實(shí)驗(yàn)一小鼠實(shí)驗(yàn)技術(shù)

實(shí)驗(yàn)一小鼠實(shí)驗(yàn)技術(shù)第一頁，共二十六頁，2022年，8月28日四次實(shí)驗(yàn)課安排小鼠的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)和各種檢驗(yàn)標(biāo)本的采集技術(shù)（第3周，3月19日）大鼠的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)和各種檢驗(yàn)標(biāo)本的采集技術(shù)（第4周，3月26日）大鼠阻塞性黃疸及急性胰腺炎模型的制作（第5周，4月2日）兔的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)和靜脈插管技術(shù)（第6周，4月9日）第二頁，共二十六頁，2022年，8月28日考核方式出勤；20%實(shí)驗(yàn)操作情況；30%實(shí)驗(yàn)報(bào)告：實(shí)驗(yàn)?zāi)康模粚?shí)驗(yàn)器材；實(shí)驗(yàn)內(nèi)容；總結(jié)；50%第三頁，共二十六頁，2022年，8月28日注意事項(xiàng)注意安全：抓??；注射器等。上課紀(jì)律：按時(shí)上課，穿實(shí)驗(yàn)服，保持安靜。保持衛(wèi)生：每次課安排4個(gè)同學(xué)打掃衛(wèi)生，動(dòng)物尸體放入尸體房。分組情況：1305教室:18人；1306教室:18人第四頁，共二十六頁，2022年，8月28日一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

掌握小鼠的抓取和固定掌握小鼠的編號與標(biāo)記方法掌握小鼠的常用給藥方法掌握小鼠的常用麻醉方法掌握小鼠的安死術(shù)掌握小鼠的采血方法了解小鼠的采尿、糞的方法了解小鼠各種臟器標(biāo)本的采集方法

第五頁，共二十六頁，2022年，8月28日二.操作內(nèi)容分組：兩人一組，每組小鼠2只，♀♂各1只。品系：ICR第六頁，共二十六頁，2022年，8月28日1.小鼠的抓取和固定單手固定：肌肉、腹腔、灌胃第七頁，共二十六頁，2022年，8月28日雙手固定：肥胖或妊娠小鼠；雙人配合固定器：尾靜脈注射與采血；固定板：外科手術(shù)或解剖；第八頁，共二十六頁，2022年，8月28日2.小鼠的性別鑒定及稱重將小鼠抓取后，放在燒杯中，稱量體重，記錄體重。辨別雌雄根據(jù)排泄孔和生殖孔的距離辨別。距離近的為雌性

距離遠(yuǎn)的為雄性第九頁，共二十六頁，2022年，8月28日3.小鼠的編號與標(biāo)記方法

染色法：①一般用于短期實(shí)驗(yàn)；②常用的染液有3%-5%的苦味酸溶液（黃色）、0.5%的中性品紅溶液（紅色）；③逆毛流方向涂上有色斑點(diǎn)；④編號的原則是“從上到下，從左到右”

