保存?zhèn)溆茫看挝从猛甑乃幟艏埰?c保存。B-內(nèi)酰胺類抗生素紙片4c保存不宜超過1周，否則效價會降低。③培養(yǎng)基。CLSI水解酪蛋白（MH）瓊脂為藥專試驗的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基 ，pH為7.2~7.4，瓊脂厚度 4mm。④細菌接種。接種物的準(zhǔn)備可采用液體生長法或直接菌落懸液法。用0.5麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn)管（1.5X108CFUTml）校正菌液濃度，于15min內(nèi)接種完畢。各紙片緊貼在瓊脂表面，給紙片中心相距〉24mm,紙片距平板內(nèi)緣＞15mm。⑤結(jié)果解釋和報告：接種正確時，細菌生長的平面是連續(xù)的而抑菌圈呈均勻的環(huán)狀。測量抑菌圈直徑，參照CLSI標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果。分為三級： ⑴.專感 （表示測試菌可被測定藥物常規(guī)劑量給藥后所達到的血藥濃度所抑制或殺滅）， ⑵.中介（指測試菌對常規(guī)劑量用藥后體液或組織中的藥物濃度的反應(yīng)性低于專感株，但在測定藥物濃集部位的體液或高于正常給藥量臨床上使用有效。），⑶耐藥（指測試菌不能被在體內(nèi)感染部位能達到的抗菌藥物濃度所抑制）。⑥（K-B法試驗的）實驗影響因素（簡答題）A.培養(yǎng)基質(zhì)量。培養(yǎng)基的成分、pH、深度、硬度和濕度等對結(jié)果的準(zhǔn)確性由直接影響。B.藥敏紙片。藥敏紙片的含藥量是影響抑菌圈大小的重要因素，其次還有藥敏紙片的保存方式。C.接種菌量。接種菌量正確與否是影響結(jié)果的重要因素之一，加大菌量使抑菌圈減小，相反可使抑菌圈擴大 。D.試驗操作質(zhì)量，接種后貼藥片的時間，孵育條件和溫度、時間，抑菌圈測量工具的精確度和質(zhì)控菌株本身的藥專特性是否合格，有無變異等都是影響紙片法藥專結(jié)果的因素。⑦質(zhì)量控制。采用標(biāo)準(zhǔn)菌株是進行藥敏試驗質(zhì)量控制的主要措施。 常用的臨床藥專質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株有：金黃色葡萄球菌 ATCC25923，大腸桿菌 ATCC25922，銅綠假單月fi菌ATCC27853、糞腸球菌ATCC2921M33186等。標(biāo)準(zhǔn)菌株的抑菌圈應(yīng)在CLSI允許的預(yù)期范圍內(nèi)，超出控制范圍應(yīng)檢查原因并及時糾正。每次藥專試驗應(yīng)將標(biāo)準(zhǔn)菌株和待測菌在同一條件下做藥專試驗。㈡稀釋法：是 定量 測定抗菌藥物抑制細菌生長作用的體外方法，分為瓊脂稀釋法和肉湯稀釋法 （又分為常量肉湯稀釋法和微量肉湯稀釋法）。最低抑菌濃度（ MIC）：稀釋法所測得的某抗菌藥物能抑制待測菌肉眼可見生長的最低藥物濃度 。最低殺菌濃度（ MBC）：指能殺滅 99.9％以上測試菌量的最低藥物濃度 。MBC測試的方法有培養(yǎng)基、藥物稀釋、細菌懸液接種等，與MIC相同，不同之處：當(dāng)MIC無肉眼可見菌生長管中的菌落數(shù)三最初接種菌落數(shù)的 0.1%,該管的最低藥物濃度即為MBC。㈢體外聯(lián)合藥物敏感試驗的意義：①治療混合性感染；②預(yù)防或延遲細菌抗生素耐藥性的發(fā)生；③聯(lián)合用藥可減少劑量以避免達到毒性劑量；④聯(lián)合用藥比單一用藥時常常效果更好?？咕幬锫?lián)合用藥可出現(xiàn) 4種結(jié)果：①拮抗作用：兩種藥物聯(lián)合作用顯著低于單獨抗菌活性；即A+B<A或B②無關(guān)作用：兩種藥物聯(lián)合作用的活性等于其單獨活性；即A+B=A或B③累加作用：兩種藥物聯(lián)合作用的活性等于兩種單獨抗菌活性之和；即A+B=A+B④協(xié)同作用：兩種藥物聯(lián)合作用顯著大于其單獨作用的總和。