人體解剖生理學(xué)實(shí)驗(yàn)

試驗(yàn)二：神經(jīng)--肌肉標(biāo)本的制備與骨骼肌收縮[試驗(yàn)內(nèi)容]坐骨神經(jīng)—排腸肌標(biāo)本的制備刺激強(qiáng)度與骨骼肌收縮反響的關(guān)系骨骼肌單收縮的分析骨骼肌收縮的總和與強(qiáng)直收縮[目的要求]學(xué)習(xí)蛙類(lèi)動(dòng)物單毀髓與雙毀髓的方法。學(xué)習(xí)并把握蛙類(lèi)坐骨神經(jīng)－排腸肌標(biāo)本的制備方法。學(xué)習(xí)肌肉試驗(yàn)的電刺激方法及肌肉收縮的記錄方法。觀看刺激強(qiáng)度與肌肉收縮反響的關(guān)系。3個(gè)時(shí)期。式的轉(zhuǎn)變。[根本原理]蛙類(lèi)的一些根本生命活動(dòng)和生理功能與恒溫動(dòng)物相像，假設(shè)將蛙的神經(jīng)-肌肉說(shuō)明神經(jīng)和肌肉產(chǎn)生了一次興奮。在生理學(xué)試驗(yàn)中常利用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本爭(zhēng)辯神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性；刺激與反響的規(guī)律和肌肉收縮的特征等，制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本是生理學(xué)試驗(yàn)的一項(xiàng)根本操作技術(shù)。度為最適刺激強(qiáng)度。3個(gè)時(shí)期：埋伏期、收縮期和舒張期。直收縮。[動(dòng)物與器材]蛙或蟾蜍、常用手術(shù)器械(手術(shù)剪、手術(shù)鑷、手術(shù)刀、金冠剪、眼科剪、眼科鑷、毀髓針和玻璃分針)、蠟盤(pán)、蛙板(木質(zhì)或硬泡沫塑料)、玻璃板、同定針、鋅銅弓、培育皿或不銹鋼盤(pán)、污物缸、滴管、紗布、粒棉線、任氏液。計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)、張力傳感器(100g)[試驗(yàn)方法與步驟]一、神經(jīng)－肌肉標(biāo)本的制備破壞腦、脊髓取蟾蜍一只，用自來(lái)水沖洗干凈〔勿用手搓〕。左手握右手持探針由頭顱后緣的枕骨大孔處垂直刺入椎管〔5.1-1〕。然后將探針改2～3有碰及顱底骨的感覺(jué)。呼吸運(yùn)動(dòng)消逝,四肢完全松軟，失去一切反射活動(dòng)。此時(shí)可將探針?lè)聪蚰韯?dòng)，退出椎管。如蟾蜍仍有反射活動(dòng)，表示腦和脊髓破壞不徹底，應(yīng)重破壞。剪除軀干上部、皮膚及內(nèi)臟用左手捏住蟾蜍的脊柱，右手持粗剪刀在柱兩側(cè)將腹壁及內(nèi)臟剪去(留意避開(kāi)坐骨神經(jīng)),并剪去肛門(mén)四周的皮膚，留下脊柱和后肢。剝皮一只手捏住脊柱的斷端〔留意不要捏住脊柱兩側(cè)的神經(jīng)〕，另一只手捏住其皮膚的邊緣,向下剝?nèi)ト亢笾钠つw〔圖5.1-2〕。將標(biāo)本放在干凈的任氏液中。將手及使用過(guò)的探針、剪刀全部沖洗干凈。分別兩腿用鑷子取出標(biāo)本,左手捏住脊柱斷端,使標(biāo)本反面朝上，右手〔也可不進(jìn)展此步〕。然后將脊柱腹側(cè)向上，左手的兩剪刀沿正中線將脊柱盆骨分為兩半(留意，勿傷坐骨神經(jīng))。將一半后肢標(biāo)本置于盛有任氏液中備用,另一半放在蛙板上進(jìn)展以下操作。7、8、9〔肛門(mén)處〕繞過(guò)坐骨聯(lián)到達(dá)膝關(guān)節(jié)腘窩處有分支進(jìn)入腓腸肌〔5.1-3〕。游離坐骨神經(jīng)和腓腸肌用蛙釘或左手的兩個(gè)手指將標(biāo)本繃直、固定。先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨神經(jīng),然后在標(biāo)本的背側(cè)于股二頭肌與半在其跟腱處穿線、結(jié)扎。剪去其它不用的組織操作從脊柱向小腿方向進(jìn)展。①剪去多余的脊柱和肌肉 將后肢標(biāo)本腹面對(duì)上，將坐骨神經(jīng)連同2～3節(jié)脊椎用粗剪刀從脊柱上剪下來(lái)再將標(biāo)本反面對(duì)上用鑷子輕輕提起脊椎上而下剪去支配腓腸肌以外的神經(jīng)分支，直至腘窩〔圖5.1-4(A)〕，并搭放在1/3〔2/3〕，制成坐骨神經(jīng)-小腿的標(biāo)本。