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獸醫(yī)微生物學(xué)重要知識(shí)點(diǎn)匯總緒言微生物學(xué)的定義:研究微生物形態(tài)、生理、遺傳變異、生態(tài)分布以及其與人類關(guān)系的科學(xué),廣義的微生物學(xué)還涉及免疫學(xué),甚至還涉及寄生蟲學(xué),特別是原蟲學(xué)。微生物的特點(diǎn):①個(gè)體微小,需借助顯微鏡觀測(cè),其群體可見。②結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)樸,繁殖快,分布廣。③比較面積大(有助于物質(zhì)互換,代謝繁殖)。④易變異,適應(yīng)性強(qiáng)。微生物的種類:三型八大類(三菌四體一病毒)真菌細(xì)胞型:細(xì)胞核有核膜、核仁,細(xì)胞器完整。Eg:真菌。原核細(xì)胞型:僅有原始核,無(wú)核仁、核膜,細(xì)胞器很不完善。DNA和RNA同時(shí)存在(擬核/核體)Eg:細(xì)菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體。非細(xì)胞型微生物:最小的一類微生物,無(wú)典型細(xì)胞結(jié)構(gòu)。只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。核酸類型為DNA或RNA.Eg:病毒。微生物學(xué)的發(fā)展過(guò)程第一階段——形態(tài)學(xué)時(shí)期:1683年荷蘭呂文虎克初次觀測(cè)到微生物。1861年巴斯德否認(rèn)“自然發(fā)生說(shuō)”;證明發(fā)酵由微生物引起的。第二階段——生理學(xué)及免疫學(xué)的奠基時(shí)期:Ⅰ巴斯德(微生物學(xué)、生理學(xué)與免疫學(xué)的重要奠基人)的歷史性奉獻(xiàn):①酒是某種微生物的發(fā)酵產(chǎn)物②解決了酒的敗壞問(wèn)題③研究炭疽病、人的狂犬病,擬定這些疾病由相應(yīng)的微生物引起、微生物可以至弱作作防止傳染病用,并且對(duì)至弱的途徑做了示范性的實(shí)驗(yàn)④發(fā)明免疫學(xué)的防止接種⑤發(fā)明巴氏消毒法Ⅱ科赫(建立微生物研究的基本操作技術(shù)和對(duì)病院細(xì)菌的研究,有突出奉獻(xiàn))功績(jī):①發(fā)明培養(yǎng)基并用于純化微生物②發(fā)明染色觀測(cè)、顯微攝影③科赫法則④證實(shí)炭疽病因素--炭疽桿菌發(fā)現(xiàn)結(jié)核病源菌--結(jié)核桿菌【科赫法則:①病原微生物應(yīng)在同一疾病中查見,但在健康動(dòng)物體內(nèi)不存在②該病原菌能被分離培養(yǎng)得純種③該純培養(yǎng)物接種至易感動(dòng)物,能產(chǎn)生同樣的疾病④自人工感染的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)能再次分離培養(yǎng)得到相同的病原】【免疫方法:注射、口服、點(diǎn)眼、滴鼻、氣霧】第三階段——近代及現(xiàn)代微生物理論上取得的成就極其應(yīng)用價(jià)值:①進(jìn)入真正意義上的基因工程時(shí)代②進(jìn)行化學(xué)治療腰肌和抗生素的研究③組織移植、免疫耐受的研究,抗原抗體反映在診斷及防治疾病上的應(yīng)用技術(shù)上的重大創(chuàng)新及其應(yīng)用價(jià)值①電子顯微鏡的應(yīng)用②標(biāo)記抗原或標(biāo)記抗體的應(yīng)用③細(xì)胞培養(yǎng)、空斑技術(shù)、蛋白質(zhì)及核酸的提純④核磁共振儀的使用⑤分子克隆、PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒从?、DNA測(cè)試、基因組學(xué)及電子計(jì)算機(jī)等技術(shù)的應(yīng)用微生物學(xué)領(lǐng)域的三大進(jìn)展:微生物遺傳學(xué)、免疫學(xué)及病毒學(xué)第1篇總論細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)【內(nèi)容提綱】細(xì)菌個(gè)體微小,經(jīng)染色后在光學(xué)顯微鏡下才干觀測(cè)。最常用的是革蘭染色法,可講細(xì)菌分為革蘭陰性和革蘭陽(yáng)性兩大類。就某種細(xì)菌而言,菌體有一定的大小、形態(tài)及排列方式。細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)涉及細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)及擬核等。革蘭陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁有較厚的肽聚糖及特有的磷壁酸。革蘭陰性菌有外膜,外膜由外膜蛋白、脂多糖等構(gòu)成,外膜下有一薄層肽聚糖。細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)有莢膜、鞭毛、菌毛、芽孢等,各有一定的結(jié)構(gòu)及特殊的生理功能,與細(xì)菌的致病性及免疫原性有關(guān)。細(xì)菌是原核生物界中的一大類單細(xì)胞微生物,它們個(gè)體微小,形態(tài)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)樸,廣義的細(xì)菌除一般細(xì)菌外,還涉及立克次體、衣原體、支原體、螺旋體及放線菌。復(fù)習(xí)思考題1、細(xì)菌的大小、基本形態(tài)答:大?。杭?xì)菌個(gè)體微小,需染色后在光學(xué)顯微鏡下才干觀測(cè)到。細(xì)菌大小的度量單位通常是微米。形態(tài):形態(tài)比較簡(jiǎn)樸,有球狀、桿狀和螺旋狀三種基本形態(tài)及某些其他形態(tài)。細(xì)菌的繁殖方式都是簡(jiǎn)樸的裂殖,不同細(xì)菌裂殖后其菌體排列方式不同。有特性性的、相對(duì)穩(wěn)定的形態(tài)和排列方式的細(xì)菌有球菌、雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌(四聯(lián)、八疊)、桿菌、螺形菌適宜條件下培養(yǎng)的細(xì)菌在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期形態(tài)典型。