即A+B>A＋B㈣聯(lián)合抑菌試驗棋盤稀釋法是目前臨床實驗室常用的聯(lián)合抑菌定量方法棋盤稀釋法部分抑菌濃度（FIC）指數(shù)的判斷標(biāo)準(zhǔn)：FIC指數(shù)<0.5為協(xié)同作用；FIC指數(shù)在 0.5~1為相加作用；FIC指數(shù)在 1~2為無關(guān)作用；FIC指數(shù)》2為拮抗作用。第九章.干粉培養(yǎng)基的質(zhì)控程序： 養(yǎng)基的質(zhì)控程序：①原料的挑選（挑選各成分較穩(wěn)定的試劑，各種化學(xué)試劑一般選用分析純）；②配制過程（嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序手冊要求進行）；③培養(yǎng)基的一般質(zhì)量控制 （包括：外觀、無菌試驗、培養(yǎng)基的量、培養(yǎng)基的pH、性能試驗）。培養(yǎng)基的一般質(zhì)量控制：（簡答題）A外觀：液體培養(yǎng)基應(yīng)澄清、無混濁，固體培養(yǎng)基應(yīng)無菌落生長，不干裂。B.無菌試驗：培養(yǎng)基制作完成后，應(yīng)檢測每批培養(yǎng)基的滅菌效果。無菌生長為合格。C.培養(yǎng)基的量：斜面培養(yǎng)基的長度為試管長度的 2/3,MH平板的厚度應(yīng)為4mm，其他平板厚度一般為3mm。D.培養(yǎng)基pH:配制好的培養(yǎng)基pH應(yīng)與規(guī)定的pH相差±0.2以內(nèi)。E.性能試驗：每一批新配制的、新購入的培養(yǎng)基，均應(yīng)用已知性質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)菌株進行預(yù)測。合格者方可使用。.滅菌器用溫度記錄裝置，或者 用生物指示劑嗜熱脂肪芽孢桿菌 ATCC7953和ATCC12980的培養(yǎng)液或菌片（含菌量為5X10^6CFU/片），化學(xué)指示劑等監(jiān)視滅菌效果。環(huán)氧乙烷消毒器使用枯草芽孢桿菌ATCC9372為生物指示劑。.生物安全水平及適用范圍實驗室的生物安全水平（ BLS）是根據(jù) 實驗室內(nèi)實驗對象的危險度 評估，而采取的不同程度的生物安全防護措施，以保證實驗室工作人員的安全和環(huán)境免受污染。目前BLS分為4級：一級生物安全防護實驗室（BSL-1）是微生物的基礎(chǔ)實驗室，進行實驗用的都是最低等級的污染物或安全的微生物，完全符合標(biāo)準(zhǔn)實驗室操作，如枯草芽孢桿菌；二級生物安全防護實驗室（BSL-2）適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物，屬于第三類病原微生物的如：沙門菌屬、乙型肝炎病毒等的實驗操作。三級生物安全防護實驗室（BSL-3）的操作對象一般是可以經(jīng)呼吸道傳播的危險微生物，如：結(jié)核分枝桿菌，伯氏柯克斯菌。四級生物安全防護實驗室（BSL-4）進行試驗研究的物質(zhì)是一些非常高危險性并且可以致命的有毒物質(zhì)，可以通過空氣傳播并且現(xiàn)今并沒有有效的疫苗或者治療方法來處理。如（出血熱病毒）第十章.醫(yī)院感染（NI）：又稱醫(yī)院獲得性感染，指在醫(yī)院內(nèi)獲得病原體并發(fā)生的一切感染，即只要感染因子來源于醫(yī)院，就可以算作醫(yī)院感染 。入院48h后發(fā)生的感染通常認(rèn)為是醫(yī)院感染。醫(yī)院感染包括：①在住院期間獲得感染并且發(fā)病；②在住院期間獲得感染而在出院后才發(fā)病的感染。③探視者和醫(yī)療結(jié)構(gòu)的工作人員在醫(yī)院內(nèi)獲得的感染。④入院48h后發(fā)生的感染通常認(rèn)為是醫(yī)院感染。醫(yī)院感染不包括：①入院前已存在的感染；②住院前獲得的感染，入院時已處于潛伏期的感染，住院后才發(fā)病；.