輸血前傳染性疾病指標(biāo)的臨床運(yùn)用

輸血前傳染性疾病指標(biāo)的臨床運(yùn)用第一頁，共三十九頁，2022年，8月28日按照衛(wèi)生部《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》相關(guān)規(guī)定,要求對(duì)輸血前和手術(shù)前(包括產(chǎn)前)患者進(jìn)行血液傳播性疾病的血清指標(biāo)檢測，即乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒抗體(抗HCV)、人類免疫缺陷病毒(Ⅰ型,Ⅱ型)抗體(抗HIVl/2)、梅毒抗體（TP）四項(xiàng)傳染性指標(biāo)。我國2012年發(fā)布的《中國丙型病毒性肝炎醫(yī)院感染防控指南》中要求：進(jìn)行外科手術(shù)及侵入性診療操作(所有涉及外科操作的內(nèi)科、內(nèi)鏡以及婦科、產(chǎn)科、牙科等的常規(guī)醫(yī)療操作)患者在進(jìn)行操作前篩查丙肝病毒抗體；血液透析患者首次血液透析前應(yīng)進(jìn)行丙肝病毒抗體檢測，丙肝病毒抗體陰性者在血透中建議定期(半年)進(jìn)行丙型病毒性肝炎的篩查這對(duì)于避免醫(yī)源性感染、預(yù)防醫(yī)務(wù)人員的職業(yè)感染，防止出現(xiàn)醫(yī)療糾紛有積極意義。第二頁，共三十九頁，2022年，8月28日為保障廣大人民群眾的身體健康，提高人口素質(zhì)，有效控制病毒性肝炎（HBV、HCV）艾滋病和梅毒等傳染性疾病的傳播，加強(qiáng)肝炎、艾滋和梅毒等傳染病的預(yù)防與控制工作，國家制定了《中華人民共和國傳染病防治法》、《艾滋病防治條例》及最新的《中國預(yù)防與控制梅毒規(guī)劃（2010-2020年）》。第三頁，共三十九頁，2022年，8月28日主要內(nèi)容HBV感染與檢測HCV感染與檢測HIV感染與檢測TP感染與檢測第四頁，共三十九頁，2022年，8月28日HBsAgPrevalence>8%-High2-7%-Intermediate<2%-LowHBV是全球衛(wèi)生問題，約有20億人曾感染過乙肝慢性HBV感染者約有3.5億,感染率最高的區(qū)域在亞洲,非洲.乙肝全球流行分布圖第五頁，共三十九頁，2022年，8月28日HBV感染的轉(zhuǎn)歸慢性HBV感染

成年期感染5%-10%%

肝硬化肝功能衰竭肝細(xì)胞癌

慢性乙型肝炎5年發(fā)生率12%-25%5年發(fā)生率5%-15%5年發(fā)生率20%-23%肝移植嬰兒期感染85%-95%急性HBV三部曲第六頁，共三十九頁，2022年，8月28日《慢性乙型肝炎防治指南》（2015年版）血清學(xué)檢測HBsAg/HBsAbHBeAg/HBeAbHBcAb/HBcAb-IgM病原學(xué)檢測HBV-DNAHBV基因型和變異指南推薦HBsAg作為HBV感染的標(biāo)志物，陽性表示HBV感染，同時(shí)明確指出，血清HBsAg定量檢測可用于預(yù)測疾病進(jìn)展，抗病毒療效和預(yù)后第七頁，共三十九頁，2022年，8月28日慢性乙型肝炎治療終點(diǎn)——《慢性乙型肝炎防治指南》（2015年版）第八頁，共三十九頁，2022年，8月28日ELISA檢測HBsAg的問題定量及溯源性：國產(chǎn)ELISA試劑為定性檢測，無法溯源到WHO國際標(biāo)準(zhǔn)，不能對(duì)病人進(jìn)行動(dòng)態(tài)定量監(jiān)測精密度：ELISA試劑通過批批檢的精密度要求為CV＜15%。實(shí)驗(yàn)室實(shí)際HBsAg測定結(jié)果的批間CV一般為25%左右敏感性：目前發(fā)現(xiàn)獻(xiàn)血員中所發(fā)現(xiàn)的HBsAg攜帶者最低含量為0.2ng/ml。國產(chǎn)ELISA試劑的敏感性水平多為0.5ng/ml左右，對(duì)極低含量的HBsAg攜帶者可能出現(xiàn)漏檢第九頁，共三十九頁，2022年，8月28日