第十頁，共二十六頁，2022年，8月28日一種顏色代表十位，另一種顏色代表個(gè)位，這樣可標(biāo)記到99號第十一頁，共二十六頁，2022年，8月28日穿耳孔法：用動(dòng)物專用耳孔器在動(dòng)物耳朵的不同部位打一小孔或打成缺口來表示一定號碼的方法。左耳代表十位，右耳代表個(gè)位。這種方法可標(biāo)記100只左右的動(dòng)物。第十二頁，共二十六頁，2022年，8月28日4.小鼠的常用給藥方法尾靜脈注射小鼠：0.05ml/10g體重～0.1ml/10g體重①放入固定器，露出尾部，準(zhǔn)備好注射液；②酒精擦拭尾部；③左手食指托住尾部下方，拇指配合，右手持注射器④針尖輕輕抬起與血管平行刺入，輕推藥液⑤血管由紅變白；用干棉球按住注射點(diǎn)，將針頭撥出，用力按壓止血。第十三頁，共二十六頁，2022年，8月28日皮下注射：①俯臥固定；頸背部皮膚；左手拇指和食指捏住皮膚提起，右手持針沿縱軸方向刺入皮下；②進(jìn)針時(shí)感覺有阻力，繼續(xù)刺入，突然阻力消失，活動(dòng)針頭皮內(nèi)注射：①與皮膚平行刺入捏住的皮膚；②注射時(shí)感覺阻力很大，并且手指有膨脹，注射部位局部形成皮丘，注射畢，為避免藥液流出，停留片刻，再將針頭撥出第十四頁，共二十六頁，2022年，8月28日腹腔注射：①仰面保定；②腹正中線左右兩側(cè)，與腹股溝平行的部位，用酒精棉球消毒③右手持針，30-45°角刺入不要太深，把針尖向上挑起皮膚和肌肉，證明未刺入內(nèi)臟，回抽無血，即可注入藥液。第十五頁，共二十六頁，2022年，8月28日灌胃法：①先將動(dòng)物保定，身體成一條直線；②灌胃針頭的前端放進(jìn)動(dòng)物口腔，順著上腭插入咽部③先少量注入藥液，如果小鼠無強(qiáng)烈掙扎，證明未插入氣管肌肉注射：注射針穿過皮膚至肌肉，回抽無血，即可注射藥液第十六頁，共二十六頁，2022年，8月28日5.小鼠的常用麻醉方法

抓取、稱重將小鼠抓取后，放在燒杯中，稱量體重，記錄體重。計(jì)算麻醉藥用量記錄給藥、進(jìn)入興奮期、麻醉期的時(shí)間。呼吸麻醉（了解）第十七頁，共二十六頁，2022年，8月28日

小鼠常用麻醉藥的劑量及注射途徑

動(dòng)物給藥途徑鹽酸氯胺酮戊巴比妥硫噴妥鈉水合氯醛小鼠i.vi.Pi.m22～4435502550400單位：mg/kgi.v－靜脈注射；i.p－腹腔注射；i.m－肌肉注射第十八頁，共二十六頁，2022年，8月28日觀察麻醉期

①全身麻醉的第一期（隨意興奮期）：出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)和運(yùn)動(dòng)失調(diào)；②全身麻醉的第二期（不隨意興奮期）：是由意識(shí)完全喪失至深而規(guī)則的自動(dòng)呼吸開始時(shí)止。③全身麻醉的第三期（外科麻醉期）：角膜反射由遲鈍漸趨消失，翻正反射消失，疼痛反射消失，④全身麻醉的第四期

（延髓麻痹期）：進(jìn)入此期，麻醉已嚴(yán)重過量，故臨床上嚴(yán)禁出現(xiàn)此期。第十九頁，共二十六頁，2022年，8月28日尾尖采血法；眼眶靜脈叢采血法；心臟采血法；6.小鼠的常用的采血方法第二十頁，共二十六頁，2022年，8月28日7.小鼠的采尿、糞的方法代謝籠少量采集：在抓取固定時(shí)受到刺激排出少量尿液和糞便長期大量采集：使用代謝籠第二十一頁，共二十六頁，2022年，8月28日

8.安死術(shù)

1.頸椎脫臼法

用左手按住動(dòng)物的頭部于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，右手抓住尾根部，快速、不間斷地向后、略向上使勁拉，以致脊椎脫臼，脊髓與腦干斷離而死亡。

2.過量麻醉法

給動(dòng)物注射正常麻醉3～4倍的藥量。

3.空氣栓塞法

向動(dòng)物的靜脈注射2～3mL左右的空氣。第二十二頁，共二十六頁，2022年，8月28日9.小鼠各種臟器標(biāo)本的采集方法腹腔臟器1：肝，胃，十二指腸，空腸，回腸，結(jié)腸第二十三頁，共二十六頁，2022年，8月