醫(yī)院感染病原體特點： （簡答題）①大多數(shù)為條件致病微生物；②多數(shù)病原菌對抗菌藥物具有耐藥性或多重耐藥；③免疫功能低下患者可以感染多種病原體；④以細菌及病毒最多見，真菌感染明顯增多，新病原體不斷出現(xiàn);第十一章.進行血液細菌培養(yǎng)（ 血培養(yǎng)）的指征：①當(dāng)患者發(fā)熱（呈38C）或低體溫（三36C）時；②外周血白細胞計數(shù)超過 10X10A9/L（特別是存在核左移時），或絕對粒細胞減少（成熟中性粒細胞計數(shù)少于 1X10A9/L）;③合并有明顯感染癥狀體征、伴有感染病灶存在時。懷疑有膿毒血癥的患者應(yīng)盡早進行血液細菌培養(yǎng)。.血液標(biāo)本的采集要求：①采血時機。理想的血液細菌培養(yǎng)應(yīng)該是在患者接受抗生素治療之前進行，故采集血培養(yǎng)應(yīng)盡可能在患者寒戰(zhàn)或發(fā)熱前；②采血部位。應(yīng)行經(jīng)皮外周靜脈穿刺采血（ 一般采集肘靜脈血），穿刺部位的皮膚消毒，嚴(yán)格無菌操作；③采血份數(shù)。對每名患者應(yīng)至少從不同部位采集血培養(yǎng) 2?3份，這樣可以提高檢測的陽性率。對懷疑亞急性感染性心內(nèi)膜炎的患者，應(yīng)間隔1h,連續(xù)采集3份血進行培養(yǎng)。同時使用需氧和厭氧培養(yǎng)瓶，分別注入；④采血量。通常采血量應(yīng)是培養(yǎng)基的 1/5或1/10.,適當(dāng)?shù)牟裳磕芴岣哧栃月?；⑤血培養(yǎng)瓶的使用。根據(jù)不同的血培養(yǎng)方法，采集到的血液標(biāo)本應(yīng)立即注入血培養(yǎng)瓶或含有 SPS的無菌容器中，并盡快進行培養(yǎng)，其中SPS對某些細菌（如腦膜炎奈瑟菌）有抑制作用，不能用于此類細菌的培養(yǎng)。進行血培養(yǎng)時已接受抗生素治療的患者，應(yīng)使用樹脂等能中和或吸附多種抗菌藥物和其他能抑制細菌生長物質(zhì)的培養(yǎng)瓶，有助于提高檢出率。無論是否已注入血液標(biāo)本，血液培養(yǎng)瓶均不能冷藏或冷凍保存。血液標(biāo)本不能直接涂片觀察，因為細菌數(shù)量太少，要先做細菌增加培養(yǎng)。（補充）第十二章中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的細菌、真菌學(xué)檢查1.標(biāo)本采集。采用腰椎穿刺術(shù)無菌采集腦脊液標(biāo)本。做腦脊液培養(yǎng)時應(yīng)同時采集患者血液標(biāo)本進行血培養(yǎng)。標(biāo)本采集后應(yīng)在常溫下立即送檢，培養(yǎng)腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌時，應(yīng)將標(biāo)本置于 35℃保溫送檢。用于常規(guī)細菌檢測的腦脊液量應(yīng)為1ml或大于1ml；用于檢測抗酸菌的腦脊液量應(yīng)為5ml或大于5ml。第十三章皮膚和軟組織感染的細菌學(xué)檢查.膿性分泌物是皮膚和軟組織感染感染最常見的標(biāo)本。采集標(biāo)本時，應(yīng)避免皮膚表面細菌污染。.封閉性膿月中。局部消毒后，用注射器抽取膿液和膿月中壁標(biāo)本置于厭氧運送培養(yǎng)基內(nèi)送檢。按厭氧要求送檢。.放線菌感染標(biāo)本?；颊吒腥咎幜鞒龅哪撘褐杏小傲蚧菢宇w粒”，能提示有放線菌感染。第十四章.病毒是急性上呼吸道感染最常見的病原體，細菌是下呼吸道感染最常見病原體，下呼吸道感染少見，但更易引起嚴(yán)重疾病及死亡。.痰液標(biāo)本的檢查方法（痰標(biāo)本是下呼吸道細菌學(xué)檢查的主要標(biāo)本）一般細菌、真菌涂片檢查目的有：①確定標(biāo)本是否適合做細菌培養(yǎng)，采用標(biāo)本直接涂片鏡檢，依據(jù)低倍鏡下（X100）白細胞和上皮細胞數(shù)目的多少來判定 （在每個低倍視野中鱗狀上皮細胞＜10個，或白細胞＞25個，同時幾乎見不到鱗狀上皮細胞為符合要求的痰標(biāo)本，否則視為不合格痰標(biāo)本）。