不亮環(huán)境或老齡期,會(huì)出現(xiàn)與正常形狀不同樣的個(gè)體,稱為衰老型或退化型。但有些細(xì)菌即使在適宜的環(huán)境中生長(zhǎng),其形狀也很不一致,有多形性。菌落的概念,菌落的實(shí)際意義菌落:某個(gè)細(xì)菌在適宜的條件下、在適合生長(zhǎng)的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部,培養(yǎng)后分裂繁殖出巨大的菌體,形成一個(gè)肉眼可見的、有一定形態(tài)的獨(dú)立群體?!締蝹€(gè)細(xì)菌及其后代組成的“大家族”】菌苔:生長(zhǎng)的菌落連成一片。【多個(gè)“大家族”】菌落的實(shí)際意義:菌落肉眼可見,各種細(xì)菌的菌落在大小、色澤、質(zhì)地、表面形狀、邊沿結(jié)構(gòu)等方面均有個(gè)各自的特性。觀測(cè)細(xì)菌的菌落特性,可推測(cè)該細(xì)菌的種類,工作中通常通過(guò)固體培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)的菌落,進(jìn)行細(xì)菌的分離、純化、傳代、計(jì)數(shù)和鑒定等。細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)和特殊結(jié)構(gòu)(繪制細(xì)菌結(jié)構(gòu)模式圖)基本結(jié)構(gòu):細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、擬核等基本結(jié)構(gòu)。特殊結(jié)構(gòu):莢膜、S層、鞭毛、菌毛、芽孢等。比較革蘭氏陽(yáng)性和陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的異同陽(yáng)性陰性厚度厚15~80nm薄10~15nm肽聚糖多40%~95%少10%~20%脂類少1%~4%多11%~22%磷壁酸√×外膜×√脂蛋白×√脂多糖×√脂多糖和外膜蛋白的組成及功能組成功能脂多糖(LPS)(革蘭陰性菌所特有,位于外膜的最表面)由類脂A、核心多糖和側(cè)鏈多糖三部分組成①可以吸附鈣離子、鎂離子等陽(yáng)離子②為噬菌體提供特異的吸附受體外膜蛋白(OMP)(外膜中向前的多種蛋白質(zhì)的統(tǒng)稱,按含量和功能分為重要次要兩類)重要OMP:微孔蛋白、脂蛋白微孔蛋白:分子篩作用,與細(xì)胞粘附和特定物質(zhì)攝取有關(guān)、受體作用脂蛋白:使外膜層與肽聚糖牢固的連接,可作為噬菌體的受體,或參與鐵及其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)細(xì)菌的遺傳物質(zhì)擬核和質(zhì)粒。遺傳物質(zhì)DNA無(wú)核膜包圍,分布于菌體中央形成擬核(核體)。擬核含細(xì)菌的遺傳基因,其功能是控制細(xì)菌的遺傳和變異。質(zhì)粒在擬核DNA之外,游離的小型雙股DNA分子,含細(xì)菌生命非必須基因,其功能是控制產(chǎn)生菌毛、毒素、耐藥性和細(xì)菌素等遺傳性狀。質(zhì)粒能獨(dú)立復(fù)制傳給子代。細(xì)菌莢膜的概念及重要功能概念:某些細(xì)菌在其生活過(guò)程中,在細(xì)胞壁的外周產(chǎn)生一層包圍整個(gè)菌體、邊界清楚的粘液樣物質(zhì)。重要功能:①抗吞噬②抗有害物質(zhì)損傷③營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的儲(chǔ)存場(chǎng)合(重要含多糖類)與廢物排出之地。細(xì)菌芽孢的特點(diǎn)及意義(某些革蘭陽(yáng)性菌在一定的環(huán)境條件下,在菌體內(nèi)形成一個(gè)圓形或卵圓形的休眠體,稱為芽孢或內(nèi)芽孢。未形成芽孢的菌體稱為繁殖體或營(yíng)養(yǎng)體,老齡芽孢將脫離原菌體獨(dú)立存在,稱為游離芽孢)特點(diǎn):①對(duì)高溫、干燥、輻射、化學(xué)藥物等有強(qiáng)大的抵抗力。②含水量低,壁厚而致密,通透性差不易著色,折光性強(qiáng)。③芽孢內(nèi)新陳代謝幾乎停止,處在休眠狀態(tài),但能保持潛在萌發(fā)力。④不是繁殖器官,一個(gè)芽孢萌發(fā)只產(chǎn)生一個(gè)營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的細(xì)胞。意義:①芽孢抵抗力強(qiáng),可在自然界中存在數(shù)年,是重要的傳染源,但芽孢并不直接引起疾病,只有發(fā)芽成為繁殖體后,才干迅速大量繁殖而致病。②芽孢抵抗力強(qiáng),故應(yīng)以殺滅芽孢座位可靠的滅菌標(biāo)準(zhǔn)。③可根據(jù)其形態(tài)位置鑒別細(xì)菌細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖與生態(tài)【內(nèi)容提綱】細(xì)菌菌體的形成是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,涉及物質(zhì)攝取、生物合成、聚合作用(DNA復(fù)制,轉(zhuǎn)錄、翻譯)及組裝四個(gè)環(huán)節(jié)。菌體以二等分分裂法無(wú)性繁殖。細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖和培養(yǎng)時(shí)間呈特定規(guī)律,用生長(zhǎng)曲線表達(dá),并可分為遲緩期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期及衰亡期四個(gè)階段。大多數(shù)細(xì)菌可在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。根據(jù)細(xì)菌對(duì)氧氣和溫度的需求差異,可將細(xì)菌分為需氧菌、厭氧菌、兼性菌以及嗜溫菌、嗜冷菌、嗜熱菌等。生化實(shí)驗(yàn)系根據(jù)細(xì)菌傳代特點(diǎn)設(shè)計(jì),用于細(xì)菌鑒定。自然界中的細(xì)菌多以群落存在,生物被膜是一種重要的表現(xiàn)形式,其抵抗力較游離細(xì)菌強(qiáng),其生長(zhǎng)受控于密度感應(yīng)系統(tǒng)。