肌的結(jié)扎線剪斷跟腱。用粗剪剪去膝關(guān)節(jié)以下部位，便制成了坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本〔5.1-4(B)〕。檢驗(yàn)標(biāo)本用沾有任氏液的鋅銅弓觸及一下〔或電刺激刺激〕坐骨神經(jīng)用熱玻棒、食鹽〔或1%HSO濾紙〕刺激坐骨神經(jīng)中樞端〔或肌肉〕，觀看肌肉2 4程中肌肉收縮有何變化?二、刺激強(qiáng)度與骨骼肌收縮反響的關(guān)系試驗(yàn)儀器用品的預(yù)備(100g)見(jiàn)圖。調(diào)整好扎線的張力，不行過(guò)松或過(guò)緊，以使肌肉自然拉平為宜(保證肌肉一旦收縮，即可牽動(dòng)張力傳感器的應(yīng)變梁)。計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)的預(yù)備即可進(jìn)展試驗(yàn)。試驗(yàn)觀看啟動(dòng)刺激圖標(biāo)，觀看肌肉收縮反響。假設(shè)肌肉無(wú)收縮反響，則適當(dāng)增度。同法漸漸增加刺激強(qiáng)度，觀看刺激強(qiáng)度與肌肉收縮反響的關(guān)系。3－4次同等高度的收縮曲線和刺激強(qiáng)度。將試驗(yàn)結(jié)果填入表。表 刺激強(qiáng)度與收縮反響的關(guān)系試驗(yàn)次數(shù)試驗(yàn)次數(shù)刺激強(qiáng)度〔mV〕收縮幅度〔mm〕三、骨骼肌單收縮的分析試驗(yàn)儀器用品的預(yù)備〔見(jiàn)上〕試驗(yàn)觀看刺激腓腸肌選用單刺激方式，調(diào)整刺激強(qiáng)度、使肌肉收縮的幅度適中(30mm左右)。將試驗(yàn)3個(gè)時(shí)程：埋伏朋、收縮期與舒張期。〔2〕刺激坐骨伸經(jīng)將神經(jīng)搭在肌槽的刺激電極上，刺激輸出與肌槽上的刺激電極連接(圖2－。在刺激參數(shù)部不變的狀況下，比較刺激神經(jīng)與刺激腓腸肌的單收縮曲線。四、骨骼肌收縮的總和與強(qiáng)直收縮試驗(yàn)儀器用品的預(yù)備〔見(jiàn)上〕試驗(yàn)觀看收縮的總和變化。強(qiáng)直收縮3－5mm調(diào)整1.5次/s(5)、6次/s(10)、10次(2—9)有間歇，使肌肉休息片刻。[留意事項(xiàng)]用金屬器械觸碰神經(jīng)干。標(biāo)本的興奮性。制備標(biāo)本時(shí)，神經(jīng)纖維應(yīng)盡可能長(zhǎng)一些，將附著于神經(jīng)干上的結(jié)締組織使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定,再開(kāi)頭試驗(yàn)效果會(huì)較好。各儀器應(yīng)妥當(dāng)接地，儀器之間、標(biāo)本與電極之間應(yīng)接觸良好。經(jīng)常滴加任氏液，保持標(biāo)本潮濕[思考題]?為什么??如何保持標(biāo)本的機(jī)能正常？是什么？及生理過(guò)程？刺激骨骼肌與刺激神經(jīng)的單收縮曲線有何不同？完全強(qiáng)直收縮的條件與機(jī)制。試驗(yàn)三：影響神經(jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)的因素觀看試驗(yàn)?zāi)康模簜浞椒?。〔包括雙相和單相動(dòng)作電位〕。學(xué)習(xí)和把握神經(jīng)干動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度測(cè)定的原理和方法。何種影響？試驗(yàn)原理：蛙類(lèi)的一些根本生命活動(dòng)和生理功能與恒溫動(dòng)物相像，假設(shè)將蛙的神經(jīng)-肌肉說(shuō)明神經(jīng)和肌肉產(chǎn)生了一次興奮。在生理學(xué)試驗(yàn)中常利用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本爭(zhēng)辯神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性；刺激與反響的規(guī)律和肌肉收縮的特征等，制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本是生理學(xué)試驗(yàn)的一項(xiàng)根本操作技術(shù)。