白細胞（個/低倍鏡視野x100）鱗狀上皮細胞（個/低倍鏡視野x100）判斷是否合格>25<10合格（可用于細菌培養(yǎng)）>2510~25尚合格（可用于細菌培養(yǎng)）<10>25不合格（重新留標(biāo)本）②初步判定是否有病原菌存在，選痰液中膿、血性部分涂片，干燥固定后，進行革蘭氏染色鏡檢。第十五章.電鏡檢查可用于病毒性腸道感染的檢測。.與抗生素相關(guān)性腹瀉（ADD）有關(guān)的病原菌主要有：艱難梭菌、金黃色葡萄球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。.金黃色葡萄球菌感染后呈現(xiàn)的是黃綠色水樣糞便。第十七章泌尿系統(tǒng)感染.膀胱穿刺法是目前判斷膀胱內(nèi)有無細菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)， 也是尿液厭氧菌培養(yǎng)的最佳采集方法。0常采用恥骨上膀胱穿刺抽取尿液法，該方法患者較痛苦較少用，常在懷疑厭氧菌感染時、采集中段尿困難者、中段尿培養(yǎng)結(jié)果與病情不符時采用。.清潔中段尿采集法簡單、易行，是最常用的尿培養(yǎng)標(biāo)本收集方法。.尿液檢測細菌計數(shù)的影響因素： （簡答題）①患者應(yīng)用抗菌藥物，可能抑制尿液中細菌生長；②大量輸液或應(yīng)用利尿劑，尿量較大，尿液稀釋，尿中營養(yǎng)成分降低，細菌繁殖速度減慢，其次還會導(dǎo)致尿液中的細菌被稀釋；③尿液的pH:pH<5.0或〉8.5,均可能抑制細菌生長；④尿頻：細菌在尿液中的停留時間縮短，數(shù)量減少；⑤營養(yǎng)要求高的細菌生長相對緩慢；⑥采集尿液時，外陰部的消毒劑混入尿中，抑制細菌生長。4.尿液檢測結(jié)果解釋及報告尿液中一般細菌及假絲酵母菌培養(yǎng)菌落計數(shù)（檢測結(jié)果）結(jié)果解釋及報告>10?5CFU/ml提示可能為泌尿系統(tǒng)感染10?~10?5CFU/ml需要結(jié)合患者的臨床癥狀分析是否為泌尿系統(tǒng)感染<10?CFU/ml可能為采集時污染一般一份尿液中多為檢出一種病原菌，少數(shù)可能會在同份尿標(biāo)本中分離到 2種病原菌。第十八章.淋病奈瑟菌、衣原體、生殖道支原體、杜克嗜血桿菌的分離培養(yǎng)是淋病、生殖道沙眼衣原體感染、生殖道支原體感染、軟下疳的實驗室診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，陽性者可確診。.分離培養(yǎng)與鑒定是所有目前能夠培養(yǎng)的生殖道感染病原體實驗室診斷的 金標(biāo)準(zhǔn)”。第二十二章.葡萄球菌屬多數(shù)菌株具有嗜鹽性，耐鹽性強.鏈球菌屬①A群鏈球菌也稱化膿性鏈球菌，致病力強，引起急性呼吸道感染、丹毒、軟組織感染、猩紅熱等，還可導(dǎo)致急性腎小球炎、風(fēng)濕熱等變態(tài)反應(yīng)性疾病。②B群鏈球菌又稱無乳鏈球菌，主要引起新生兒敗血癥和腦膜炎。③肺炎鏈球菌又稱肺炎球菌，主要引起大葉性肺炎、支氣管炎、中耳炎、菌血癥等。④草綠色鏈球菌又稱甲型溶血性鏈球菌，是人體口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，常不致病，偶可引起亞急性細菌性心內(nèi)膜炎。最常見病原菌。3.腸球菌屬腸球菌的主要特征：革蘭陽性球菌、菌落灰白色，觸酶陰性。鑒定方法：①PYR試驗（快速篩選鑒定試驗）；②膽汁-七葉音試驗（本試驗不能區(qū)別腸球菌與非腸球菌，需做耐鹽受試驗進一步鑒定。只能用于非 D群腸鏈球菌鑒定 ）；③耐鹽受試驗（本試驗結(jié)合膽汁-七葉音試驗可對腸球菌作出鑒定）。腸桿菌科.