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復(fù)習(xí)題:1、名詞解釋:----微小RNA,是一種大小約為21-23個(gè)堿基單鏈小分子RNA,是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約為70-90個(gè)堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過(guò)Dicer酶加工生成。:——小干擾RNA(smallinterferingRNA),RNAi的關(guān)鍵效應(yīng)分子,21-23個(gè)nt大小的雙鏈RNA。:----RNA干擾是正常生物體內(nèi)抑制特定基因表達(dá)的一種現(xiàn)象,它是指當(dāng)細(xì)胞中導(dǎo)入與內(nèi)源性mRNA編碼區(qū)同源的雙鏈RNA(doublestrandedRNA,dsRNA)時(shí),該mRNA發(fā)生降解而導(dǎo)致基因表達(dá)沉默的現(xiàn)象,這種現(xiàn)象發(fā)生在轉(zhuǎn)錄后水平又稱為轉(zhuǎn)錄后基因沉默(PTGS):----轉(zhuǎn)錄后基因沉默,是正常生物體內(nèi)抑制特定基因表達(dá)的一種現(xiàn)象,它是指當(dāng)細(xì)胞中導(dǎo)入與內(nèi)源性mRNA編碼區(qū)同源的雙鏈RNA(doublestrandedRNA,dsRNA)時(shí),該mRNA發(fā)生降解而導(dǎo)致基因表達(dá)沉默的現(xiàn)象,這種現(xiàn)象發(fā)生在轉(zhuǎn)錄后水平,又稱為轉(zhuǎn)錄后基因沉默(PTGS):----核小體:染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)亞基,由約200bp的DNA和組蛋白八聚體所組成信息體,真核細(xì)胞mRNA通常與一些蛋白質(zhì)結(jié)合成核蛋白顆粒(RNP),構(gòu)成信息體:----分子伴侶是一類能介導(dǎo)蛋白質(zhì)進(jìn)行正確折疊、組裝的蛋白質(zhì),能協(xié)助蛋白質(zhì)獲得正確的構(gòu)型。:----泛素,是生物體內(nèi)廣泛存在的一類酸性蛋白質(zhì);含76個(gè)氨基酸,序列在進(jìn)化過(guò)程中高度保守,C-端為Gly,且分子內(nèi)部有多個(gè)Lys。: (Cysteine-containingaspartate-specificproteases天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶/切冬酶/胱冬肽酶)富含半胱氨酸,以非活性狀態(tài)的酶原存在,其肽鏈比有活性時(shí)長(zhǎng)一些,將多出的部分切除,就轉(zhuǎn)變成有活性的caspase。激活后,能夠在靶蛋白的特異天冬氨酸殘基部位進(jìn)行切割。peptideandleaderpeptide: 信號(hào)肽(signalpeptide),是引導(dǎo)新合成肽鏈轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的一段多肽,位于新合成肽鏈的N端;前導(dǎo)肽(leaderpeptide),是細(xì)胞器組成蛋白的主要加工方式,前導(dǎo)肽中含有作為細(xì)胞器蛋白定位的所有信息,前導(dǎo)肽負(fù)責(zé)細(xì)胞器外膜的初始識(shí)別,導(dǎo)肽起始了前體蛋白和細(xì)胞器膜的相互作用。:----基因座控制區(qū)(Locuscontrolregion),是一種順式作用元件,具有穩(wěn)定染色質(zhì)疏松結(jié)構(gòu)的功能。:----核基質(zhì)結(jié)合區(qū),是一段在體外能與核基質(zhì)結(jié)合的富含AT的DNA序列。:----增強(qiáng)子:指能使與它連鎖的基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的DNA序列。:----啟動(dòng)子:在DNA分子中,RNA聚合酶能夠識(shí)別、結(jié)合并導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄起始的序列。:----沉默子:一種通過(guò)一段延伸的DNA區(qū)域影響染色質(zhì)結(jié)構(gòu)(異染色質(zhì)化),從而調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄關(guān)閉的DNA元件zipper:=--亮氨酸拉鏈-能夠與CAAT盒結(jié)合,竣基端35個(gè)氨基酸殘基能形成-螺旋,其中每隔6個(gè)AA就有一個(gè)Leu,使第7個(gè)Leu殘基都在螺旋的同一方向出現(xiàn),以二聚體形式(疏水作用力)與DNA結(jié)合,結(jié)合DNA的區(qū)域是肽鏈氨基端20-30個(gè)富含堿性AA的結(jié)構(gòu)域。finger:----鋅指結(jié)構(gòu),常出現(xiàn)在DNA結(jié)合蛋白中的結(jié)構(gòu)基元,是有一個(gè)含有大約30個(gè)氨基酸的環(huán)與環(huán)上的4個(gè)Cys或2個(gè)Cys和2個(gè)His配位的Zn構(gòu)成,形成的結(jié)構(gòu)像手指狀。:----屬于RNaseIII家族,是dsRNA的特異性核酸內(nèi)切酶。: RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體,(RNA-inducingsilencingcomplex),具有核酸內(nèi)切、外切以及解旋酶活性,是RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合體。