后者通過(guò)信號(hào)分子作用,在基因水平完畢對(duì)細(xì)菌群落生長(zhǎng)的調(diào)控。微生物種群之間在自然界存在著復(fù)雜的互相作用,正常菌群對(duì)維護(hù)動(dòng)物健康至關(guān)重要。復(fù)習(xí)思考題形成細(xì)菌個(gè)體的代謝過(guò)程有何特點(diǎn)?①細(xì)菌生長(zhǎng)和繁殖速度極快,超過(guò)動(dòng)物細(xì)胞10~100倍②細(xì)菌運(yùn)用各種化合物作為能源的能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于動(dòng)物細(xì)胞③細(xì)菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求比動(dòng)物細(xì)胞更為多種多樣,由于他們有多種代謝旁路④細(xì)菌可運(yùn)用超長(zhǎng)流水線式的生產(chǎn)方式生成大分子物質(zhì)⑤細(xì)菌能生產(chǎn)諸如肽聚糖、脂多糖、磷壁酸等特殊物質(zhì)物質(zhì)攝取的方式有哪幾種?各有何特點(diǎn)?單純擴(kuò)散被動(dòng)擴(kuò)散,細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)最簡(jiǎn)樸的一種互換方式。細(xì)胞膜兩側(cè)的物質(zhì)靠濃度差(濃度梯度)進(jìn)行分子擴(kuò)散,不需要能量。無(wú)特異性和選擇性,速度較慢,細(xì)胞內(nèi)為溶質(zhì)濃度一旦達(dá)成平衡,擴(kuò)散便停止。促進(jìn)擴(kuò)散某些物質(zhì)與某些位于細(xì)胞膜的特異性載體蛋白相結(jié)合,然后將其轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞內(nèi),這一過(guò)程具有特異性和選擇性,不需要能量。積極運(yùn)送細(xì)菌吸取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的一種重要方式,需要特異性載體蛋白,能將特異性溶質(zhì)逆濃度梯度泵入細(xì)胞,因此需要能量?;蛭晦D(zhuǎn)物質(zhì)在運(yùn)送的同時(shí)受到化學(xué)修飾,從而能慍緣不斷輸入細(xì)胞,此種方式在缺氧環(huán)境中最常見,其過(guò)程涉及從可溶物向分子的化學(xué)變化,需要特異性載體蛋白的參與,需要能量。細(xì)菌菌體分裂為什么只需較短時(shí)間?細(xì)菌以二等分分裂法進(jìn)行無(wú)性繁殖。大多數(shù)細(xì)菌菌體在適宜條件下分裂需要較短時(shí)間,是由于在上一輪的復(fù)制尚未完畢時(shí),下一輪的細(xì)胞分裂已經(jīng)啟動(dòng)。此外染色體DNA存在多個(gè)復(fù)制叉,可使自帶的染色體DNA同時(shí)開始部分復(fù)制。何謂細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線?如何擬定?有何意義?不同時(shí)期有何特點(diǎn)?細(xì)菌生長(zhǎng)曲線:將細(xì)菌接種在液體培養(yǎng)基并置于適宜的溫度下,定期取樣檢查活菌數(shù),可發(fā)現(xiàn)其生長(zhǎng)過(guò)程具有規(guī)律性。以時(shí)間為橫坐標(biāo)、以活菌數(shù)為縱坐標(biāo),可得出一條生長(zhǎng)曲線。曲線顯示了細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的四個(gè)期。細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線是在體外人工培養(yǎng)條件下觀測(cè)到的,在動(dòng)物體內(nèi)因受諸多因素的制約,未必能出現(xiàn)此種典型的曲線,但對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)規(guī)律的研究及實(shí)踐有重要的參考價(jià)值。以下為各個(gè)時(shí)期及其特點(diǎn):遲緩期細(xì)菌來(lái)到新環(huán)境的一個(gè)適應(yīng)過(guò)程。菌體增大,代謝活躍,合成并積累所需酶系統(tǒng)。RNA含量明顯增長(zhǎng),但DNA含量無(wú)變化。此時(shí)細(xì)菌數(shù)并不增長(zhǎng)。對(duì)數(shù)期細(xì)菌此時(shí)生長(zhǎng)迅速,以恒定的速度進(jìn)行分裂繁殖,活菌數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng),達(dá)成頂峰。生長(zhǎng)曲線接近一條斜的直線。該期的病原菌致病力最強(qiáng),其形態(tài)、染色特性及生理活性較典型,對(duì)抗菌藥物的作用較為敏感。穩(wěn)定期因營(yíng)養(yǎng)的消耗、代謝產(chǎn)物的蓄積等,細(xì)菌繁殖速度下降,死亡數(shù)逐步上升,新繁殖的活菌數(shù)與死亡數(shù)大體平衡。該期細(xì)菌的形態(tài)及生理形狀常有改變。毒素等代謝產(chǎn)物大多在此時(shí)產(chǎn)生。衰亡期細(xì)菌開始大量死亡,死菌數(shù)超過(guò)活菌數(shù)。細(xì)菌菌體變形或自溶,染色不典型,難以進(jìn)行鑒定。何謂培養(yǎng)基?種類有哪些?培養(yǎng)基還是人工配制的基質(zhì),具有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基制成后,通常都要進(jìn)行滅菌解決。種類:按營(yíng)養(yǎng)組成,狀態(tài),功能差異區(qū)分基礎(chǔ)培養(yǎng)基含多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)成分,常用新鮮牛肉浸膏,加入適量的蛋白胨、NaCl、磷酸鹽,調(diào)節(jié)pH至7.2~7.6即成。