腸桿菌科細菌的共同特征：①革蘭陰性桿菌，無芽抱，有菌毛，多數(shù)有周身鞭毛；②需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長良好，血平板生長為灰白、濕潤、光滑的菌落；③在腸道選擇培養(yǎng)基（MAC、EMB、SS等）上，因乳糖分解或不分解，生長為不同特征的菌落；④生化反應(yīng)活躍，發(fā)酵葡萄糖，氧化酶陰性（鄰單胞菌屬除外），觸酶陽性（痢疾志賀菌除外），硝酸鹽還原陽性。.大腸埃希菌的主要特征：革蘭陰性菌，在腸道選擇培養(yǎng)基上形成發(fā)酵乳糖的菌落。氧化酶陰性，硝酸鹽還原陽性，葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）斜面與底層均產(chǎn)酸、產(chǎn)氣， H2S陰性，尿酶陰性，動力陽性， IMViC++－－.沙門菌屬肥達反應(yīng)用于輔助診斷傷寒和副傷寒。.志賀菌屬①志賀菌產(chǎn)生的強烈內(nèi)毒素作用于腸黏膜，使其通透性增高，促進腸黏膜對內(nèi)毒素的吸收，導(dǎo)致一系列中毒癥狀，引起細菌性痢疾， 典型細菌性痢疾的臨床表現(xiàn)為：腹痛、發(fā)熱、水樣便，后轉(zhuǎn)為膿血黏液便，伴有里急后重。②志賀菌典型生化反應(yīng)為：不發(fā)酵乳糖，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不產(chǎn)生H2S,即KIA o不產(chǎn)生尿酶，動力陰性，IMViC為一/++——.變形桿菌屬（革蘭陰性桿菌，無芽抱，無莢膜，兼性厭氧）鑒定：根據(jù)典型的遷徙現(xiàn)象，迅速分解尿素，苯丙氨酸脫氨酶陽性， KIA為KA++,IMViC為—/++――,可鑒定為變形桿菌，變形桿菌尿酶試驗陽性（紅色）。.小腸結(jié)腸炎耶爾森菌為兼性厭氧，4~40c均能生長，最適溫度為20~28C,4c下增菌培養(yǎng)。㈠假單胞菌屬.人類非發(fā)酵菌感染中，假單胞菌占70%~80%,主要為銅綠假單胞菌。.假單胞菌屬的主要特征：①革蘭陰性，動力陽性；②專性需氧，營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基上生長良好，某些菌株具有明顯的菌落形態(tài)或色素；③氧化酶陽性，葡萄糖氧化發(fā)酵試驗（O/F試驗）通常為氧化型；④可將硝酸鹽轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽或氮氣；⑤淺黃假單胞菌和稻皮假單胞菌氧化酶陰性，常不能在麥康凱培養(yǎng)基上生長。㈡銅綠假單胞菌.銅綠假單胞菌的鑒定：根據(jù)培養(yǎng)物的菌落特征、產(chǎn)生水溶性藍綠色、紅色或褐色色素、特殊的氣味、氧化酶試驗陽性、氧化發(fā)酵試驗為氧化分解葡萄糖等可作出初步鑒定。.銅綠假單胞菌的主要生化反應(yīng)：氧化酶試驗氧化葡萄糖發(fā)酵試驗氧化乳糖試驗精氨酸雙水解試驗呷咪試驗枸檬酸鹽利用試驗42C生長試驗十十一十一十十.不動桿菌屬不動桿菌的鑒定：用商品化的鑒定系統(tǒng)鑒定不動桿菌。 KIA底層及斜面均不變色、無動力；氧化酶陰性，硝酸鹽還原試驗陰性，可初步確定為不動桿菌屬的細菌。氧化酶陰性，硝酸鹽還原試驗陰性，無動力的革蘭陰性桿菌極為罕見 。.窄食單胞菌屬嗜麥芽窄食單胞菌的主要生化反應(yīng)特征有：氧化酶陰性，呷咪試驗陰性，精氨酸雙水解試驗陰性。試驗表現(xiàn)出氧化酶陰性的特征可用來推測性的鑒定嗜麥芽窄食單胞菌。第二十五章弧菌屬1.霍亂弧菌為兼性厭氧菌，最適宜生長溫度37C,具有耐堿性，初次分離常選用pH8.5的堿性蛋白陳水進行選擇性增菌。在TCBS（硫代硫酸鹽-枸檬酸鹽-膽汁-蔗糖）選擇培養(yǎng)基上，發(fā)酵蔗糖產(chǎn)酸，菌落呈黃色。常用含亞硫酸鉀的選擇培養(yǎng)基，其可將硫離子還原成元素硫，形成灰褐色菌落中心。2.霍亂弧菌01群的菌株古典生物型和曰Tor生物型的不同生物學(xué)特征見下表特征古典生物型日Tor生物型羊紅細胞溶血一D雞紅細胞凝集一十V-P試驗一十多黏菌素B敏感試驗十一IV組噬菌體裂解十一V組噬菌體裂解一十3.