: RNA依賴的RNA聚合酶(RNA-dependentRNApolymerases),是RNAi的調(diào)節(jié)因子,使RNAi可以在生物體內(nèi)傳遞。:----是RNaseIII(雙鏈RNA特異性核酸內(nèi)切酶)家族的成員,是主要位于核內(nèi)對(duì)pre-miRNA進(jìn)行加T的RNA酶。proteosome:----蛋白酶體是一種蛋白分子的破碎機(jī),由于他被保護(hù)著因此不能降解細(xì)胞內(nèi)的正常蛋白。:----開(kāi)放讀碼框:從mRNA5端起始密碼子AUG到3端終止密碼子之間的核甘酸序列,各個(gè)三聯(lián)體密碼連續(xù)排列編碼一條蛋白質(zhì)多肽鏈,稱為開(kāi)放閱讀框或開(kāi)放讀碼框(ORF)。actionelement:----(順式作用原件)通過(guò)核甘酸自身的特異二級(jí)結(jié)構(gòu)控制與它緊密連鎖的結(jié)構(gòu)基因的表達(dá),一般不編碼蛋白質(zhì)(無(wú)基因產(chǎn)物的DNA功能區(qū))。actionfactor:---(反式作用因子)通過(guò)擴(kuò)散自身表達(dá)產(chǎn)物(酶,調(diào)節(jié)蛋白)控制其他基因的表達(dá),可轉(zhuǎn)錄可翻譯調(diào)節(jié)蛋白的DNA功能區(qū)。andintron—:外顯子:不連續(xù)基因的居間序列;內(nèi)含子:是隔斷基因的線性表達(dá)而剪接過(guò)程中被除去的核昔序列,內(nèi)含子是非編碼序列,通過(guò)剪接而除去,但它不是基因中沒(méi)有功能的廢料。blotting:----Southern印跡:鑒定DNA中某一特定的基因片段的技術(shù),通過(guò)標(biāo)記的探針DNA與靶DNA結(jié)合,檢測(cè)目的基因的存在及大小。blotting: Northern印跡,用以檢測(cè)某一特定的RNA(通常是mRNA)片段的存在及表達(dá)量。因與DNA雜交(Southern雜交)相對(duì)應(yīng),故被稱之為Northern雜交blotting:----免疫印跡:蛋白質(zhì)水平上的雜交技術(shù),即檢測(cè)蛋白質(zhì)與標(biāo)記的特定蛋白抗體結(jié)合,經(jīng)放射自顯影顯示條帶,根據(jù)條帶密度確定蛋白質(zhì)表達(dá)量。與DNA、RNA水平上的Southern雜交、Northern雜交相對(duì)應(yīng),稱為Western雜交。targeting:----基因靶向:是指利用細(xì)胞DNA可與外源性DNA同源序列發(fā)生同源重組的性質(zhì),定向改造生物某一基因的技術(shù)。knock-out:----基因敲除:利用基因打靶技術(shù),用無(wú)功能的外源基因轉(zhuǎn)入細(xì)胞與基因組中同源序列進(jìn)行同源重組,把具有功能的同源序列置換出來(lái),造成功能基因的缺失或失活的技術(shù)。2、選擇題1、轉(zhuǎn)座子引起的突變可類似于缺失突變的效果:基因的功能完全喪失?,F(xiàn)有一青霉素抗性的突變菌株,經(jīng)過(guò)什5侵染后,失去了青霉素抗性,試解釋原因A.轉(zhuǎn)座子改變了細(xì)菌的代謝過(guò)程 B.轉(zhuǎn)座子影響了細(xì)菌細(xì)胞壁的合成過(guò)程C轉(zhuǎn)座子插入編碼B-內(nèi)酰胺酶的基因內(nèi)部,使之失活D.轉(zhuǎn)座子使細(xì)菌通過(guò)其他機(jī)制抵御青霉素作用 E.無(wú)法解釋2、下面哪一項(xiàng)是對(duì)三元轉(zhuǎn)錄復(fù)合物的正確描述A.。因子、核心酶和雙鏈DNA在啟動(dòng)子形成的復(fù)合物B.全酶、TFI和解鏈DNA雙鏈形成的復(fù)合物C...全酶、…模板DNA和新生RNA形成的復(fù)合物..D.三個(gè)全酶的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)(tsp)形成的復(fù)合物E.。因子、核心酶和促旋酶形成的復(fù)合物3、。因子和DNA之間相互作用的最佳描述是A.。因子通常與DNA結(jié)合,且沿著DNA搜尋,直到在啟動(dòng)子碰到核心酶。它與DNA的結(jié)合不需依靠核心酶B......。.因子通常與.口心.結(jié)合.,且沿著DNA搜尋,…它識(shí)別啟動(dòng)子共有序列且與核心酶結(jié)合C。因子是DNA依賴的RNA聚合酶的固有組分,它識(shí)別啟動(dòng)子共有序列且與全酶結(jié)合D.。因子加入三元復(fù)合物而啟動(dòng)RNA合成4、。因子專一性表現(xiàn)在A^同編碼基因有識(shí)別不同啟動(dòng)子的總因子B.不同細(xì)菌產(chǎn)生可以互換的。因子C.。因子參與起始依靠特定的核心酶 D.。因子是一種非專一性蛋白,作為所有RNA聚合酶的輔助因子起作用5、核糖體的E位點(diǎn)是A.真核mRNA加工位點(diǎn) B.tRNA離開(kāi)原核生物核糖體的位點(diǎn).C.核糖體中受EcoRI限制的位點(diǎn)D.電化學(xué)電勢(shì)驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的位點(diǎn)6、細(xì)菌核糖體由( )及( )亞基組成A.20S,40SB.30S,50SC.40S,60SD.50S,70S7、色氨酸操縱子的調(diào)控作用是受兩種相互獨(dú)立的系統(tǒng)控制的,其中一個(gè)需要前導(dǎo)肽的翻譯。下面哪一種物質(zhì)調(diào)控這個(gè)系統(tǒng)A色氨酸 瓦色氨酰-tRNATrpCcAMPD以上都不是8、負(fù)調(diào)節(jié)物如乳糖阻遏蛋白如何阻止1^岫聚合酶起始轉(zhuǎn)錄A.