ELISA檢測HBsAg的問題突變株：S基因發(fā)生突變可導(dǎo)致HBsAg的抗原決定簇發(fā)生改變?？捎绊懪c相應(yīng)抗體的結(jié)合，從而出現(xiàn)HBsAg假陰性結(jié)果特異性：ELISA影響因素多，采用400nm波長比色，出現(xiàn)假陽性結(jié)果的可能性較大，在弱反應(yīng)性的標(biāo)本中更為常見第十頁，共三十九頁，2022年，8月28日HBsAg化學(xué)發(fā)光定量檢測優(yōu)秀的突變檢測能力（混合單克隆抗體，小分子標(biāo)記物）儀器自動(dòng)化檢測，發(fā)光物質(zhì)穩(wěn)定，精密度高（<10%）敏感性高（0.03~0.05IU/ml）表面抗原的定量檢測是評(píng)定乙肝治療效果的顯著預(yù)測因素血清HBsAg定量與cccDNA水平有較好的相關(guān)性，判斷理想的治療終點(diǎn)第十一頁，共三十九頁，2022年，8月28日HBVcccDNA與HBsAg相關(guān)性cccDNA是乙肝病毒前基因組RNA復(fù)制的原始模板，只有清除了細(xì)胞核內(nèi)的cccDNA，才能徹底消除乙肝患者病毒攜帶狀態(tài)，是抗病毒治療的目標(biāo)慢乙肝患者外周血中幾乎檢測不到cccDNA血清HBsAg濃度與cccDNA相關(guān)NewinsightonhepatitisBviruspersistencefromthestudyofintrahepaticviralcccDNA，JournalofHepatology,Volume42,Issue3,March2005,Pages302-308第十二頁，共三十九頁，2022年，8月28日最常見的HBsAg突變位點(diǎn)第十三頁，共三十九頁，2022年，8月28日評(píng)估13種常見變異株,ELISA只能檢測其中的3種.

第十四頁，共三十九頁，2022年，8月28日高敏發(fā)光：常見突變位點(diǎn)全部檢出第十五頁，共三十九頁，2022年，8月28日HBsAg定量檢測：優(yōu)勢和價(jià)值優(yōu)勢價(jià)值兩步法檢測，避免HOOK效應(yīng)結(jié)果可靠，減少糾紛定量檢測，單位IU/mL抗病毒療效監(jiān)測及預(yù)測，改善患者預(yù)后W.H.O標(biāo)準(zhǔn)品溯源結(jié)果可比，減少重復(fù)檢查，減輕患者負(fù)擔(dān)

高靈敏度，0.03-0.05IU/mL縮短窗口期，改善患者預(yù)后及臨床滿意度優(yōu)異的突變檢測能力避免漏檢，減少糾紛多基因型檢測能力防止漏檢，減少糾紛第十六頁，共三十九頁，2022年，8月28日抗-HBs定性檢測（有無應(yīng)答標(biāo)志）機(jī)體對(duì)乙肝病毒產(chǎn)生抵抗力的標(biāo)志疫苗注射后免疫成功的標(biāo)志抗-HBs定量檢測第十七頁，共三十九頁，2022年，8月28日疫苗接種完成后1個(gè)月抗體濃度達(dá)到高峰第十八頁，共三十九頁，2022年，8月28日無應(yīng)答者:無抗體產(chǎn)生(5%)加強(qiáng)劑量復(fù)種低應(yīng)答者:<10IU/L(10%)加強(qiáng)劑量復(fù)種中應(yīng)答者:10-100IU/L(65%)無須復(fù)種高應(yīng)答者:>100IU/L(20%)無須復(fù)種乙肝疫苗注射效果評(píng)價(jià)

