NY/T 562-2002動物衣原體病診斷技術(shù)

ICS.11.220841NY中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T562-2002動物衣原體病診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforanimalchlamydiosis2002-08-27發(fā)布2002-12-01實(shí)施中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布

NY/T562-2002衣原體病是由衣原體感染引起的一類具有公共衛(wèi)生意義的自然疫源性疾病。目前已發(fā)現(xiàn)鴨、火雞、雞、鶴、鵝等140余種禽烏和數(shù)十種哺乳動物，如綿羊、山羊、牛、托牛、馬、驃、驢、豬、犬、貓、免、豚鼠、小鼠等可被衣原體感染，表現(xiàn)不同癥狀或亞臨床經(jīng)過。衣原體病病畜禽對人類的健康構(gòu)成直接威脅，人與病畜禽接觸，往往會被感染，表現(xiàn)感冒樣癥狀、眼疾和孕婦流產(chǎn)等。因此加強(qiáng)對本病的口岸檢疫具有十分重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。衣原體屬包括：鸚鵡熱衣原體（Chlanyaiapsillaci）、反動物衣原體(Chlamydiapecorwm）、沙眼衣原體（Chlamydiairachomalis）利肺炎衣原體（ChlamrydiaDneumoniae），這4種衣原體具有共同的特異性屬抗原。引起動物衣原體病的病原主要為鸚鵡熱衣原體和反臺動物衣原體，而沙眼衣原體感染豬一般呈陶性經(jīng)過。在80年代，衣原體病補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CF)操作規(guī)程和間接血凝試驗(yàn)（IHA）操作規(guī)程已被分別納入農(nóng)業(yè)部頒布的動物檢疫規(guī)程，多年來被廣泛地用于畜禽衣原體病監(jiān)測和診斷。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B、附錄C、附錄E和附錄F為規(guī)范性附錄，附錄D為資料性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所，本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：邱昌慶、高雙娣、周繼章、楊學(xué)禮

NY/T562—2002動物衣原體病診斷技術(shù)1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CF)的直接法與間接法和間接血毅試驗(yàn)（IHA)技術(shù)：本標(biāo)準(zhǔn)的直接補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（DCF)適用于豬以外的哺乳動物和鸚鵡、鴿(老齡鴿除外)衣原體病的進(jìn)出境檢疫和定性診斷，間接補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(ICF)適用于禽鳥(鸚鵡、鴿除外.但包括老齡鴿)和豬衣原體病的進(jìn)出境檢疫和定性診斷；IH八試驗(yàn)適用于動物衣原體病的產(chǎn)地檢疫、疫情監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CF）2.1材料準(zhǔn)備2.1.1器材：12mm×37mm試管、試管架、水浴箱、U型96(8×12)孔微量滴定板、生理鹽水。2.1.2補(bǔ)體：商品補(bǔ)體.按說明書使用和保存，試驗(yàn)前對供試補(bǔ)體需經(jīng)補(bǔ)體效價(jià)滴定。補(bǔ)體效價(jià)滴定方法見附錄A。2.1.3溶血素：試驗(yàn)的對供試溶血素需經(jīng)效價(jià)滴定。溶血素效價(jià)滴定見附錄B.2.1.41%綿羊紅細(xì)胞懸液,制備方法見附錄C。敏化紅細(xì)胞制備見第A.2章。2.1.5被檢血清，應(yīng)無溶血、無腐敗(可加人0.01%硫柳汞或0.2%疊氮鈉防腐),試驗(yàn)前需火能。不同畜禽血清滅能的溫度和時(shí)間見附錄D。2.1.6標(biāo)準(zhǔn)抗原和標(biāo)準(zhǔn)陽性、陰性血消(抗原和陽性血清效價(jià)滴定的方法見附錄E）指示血清！2.2操作方法2.2.1直接補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(DCF）包括試管法和微最法）2.2.1.1試管法按表1的程序操作。試驗(yàn)要同時(shí)設(shè)抗補(bǔ)體對照、陽性血清對照、陰性血清對照、抗原對照、溶血素對照和生理鹽水對照。2.2.1.2微量法用U型96孔反應(yīng)板，按表2的程序操作。試驗(yàn)同時(shí)設(shè)抗補(bǔ)體對照、陽性血清對照、陰性血清對照、抗原對照、溶血素對照和生理鹽水對照。2.2.1.3DCF試驗(yàn)結(jié)果判定在最后一次37C水浴30min后，立即進(jìn)行試驗(yàn)結(jié)果判定直接補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（試管法）單位為率升被檢血清陰性陽性