形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)阻斷聚合酶的通過(guò) B.物理阻斷聚合酶分子特定的DNA結(jié)合位點(diǎn)C通過(guò)結(jié)合聚合酶分子,從而阻止其結(jié)合D.阻斷聚合酶與P序列結(jié)合9、在基因型為(I+p+OcZ+Y-A+/I-p+O+Z-Y+A-)的菌株中,B-半乳糖苷酶的表達(dá)形式應(yīng)為(A),透性酶的表達(dá)形式為(B),轉(zhuǎn)乙?;傅谋磉_(dá)形式為(A)A.組成型B.誘導(dǎo)型C.缺陷型D.致死型10、色氨酸操縱子的終產(chǎn)物一一色氨酸如何參與操縱子的調(diào)控A.結(jié)合到阻抑物上,阻斷其與DNA的結(jié)合,從而使轉(zhuǎn)錄得以進(jìn)行B.結(jié)合到阻抑物上,使阻抑物與DNA結(jié)合,從而使轉(zhuǎn)錄得以進(jìn)行C色氨酸直接與DNA結(jié)合,抑制操縱子轉(zhuǎn)錄D.“結(jié)合到阻抑物上,形成復(fù)合物與.DNA結(jié)合,阻止轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行11、在色氨酸操縱子中,衰減作用通過(guò)前導(dǎo)序列中兩個(gè)色氨酸密碼子的識(shí)別而進(jìn)行,如果這兩個(gè)密碼子突變?yōu)榻K止密碼子,會(huì)有什么結(jié)果A該操縱子將失去對(duì)色氨酸衰減調(diào)節(jié)的應(yīng)答功能B突變?yōu)榻M成型表達(dá)的基因,不受色氨酸是否存在的調(diào)節(jié)C將合成色氨酸合成酶 DABC現(xiàn)象都不會(huì)發(fā)生 E...ABC現(xiàn)象都會(huì)發(fā)生12、色氨酸操縱子調(diào)節(jié)中,色氨酸是作為A.阻抑物B.衰減子C活化物D?.輔阻抑物13、在大腸桿菌的熱激反應(yīng)中,某些蛋白質(zhì)表達(dá)的開(kāi)啟和關(guān)閉的機(jī)制是A.溫度升高使特定阻抑蛋白失活B.編碼熱敏感蛋白的基因的啟動(dòng)子區(qū)域在較高溫度下發(fā)生變性C二在高溫時(shí)形成新的私因子,調(diào)節(jié)熱激基因的表達(dá)D.高溫時(shí),已存在的聚合酶。因子與啟動(dòng)子的結(jié)合能力增強(qiáng)14、鋅指蛋白結(jié)構(gòu)模體與哪種蛋白質(zhì)功能有關(guān)A.激酶活性B..DNA結(jié)合C.mRNA剪接D.DNA復(fù)制E.甲基化15、()是通常與其調(diào)控的基因具有一段距離的DNA順式作用元件。A.啟動(dòng)子B.終止子C.增強(qiáng)子D.調(diào)節(jié)子16、由于高度濃縮而造成轉(zhuǎn)錄沉默的DNA區(qū)的C堿基通常發(fā)生()修飾。A.超氧化B二甲基化C.去磷酸化D.磷酸化E.整合17、利用自己的位點(diǎn)專一重組酶把自己從寄主基因組中的一個(gè)地方移到另一個(gè)地方的遺傳元件叫()A、啟動(dòng)子B、轉(zhuǎn)座子C、T-DNAD、順?lè)醋?8、證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是:肺炎鏈球菌在老鼠體內(nèi)的毒性和T2噬菌體感染大腸桿菌。這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中主要的論點(diǎn)證據(jù)是:(A)從被感染的生物體內(nèi)重新分離得到DNA,作為疾病的致病劑(B)DNA突變導(dǎo)致毒性喪失⑹生物體吸收的外源DNA(而并非蛋白質(zhì))改變了其遺傳潛能(D)DNA是不能在生物體間轉(zhuǎn)移的,因此它一定是一種非常保守的分子19、1953年Watson和Crick提出:( )(A)多MSMDNA鏈通過(guò)氫鍵連接成一個(gè)雙螺旋DNA的復(fù)制是半保留的,常常形成親本一子代雙螺旋雜合鏈(C)三個(gè)連續(xù)的核甘酸代表一個(gè)遺傳密碼 (D)遺傳物質(zhì)通常是DNA而非RNA20、下列哪一種蛋白不是組蛋白的成分()(A)H1(B)H2A、H2B(C)H3、H4(D)…H5...21、在原核生物復(fù)制子中以下哪種酶除去RNA引發(fā)體并加入脫氧核糖核昔酸:(A)DNA聚合酶III(B)DNA聚合酶Il(C)DNA聚合酶?(D)外切核酸酶MFl22、DNA復(fù)制時(shí)不需要以下哪種酶(A)DNA依賴的DNA聚合酶(B.RNA依賴的DNA聚合酶(C)拓?fù)洚悩?gòu)酶8)連接酶23、一個(gè)操縱子(元)通常含有(A)數(shù)個(gè)啟動(dòng)序列和一個(gè)編碼基因 (B).一個(gè)啟動(dòng)序列和數(shù)個(gè)編碼基因(C)一個(gè)啟動(dòng)序列和一個(gè)編碼基因 (D)兩個(gè)啟動(dòng)序列和數(shù)個(gè)編碼基因(E)數(shù)個(gè)啟動(dòng)序列和數(shù)個(gè)編碼基因24、乳糖操縱子(元)的直接誘導(dǎo)劑是(A)葡萄糖(B)乳糖(C)B一半乳糖甘酶(D)透酶(EL異構(gòu)乳糖25、1_2。阻遏蛋白結(jié)合乳糖操縱子(元)的(A)CAP結(jié)合位點(diǎn)(BLA序列(C)P序列(D)Z基因(E)I基因26、cAMP與CAP結(jié)合、CAP介導(dǎo)正性調(diào)節(jié)發(fā)生在(A)葡萄糖及cAMP濃度極高時(shí)(B)沒(méi)有葡萄糖及cAMP較低時(shí)(C)…沒(méi)有葡萄糖及.cAMP.較高時(shí).…(D)有葡萄糖及cAMP較低時(shí)(E)有葡萄糖及cAMP較高時(shí)27、1_2。阻遏蛋白由(A)Z基因編碼(B)Y基因編碼(C)A基因編碼(D)..」.