營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基在基礎(chǔ)培養(yǎng)基內(nèi),添加葡萄糖、血液或血清等,即成營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,最常用的是血瓊脂平板(在營(yíng)養(yǎng)瓊脂中加入5%的新鮮血液配制成)液體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入1%~2%的瓊脂,加熱融化再冷卻凝固。用于細(xì)菌的分離純化、菌落觀測(cè)、生物活性檢測(cè)等,可制成試管斜面或傾倒平面。固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入0.5%的瓊脂??勺龃┐虒?shí)驗(yàn),觀測(cè)細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)力。半固體培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基針對(duì)特定菌種設(shè)計(jì),根據(jù)其特定產(chǎn)物,在培養(yǎng)基中加入特定作用底物或顯色指示劑,憑肉眼辨認(rèn)顏色既能鑒別菌種。Eg三糖鐵培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì),對(duì)不同細(xì)菌分別產(chǎn)生克制或促進(jìn)作用,從而可從混雜多種細(xì)菌的樣本分離出所需細(xì)菌。Eg麥康凱培養(yǎng)基、SS培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基等。厭氧培養(yǎng)基為培養(yǎng)厭氧菌而設(shè)計(jì)。試述重要的細(xì)菌生化反映的原理及用途。P28P29各種細(xì)菌可以分解運(yùn)用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不同,對(duì)相同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分解產(chǎn)物也不同,據(jù)此可以設(shè)計(jì)特定的生化反映,作為鑒定細(xì)菌只用。細(xì)菌的合成代謝產(chǎn)物如毒素、色素等也有一定的鑒別意義,但一般不用生化反映檢測(cè)。常用的生化反映有氧化酶實(shí)驗(yàn)、觸酶實(shí)驗(yàn)、氧化發(fā)酵(O/F)實(shí)驗(yàn)、VP實(shí)驗(yàn)及甲基紅實(shí)驗(yàn)等??刹捎梦⒘糠ê统A糠?。目前一般多用商品化的微量生化試劑檢測(cè)劑盒。VP實(shí)驗(yàn)由兩學(xué)者創(chuàng)建得名。大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌均能發(fā)酵葡萄糖,產(chǎn)酸,產(chǎn)氣,兩者不能區(qū)別。但產(chǎn)氣桿菌能使丙酮酸脫落,生成中性的乙酰甲基甲醇,后者在堿性溶液中被空氣中的分子樣所氧化,生成的乙二酰與培養(yǎng)基中含胍基的化合物發(fā)生反映,生成紅色化合物,是為陽(yáng)性。大腸桿菌不能生成乙酰甲基甲醇,故為陰性。甲基紅實(shí)驗(yàn)在VP實(shí)驗(yàn)中,產(chǎn)氣桿菌分解葡萄糖,產(chǎn)生的兩分子丙酮酸轉(zhuǎn)變?yōu)橐环肿又行缘囊阴<谆状?故最終的酸類較少,培養(yǎng)液pH>5.4。以甲基紅(MR)做指示劑是,溶液呈橘黃色,是為陰性。大腸桿菌分解葡萄糖時(shí),丙酮酸不轉(zhuǎn)變?yōu)橐阴<谆状迹逝囵B(yǎng)基酸性較強(qiáng),pH≤4.5,甲基紅指示劑呈紅色,則為陽(yáng)性。生物被膜有何特點(diǎn)。生物被膜中的細(xì)菌由于被多糖等物質(zhì)包埋而受到保護(hù),對(duì)外環(huán)境的抵抗力及對(duì)抗生素的抗性均較同種游離的單個(gè)菌體強(qiáng),影響抗生素的療效和滅菌效果。電鏡下可觀測(cè)到細(xì)菌的生物被膜呈連片狀的菌體團(tuán)塊。研究表白有的細(xì)菌如嗜水氣單胞菌,治病菌株可形成生物被膜,而非致病菌不形成。生物被膜的形成手細(xì)菌的密度感應(yīng)系統(tǒng)調(diào)控。何謂密度感應(yīng)系統(tǒng)調(diào)控?舉例說(shuō)明其應(yīng)用價(jià)值。P30試述益生菌和益生元的概念及應(yīng)用價(jià)值。某些細(xì)菌或真菌有助于宿主胃腸道微生物區(qū)系的平衡,能克制對(duì)宿主有害的微生物的生長(zhǎng),用這些微生物制成的制劑稱為益生菌或益生素。飼料或食品中的某些寡糖例假如寡糖(FOS)等成分,不被宿主消化吸取,但等選擇性的刺激宿主消化道有益微生物或飼喂的益生菌的生長(zhǎng),對(duì)宿主產(chǎn)生有益作用,此類成分叫益生元或益生素元。益生菌及一生緣亦可聯(lián)合使用。兩者對(duì)動(dòng)物有一定的保健作用。何謂菌群失調(diào)?保持動(dòng)物正常菌群有何重要意義?因患病、外科手術(shù)、環(huán)境改變和濫用抗菌藥物等因素,宿主某個(gè)微生物正常菌群中的細(xì)菌種類和數(shù)量發(fā)生改變,對(duì)機(jī)體導(dǎo)致?lián)p失,出現(xiàn)一定病理效應(yīng)的狀態(tài),稱為菌群失調(diào)。例如長(zhǎng)期連續(xù)或短期大量口服大腸桿菌敏感的抗菌藥物,殺死了腸道有益大腸桿菌,致使對(duì)抗菌藥物不敏感的致病性大腸桿菌或其他腸道致病菌借機(jī)大量增值,引起腸道疾病。正常菌群與其宿主之間形成一個(gè)共生關(guān)系,具體表現(xiàn)在營(yíng)養(yǎng)免疫和生物拮抗三個(gè)方面。P32試述悉生生物學(xué)和悉生動(dòng)物的概念、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分類(涉及定義)以及哺育實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的意義。悉生動(dòng)物學(xué):是用無(wú)菌動(dòng)物技術(shù)研究微生物與其宿主互相關(guān)系的生命科學(xué),它是在科學(xué)研究與臨床醫(yī)學(xué)中應(yīng)用悉生動(dòng)物的科學(xué)。悉生動(dòng)物:一切生命形態(tài)都知道的動(dòng)物。根據(jù)概念可分為五類,其中無(wú)特定病原體動(dòng)物應(yīng)用正日趨廣泛。