定量是應(yīng)答水平評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)血清HBsAb定量可用于評(píng)價(jià)乙肝疫苗接種的效果第十九頁，共三十九頁，2022年，8月28日主要內(nèi)容HBV感染與檢測HCV感染與檢測HIV感染與檢測TP感染與檢測第二十頁，共三十九頁，2022年，8月28日HCV-沉默的殺手全球感染率2.8%，中國感染率0.43%慢性化比例高達(dá)70%第二十一頁，共三十九頁，2022年，8月28日2004HCVaudiowebconference,Dr.ERSchiff,MiamiUniversity,FloridaSymptoms+/-TimeafterExposureTiteranti-HCVALTNormal01234561234YearsMonthsHCV-RNAHCVCoreAgSymptoms+/-TimeafterExposureTiteranti-HCVALTNormal01234561234YearsMonthsHCV-RNAHCVCoreAgPersistentCase:70%CuredCase:30%HCV

感染的典型血清學(xué)模式急性HCV感染被完全治愈急性HCV感染轉(zhuǎn)為慢性感染急性HCV感染的兩種臨床結(jié)果（血清學(xué)模式）：2015年版中國丙型肝炎防治指南推薦以抗-HCV作為HCV感染者的篩查第二十二頁，共三十九頁，2022年，8月28日抗-HCV檢測的窗口期3rdgenerationHCVantibodytestsHCV感染3rdgen二代試劑82天一代試劑140-150天3代試劑70天強(qiáng)生第三代，Roche、Sysmex、Abbott、Siemens等均為第二代第二十三頁，共三十九頁，2022年，8月28日化學(xué)發(fā)光與ELISA檢測敏感度比較幾種丙肝抗體檢測的臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)，現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012本試驗(yàn)中所有初篩陽性及三種方法檢測不一致標(biāo)本均以HCV-RNA進(jìn)行確認(rèn)，結(jié)果僅有1例HCV-RNA為陰性，其余均為陽性，可能是由于窗口期導(dǎo)致發(fā)光法漏檢，無誤診，而兩種ELISA方法漏檢隸屬分別為14例和12例，兩例誤診（RF強(qiáng)陽性/較嚴(yán)重溶血）第二十四頁，共三十九頁，2022年，8月28日高危人群篩查：血透患者血透患者感染丙肝屢見報(bào)道第二十五頁，共三十九頁，2022年，8月28日為什么血透患者為丙肝高危人群？長期血液透析病人多為慢性腎功能衰竭病人，機(jī)體免疫力低下，免疫系統(tǒng)較難發(fā)生免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體，導(dǎo)致HCV抗體檢測的窗口期延長。對(duì)于血透人群只用HCV抗體篩查，會(huì)導(dǎo)致大量漏檢，增加血透病人感染風(fēng)險(xiǎn)！第二十六頁，共三十九頁，2022年，8月28日丙肝血清學(xué)圖譜核心抗原檢測:12-15天抗體檢測：70天明顯縮短窗口期！有條件建議對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)人群開展HCV核心抗原檢測第二十七頁，共三十九頁，2022年，8月28日主要內(nèi)容HBV感染與檢測HCV感染與檢測HIV感染與檢測TP感染與檢測第二十八頁，共三十九頁，2022年，8月28日中國HIV的流行分布截至2013年9月，聯(lián)合國艾滋病規(guī)劃署（UNAIDS）公布中國HIV感染人數(shù)850，000中國艾滋病每天死8000人，每天新患1.5萬第二十九頁，共三十九頁，2022年，8月28日02030405060708090100IgGHIV1病毒裂解產(chǎn)物敏感性特異性無IgM無

HIV21983-85Sensitivity%2002P24+IgG+IgMHIV1&HIV2重組抗原合成多肽敏感性>99.9%特異性>99.9%第4代IgG+IgMHIV1&HIV2重組抗原合成多肽