基因編碼(E)以上都不是28、色氨酸操縱子(元)調(diào)節(jié)過(guò)程涉及(A)轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)(B)轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)調(diào)節(jié)(C)轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)(D)翻譯水平調(diào)節(jié)(E)…轉(zhuǎn)錄/翻水調(diào).節(jié)29、與O序列結(jié)合(震) 30、與P序列結(jié)合(旦)31、與CAP結(jié)合(一J) 32、與CAP位點(diǎn)結(jié)合(乩)(A)Lac阻遏蛋白(B)RNA聚合酶(C)環(huán)磷酸腺昔 (D)CAP-cAMP(E)異構(gòu)乳糖33、乳糖、色氨酸等小分子物質(zhì)在基因表達(dá)調(diào)控中作用的共同特點(diǎn)是A與啟動(dòng)子結(jié)合B與DNA結(jié)合影響模板活性C與RNA聚合酶結(jié)合影響其活性D一與蛋白質(zhì)結(jié)合影響該蛋白質(zhì)結(jié)合,DNA E與操縱基因結(jié)合34、DNA損傷修復(fù)的SOS系統(tǒng)A是一種保真性很高的復(fù)制過(guò)程 BJ&A蛋白是一系列操縱子的阻遏物CRecA蛋白是一系列操縱子的阻遏物D它只能修復(fù)嘧啶二聚體35、以下關(guān)于cAMP對(duì)原核基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控作用的敘述錯(cuò)誤的是AcAMP可與分解代謝基因活化蛋白(CAP)結(jié)合成復(fù)合物BcAMP-CAP復(fù)合物結(jié)合在啟動(dòng)子前方C葡萄糖充足時(shí),cAMP水平不高 D葡萄糖和乳糖并存時(shí),細(xì)菌優(yōu)先利用乳糖.tRNA分子上結(jié)合氨基酸的序列是A.CAA-3/ B.…CCA-3J...C.AAC-3/D.ACA-3/E.AAC-3,.遺傳密碼A.20種氨基酸共有64個(gè)密碼子 B.堿基缺失、插入可致框移突變C.AUG,是起始密碼 D.UUU是終止密碼38、tRNA能夠成為氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)體,是因?yàn)槠浞肿由嫌?A...-CCA-QH.3,末端B.3個(gè)核甘酸為一組的結(jié)構(gòu)C.稀有堿基D”.反密碼環(huán)E.假腺嘌吟環(huán)39、蛋白質(zhì)生物合成中的終止密碼是()。OAA (B)UAU(C)UAC…(D)…UAG.…(E)…UGA40、Shine-Dalgarno序列(SD-序列)是指:( )A.在@RNA分子的起始密碼子上游8-13個(gè)核苷酸處的順序B.在DNA分子上轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)前8-13個(gè)核甘酸處的順序3‘端富含嘧啶的互補(bǔ)順序 D.啟動(dòng)基因的順序特征41、反密碼子中哪個(gè)堿基對(duì)參與密碼子的簡(jiǎn)并性(搖擺)。().(A).第一個(gè) (B)第二個(gè)(C)第二個(gè)(D)第一個(gè)與第二個(gè)42、與mRNA的GCU密碼子對(duì)應(yīng)的tRNA的反密碼子是( )(A)CGA…-,(B)…IGC (C)CIG(D)CGI43、真核與原核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的相同點(diǎn)是()(A)翻譯與轉(zhuǎn)錄偶聯(lián)進(jìn)行 (B)模板都是多順?lè)醋?.(C.)..都需要GTP (D)甲酰蛋氨酸是第一個(gè)氨基酸44、DNA以半保留方式復(fù)制,如果一個(gè)具有放射性標(biāo)記的雙鏈口岫分子,在無(wú)放射性標(biāo)記的環(huán)境中經(jīng)過(guò)兩輪復(fù)制。其產(chǎn)物分子的放射性情況如何()。A其中一半沒(méi)有放射性 B都有放射性 C半數(shù)分子的兩條鏈都有放射性D都不含放射性45、修補(bǔ)胸腺嘧啶有數(shù)種方法,其中之一是用DNA連接酶、DNA聚合酶等催化進(jìn)行,試問(wèn)這些酶按下列哪種順序發(fā)揮作用():A、DNA連接酶TDNA聚合酶T核酸內(nèi)切酶 B、DNA聚合酶T核酸內(nèi)切酶TDNA連接酶C、…核酸內(nèi)切酶3DNA.聚合酶2DNA連接酶 D、核酸內(nèi)切酶TDNA連接酶TDNA聚合酶46、大腸桿菌中,參與轉(zhuǎn)錄終止調(diào)控的是:A:TATAbox &PS子 C:snoRNAD:RNaseP47、在正轉(zhuǎn)錄調(diào)控系統(tǒng)中,調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物被稱為:()A:阻遏蛋白B:誘導(dǎo)因子以激活蛋白D:增強(qiáng)子48、大腸桿菌的乳糖操縱子屬于(A),大腸桿菌的色氨酸操縱子屬于(B)A.負(fù)控誘導(dǎo) B.負(fù)控阻遏 C.正控誘導(dǎo) D.正控阻遏3、簡(jiǎn)答題1、Lac阻遏蛋白由_L基因編碼,結(jié)合_Q_序列對(duì)Lac操縱子(元)起阻遏作用。2、Trp操縱子的精細(xì)調(diào)節(jié)包括阻遏機(jī)制及弱化/衰減機(jī)制兩種機(jī)制。3、RNAi及其產(chǎn)生的機(jī)制答:RNAi是正常生物體內(nèi)抑制特定基因表達(dá)的一種現(xiàn)象,它是指當(dāng)細(xì)胞中導(dǎo)入與內(nèi)源性mRNA編碼區(qū)同源的雙鏈RNA(doublestrandedRNA,dsRNA)時(shí),該mRNA發(fā)生降解而導(dǎo)致基因表達(dá)沉默的現(xiàn)象,這種現(xiàn)象發(fā)生在轉(zhuǎn)錄后水平,又稱為轉(zhuǎn)錄后基因沉默RNAi的作用機(jī)制:(1)長(zhǎng)片段dsRNA在細(xì)胞內(nèi)被III型RNA酶Dicer切成長(zhǎng)度大約為19-23nt的siRNA,由siRNA參與構(gòu)成復(fù)合物RISC。