無(wú)菌動(dòng)物不帶任何微生物的動(dòng)物,即無(wú)外源菌動(dòng)物。事實(shí)上某些內(nèi)源性病毒或正常病毒很難去除,因此無(wú)菌動(dòng)物事實(shí)上是一個(gè)相對(duì)概念。無(wú)菌動(dòng)物中尚有一種無(wú)γ球蛋白動(dòng)物。悉生動(dòng)物俠義的悉生動(dòng)物是指無(wú)菌動(dòng)物,廣義也指有目的地帶有某種或某些已知微生物的動(dòng)物。無(wú)菌動(dòng)物帶有或接種了一種微生物的動(dòng)物叫單聯(lián)悉生動(dòng)物,帶兩種微生物者稱雙聯(lián)微生物,依次類推,稱為三聯(lián)或多聯(lián)微生物。無(wú)特定病原體動(dòng)物(SPF)是指不存在某些特定的具有病原性或潛在病原性微生物的動(dòng)物。例如為了排除某些細(xì)菌如假單胞菌屬、變形桿菌屬、克雷伯菌屬等的干擾,可通過(guò)無(wú)菌動(dòng)物與這些細(xì)菌以外的正常菌群相聯(lián)系哺育SPF動(dòng)物。清潔動(dòng)物是指動(dòng)物來(lái)源于剖腹產(chǎn),飼養(yǎng)與半屏蔽系統(tǒng),其體內(nèi)外不能攜帶人畜共患病和動(dòng)物重要傳染病的病原體。是無(wú)菌動(dòng)物與健康動(dòng)物純正的正常微生物群相聯(lián)系的結(jié)果。普通動(dòng)物是指在開放條件下飼養(yǎng),其體內(nèi)外存在著多種微生物和寄生蟲,但不能攜帶人畜共患病病原微生物的動(dòng)物。哺育實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的意義:由于無(wú)菌動(dòng)物不受任何微生物的刺激和干擾,所以可以用于研究動(dòng)物體內(nèi)外微生物區(qū)系對(duì)機(jī)體的影響及微生態(tài)學(xué)研究,可用來(lái)研究免疫、腫瘤、病理及傳染病的凈化等。由于無(wú)菌動(dòng)物的哺育和飼養(yǎng)技術(shù)很困難,所以通常用悉生動(dòng)物代替。第三章消毒、滅菌及獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全【內(nèi)容提綱】消毒和滅菌是獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)踐中的最常用的措施。常用的火焰滅菌法、熱空氣滅菌法、高壓蒸汽滅菌法、巴氏消毒法及煮沸滅菌法各有特點(diǎn)和實(shí)用范圍。可見光中的紫外線和紅外線有殺菌作用,光復(fù)活作用是一個(gè)值得注意的現(xiàn)象。Γ射線和微波等也常用于滅菌。濾過(guò)除菌應(yīng)用廣泛,制造生物制品等藥品的車間的空氣需要濾過(guò)并規(guī)定達(dá)成一定的潔凈限度。化學(xué)消毒劑的功效易受環(huán)境因素的影響,抗生素等用于細(xì)菌感染的治療。細(xì)菌素對(duì)同種或類似細(xì)菌有一定的抑殺作用。根據(jù)從事的病原微生物的危害性的差異,獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室通常通常分為生物安全等級(jí)1~4級(jí)(BSL1~4)4種規(guī)格,BSL~4是最高安全級(jí)別。我國(guó)農(nóng)業(yè)部將動(dòng)物病原微生物分為一至四類,一類危害性最大。復(fù)習(xí)思考題1、滅菌、消毒、防腐、無(wú)菌的概念?答:(1)滅菌:殺滅物體上所有微生物的方法,涉及殺滅細(xì)菌芽胞霉菌孢子在內(nèi)的所有病原微生物和非病原微生物。(2)消毒:殺滅物體上病原微生物的方法,僅規(guī)定達(dá)成消除傳染性的目的,而對(duì)非病原微生物及其芽胞、孢子并不嚴(yán)格規(guī)定所有殺死。(3)防腐:阻止或克制物品上微生物生長(zhǎng)繁殖的方法,微生物不一定死亡。(4)無(wú)菌:無(wú)菌為不存在活細(xì)菌的意思。防止或杜絕細(xì)菌進(jìn)入動(dòng)物、人或其他物品的方法稱為無(wú)菌操作。2、物理消毒滅菌方法重要有哪些?如何合理選用?答:(1)熱力滅菌法:高溫滅菌法是最古老、作用最大、應(yīng)用最廣、使用最簡(jiǎn)便以及效果最可靠的滅菌方法。熱力使蛋白質(zhì)中的氫鍵破壞使之變性或凝固,使雙股DNA分開為單股,活化核酸酶使單股DNA斷裂。細(xì)菌繁殖體對(duì)其最為敏感,另一方面的真菌和病毒,細(xì)菌芽胞對(duì)熱有很強(qiáng)的抵抗力作用。熱力滅菌法分為干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類,在同一溫度下后者的效力比前者大,這是由于濕熱中菌體蛋白較易凝固、濕熱穿透力比干熱強(qiáng)、蒸汽變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)可釋放大量潛熱迅速提高被滅菌物體的溫度。輻射滅菌法輻射涉及電磁波輻射和粒子輻射。輻射除可被一些產(chǎn)色素細(xì)菌運(yùn)用作為能量源外,對(duì)多數(shù)細(xì)菌有損害作用。超聲波殺菌法超聲波裂解細(xì)胞的重要機(jī)制:它通過(guò)水發(fā)生空(腔)化作用,在液體中導(dǎo)致壓力改變,應(yīng)力薄弱區(qū)形成許多小空腔,逐漸增大,最后崩裂。有殘存,費(fèi)用頗大,故未應(yīng)用于消毒滅菌。目前重要用于裂解細(xì)胞,提取細(xì)胞組分進(jìn)行研究。濾過(guò)除菌法概念:是通過(guò)機(jī)械、物理阻流作用將液體或空氣中的細(xì)菌等微生物除去的方法。合用條件:通常不能除去病毒、支原體、細(xì)菌L型等微生物。糖培養(yǎng)液、各種特殊的培養(yǎng)基、血清、毒素、抗毒素、抗生素、維生素、氨基酸等不能加熱滅菌的液體常用濾器過(guò)濾除菌。此外,還可以進(jìn)行病毒的分離。運(yùn)用空氣過(guò)濾器可以進(jìn)行超凈工作臺(tái)、無(wú)菌隔離器、無(wú)菌操作室、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室以及疫苗、藥品、食品等生產(chǎn)廠房的空氣濾過(guò)除菌。干燥及低溫抑菌法干燥→失水→新陳代謝障礙→菌體蛋白質(zhì)變性或鹽類濃度增高→死亡運(yùn)用高濃度的鹽溶液或糖溶液保存食品,是由于高濃度的溶液吸取菌體內(nèi)的水分,導(dǎo)致微生物的生理性干燥而達(dá)成抑菌的目的。