奮過(guò)程所發(fā)生的這種電位變化稱(chēng)神經(jīng)干動(dòng)作電位。假設(shè)將兩個(gè)引導(dǎo)電極置于正常完整的神經(jīng)干外表，當(dāng)神經(jīng)干的一端興奮之后，興奮波會(huì)先后通過(guò)兩個(gè)引導(dǎo)電極(r1r1’,5.5-1)，可記錄到兩個(gè)相反方一個(gè)方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱(chēng)為單向動(dòng)作電位?；D(zhuǎn)變，這一點(diǎn)不同于單根神經(jīng)纖維的動(dòng)作電位。傳導(dǎo)速度各不一樣。蛙類(lèi)坐骨神經(jīng)干中以Aα類(lèi)纖維為主，傳導(dǎo)速度(V)大約為35～40m/s。測(cè)定神經(jīng)沖動(dòng)在神經(jīng)干上傳導(dǎo)的距離(d)與通過(guò)這段距離所需的時(shí)(t)，V=d/tt1，t2，t2～t1動(dòng)作電位起點(diǎn)的間隔時(shí)間)；然后再測(cè)量標(biāo)本屏蔽盒中兩對(duì)引導(dǎo)電極起始電極之d(5.5–15.5-2r1～r2速度(V)＝d/(t2～t1)?m?s-1。動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度與動(dòng)作電位產(chǎn)生的速度親熱相關(guān),都是以離子運(yùn)動(dòng)為根底動(dòng)作電位在神經(jīng)干上傳導(dǎo)的速度產(chǎn)生影響。儀器與試劑及材料：蟾蜍或青蛙、神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒、電子刺激器、示波器或計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集〔或尖頭無(wú)齒鑷〕、金屬探針〔解剖針〕、玻璃分針、蛙板〔或玻璃板〕、蛙釘、細(xì)線、培育皿、滴管、雙凹夾、培育皿、倍氯化鉀任氏液、0.5試驗(yàn)方法與步驟：神經(jīng)－肌肉標(biāo)本的制備坐骨神經(jīng)標(biāo)本的制備定后開(kāi)頭試驗(yàn)。儀器及標(biāo)本的連結(jié)用浸有任氏液的棉球擦拭神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒上的電極，標(biāo)本盒內(nèi)放置一遠(yuǎn)中端置于引導(dǎo)電極上。假設(shè)使用刺激器、示波器進(jìn)展試驗(yàn)，則參照?qǐng)D5.5-1連接儀器。Hz，0.1～0.2ms，強(qiáng)度依據(jù)標(biāo)本興2ms/cm。外觸發(fā)輸入接刺激器的觸發(fā)輸出端。觸發(fā)選擇置于外觸發(fā)同步。開(kāi)啟至熒光屏中間。5.5-2CH1、CH2觀測(cè)和測(cè)定雙相動(dòng)作電位緩慢增大刺激強(qiáng)度，在偽跡后消滅的先上(負(fù)相波)后下(正相波)的電作電位波形的變化。讀出波寬為某一數(shù)值時(shí)的閾刺激。增大刺激強(qiáng)度的過(guò)程中，偽跡和動(dòng)作電位均隨之加大，但當(dāng)強(qiáng)度加大加大。這是區(qū)分刺激偽跡與動(dòng)作電位的牢靠方法之一。5.5-3)電位上下相的振幅和整個(gè)動(dòng)作電位持續(xù)時(shí)間數(shù)值。將神經(jīng)干標(biāo)本放置的方向倒換后，雙相動(dòng)作電位的波形有無(wú)變化？5．觀看單相動(dòng)作電位用鑷子將兩個(gè)引導(dǎo)電極r1,r13mol/L數(shù)值。6．動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度的測(cè)定換一根坐骨神經(jīng)，按步驟3〔1〕搭放在神經(jīng)屏蔽盒的電極上。進(jìn)入“神經(jīng)干〔則可在一個(gè)通道內(nèi)顯示兩個(gè)通道的圖形個(gè)通道中〔或示波器的上、下線〕觀看到先后形成的兩個(gè)雙向動(dòng)作電位波形。