(2)siRNA通過(guò)與同源mRNA的特異配對(duì),引導(dǎo)RISC特異地降解同源mRNA,導(dǎo)致基因表達(dá)的抑制。(3)因此小片段的siRNA可以誘導(dǎo)高效的基因沉默。4、Ubiquitin如何介導(dǎo)蛋白質(zhì)選擇性降解答:半衰期短的蛋白質(zhì)在其完成其功能和使命后,其自身結(jié)構(gòu)和電荷狀況發(fā)生改變,泛素對(duì)需要清除的蛋白質(zhì)通過(guò)其賴氨酸殘基側(cè)鏈£-氨基連接多聚泛素鏈(降解標(biāo)簽)。一旦靶蛋白被4個(gè)以上的泛素分子修飾,他們就被蛋白酶體降解。蛋白酶體是一種蛋白分子的破碎機(jī),由于它被保護(hù)著因此不能降解細(xì)胞內(nèi)的正常蛋白。5、真核生物的染色體是如何包裝的答:(1)染色質(zhì)由核小體重復(fù)構(gòu)成1)DNA盤(pán)繞在一個(gè)組蛋白八聚體上形成核小體的核心顆粒2)連接區(qū)DNA將相鄰的兩個(gè)核小體連接起來(lái)3)組蛋白H1把單個(gè)核小體封鎖起來(lái),結(jié)合于連接DNA上,使核小體一個(gè)挨一個(gè)彼此靠攏(2)30nm纖絲-真核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的第二層次。在有組蛋白H1存在的情況下,由直徑10nm的核小體串珠結(jié)構(gòu)螺旋盤(pán)繞,每圈6個(gè)核小體,形成外徑為30nm,內(nèi)徑10nm,螺距11nm的螺線管。(3)150nm螺線圈-真核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的第三層次.由30nm纖絲進(jìn)一步螺旋化形成直徑為150nm的圓筒狀結(jié)構(gòu)。突環(huán)為其特征結(jié)構(gòu)。(4)300nm超螺線管-真核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的第四層次150nm螺線圈進(jìn)一步螺旋折疊,形成直徑300nm的超螺線管。玫瑰花結(jié)為其特征結(jié)構(gòu),每個(gè)玫瑰花結(jié)包含6個(gè)突環(huán)。(5)700nm超螺線管----真核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的第五層次300nm超螺線管進(jìn)一步螺旋折疊,形成直徑700nm的超螺線管。每個(gè)超螺線管包含30個(gè)玫瑰花結(jié)。(6)染色單體-真核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的第六層次.700nm超螺線管進(jìn)一步螺旋折疊,形成直徑1400nm的染色單體。每個(gè)染色單體包含10個(gè)超螺旋管。(7)染色體-真核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的第七層次.兩條1400nm的染色單體組成染色體。6、2013年諾貝爾生理學(xué)/醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)及諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)的獲獎(jiǎng)人是誰(shuí)并說(shuō)說(shuō)他們的主要貢獻(xiàn)。諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng):美國(guó)、德國(guó)3位科學(xué)家JamesE.Rothman詹姆斯?羅斯曼),RandyW.Schekman(蘭迪?謝克曼)和ThomasC.Sudhof(托馬斯,祖德霍夫)獲獎(jiǎng)。獲獎(jiǎng)理由是“發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)的主要運(yùn)輸系統(tǒng)一一囊泡運(yùn)輸?shù)恼{(diào)節(jié)機(jī)制”。這三位科學(xué)家的研究成果解答了細(xì)胞如何組織其內(nèi)部最重要的運(yùn)輸系統(tǒng)之 囊泡傳輸系統(tǒng)的奧秘。謝克曼發(fā)現(xiàn)了能控制細(xì)胞傳輸系統(tǒng)不同方面的三類基因,從基因?qū)用嫔蠟榱私饧?xì)胞中囊泡運(yùn)輸?shù)膰?yán)格管理機(jī)制提供了新線索;羅思曼20世紀(jì)90年代發(fā)現(xiàn)了一種蛋白質(zhì)復(fù)合物,可令囊泡基座與其目標(biāo)細(xì)胞膜融合;祖德霍夫發(fā)現(xiàn)并解釋了囊泡如何在指令下精確地釋放出內(nèi)部物質(zhì)。諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng):美國(guó)三位科學(xué)家MartinKarplus(馬丁?卡普拉斯),MichaelLevitt(邁克爾?萊維特)和AriehWarshel(亞利耶?瓦謝爾因)獲獎(jiǎng)。獲獎(jiǎng)理由是“為復(fù)雜化學(xué)系統(tǒng)創(chuàng)立了多尺度模型”。Karplus、Levitt的Warshel工作的突破意義在于他們?cè)O(shè)法讓牛頓的經(jīng)典物理和完全不同的量子物理結(jié)合在化學(xué)過(guò)程的建模之中。