類型概念方法、滅菌機(jī)制條件干熱滅菌法火焰滅菌法以火焰直接灼燒殺死物品中病原微生物的方法灼燒(直接用火焰滅菌)合用于耐燒的接種針(環(huán))、金屬器具、試管口等的滅菌焚燒(直接點(diǎn)燃或者焚燒爐內(nèi)焚燒)常用于燒毀的物品,如患病動(dòng)物尸體、病畜禽的墊料及其他污染廢棄物等熱空氣滅菌法運(yùn)用干熱滅菌器,以干熱空氣進(jìn)行滅菌的方法在干熱情況下,由于熱空氣的穿透力較低,需在160℃維持2h才干達(dá)成殺死所有微生物及其芽胞、孢子的目的。合用于高溫下不損壞、不變質(zhì)、不蒸發(fā)的物品,如各種玻璃器皿、瓷器、金屬器械等濕熱滅菌法煮沸消毒法常壓下煮沸10~20min可殺死所有細(xì)菌的繁殖體,芽胞長(zhǎng)需煮沸1~2h才干被殺死。若在水中加入2%碳酸鈉或2%~5%石炭酸,可以提高沸點(diǎn),增強(qiáng)殺菌力外科手術(shù)器械、注射器、針頭以及食具等多用此法消毒巴氏消毒法以較低溫度殺滅液態(tài)食品中的病原微生物或特定微生物,而又不嚴(yán)重?fù)p害其營(yíng)養(yǎng)成分和風(fēng)味的消毒方法①.低溫維持巴氏消毒法:在63~65℃維持30min;目前重要應(yīng)用于葡萄酒、啤酒、果酒、牛乳等食品的消毒。超高溫巴氏消毒法的鮮乳在常溫下保質(zhì)期可長(zhǎng)達(dá)半年。②高溫瞬時(shí)巴氏消毒法:在71~72℃保持15s;③超高溫巴氏消毒法:在132℃保持1~2s。加熱消毒后迅速冷卻至10℃以下(冷擊法)流通蒸汽消毒法是運(yùn)用一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下100℃的流通蒸汽進(jìn)行物品消毒,又稱常壓蒸汽消毒法100℃的蒸汽維持30min足以殺死細(xì)菌的繁殖體,但細(xì)菌的芽胞和真菌孢子不能被所有殺滅。該法常用阿諾德流通蒸汽滅菌器或蒸籠。流通蒸汽滅菌法運(yùn)用反復(fù)多次的流通蒸汽間歇加熱以達(dá)成殺滅所有微生物的方法,又稱間歇滅菌法或丁達(dá)爾滅菌法在流通蒸汽滅菌器內(nèi)進(jìn)行第一次流通蒸汽滅菌后,將物品移植37℃保溫箱中保溫過(guò)夜,待芽胞萌發(fā)出芽,次日以同樣的方式再進(jìn)行一次滅菌和保溫過(guò)夜,如此連續(xù)3次以上,可達(dá)成完全滅菌的效果。此法常用于一些不耐高溫的培養(yǎng)基,如雞蛋培養(yǎng)基、血清培養(yǎng)基、糖培養(yǎng)基的滅菌。如將物品在70~80℃加熱1h。連續(xù)6次,也可達(dá)成滅菌目的,且可不破壞血清等物質(zhì)。根據(jù)滅菌對(duì)象不同,溫度、加熱時(shí)間、次數(shù),均可適當(dāng)增減。高壓蒸汽滅菌法用高壓蒸汽滅菌器進(jìn)行滅菌的方法。在103.4kPa蒸汽壓下,于121.3℃維持15~20min,可殺死涉及細(xì)菌芽胞在內(nèi)的所有微生物。是應(yīng)用最廣、最有效的滅菌方法。凡耐高溫、不怕潮濕的物品,如各種培養(yǎng)基、溶液、玻璃器皿、金屬器械、敷料、橡皮手套、工作服和實(shí)驗(yàn)小動(dòng)物尸體等均可。類別概念方法、滅菌機(jī)制條件非電離輻射可見光是指紅外線和紫外線之間的肉眼可見的光線,波長(zhǎng)400~800nm可見光具有薄弱的殺菌作用,若將某些染料如結(jié)晶紫、美藍(lán)、汞溴紅、伊紅、沙黃等加到培養(yǎng)基或涂在外傷表面,能增強(qiáng)可見光的殺菌作用,這一現(xiàn)象稱為光感作用。一般在有氧的情況才出現(xiàn)光感作用。(染料激活氧或染料氧化起殺菌作用)光感作用對(duì)原生動(dòng)物、細(xì)菌、毒素、病毒和噬菌體等均有滅火作用。革蘭陽(yáng)性菌對(duì)光感作用比陰性敏感,美藍(lán)、汞溴紅、伊紅僅作用于革蘭陽(yáng)性菌,而沙黃則作用于革蘭陰性菌。日光直射日光有強(qiáng)烈的殺菌作用多數(shù)微生物在直射日光的照射下半小時(shí)到數(shù)小時(shí)即可死亡。芽胞往往須經(jīng)20h才可死亡。效果影響因素眾多。實(shí)際生活中,日光對(duì)被污染的土壤、牧場(chǎng)、畜舍、用品等的消毒以及江河的自凈作用均有重要意義紫外線紫外線波長(zhǎng)200~300nm部分具有殺菌作用,其中265~266nm殺菌力最強(qiáng)。紫外線損害DNA構(gòu)型,干擾DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄;使空氣中的分子氧變?yōu)槌粞?釋放出氧化能力強(qiáng)的氧原子。實(shí)驗(yàn)室通常使用的紫外線殺菌燈,殺菌力強(qiáng)而穩(wěn)定紫外線的穿透力弱,故只能用于微生物實(shí)驗(yàn)室、無(wú)菌室、手術(shù)室、傳染病房、種蛋室等的空氣消毒,或用于不能用高溫或化學(xué)藥品消毒的表面消毒;光復(fù)活作用。紅外線紅外線是波長(zhǎng)為0.77~1000微米的電磁波,尤以1~10微米的熱效應(yīng)最強(qiáng)運(yùn)用紅外線烤箱滅菌。無(wú)需空氣傳導(dǎo),可是照射物體表面迅速升溫。滅菌作用與干熱相似,滅菌時(shí)間、所需溫度亦同于熱空氣滅菌法。此法多用于醫(yī)療器械的滅菌。微波微波重要是一種波長(zhǎng)1mm到1m的超高頻電磁波消毒中常用的微波頻率為915~2450MHz。重要是運(yùn)用微波的加熱作用??赏高^(guò)玻璃、塑料薄膜、陶瓷等物質(zhì),但不能透過(guò)金屬表面。目前重要用于食品工業(yè),醫(yī)藥方面用于維生素和中藥藥丸等的滅菌。時(shí)間短,加熱均勻是其顯著特點(diǎn)。電離輻射放射性同位素的射線(即α射線、β射線、γ射線)和X射線以及高能質(zhì)子、中子等可將被照射物質(zhì)原子核周邊的電子擊出,引起電離,故稱為電離輻射。射線使水電離出游離基(強(qiáng)烈的還原劑和氧化劑)直接作用于細(xì)菌;射線使酶失活;導(dǎo)致涉及DNA在內(nèi)的細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)分解;在足夠計(jì)量時(shí),對(duì)各種細(xì)菌均有致死作用。在實(shí)際工作中,其他等缺少穿透力不實(shí)用,重要應(yīng)用X射線、γ射線、β射線。電離輻射多用于大量一次性塑料制品的消毒,亦可用于食品、飼料的消毒,且不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分。