1994P24抗原IgGHIV1+HIV2重組抗原敏感性特異性無IgM1987-90第3代第2代第1代敏感性特異性HIV-1O組血清學(xué)檢測HIV技術(shù)的進(jìn)展第三十頁，共三十九頁，2022年，8月28日01020405060708090100365301代抗體檢測3代抗體檢測P24抗原檢測4代Ag+Ab檢測172231窗口期:3-5天‘靈敏的’聯(lián)檢3代HIV抗體EIAHIVp24Agp24AgEIA抗HIV抗體1代HIV抗體EIA

HIVAg+Ab聯(lián)合檢測縮短窗口期Adaptedfrom:FiebigetalAIDS,17:1871-1879(2003)感染早期，在HIV抗體產(chǎn)生之前就可以檢出HIVp24抗原。HIV抗原抗體(Ag+Ab)聯(lián)檢檢出HIV感染的時(shí)間比HIV抗體檢測早3-5天第三十一頁，共三十九頁，2022年，8月28日化學(xué)發(fā)光與ELISA檢測敏感度比較CLIA>ECLIA>ELISA三種不同技術(shù)原理的第4代HIV診斷試劑的臨床檢測性能比較研究中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志2013年雅培羅氏佰樂注：血清轉(zhuǎn)換盤來源于已經(jīng)確診HIV感染，且已知感染HIV的時(shí)間第三十二頁，共三十九頁，2022年，8月28日編號(hào)血清盤結(jié)果ABBOTT結(jié)果ROCHE結(jié)果Sysmex結(jié)果SIMENS結(jié)果2R702.25R374.9R361.157R>50R3R887.257R1834R>500.000R>50R5R35.387R44.17R49.821R>50R6R100.847R78.74R59.879R3.96R8R57.587R35.69R69.446R>50R9R435.559R247.1R>500.000R0.08N10N0.101N0.264N0.019N0.08N11R57.321R18.07R61.642R<0.05N12R20589R10.08R64.298R0.08N14R849.715R61.74R>500.000R0.27N15R36.643R18.76R104.201R0.11N17R160.909R89.34R419.387R14.71R19R87.388R37.41R166.591R0.09N20N0.107N0.282N0.043N0.15N21R27.169R9.42R61.493R>50R22R7.243R3.52R16.17R1.23R23R3.329R2.3R6.998R<0.05N25R2.569R1.35R7.094R0.07N血清轉(zhuǎn)換盤檢測結(jié)果第三十三頁，共三十九頁，2022年，8月28日主要內(nèi)容HBV感染與檢測HCV感染與檢測HIV感染與檢測TP感染與檢測第三十四頁，共三十九頁，2022年，8月28日

診察臨床癥狀初期硬結(jié)、硬性下疳、扁平濕疣等病原學(xué)檢查原理：一期、二期梅毒時(shí)，取硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損部位組織液或淋巴結(jié)穿刺術(shù)得到的組織液，在暗視野顯微鏡下，光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發(fā)出亮光，從而根據(jù)其特殊形態(tài)和運(yùn)動(dòng)方式進(jìn)行檢測。方法：（1）暗視顯微鏡檢查（2）鍍銀染色法（3）核酸檢測血清學(xué)檢查梅毒螺旋體抗體（TP）檢測法脂質(zhì)抗體檢測法梅毒診斷方法第三十五頁，共三十九頁，2022年，8月28日

感染梅毒4周左右產(chǎn)生IgG型抗梅毒螺旋體抗體，即使經(jīng)足量抗梅治療，梅毒螺旋體抗原消失后很長時(shí)間，IgG抗體仍可通過記憶細(xì)胞的作用繼續(xù)產(chǎn)生，甚至終生在血清中可測出另一種具有抗體性質(zhì)的物質(zhì)叫反應(yīng)素(reagin)，是梅毒螺旋體破壞人體組織過程中釋放出的一種抗原性心磷脂刺激機(jī)體所產(chǎn)生的抗體。反應(yīng)素一般在感染后5～7周（或下疳出現(xiàn)后2～3周）產(chǎn)生，經(jīng)正規(guī)治療后可逐漸消失。感染梅毒后，首先產(chǎn)生IgM型抗梅毒螺旋體抗體，感染2周后即可測出，早