經(jīng)典物理的強(qiáng)項(xiàng)是計(jì)算簡(jiǎn)單,可用于建模非常大的分子,但弱點(diǎn)是無(wú)法建?;瘜W(xué)反應(yīng)。為了模擬化學(xué)反應(yīng),化學(xué)家不得不使用量子物理,但量子物理需要驚人的計(jì)算量,因此只能用于小分子。他們?nèi)说墓ぷ鹘Y(jié)合了兩者的長(zhǎng)處,發(fā)展出同時(shí)利用經(jīng)典物理和量子物理的方法。7、lacOc,lacIs各表示什么含義答:lacOc操縱基因發(fā)生突變,導(dǎo)致阻遏蛋白無(wú)法與之結(jié)合,使乳糖操縱子總是處于開(kāi)放狀態(tài),結(jié)構(gòu)基因持續(xù)表達(dá)。lacIs調(diào)節(jié)基因發(fā)生突變,且突變位點(diǎn)是編碼產(chǎn)物與誘導(dǎo)物結(jié)合的位點(diǎn),導(dǎo)致突變基因的表達(dá)產(chǎn)物(阻遏蛋白)不能與誘導(dǎo)物結(jié)合,即使誘導(dǎo)物存在,也不能與阻遏蛋白結(jié)合,并且已經(jīng)結(jié)合在O上的阻遏蛋白也不會(huì)解離下來(lái)突變體的表現(xiàn)型是無(wú)論乳糖是否存在乳糖操縱子總是處于關(guān)閉狀態(tài)。8、以大腸桿菌的乳糖操縱子為例,說(shuō)明代謝物阻遏效應(yīng)及誘導(dǎo)物效應(yīng)如何調(diào)節(jié)操縱子的表達(dá)答:在乳糖操縱元中,調(diào)控基因LacI位于Plac鄰近,有其自身的啟動(dòng)子和終止子,轉(zhuǎn)錄方向和結(jié)構(gòu)基因群的轉(zhuǎn)錄方向一致,編碼產(chǎn)生由347個(gè)氨基酸組成的調(diào)控蛋白R(shí)。在在環(huán)境沒(méi)有乳糖存在的情況下,R形成分子量為152000的活性四聚體,能特異的與操縱子0緊密結(jié)合,從而阻止利用乳糖的酶類基因的轉(zhuǎn)錄,所以R是乳糖操縱元的阻遏蛋白。當(dāng)環(huán)境中有足夠的乳糖時(shí),乳糖受B-半乳糖甘酶作用轉(zhuǎn)變?yōu)閯e乳糖,別乳糖與R結(jié)合,使R的空間構(gòu)象變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性緊密結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。在這過(guò)程中乳糖就是誘導(dǎo)劑,與R結(jié)合起到去阻遏作用,誘導(dǎo)了利用乳糖的酶類基因轉(zhuǎn)錄開(kāi)放。9、以大腸桿菌色氨酸操縱子為例,說(shuō)說(shuō)在轉(zhuǎn)錄及翻譯水平如何調(diào)節(jié)操縱子的表達(dá)答:阻遏機(jī)制:Trp是轉(zhuǎn)錄和翻譯雙重調(diào)節(jié),原因是操縱基因和結(jié)構(gòu)基因不是直接相連的。調(diào)節(jié)基因編碼一種沒(méi)有活性的阻遏蛋白,低Trp時(shí),結(jié)構(gòu)基因可以轉(zhuǎn)錄高色氨酸時(shí),高時(shí),阻遏物+Trp結(jié)合操縱基因,完全阻斷轉(zhuǎn)錄。 弱化機(jī)制:當(dāng)細(xì)胞內(nèi)具有Trp,但其含量不足以激活阻遏蛋白,RNA聚合酶能通過(guò)0,起動(dòng)TrpOperon轉(zhuǎn)錄;細(xì)胞內(nèi)Trp含量較高,總體轉(zhuǎn)錄過(guò)程雖被關(guān)閉,但有少量RNA聚合酶的滲漏,轉(zhuǎn)錄被啟動(dòng)。先轉(zhuǎn)錄的是mRNA的引導(dǎo)區(qū),隨后核糖體結(jié)合于引導(dǎo)區(qū)的起始密碼子AUG啟動(dòng)引導(dǎo)肽的翻譯;此時(shí)RNA聚合酶已轉(zhuǎn)錄至區(qū)段2,核糖體覆蓋于區(qū)段1上,當(dāng)核糖體到達(dá)連續(xù)排列兩個(gè)Trp密碼子上時(shí),由于細(xì)胞內(nèi)含有較豐富的Trp,細(xì)胞內(nèi)有大量的Trp-tRNATrp可供翻譯,此處翻譯速度不會(huì)改變,核糖體順利通過(guò)區(qū)段1,到達(dá)終止密碼子處,此時(shí)覆蓋了區(qū)段2的部分序列;此時(shí)RNA聚合酶已經(jīng)完成了區(qū)段3與4的轉(zhuǎn)錄,由于區(qū)段2不能與3配對(duì),則區(qū)段3與4配對(duì),形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),同時(shí)與尾隨的多聚U構(gòu)成不依賴于p因子的終止子結(jié)構(gòu),使TrpOperon表現(xiàn)為轉(zhuǎn)錄前終止。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)Trp水平較低,或缺乏Trp時(shí),細(xì)胞內(nèi)沒(méi)有Trp-tRNATrp可供翻譯,核糖體到達(dá)連續(xù)排列兩個(gè)Trp密碼子上時(shí),就會(huì)“停工待料”,此時(shí)核糖體覆蓋區(qū)段1,而區(qū)段2與3則形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),阻止區(qū)段3與4及尾隨的多聚U形成終止子結(jié)構(gòu),RNA聚合酶則能順利通過(guò)引導(dǎo)區(qū)的轉(zhuǎn)錄到達(dá)結(jié)構(gòu)基因處開(kāi)始Trp合成酶基因的轉(zhuǎn)錄。10、什么是切冬酶和PCD它在PCD中是如何發(fā)揮作用的PCD是程序性細(xì)胞死亡(PCD),也叫細(xì)胞凋亡。體內(nèi)健康細(xì)胞在特定細(xì)胞外信號(hào)的誘導(dǎo)下,其死亡途徑被激活,在有關(guān)基因調(diào)控下發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的死亡,以滿足個(gè)體發(fā)育或適應(yīng)外界特定環(huán)境需要。