3、影響消毒劑作用的因素消毒劑的性質(zhì)和作用時(shí)間:絕大多數(shù)消毒劑在高濃度時(shí)殺菌作用大,濃度低至一定限度只有抑菌作用。過(guò)濃不一定能提高消毒效力。一定濃度下,對(duì)細(xì)菌作用的時(shí)間越長(zhǎng),效果越好。微生物的種類和數(shù)量:同一消毒劑對(duì)不同種類處在不同事情的微生物效果不同。微生物數(shù)數(shù)量越大,所需消毒時(shí)間就越長(zhǎng)。溫度:一般溫度升高可增強(qiáng)殺菌效果。④酸堿度:消毒劑的殺菌效果受PH的影響。PH也影響消毒劑的電離度,一般未電離的因子易通過(guò)細(xì)胞壁殺菌效果好。⑤有機(jī)物:環(huán)境中有有機(jī)物,特別是蛋白質(zhì)能和許多消毒劑結(jié)合,嚴(yán)重影響效果。⑥藥物的互相拮抗:消毒劑理化性質(zhì)不同,兩種藥品合用時(shí)也許產(chǎn)生互相拮抗,使藥效減少影響消毒效果的尚有濕度、穿透力、表面張力及拮抗物質(zhì)等。試述我國(guó)《獸藥GMP》對(duì)獸藥生產(chǎn)潔凈室(區(qū))空氣潔凈度的劃分。答:100級(jí)、10000級(jí)、100000級(jí)、300000級(jí)5.比較消毒劑、防腐劑,化學(xué)治療劑的殺菌機(jī)制。答:消毒劑和防腐劑之間沒有嚴(yán)格界線。消毒劑與化學(xué)治療劑不同,它在殺滅病原微生物的同時(shí),對(duì)動(dòng)物體的組織細(xì)胞也有損害作用,所以只能外用或用于環(huán)境的消毒,其中少數(shù)不被吸取的化學(xué)消毒劑亦可用于消化道的消毒。而化學(xué)治療劑對(duì)于宿主和病原微生物的作用品有選擇性,她能使微生物受克制或死亡,而對(duì)宿主細(xì)胞毒副作用甚小。消毒劑:用來(lái)殺滅病原微生物的化學(xué)藥劑。防腐劑:用于克制微生物生長(zhǎng)繁殖的化學(xué)藥劑?;瘜W(xué)治療劑:用于消除宿主體內(nèi)病原微生物或其他寄生蟲的化學(xué)藥品稱為化學(xué)治療劑??股睾图?xì)胞素兩者的作用原理如何?(1)抗生素:某些微生物在代謝中產(chǎn)生的一類能克制或殺死另一些病原微生物的物質(zhì)。作用原理:①干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成;②損傷細(xì)胞膜而影響其通透性;③影響菌體蛋白質(zhì)的合成;④影響核酸的合成;(2)細(xì)菌素:是某種細(xì)菌產(chǎn)生的一種具有殺菌作用的蛋白質(zhì)。只能作用于與它同種不同株的細(xì)菌以及與它親緣關(guān)系相近的細(xì)菌第四章細(xì)菌的感染與致病機(jī)理【內(nèi)容提綱】細(xì)菌是否有致病性,經(jīng)典的依據(jù)是柯赫法則,近年來(lái)提出的基因水平的柯赫法則對(duì)此標(biāo)準(zhǔn)做了補(bǔ)充和完善。就某種病原菌而言,其致病性一般通過(guò)測(cè)定LD50來(lái)定量。細(xì)菌的致病性在很大限度上取決于其毒力因子,涉及侵襲力與毒素,以及毒力因子的分泌系統(tǒng)。侵襲力導(dǎo)致病原菌在機(jī)體內(nèi)定殖、突破機(jī)體的防御屏障、內(nèi)化作用、繁殖與擴(kuò)散。毒素有外毒素和內(nèi)毒素之分,外毒素是具有特異性毒性作用的蛋白質(zhì),典型結(jié)構(gòu)為A-B亞單位的聚體。內(nèi)毒素為L(zhǎng)PS的類脂A,耐熱,具有致熱作用等。有關(guān)病毒致病性的現(xiàn)代觀點(diǎn)不僅要考慮病原菌,還要考慮宿主及兩者的互相作用,機(jī)會(huì)致病菌因此得以重視。細(xì)菌的毒力可用人工的方法增強(qiáng)或減弱,并受到溫度、離子濃度等多種環(huán)境因子、非編碼小RNA及二元信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)等的調(diào)節(jié)。復(fù)習(xí)思考題(1~6重點(diǎn))致病性與毒力的概念。(1)一定種類的病原菌在一定的條件下,能在宿主體內(nèi)引起感染的能力稱為致病性。病原菌致病力的強(qiáng)弱限度稱為毒力。經(jīng)典的柯赫法則。由德國(guó)細(xì)菌學(xué)家羅伯特·柯赫890年提出,是擬定某種細(xì)菌是否具有致病性的重要依據(jù):特殊的病原菌應(yīng)在同一疾病中查見,在健康者不存在:此病原菌能被分離培養(yǎng)而得到純種;此純培養(yǎng)物接種易感動(dòng)物,能導(dǎo)致同樣病癥。LD50的概念。答:半數(shù)致死量(LD50)是指能使接種的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在感染后一定期限內(nèi)死亡一半所需的微生物量或毒素量。外毒素與內(nèi)毒素的區(qū)別。概念特性組成化學(xué)性質(zhì)產(chǎn)生耐熱性毒性作用毒性限度致熱性免疫原性能否產(chǎn)生類毒素外毒素是某些病原菌在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中所產(chǎn)生的對(duì)宿主細(xì)胞有毒性的可溶性蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)由某些革蘭陽(yáng)性菌或陰性菌分泌通常不耐熱特異性,為細(xì)胞毒素、腸毒素或神經(jīng)毒素,對(duì)特點(diǎn)的細(xì)胞或組織發(fā)揮特點(diǎn)作用高,往往致死對(duì)宿主不致熱強(qiáng),刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體(抗毒素)能,用甲醛解決大多數(shù)外毒素由A、B兩種亞單位組成。A亞單位為毒素的活性中心,B亞單位為結(jié)合部位內(nèi)毒素特指革蘭陰性菌中的脂多糖(LPS)成分,細(xì)菌在死亡后破裂或用人工方法裂解菌體后才釋放脂多糖由革蘭陰性菌裂解產(chǎn)生極為耐熱全身性,致發(fā)熱、腹瀉、嘔吐弱,很少致死常致宿主發(fā)熱較弱,免疫應(yīng)答局限性以中和毒性不能LPS由O特意多糖側(cè)鏈、非特異核心多糖和類脂A組成。感染的類型。