副溶血弧菌為兼性厭氧菌，具有嗜鹽性，在TCBS平板上形成綠色或藍綠色菌落。神奈川現(xiàn)象：從腹瀉患者標(biāo)本中分離到的95%以上的菌株在含人O型紅細胞或兔紅細胞的我萋培養(yǎng)基上可產(chǎn)生B-溶血現(xiàn)象，稱為神奈川現(xiàn)象。神奈川現(xiàn)象是鑒定副溶血弧菌致病菌株的一項重要指標(biāo)。第二十六章.彎曲菌屬空腸彎曲菌最適的生長溫度為42~43C；胎兒彎曲菌在42c不生在，25c生長。菌種馬尿酸鹽水解試驗空腸彎曲菌空腸亞種十空腸彎曲菌多氏亞種V（表小口」艾）大腸彎曲菌一胎兒彎曲菌胎兒亞種一胎兒彎曲菌性病亞種一.螺桿菌屬幽門螺桿菌的致病因素包括毒力因子、感染后引發(fā)機體的免疫反應(yīng)、宿主胃環(huán)境等因素。幽門螺桿菌是胃炎、消化性潰瘍的主要致病因素，與胃癌的發(fā)生密切相關(guān)，人類是幽門螺桿菌感染的主要傳染源。第二十七章苛養(yǎng)菌（指對營養(yǎng)及生長環(huán)境要求較為苛刻，普通條件下不生長或難以生長的一類細菌）嗜血桿菌屬（最常見的為流感嗜血桿菌）.嗜血桿菌屬的氧化還原酶系統(tǒng)不完善，需要特殊的營養(yǎng)——X或（和）V因子才能生長。X因子為血紅蛋白衍生物，V因子為輔酶I或輔酶H。培養(yǎng)嗜血桿菌的培養(yǎng)基呈巧克力色稱為巧克力培養(yǎng)基。嗜血桿菌對X、V因子需求不盡相同，可作為細菌種間鑒定特性之一。.衛(wèi)星現(xiàn)象：將流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌共同培養(yǎng)時，因金黃色葡萄球菌能合成較多的V因子，靠近金黃色葡萄球菌周圍的流感嗜血桿菌菌落較大，距離越遠的菌落越小，這種現(xiàn)象稱為衛(wèi)星現(xiàn)象。.流感嗜血桿菌中的莢膜b型株致病性最強。鮑特菌屬（包括百日咳鮑特菌、副百日咳鮑特菌、支氣管敗血癥鮑特菌臨床最常見，均為專性需氧菌，該菌屬代表菌種是百日咳鮑特菌，簡稱百日咳桿菌）.百日咳鮑特菌對營養(yǎng)要求最為復(fù)雜，血培養(yǎng)基和巧克力培養(yǎng)基上均不能生長，常用培養(yǎng)基為鮑-金培養(yǎng)基（B-G）和CHB培養(yǎng)基。.百日咳鮑特菌生長緩慢，在B-G及CHB（木炭、去纖維馬血的木炭-馬血瓊脂）平板上形成的菌落相似，形成光滑、灰白色不透明的珍珠狀小菌落，有狹窄的溶血環(huán)。軍團菌屬（歸屬軍團菌科，代表菌是嗜肺軍團菌）.軍團菌營養(yǎng)要求苛刻，常用的培養(yǎng)基是 BCYEa培養(yǎng)基，其主要成分為活性炭酵母浸出液，加上鐵、L-半胱氨酸和a-酮戊二酸。.嗜肺軍團菌在空調(diào)冷凝水中的檢出率最高 。第二十八章需氧革蘭陽性桿菌芽孢桿菌屬（一般不致病，炭疽芽孢桿菌 和蠟樣芽孢桿菌有致病性）.炭疽芽孢桿菌（簡稱炭疽桿菌）是芽孢桿菌屬中致病力最強的一種，普通平板上形成灰白色、扁平、干燥、粗糙型菌落，邊緣不整齊呈現(xiàn)卷發(fā)狀。.炭疽芽孢桿菌的 串珠試驗中菌體成為大而均勻的圓球狀成串排列，這種形態(tài)變化為炭疽芽孢桿菌特有的現(xiàn)象。觸酶陽性.蠟樣芽孢桿菌 易經(jīng)口感染，引起食物中毒，并導(dǎo)致敗血癥，是最常見的芽孢桿菌。其主要的致病物質(zhì)是腸毒素，引起的食物中毒有兩種類型：①嘔吐型（由耐熱腸毒素引起）；②腹瀉型（由不耐熱腸毒素引起）。棒狀桿菌屬（主要是白喉棒狀桿菌引起致?。?白喉棒狀桿菌（簡稱白喉桿菌）的生物學(xué)特性：①用亞甲藍、Albert法、Neisser法等染色可顯示菌體內(nèi)有 濃染的異染顆TOC\o"1-5"\h\z粒，排列成念珠狀或位于菌體兩端，也稱極體，為本菌的形態(tài)鑒別特征 。②在呂氏血清斜面 上生長較快，形成灰白色、有光澤的菌苔，鏡下形態(tài)典型，異染顆粒明顯 。③亞硫酸鉀能抑制雜菌生長，故亞硫酸鉀血平板通常用于白喉棒狀桿菌的初次分離培養(yǎng)，亞碲酸鹽離子能透過細胞膜進入白喉棒狀桿菌細胞質(zhì)中，還原為金屬碲而沉淀，使 菌落呈黑色 。