為非壞死性的細(xì)胞死亡,細(xì)胞分解為凋亡小體,被鄰近細(xì)胞吞噬;DNA降解為有序降解。是多細(xì)胞生物發(fā)育過(guò)程中一種常見(jiàn)的調(diào)節(jié)途徑。Caspase切冬酶富含半胱氨酸,以非活性狀態(tài)的酶原存在,其肽鏈比有活性時(shí)長(zhǎng)一些,將多出的部分切除就轉(zhuǎn)變成有活性的caspase。激活后,能夠在靶蛋白的特異天冬氨酸殘基部位進(jìn)行切割。切冬酶開(kāi)始以沒(méi)有活性的酶原存在,經(jīng)過(guò)其他酶原的剪切成為有活性的切冬酶,對(duì)靶蛋白特異性的天冬氨酸殘基進(jìn)行水解為各種蛋白。11、RNAi的分子生物學(xué)特性。答:①RNAi是siRNA介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄后水平的基因沉默②RNAi作用針對(duì)的是靶基因的外顯子序列③高特異性,只針對(duì)同源靶向mRNA ④高效性,極低濃度的siRNA就能完全抑制基因表達(dá)⑤RNAi作用具有可傳遞性12、siRNA與miRNA之間有什么區(qū)別和聯(lián)系答:①miRNA是內(nèi)源性的,而siRNA主要是外源引入的;②miRNA不能介導(dǎo)靶mRNA的降解,只是與靶RNA不完全互補(bǔ),從而阻抑翻譯;siRNA是介導(dǎo)靶mRNA的完全降解;③內(nèi)源miRNA在與靶mRNA完全互補(bǔ)的前提下,也能表現(xiàn)剪切靶RNA的干擾效應(yīng)。④人工siRNA在體內(nèi)能產(chǎn)生類似miRNA的功能。13、什么是泛素它是如何行使蛋白質(zhì)選擇性降解的功能的答:泛素是生物體內(nèi)廣泛存在的一種酸性蛋白質(zhì),內(nèi)含76個(gè)氨基酸,序列在進(jìn)化過(guò)程中高度保守,C-端為Gly,且分子內(nèi)部含有多個(gè)Lys。泛素調(diào)節(jié)的蛋白質(zhì)選擇性降解:半衰期短的蛋白質(zhì),在完成其功能和使命后,其自身結(jié)構(gòu)和電荷狀況都會(huì)發(fā)生改變,并且在蛋白質(zhì)上加上泛素標(biāo)簽;①一旦靶蛋白被4個(gè)以上的泛素分子修飾,它們就被蛋白酶體降解。②蛋白酶體是一種蛋白分子的破碎機(jī),由于它被保護(hù)著,因此不能降解細(xì)胞內(nèi)的正常蛋白③蛋白酶形似一個(gè)圓柱體,它的活性位點(diǎn)隱藏在圓柱體腔內(nèi)部。它末端的帽子結(jié)構(gòu)控制著蛋白能否進(jìn)入體腔內(nèi),蛋白質(zhì)在腔內(nèi)被降解成3-23個(gè)氨基酸長(zhǎng)短不等的肽段。14、區(qū)別F-、F+、Hfr、F'幾個(gè)不同的概念。答:細(xì)菌能在接合中作為傳遞供體取決于致育因子(fertilityfacter)又稱為F因子。大腸桿菌中發(fā)現(xiàn),含質(zhì)粒為F+:無(wú)質(zhì)粒為F-:質(zhì)粒整合到染色體上為Hfr.F,菌株一Hfr菌株的F因子因不正常切Hfr菌株:因與F-菌株接合后發(fā)生重組的頻率要比F+和F-接合后發(fā)生成游離的但帶有一小段染色體基因的F因子,稱F'.F+“雄性”菌株,其細(xì)胞含游離的F因子(1-4)在細(xì)胞表面還有與F因子數(shù)目相當(dāng)?shù)男跃?。F-“雌性”菌株,無(wú)F因子,細(xì)胞表面也沒(méi)有性菌毛。但他可通過(guò)與F+菌株或F-菌株的接合而接受供體菌的F因子F,因子,而變成雄性菌株,業(yè)可以接受來(lái)自Hfr的一部分或全部遺傳信息。15、RecA蛋白是怎樣調(diào)節(jié)SOS反應(yīng)的答:SOS反應(yīng)是由RecA蛋白和LexA阻遏物相互作用引起的,RecA蛋白是一種由大腸桿菌Rec基因編碼的蛋白質(zhì),也是SOS反應(yīng)的啟動(dòng)因子,在有單鏈DNA和ATP存在時(shí),RecA蛋白被激活,從而促進(jìn)LexA阻遏蛋白裂解,阻遏作用解除,使許多與修復(fù)有關(guān)的基因被激活而得到表達(dá)。進(jìn)而誘導(dǎo)DNA的SOS修復(fù)。16、請(qǐng)正確書(shū)寫(xiě)丙氨酰tRNA、賴氨酰tRNA、谷氨酰tRNA。答:丙氨酰tRNA:Ala-tRNAAla;賴氨酰tRNA:Lys-tRNALys;谷氨酰tRNA:Glu-tRNAGlu.17、真核生物翻譯起始復(fù)合物的形成與原核生物有什么主要區(qū)別答:原核生物的30S小亞基先與mRNA結(jié)合后,再與fMet-tRNAfMet結(jié)合,最后與50S大亞基結(jié)合形成70S*mRNA*fMet-tRNAfMet起始復(fù)合物。真核生物的40S小亞基先與Met-tRNAMet結(jié)合后,再與mRNA結(jié)合,最后與60S大亞基結(jié)合形成80S*mRNA*Met-tRNAMet起始復(fù)合物。18、在真核及原核生物中,翻譯的準(zhǔn)確起始分別是如何發(fā)動(dòng)的(核糖體如何識(shí)別起始密碼子)答:原核生物中,(1).核糖體大小亞基分離;230小亞基首先與翻譯起始因子2F-1,2F-3結(jié)合,通過(guò)SD序列與MRNA模板結(jié)合(2).30S小亞基通過(guò)反SD序列與mRNA模板的SD序列相結(jié)合使起始密碼子調(diào)整到核糖體的P位(3).在IF-2和GTP的幫助下,fMet-tRNAfMet進(jìn)入小亞基的P位,tRNA上的反密碼子與mRNA上的起始密碼子配對(duì)。(4).帶有tRNA、mRNA和3個(gè)翻譯起始因子的小亞基復(fù)合物與50S大亞基結(jié)合,GTP水解,釋放翻譯起始因子。