答:隱形感染和顯性感染細(xì)菌毒力減弱的方法答:(1)長(zhǎng)時(shí)間在體外連續(xù)培養(yǎng)傳代;(2)在高于最適生長(zhǎng)溫度條件下培養(yǎng);(3)在具有特殊化學(xué)物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng);(4)通過(guò)非易感動(dòng)物;(5)通過(guò)基因工程的方法;7.試述致病菌侵入宿主細(xì)胞的重要過(guò)程。答:定殖(細(xì)菌感染的第一步就是在體內(nèi)定殖)→干擾或逃避宿主的防御機(jī)制(抗吞噬作用、抗體液免疫機(jī)制)→內(nèi)化作用(指某些細(xì)菌在粘附在細(xì)胞組織后能進(jìn)入吞噬細(xì)胞或非吞噬細(xì)胞內(nèi)部的過(guò)程)→在體內(nèi)增殖(核心問(wèn)題,增殖速度對(duì)致病性極其重要)→在體內(nèi)擴(kuò)散8.什么樣的細(xì)菌能進(jìn)行內(nèi)化作用,意義何在?答:(1)結(jié)合桿菌、李氏桿菌、衣原體等嚴(yán)格的胞內(nèi)寄生菌及大腸桿菌、沙門菌、耶爾森菌等胞外寄生菌;意義:細(xì)菌通過(guò)這種位移作用進(jìn)入深層組織,或進(jìn)入血液循環(huán),借以從感染的病發(fā)原灶擴(kuò)散至全身或較遠(yuǎn)的靶器官。宿主細(xì)胞為進(jìn)入其中的細(xì)菌提供了一個(gè)增殖的小環(huán)境和庇護(hù)所,使細(xì)菌逃避宿主免疫機(jī)制的殺滅。胞外蛋白酶有何致病作用,舉例說(shuō)明。細(xì)菌分泌的蛋白酶稱為胞外蛋白酶。它們具有多種致病作用,例如激活外毒素、滅活細(xì)菌中的補(bǔ)體等,有的蛋白酶自身就是外毒素。此外,最重要的作用是導(dǎo)致組織基質(zhì)或細(xì)胞膜的損傷,增長(zhǎng)其通透性,有助于細(xì)菌在體內(nèi)擴(kuò)散。此毒素常見的有:透明質(zhì)酸酶,分解基地組織,葡萄球菌、鏈球菌可產(chǎn)生;膠原酶,分解ECM中的膠原蛋白,見之于梭菌、氣單胞菌等;神經(jīng)氨酸酶,分解細(xì)胞膜的磷脂,產(chǎn)氣莢膜梭菌等可產(chǎn)生。10.什么是類毒素,有何用途?答:外毒素在0.4%的甲醛溶液作用下,通過(guò)一段時(shí)間可脫毒,但仍保存原有抗原性,稱為類毒素。注入機(jī)體后可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素,可作為疫苗進(jìn)行免疫接種。舉例說(shuō)明細(xì)菌毒力因子重要的分泌系統(tǒng)的重要特點(diǎn)。答:具有接觸介導(dǎo)的特性:以腸致病性大腸桿菌(EPEC)為例,置37℃的處在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的EPEC與宿主細(xì)胞接觸后,T3SS大量分泌蛋白質(zhì)并進(jìn)入宿主細(xì)胞。EPEC的4型菌毛(BFP)對(duì)激活此分泌系統(tǒng)起關(guān)鍵作用。T3SS的這種接觸激活作用可被氯霉素克制。什么是機(jī)會(huì)致病菌?為什么應(yīng)予以重視?是指某些細(xì)菌通常不積極入侵宿主,但當(dāng)宿主的免疫屏障被打開或免疫功能異常時(shí),這類細(xì)菌就會(huì)進(jìn)入機(jī)體的血液或組織,導(dǎo)致感染并致病。細(xì)菌致病性與毒力的傳統(tǒng)概念的缺陷是僅考慮病原菌自身,即著重研究那些專性致病菌,忽視了宿主因素以及宿主和病原菌的互相作用。環(huán)境因子如何影響細(xì)菌毒力因子的調(diào)節(jié),舉例。(1)溫度:嗜水汽單胞菌的毒素、菌毛在25℃左右表達(dá)量最佳;鐵:它不僅可以誘導(dǎo)鐵載體、鐵載體受體及其它鐵結(jié)合蛋白受體等與鐵代謝有關(guān)的成分表達(dá),并且還對(duì)某些細(xì)菌毒素有調(diào)節(jié)作用,如類志賀毒素;鈣:鈣對(duì)耶爾森菌Yops的表達(dá)有調(diào)節(jié)作用。Yops是耶爾森菌的一系列外膜蛋白,是重要的毒力因子;滲透壓:滲透壓對(duì)霍亂弧菌的毒力及菌毛的表達(dá)有調(diào)節(jié)作用,在宿主組織相近的生理范圍內(nèi)表達(dá)量最高。14.什么是非編碼?。襈A答:是一大類不編碼蛋白質(zhì)的RNA分子,存在于所以生物體中。sRNA作為一種新的調(diào)控因子,可與mRNA結(jié)合,導(dǎo)致后者降解;或與蛋白質(zhì)結(jié)合,影響蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能。什么是二元信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)?其在病原信號(hào)傳遞上有何作用。答:最簡(jiǎn)樸的二元信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)(TCSTS)由組氨酸激酶(HK)和反映調(diào)節(jié)因子(RR)組成。感受到外界環(huán)境信號(hào)后將RR磷酸化,將外界信號(hào)傳遞到胞內(nèi)。整個(gè)雙組分信號(hào)通路由信號(hào)輸入,HK自身磷酸化、RR磷酸化及信號(hào)輸入等環(huán)節(jié)構(gòu)成。TCSTS在病原菌的信號(hào)傳導(dǎo)中起著極為重要的作用,涉及病原菌對(duì)宿主的辨認(rèn)和侵襲,對(duì)環(huán)境的代謝性適應(yīng)。對(duì)滲透壓改變的勝利應(yīng)答、趨化性等等。細(xì)菌的遺傳變異【內(nèi)容提綱】細(xì)菌遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)組合要是基因組。質(zhì)粒作為細(xì)菌基因組外自我復(fù)制的遺傳物質(zhì),控制細(xì)菌的某些次要形狀,如抗性等,并可以轉(zhuǎn)移或丟失。轉(zhuǎn)位因子涉及插入序列、轉(zhuǎn)座子、Mu噬菌體及基因盒-整合子系統(tǒng),具有可移動(dòng)性和不穩(wěn)定性。毒力島是具有潛在可移動(dòng)性的毒力基因群。轉(zhuǎn)化、傳導(dǎo)和接合是細(xì)菌個(gè)體間互換遺傳物質(zhì)的天然方,采用原生質(zhì)體融合等人工方法也可達(dá)成相似的目的。掌握細(xì)菌遺傳變異的規(guī)律,不僅有
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