GB/T 28073-2011南芥菜花葉病毒檢疫鑒定方法

ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T28073—2011

南芥菜花葉病毒檢疫鑒定方法

Detectionandidentificationofarabismosaicvirus

2011-12-30發(fā)布2012-06-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T28073—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國(guó)廈門出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國(guó)上海出入境檢驗(yàn)檢疫

:、

局中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國(guó)福建出入境檢驗(yàn)檢疫局

、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人廖富榮于翠張永江陳紅運(yùn)林石明陳青黃蓬英沈建國(guó)吳媛

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T28073—2011

南芥菜花葉病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了南芥菜花葉病毒血清學(xué)和分子生物學(xué)的檢測(cè)鑒定方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于植物種子鱗球莖苗木和組培苗等植物及其產(chǎn)品中南芥菜花葉病毒的檢測(cè)與鑒定

、、。

2南芥菜花葉病毒基本信息

中文名南芥菜花葉病毒

:。

英文名

:arabismosaicvirus。

異名啤酒花蕁麻病病毒大

:arabismosaicnepovirus;hopnettleheadvirus();rhubarbmosaicvirus(

黃花葉病毒懸鉤子黃矮病毒白臘樹

);raspberryyellowdwarfvirus();ashringandlinepatternviurs(

環(huán)線狀病毒大黃花葉病毒連翹黃網(wǎng)狀病毒

);rhabarber-mosaik-virus();forsythiayellownetvirus();

茉莉黃斑病毒

jasmineyellowblotchvirus()。

英文縮寫

:ArMV。

屬豇豆花葉病毒科線蟲傳多面體病毒屬Nepovirus

Comoviridae,。

南芥菜花葉病毒的其他信息參見附錄

A。

3方法原理

利用基于抗原抗體反應(yīng)的雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定反轉(zhuǎn)錄和體外擴(kuò)增技

(DAS-ELISA)、DNA

術(shù)的反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)進(jìn)行檢測(cè)鑒定

(RT-PCR)。

4主要儀器設(shè)備

本標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)鑒定方法主要使用以下儀器設(shè)備

:

微量榨汁機(jī)酶標(biāo)儀洗板機(jī)微量天平感量?jī)x熒光儀電泳儀水平電泳

、、、(:0.001g)、PCR、PCR、、

槽凝膠成像儀高速冷凍臺(tái)式離心機(jī)水浴槽計(jì)等和各種量程的可調(diào)移液器

、、、、pH(1000μL、200μL、

100μL、20μL、10μL、2μL)。

5檢測(cè)與鑒定

51DAS-ELISA檢測(cè)

.

把樣品充分研磨或在液氮中研磨按比例加入樣品提取緩沖液轉(zhuǎn)移到

0.5g~1.0g,1∶10,5mL

離心管中離心上清液作為的檢測(cè)提取液

,8000r/min5min,DAS-ELISA。

設(shè)置陰性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照陰性對(duì)照的種類和材料如種子或葉片應(yīng)該盡量與所檢測(cè)

、,(:)

樣品類型相一致具體操作過(guò)程見附錄