標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 28982-2012 番茄斑萎病毒PCR檢測方法》是一項國家標(biāo)準(zhǔn)，旨在規(guī)范使用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)對番茄斑萎病毒進(jìn)行檢測的過程。該標(biāo)準(zhǔn)適用于農(nóng)業(yè)、植物檢疫以及科學(xué)研究領(lǐng)域中對于番茄斑萎病毒感染情況的快速準(zhǔn)確鑒定。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容，首先明確了所需材料和試劑的具體要求，包括但不限于DNA提取試劑盒、特異性引物序列等，并詳細(xì)說明了實驗過程中使用的儀器設(shè)備及其性能指標(biāo)，確保實驗條件的一致性和可重復(fù)性。

接下來，標(biāo)準(zhǔn)描述了從樣品采集到最終結(jié)果分析的完整流程。樣品采集部分強(qiáng)調(diào)了選取具有典型癥狀植株作為樣本的重要性；接著是核酸提取步驟，提供了多種可行的方法供選擇；隨后進(jìn)入關(guān)鍵的PCR擴(kuò)增階段，給出了推薦使用的反應(yīng)體系組成、循環(huán)參數(shù)設(shè)置等信息；最后，通過凝膠電泳或其他適當(dāng)手段來觀察并記錄PCR產(chǎn)物，依據(jù)特定大小片段的存在與否判斷是否感染了目標(biāo)病毒。

此外，《GB/T 28982-2012》還特別關(guān)注到了實驗室內(nèi)質(zhì)量控制措施，如設(shè)立陽性對照與陰性對照以驗證整個操作過程的有效性和準(zhǔn)確性，同時建議定期參加外部質(zhì)控活動以保證實驗室間數(shù)據(jù)的一致性。

此標(biāo)準(zhǔn)為從事相關(guān)工作的人員提供了一套科學(xué)合理的技術(shù)指南，有助于提高我國在植物病害診斷方面的技術(shù)水平和服務(wù)能力。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2012-12-31 頒布
  • 2013-06-01 實施
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文檔簡介

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T28982—2012

番茄斑萎病毒PCR檢測方法

DetectionoftomatospottedwiltvirusbyPCR

2012-12-31發(fā)布2013-06-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T28982—2012

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國上海出入境檢驗檢疫局中華人民共和國廈門出入境檢驗檢疫

:、

局中華人民共和國北京出入境檢驗檢疫局

、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人于翠楊翠云廖富榮易建平鄧叢良戚龍君

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T28982—2012

番茄斑萎病毒PCR檢測方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了番茄斑萎病毒的免疫磁珠和實時熒光檢測方法

RT-PCR、RT-PCRRT-PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于包括種子苗木和無性繁殖材料的活體植物材料及傳毒介體中攜帶的番茄斑萎病毒

、

的檢測

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

進(jìn)出境植物及植物產(chǎn)品檢疫抽樣

SN/T2122

3番茄斑萎病毒基本信息

中文名番茄斑萎病毒

:

英文名

:tomatospottedwiltvirus

縮寫

:TSWV

分類地位布尼亞病毒科番茄斑萎病毒屬Tospovirus

:(Bunyaviridae),()

番茄斑萎病毒其他信息參見附錄

A。

4方法原理

用特異性抗體修飾的磁株吸附待測樣品中的病毒粒子后經(jīng)高溫裂解釋放出病毒或直接從待

RNA,

測樣品材料中提取植物總?cè)缓笤谀孓D(zhuǎn)錄酶的作用下合成以為模板再通過普通

RNA,cDNA,cDNA

或?qū)崟r熒光進(jìn)行檢測分析結(jié)果即可明確材料中是否含有病毒核酸成分

RT-PCRRT-PCR。PCR。

5儀器用具及試劑

、

51儀器設(shè)備

.

儀實時熒光儀旋轉(zhuǎn)孵育器電泳儀凝膠分析成像系統(tǒng)水浴鍋高速冷凍離心機(jī)高

PCR,PCR,,,,,,

壓滅菌鍋微波爐渦旋振蕩器電子天平感量超低溫冰箱等

,,,(0.001g),(-80℃)。

52用具

.

磁力架可調(diào)式微量移液器無吸頭無離心管管研缽等

,,RNase,RNase,PCR,。

53試劑

.

除有特殊說明外所有實驗用試劑均為分析純或生化試劑試劑配制見附錄

,。B。

番茄斑萎病毒抗體磁珠具有超順磁性的聚苯乙烯珠子直徑表面標(biāo)記有甲

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