t1，下線為t2(t2～t1d(即測(cè)定r1～r25min導(dǎo)速度。5min的傳導(dǎo)速度。試驗(yàn)結(jié)果：V＝d/(t2～t1)(m/s)。留意事項(xiàng)：用金屬器械觸碰神經(jīng)干。標(biāo)本的興奮性。制備標(biāo)本時(shí)，神經(jīng)纖維應(yīng)盡可能長(zhǎng)一些，將附著于神經(jīng)干上的結(jié)締組織使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定,再開(kāi)頭試驗(yàn)效果會(huì)較好。各儀器應(yīng)妥當(dāng)接地，儀器之間、標(biāo)本與電極之間應(yīng)接觸良好。經(jīng)常滴加任氏液，保持神經(jīng)標(biāo)本潮濕，但要用濾紙片吸去神經(jīng)干上過(guò)多上，以免影響動(dòng)作電位的波形。測(cè)定動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度時(shí)，兩對(duì)引導(dǎo)電極間的距離應(yīng)盡可能大。思考題：神經(jīng)被夾傷或經(jīng)KCl溶液處理后，動(dòng)作電位的其次相為何消逝?特性有沖突嗎？為什么?引導(dǎo)電極調(diào)換位置后，動(dòng)作電位波形有無(wú)變化?為什么?t1算神經(jīng)動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度?用一對(duì)引導(dǎo)電極能否測(cè)定神經(jīng)動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度?的？4℃附：刺激偽跡漸漸增大刺激強(qiáng)度時(shí)，在屏幕的左側(cè)基線上第一個(gè)波即為偽它的產(chǎn)生氣制有二，一是通過(guò)刺激電極與記錄電極之間的電容偶合進(jìn)入放大器，激器、示波器功能狀態(tài)的標(biāo)志。但偽跡太大，會(huì)使動(dòng)作電位發(fā)生畸變。細(xì)胞膜的電纜學(xué)說(shuō)細(xì)胞外液和細(xì)胞內(nèi)液均為含電解質(zhì)的液體，可以看作為兩個(gè)導(dǎo)體，有肯定的電阻；細(xì)胞膜是含脂質(zhì)的膜，相對(duì)地視作絕緣體，與前變小，是膜外電阻、膜電阻及膜內(nèi)電阻引起的后果。雙極記錄法本試驗(yàn)使用的記錄方法為雙極記錄法，所記錄到的電位變反映了膜外電位的轉(zhuǎn)變。刺激的極性法則以直流電作用于神經(jīng)時(shí)，在通電、斷電時(shí)均可產(chǎn)生興時(shí)發(fā)生興奮的緣由；陽(yáng)極下的興奮性降低，稱(chēng)為陽(yáng)極電緊急．?dāng)嚯姾螅帢O下的興奮性降低，稱(chēng)為陰極后壓抑；陽(yáng)極下的興奮性上升，稱(chēng)為陽(yáng)極后加強(qiáng)，是斷電時(shí)發(fā)生興奮的緣由，通常所說(shuō)的刺激發(fā)生在陰極下，刺激時(shí)陰極下的外向電流，指的就是通電的狀況而言的。記錄介質(zhì)通常所說(shuō)雙相動(dòng)作電位的波形，其記錄介質(zhì)是空氣或油。假設(shè)上滴過(guò)多的任氏液。試驗(yàn)四：蛙類(lèi)離體心臟灌流及藥物影響〔綜合設(shè)計(jì)性試驗(yàn)〕試驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)離體蛙心灌流的試驗(yàn)方法，了解離體器官的爭(zhēng)辯方法。了解腎上腺素、乙酰膽堿等激素、神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)心臟活動(dòng)的調(diào)整意義。。試驗(yàn)原理：壞，例如酸堿度及離子濃度的急劇轉(zhuǎn)變等，心臟的活動(dòng)就會(huì)受到影響。釋放乙酰膽堿，使心肌收縮力氣減弱，心率減慢。的影響與其內(nèi)部所含物質(zhì)的成份有關(guān)。