④白喉棒狀桿菌根據(jù)在亞硫酸鉀血平板上生長的菌落特點分為三型：重型、輕型、中間型。該型別分類與疾病輕重?zé)o明顯關(guān)系，也無特殊意義。（可能判斷改錯）⑤需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求高，在含有血液、血清、雞蛋的培養(yǎng)基上生長。.白喉棒狀桿菌的微生物學(xué)檢驗①標(biāo)本采集。從疑似假膜的邊緣采集分泌物。②直接顯微鏡檢查：將標(biāo)本直接涂片， 分別做革蘭染色和異染顆粒染色，鏡檢革蘭陽性棒狀桿菌，形態(tài)典型且有明顯異染顆粒，可作初步報告，為臨床早期診斷提供依據(jù)。③分離培養(yǎng)：可用亞硫酸鉀血平板、血平板，純培養(yǎng)基用呂氏血清斜面。④鑒定：白喉棒狀桿菌觸酶陽性，呷咪和月尿酶試驗陰性。白喉棒狀桿菌包括無毒株和有毒株，需要通過毒力試驗鑒定白喉棒狀桿菌的致病菌株，應(yīng)用白喉抗毒素檢測白喉桿菌毒素，確定產(chǎn)毒株，方法有ELISA法和ELek平板毒力試驗。.白喉棒狀桿菌導(dǎo)致的白喉為急性呼吸道傳染病，以 兒童多見，有假膜，菌體不入血，菌體產(chǎn)生的外毒素不（白喉毒素）入血。第三十章分枝桿菌屬.分枝桿菌（又稱抗酸桿菌），具有抗酸染色為陽性。.結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群（以結(jié)核分枝桿菌感染最常見）結(jié)核分枝桿菌微生物學(xué)檢驗：①直接顯微鏡檢查。標(biāo)本直接涂片，作抗酸染色或金胺 。熒光染色。②分離培養(yǎng)是最可靠的。痰液及其他含有雜菌的標(biāo)本，在培養(yǎng)前應(yīng)以適當(dāng)方法加以處理，以達到殺死或減少雜菌和和液化痰標(biāo)本的目的。.結(jié)核分枝桿菌免疫學(xué)檢測：結(jié)核菌素試驗：是應(yīng)用結(jié)核菌素進行皮膚試驗來測定機體對結(jié)核分枝桿菌是否產(chǎn)生遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)的一種試驗。結(jié)核菌素是結(jié)核分枝桿菌的菌體成分，目前都是用 PPD（純蛋白衍生物）。①結(jié)核菌素試驗時，感染、免疫、變態(tài)反應(yīng)共存，前臂皮內(nèi)注射，48~72h后判斷情況如下表：試驗結(jié)果試驗判定結(jié)果試驗結(jié)果分析紅月中硬結(jié)超過5mm陽性表示感染過結(jié)核分枝桿菌或接種過卡介苗，但不一定患結(jié)核病紅月中硬結(jié)呈15mm強陽性表示可能有活動性結(jié)核，應(yīng)進一步檢查，用PPD作為抗原做ELISA抗PPDIgG檢測，可快速診斷紅月中硬結(jié)＜5mm陰性表明未感染過結(jié)核分枝桿菌，但應(yīng)排除原發(fā)結(jié)核病早期、老年人、嚴(yán)重結(jié)核?。ㄈ缃Y(jié)核性腦膜炎）或后其他嚴(yán)重疾?。ㄈ绨籽?、艾滋?。┮约皯?yīng)用免疫抑制劑等②結(jié)核菌素試驗的主要用途 ：（簡單題）A.選才￥BCG（卡介苗）接種對象及測定接種效果；B.作為嬰幼兒結(jié)核病診斷的參考；C.在未接種BCG的人群中做結(jié)核分枝桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查;D.測定月中瘤患者的細胞免疫功能。1.麻風(fēng)分枝桿菌的人工培養(yǎng)迄今為止尚未成功，目前不能人工分離培養(yǎng)，只能做顯微鏡檢查。第三十一章 厭氧菌（芽孢厭氧菌和無芽孢厭氧菌）.在臨床厭氧菌感染中，絕大數(shù)是由 無芽孢厭氧菌（以脆弱類桿菌（BF）最常見）引起的內(nèi)源性感染（約占 90%），且多為與需氧菌或兼性厭氧菌共同引起的混合感染，僅少數(shù)為單純厭氧菌感染。.厭氧菌感染的臨床指征：①感染局部有氣體產(chǎn)生，這是厭氧菌感染的重要特征之一；②發(fā)生在黏膜附近的感染；③深部外傷；④有特殊的分泌物；⑤某些抗生素治療無效的感染。.