標準解讀

《GB/T 33120-2016 梨皰狀潰瘍類病毒檢疫鑒定方法》是一項國家標準，主要針對梨樹上可能出現(xiàn)的皰狀潰瘍類病毒進行檢測和鑒定。該標準詳細規(guī)定了從樣品采集到最終結(jié)果分析的一系列步驟，適用于進出口貿(mào)易中以及國內(nèi)種植區(qū)域間調(diào)運時對梨樹及其繁殖材料（如接穗、砧木等）是否感染此類病毒的檢疫工作。

首先，在樣品準備階段，需要按照特定要求選取健康或疑似患病的植株部分作為測試樣本。接著是核酸提取過程，采用高效且可靠的生物化學(xué)技術(shù)從植物組織中分離出總RNA或DNA。隨后通過RT-PCR或其他分子生物學(xué)手段擴增目標序列，并利用凝膠電泳等方法觀察特異性條帶的存在與否來判斷樣品是否含有梨皰狀潰瘍類病毒。

此外，為了確保實驗結(jié)果準確無誤，《GB/T 33120-2016》還特別強調(diào)了實驗室條件控制的重要性，包括但不限于使用陽性對照品驗證反應(yīng)體系的有效性、設(shè)置空白對照排除污染可能性等措施。同時，對于如何記錄數(shù)據(jù)、保存原始資料也有明確規(guī)定，以保證整個檢測流程透明可追溯。

最后，在報告編寫方面，該標準指出應(yīng)包含所有關(guān)鍵信息，比如樣品來源、處理日期、所用試劑批號及儀器型號等，以便于后續(xù)查詢與復(fù)核。通過遵循這一系列嚴格的操作指南，可以有效地識別并隔離攜帶梨皰狀潰瘍類病毒的植株，從而保護我國乃至全球范圍內(nèi)的梨產(chǎn)業(yè)免受侵害。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2016-10-13 頒布
  • 2017-05-01 實施
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文檔簡介

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標準

GB/T33120—2016

梨皰狀潰瘍類病毒檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofPearblistercankerviroid

2016-10-13發(fā)布2017-05-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T33120—2016

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任

。。

本標準由全國植物檢疫標準化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標準起草單位中華人民共和國湖北出入境檢驗檢疫局中華人民共和國中山出入境檢驗檢疫

:、

局中華人民共和國新疆出入境檢驗檢疫局中華人民共和國云南出入境檢驗檢疫局中華人民共和國

、、、

山東出入境檢驗檢疫局中華人民共和國檢驗檢疫科學(xué)研究院華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科技學(xué)院

、、。

本標準主要起草人王振華陳定虎葉蕓徐文興徐家文曾憲東徐雪張永江王翀李旻王英超

:、、、、、、、、、、、

吳興海

。

Ⅰ

GB/T33120—2016

梨皰狀潰瘍類病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標準規(guī)定了梨皰狀潰瘍類病毒的檢疫鑒定方法

。

本標準適用于進出境梨樹種苗組培苗及植株中梨皰狀潰瘍類病毒的檢疫和鑒定

、。

2梨皰狀潰瘍類病毒基本信息

學(xué)名Pearblistercankerviroid

:。

縮寫

:PBCVd。

異名梨泡斑類病毒

:。

分類地位馬鈴薯紡錘塊莖類病毒科Posiviroidae蘋果銹皮類病毒屬Ascaviroid

:(p),(p)。

傳播途徑通過嫁接芽接和刀具機械傳播但沒有有關(guān)介體及種子傳毒的報道遠距離通過種苗

:、,。

調(diào)運傳播

。

梨皰狀潰瘍類病毒的其他信息參見附錄

A。

3方法原理

根據(jù)梨皰狀潰瘍類病毒全長核酸鏈中的保守區(qū)域設(shè)計了一對擴增該類病毒全長核酸的引

RNA

物進行擴增和序列測定根據(jù)梨皰狀潰瘍類病毒全長核酸序列設(shè)計與正單鏈互補的單

,RT-PCR;RNA

鏈探針通過雜交信號強弱進行結(jié)果判定

RNA,。

4儀器設(shè)備和主要試劑

41儀器設(shè)備

.

超凈工作臺滅菌鍋制冰機高速冷凍離心機超低溫冰箱常規(guī)冰箱渦旋振蕩器微量進樣器垂

、、、、、、、、

直電泳槽儀凝膠成像系統(tǒng)雜交爐交聯(lián)儀雜交管化學(xué)發(fā)光檢測儀等

、PCR、、、、、。

42主要試劑

.

除另有規(guī)定外所有試劑均為分析純試劑見附錄分子雜交試劑見附錄

,。RT-PCRB;C。

5癥狀觀察

取樣品量若樣品少可適量增大比例的種苗進行檢查檢查梨皰狀潰瘍類病毒侵染癥

1%~5%()。

狀樹皮上形成皰狀物或樹皮開裂

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