動(dòng)物與器材：蛙心夾,計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng),張力傳感器,滴管,培育皿,污物缸,紗布,棉線,橡皮泥,,0.65%NaCl1%CaCl1%KCl3%2.5%NaHCO1:50002方法與步驟：取一只蛙或蟾蜍,雙毀髓后背位于蠟盤(pán)中,認(rèn)真識(shí)別心臟四周的大血管。在左動(dòng)脈下方穿一線,于動(dòng)脈圓錐處結(jié)扎,再?gòu)淖笥覂蓜?dòng)脈下方穿一線,并打一活蛙心套管,然后將盛有少量任氏液的斯氏蛙心套管,由開(kāi)口處插入動(dòng)脈圓錐.當(dāng)套管進(jìn)到大動(dòng)脈圓錐基部時(shí),應(yīng)將套管稍稍后退,提取蛙心夾連線并使蛙心套管尖端向動(dòng)脈圓錐的背部后下方及心尖方向推動(dòng),經(jīng)動(dòng)脈瓣插入心室腔內(nèi)。此時(shí)可見(jiàn)吸去套管中的血液,更換穎任氏液。穩(wěn)定套管后,輕輕提起備用線,將左右動(dòng)脈連同插入的套管用雙結(jié)扎緊(不得漏液),再將結(jié)線固定在套管的小玻璃鉤上,然心室內(nèi)余血,使血管內(nèi)灌流液不再有殘留血液,保持套管內(nèi)液面高度全都,進(jìn)展試驗(yàn)。將插好的離體心臟套管固定在支架上,用蛙心夾住少許的心尖部肌肉.再傳感器上,調(diào)整顯示器的心臟收縮的曲線幅度適中。試驗(yàn)觀看度。試驗(yàn)工程設(shè)計(jì)及結(jié)果觀看溫度對(duì)無(wú)機(jī)離子蛙心活動(dòng)的影響A0.65%NaClB0.65%NaCl1%CaCl2心跳變化。

1～2C1%CaCl1～21%KCl1～22觀看心跳變化。0.012～3觀看心跳變化。遞質(zhì)和激素對(duì)蛙心活動(dòng)的影響A0.01%1～2滴，觀看心跳變化。B3%1～2察心跳變化。待心跳變化明顯時(shí)，馬上參加2.5%NaHCO3逐步恢復(fù)。心血管藥物對(duì)蛙心活動(dòng)的影響

溶液1～2滴，觀看心跳試驗(yàn)結(jié)果。觀看自己提取的植物制劑和人民常飲用的化合物對(duì)例題蛙心的活動(dòng)影響有機(jī)化合物：乙醇、甲醇等?！蝉r組織用量多些泡冷卻后備用。設(shè)計(jì)試驗(yàn)觀看的工程數(shù)量10進(jìn)展試驗(yàn)。留意事項(xiàng)：3復(fù)正常后再進(jìn)展下一項(xiàng)試驗(yàn)。錯(cuò)。響試驗(yàn)結(jié)果。蛙心插管內(nèi)液面應(yīng)保持恒定高度。保持記紋鼓轉(zhuǎn)速均勻全都。思考題：本試驗(yàn)說(shuō)明心肌的那些生理特征？用試驗(yàn)說(shuō)明內(nèi)環(huán)境相對(duì)恒定的意義。試分析任氏液中適量離子,鈣離子,鉀離子對(duì)心肌的影響。為何強(qiáng)調(diào)試驗(yàn)保持灌流液面的恒定?灌流量對(duì)心臟活動(dòng)的有什么影響？試想,活的機(jī)體在心交感神經(jīng)興奮時(shí)或迷走神經(jīng)興奮時(shí)對(duì)心臟有何影響？附：離子和藥物對(duì)離體蛙心活動(dòng)的影響的解釋K＋對(duì)心臟活動(dòng)的影響：總體看來(lái)心肌對(duì)細(xì)胞外K＋濃度變化比較敏感；但是不同部位心肌的敏感性細(xì)胞外液鉀濃度增高時(shí)，對(duì)興奮性的影響與其濃度增高的程度有關(guān)。當(dāng)K＋濃度輕度或者中度上升時(shí)，細(xì)胞內(nèi)外K＋的濃度梯度減小，K＋外流的力氣減弱,靜〔RP〕確實(shí)定值減小,和閾電位(TP)差值減小,細(xì)胞的興奮性增高；當(dāng)K＋的濃度大幅度的上升，RP〔膜內(nèi)－55mv〕時(shí)，鈉通道的開(kāi)放舒張狀態(tài)。此時(shí)，僅由Ca2＋的內(nèi)流來(lái)構(gòu)成動(dòng)作電位，故上升支小而緩慢，使興奮傳導(dǎo)速度減慢，傳導(dǎo)性降低。程加速，平臺(tái)期縮短，不應(yīng)期也縮短。K＋Ca2＋在細(xì)胞膜上有競(jìng)爭(zhēng)性抑制；因此當(dāng)膜外K＋的濃度上升時(shí)，平臺(tái)期內(nèi)流的Ca2＋削減，心肌細(xì)胞內(nèi)。4Ca2＋對(duì)心臟活動(dòng)的影響：Na＋用。因此，細(xì)胞外Ca2＋濃度發(fā)生變化時(shí)，與Ca2＋Na＋