厭氧菌感染的細菌學(xué)指征：①分泌物直接涂片革蘭染色，發(fā)現(xiàn)細菌染色不均、形態(tài)奇特呈明顯多形態(tài)；②鏡檢查見細菌，而需氧培養(yǎng)陰性；③在液體及半固體培養(yǎng)基深部有細菌生長。.厭氧菌感染的標(biāo)本采集厭氧菌標(biāo)本采集時須注意：標(biāo)本不應(yīng)被正常菌群污染，盡量避免接觸空氣。是厭氧菌培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。應(yīng)從無正常菌群寄居的部位用無菌操作方法采集標(biāo)本。凡含有正常菌群的標(biāo)本，如齒齦拭子、鼻咽拭子、咯痰、自然排出的尿液、接近皮膚或黏膜的分泌物、陰道分泌物、糞便以及洗胃液等，均不宜作厭氧菌培養(yǎng)。（多選）用于厭氧菌培養(yǎng)的最佳標(biāo)本是 活檢組織或用針抽吸的分泌物和膿液 。.厭氧菌標(biāo)本的運送方法：①針筒運送法；②無氧小瓶運送法（目前常用的方法）；③標(biāo)本充盈運送法；④組織塊運送法；⑤厭氧袋運送法；⑥棉拭運送法。梭狀芽孢桿菌屬（是芽孢厭氧菌唯一的菌屬）破傷風(fēng)梭菌.破傷風(fēng)梭菌是臨床常見的 革蘭陽性厭氧芽孢桿菌，為破傷風(fēng)的病原菌。.破傷風(fēng)梭菌在芽孢形成后易轉(zhuǎn)變成革蘭陰性。.破傷風(fēng)梭菌呈鼓槌狀，為本菌典型特征。.破傷風(fēng)梭菌專性厭氧，在普通平板上不易生長，在潮濕的血平板上常呈擴散生長，形成爬行生長物，不易獲得單個表面菌落。經(jīng)培養(yǎng)后形成扁平、灰白色、邊緣不齊、周邊疏松呈羽毛狀的菌落，有狹窄的B溶血。產(chǎn)氣莢膜梭菌.產(chǎn)氣莢膜梭菌 是臨床標(biāo)本中最常見的厭氧芽孢梭菌，為革蘭陽性粗大桿菌，兩端鈍圓，無鞭毛，在機體內(nèi)可形成明顯的莢膜。在組織和人工培養(yǎng)基中很少形成芽胞，為本菌的特點之一。.產(chǎn)氣莢膜梭菌的菌落中多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán)，內(nèi)環(huán)完全溶血，由8毒素引起,外環(huán)不完全溶血，由a毒素引起。.Nagler反應(yīng)：在卵黃平板上，由產(chǎn)氣莢膜梭菌產(chǎn)生的卵磷脂酶（a毒素）分解卵黃中的卵磷脂導(dǎo)致菌落周圍出現(xiàn)乳白色渾濁圈，能被特異抗血清所中和，稱為Nagler反應(yīng)。.“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象：產(chǎn)氣莢膜梭菌在牛乳培養(yǎng)基中，能分解乳糖產(chǎn)酸使酪蛋白凝固，同時產(chǎn)生大量氣體將凝固的酪蛋白沖散形成蜂窩狀，并將液面上的凡士林向上推擠，甚至沖開棉塞，氣勢兇猛，稱為“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象，為產(chǎn)氣莢膜梭菌特征之一。肉毒梭菌在厭氧條件下可產(chǎn)生毒性極強的外毒素-肉毒毒素，為已知最劇烈的毒素.艱難梭菌（因?qū)ρ鯓O為敏感，很難分離培養(yǎng)而得名）最常用平板是環(huán)絲氨酸-頭抱甲氧霉素-果糖-卵黃瓊脂（CCFA）平板培養(yǎng)基，形成較大的表面粗糙、邊緣不齊的黃色菌落，在紫外線照射下，可見黃綠色熒光 。.艱難梭菌的微生物學(xué)檢驗①直接顯微鏡檢查。標(biāo)本直接涂片做革蘭染色鏡檢，若發(fā)現(xiàn)標(biāo)本中有大量呈優(yōu)勢生長的革蘭陽性粗長桿菌，同時結(jié)合患者有長期使用抗生素的病史，可初步報告②分離培養(yǎng)。糞便標(biāo)本接種CCFA選擇培養(yǎng)基，挑選典型呈粗糙的黃色菌落轉(zhuǎn)種庖肉培養(yǎng)基進行純培養(yǎng)，供做鑒定試驗和毒素測定。第三十二章螺旋體和支原體螺旋體.鉤端螺旋體是螺旋體中唯一可進行人工培養(yǎng)的，常用柯