真核生物中,(1)核糖體大小亞基分離:(2).Met-tRNAMet與40小亞基結(jié)合(3).40S亞基識(shí)別mRNA帽子結(jié)構(gòu)掃描至起始密碼子G各種起始因子釋放。(4).形成復(fù)合物。19、生物大分子之間的相互作用是生命現(xiàn)象的具體表現(xiàn)。請(qǐng)以蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)分子間,以及蛋白質(zhì)與核酸分子間的相互作用為例加以說(shuō)明(從DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯及基因表達(dá)調(diào)控等方面進(jìn)行思考)。答:生物分子之間的相互作用是生命現(xiàn)象發(fā)生的基礎(chǔ)。一切生命過(guò)程都是生物分子之間或生物分子和其他物質(zhì)分子之間進(jìn)行接觸,相互作用,發(fā)生物理和化學(xué)變化所引起的。(1)蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用蛋白質(zhì)控制和調(diào)節(jié)細(xì)胞中諸多的生命活動(dòng)。盡管有一些蛋白質(zhì)主要以單體的形式發(fā)揮作用,但卻有很大一部分蛋白子,即使不是大多數(shù)蛋白質(zhì),卻是通過(guò)與別的配體分子結(jié)合或作為一個(gè)大的生物復(fù)合體中的一部分來(lái)參與細(xì)胞的生命活動(dòng)。分裂還是分化,黏附還是遷移,存活還是死亡--這都是后生動(dòng)物細(xì)胞在發(fā)育和成年生活過(guò)程中必須做出的重要抉擇,這些抉擇必須準(zhǔn)確無(wú)誤和協(xié)調(diào)一致,并且可由胞外因子和胞內(nèi)信號(hào)同時(shí)指令,細(xì)胞執(zhí)行這些抉擇的過(guò)程叫信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的過(guò)程中,蛋白質(zhì)一蛋白質(zhì)的相互作用很重要。一個(gè)信號(hào)蛋白和另一個(gè)信號(hào)蛋白的結(jié)合能產(chǎn)生很多結(jié)果,一種結(jié)果是這種結(jié)合能募集信號(hào)蛋白,使其定位到它被激活的地方或需要它執(zhí)行功能的地方,第二種蛋白質(zhì)相互作用的結(jié)果是一個(gè)蛋白質(zhì)和另一個(gè)蛋白質(zhì)結(jié)合能誘導(dǎo)蛋白構(gòu)象發(fā)生變化,這種變化能影響其活性或與其他結(jié)合結(jié)構(gòu)域的可靠近性,從而誘發(fā)進(jìn)一步的蛋白質(zhì)的相互作用。(2)蛋白質(zhì)與核酸之間的相互作用DNA與蛋白質(zhì)之間的相互作用是指順式作用元件與反式作用因子之間的特異性識(shí)別與結(jié)合,從DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯、基因表達(dá)調(diào)控到染色質(zhì)的組裝,都涉及到DNA與蛋白質(zhì)的相互作用。大部分結(jié)合蛋白有自己的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域,主要分為leu拉鏈、螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋、螺旋-環(huán)-螺旋-鋅指結(jié)構(gòu)以及同質(zhì)異形結(jié)構(gòu)域幾種結(jié)構(gòu)模式,它們靠對(duì)DNA螺旋大溝中的氫鍵的特異識(shí)別,以非共價(jià)鍵與DNA結(jié)合,來(lái)執(zhí)行不同的功能。(1)參與DNA復(fù)制的主要酶:DNA聚合酶、引物酶、拓?fù)洚悩?gòu)酶、單鏈結(jié)合蛋白、DNA連接酶。在蛋白質(zhì)-核酸的相互作用下,完成DNA的復(fù)制過(guò)程(2)轉(zhuǎn)錄是在RNA聚合酶的作用下,以DNA為模板,按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則,合成一條與DNA鏈的一定區(qū)段互補(bǔ)的RNA鏈的過(guò)程。(3)翻譯是指把mRNA分子中堿基順序轉(zhuǎn)變成蛋白質(zhì)中氨基酸順序的過(guò)程,蛋白質(zhì)合成的真實(shí)性主要決定于tRNA結(jié)合的特異性酶,由它決定氨基酸能否與對(duì)應(yīng)的tRNA結(jié)合,既能識(shí)別tRNA,又能識(shí)別氨基酸,對(duì)兩者都具有高度的專一性。(4)以大腸桿菌為例,大腸桿菌中基因表達(dá)調(diào)控最常見(jiàn)的蛋白質(zhì)可能是。因子,基因組序列分析后發(fā)現(xiàn)存在6種。因子,其中。70是調(diào)控最基本的生理功能如碳代謝、生物合成等基因的轉(zhuǎn)錄所必須的。20、不依賴p因子的轉(zhuǎn)錄終止子在結(jié)構(gòu)上有什么特點(diǎn)答:①終止位點(diǎn)上游一般存在一個(gè)富含GC堿基的二重對(duì)稱區(qū),RNA形成發(fā)夾結(jié)構(gòu);②在終止位點(diǎn)前面有一段由4-8個(gè)A組成的序列,RNA的3,端為寡聚U21、什么是啟動(dòng)子清理(promoterclearance)轉(zhuǎn)錄過(guò)程中,當(dāng)開(kāi)放的啟動(dòng)子復(fù)合物足夠穩(wěn)定時(shí),RNA聚合酶離開(kāi)啟動(dòng)子,釋放出。因子,核心酶空出啟動(dòng)子位點(diǎn)以進(jìn)行下一次轉(zhuǎn)錄起始。22、什么叫DNA重組其機(jī)制主

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