標準解讀
GB/T 18654.14-2008 是一項中國國家標準,專注于養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗領(lǐng)域,特別是關(guān)于DNA含量測定的方法與規(guī)范。該標準是GB/T 18654系列標準的一部分,專門針對魚類種質(zhì)質(zhì)量控制中的一個重要指標——DNA含量進行規(guī)定,旨在為魚類養(yǎng)殖業(yè)提供科學、統(tǒng)一的檢測手段,保障種質(zhì)資源的質(zhì)量和遺傳多樣性。
標準適用范圍
本標準適用于養(yǎng)殖魚類,包括但不限于常見的食用魚、觀賞魚等,其目的是通過標準化流程測定魚類組織樣本中的DNA含量,從而為種質(zhì)評價、遺傳改良、疾病診斷及品種鑒定等工作提供準確的數(shù)據(jù)支持。
主要內(nèi)容概述
-
定義與術(shù)語:標準首先明確了有關(guān)DNA含量測定的基本概念和專業(yè)術(shù)語,確保所有使用者對檢驗內(nèi)容有統(tǒng)一的理解基礎。
-
采樣要求:詳細規(guī)定了樣品采集的部位、方法、保存條件以及運輸要求,以減少因采樣不當導致的檢測誤差。
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樣本前處理:說明了樣本預處理的步驟,包括組織的勻漿、細胞裂解、DNA提取等關(guān)鍵環(huán)節(jié)的操作細節(jié),以保證DNA的完整性和純度。
-
DNA含量測定方法:介紹了適用于魚類DNA含量測定的具體技術(shù),如熒光定量PCR、紫外分光光度法或流式細胞術(shù)等,并對每種方法的原理、操作步驟、所需儀器設備及試劑進行了詳細描述。
-
質(zhì)量控制:強調(diào)了檢測過程中的質(zhì)量控制措施,包括空白對照、標準品校準、重復性與再現(xiàn)性實驗等,確保檢測結(jié)果的可靠性和準確性。
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數(shù)據(jù)處理與報告:規(guī)定了如何計算DNA含量、處理實驗數(shù)據(jù)以及編制檢測報告的格式和內(nèi)容要求,便于信息的交流與比對。
-
安全與環(huán)保:提到了在DNA提取及測定過程中應遵循的安全操作規(guī)程和環(huán)境保護措施,以保護操作人員健康并減少環(huán)境污染。
實施意義
該標準的實施有助于提升我國魚類養(yǎng)殖業(yè)的科學管理水平,通過標準化的DNA含量檢測,可有效篩選出優(yōu)良種質(zhì)資源,促進魚類品種的優(yōu)化與創(chuàng)新,同時為魚類疾病的早期預警和防控提供技術(shù)支持,進而推動整個行業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2008-06-27 頒布
- 2008-10-01 實施
文檔簡介
犐犆犛65.150
犅50
中華人民共和國國家標準
犌犅/犜18654.14—2008
養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗
第14部分:犇犖犃含量的測定
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20080627發(fā)布20081001實施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局
發(fā)布
中國國家標準化管理委員會
書
犌犅/犜18654.14—2008
前言
GB/T18654《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》分為下列部分:
———第1部分:檢驗規(guī)則;
———第2部分:抽樣方法;
———第3部分:性狀測定;
———第4部分:年齡與生長的測定;
———第5部分:食性分析;
———第6部分:繁殖性能的測定;
———第7部分:生態(tài)特性分析;
———第8部分:耗氧率與臨界窒息點的測定;
———第9部分:含肉率測定;
———第10部分:肌肉營養(yǎng)成分的測定;
———第11部分:肌肉中主要氨基酸含量的測定;
———第12部分:染色體組型分析;
———第13部分:同工酶電泳分析;
———第14部分:DNA含量的測定;
———第15部分:RAPD分析;
……
本部分為GB/T18654的第14部分。
本部分由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。
本部分由全國水產(chǎn)標準化技術(shù)委員會淡水養(yǎng)殖分技術(shù)委員會歸口。
本部分起草單位:上海水產(chǎn)大學、中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所。
本部分主要起草人:李思發(fā)、趙金良、徐忠法、蔡完其、鄒曙明。
Ⅰ
書
犌犅/犜18654.14—2008
養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗
第14部分:犇犖犃含量的測定
1范圍
GB/T18654的本部分規(guī)定了魚類脫氧核糖核酸(DNA)含量測定的試劑與材料、儀器和設備、
抽樣、分析步驟和結(jié)果判定。
本部分適用于常見淡水、海水養(yǎng)殖魚類。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的條款通過GB/T18654的本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文
件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本部分,然而,鼓勵根據(jù)本部分達成
協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本
部分。
GB/T18654.1—2002養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗第1部分:檢驗規(guī)則
GB/T18654.2養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗第2部分:抽樣方法
3試劑與材料
除非另有說明,在分析中僅使用確認為分析純的試劑和蒸餾水或去離子水或相當純度的水。
3.1磷酸氫二鈉(Na2HPO4)。
3.2二個結(jié)晶水的磷酸二氫鈉(NaH2PO4·2H2O)。
3.3生理鹽水:0.75%氯化鈉(NaCl)溶液。
3.4固定液:3份甲醇加入1份冰乙酸,現(xiàn)配現(xiàn)用。
3.5肝素溶液:濃度為500IU/mL。
3.6胰酶:濃度為5mg/mL。
3.7核糖核酸酶(RNase):1mg/mL。
3.8碘化丙啶(PI):濃度為50μg/mL。
3.90.1mol/L磷酸緩沖液(PBS):Na2HPO412.35g、NaH2PO4·2H2O20.3g,蒸餾水定容至1L。
4儀器和設備
4.1離心機:轉(zhuǎn)速為5000r/
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