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選修1專題2課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)教案一、課題目標(biāo).知識目標(biāo)祇了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識。反了解消毒和滅菌方法。.能力目標(biāo)a.進(jìn)行無菌技術(shù)操作。b.進(jìn)行微生物培養(yǎng)。.情感目標(biāo)形成勇于實(shí)踐、嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的科學(xué)態(tài)度和科學(xué)精神。二、課題重點(diǎn)無菌技術(shù)操作。三、課題難點(diǎn)無菌技術(shù)操作。四教學(xué)流程教學(xué)流程教師活動學(xué)生活動設(shè)計(jì)意圖環(huán)節(jié)課程導(dǎo)入.專題導(dǎo)入:提供章頁圖材料和微生物相關(guān)圖片,講解微生物與人類的密切關(guān)系,導(dǎo)入本專題。材料:生物學(xué)的發(fā)展史表明,諸多革命性改變?nèi)祟悓ιJ(rèn)識的事件,都與微生物有著千絲萬縷的聯(lián)系。例如,肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì),青霉素的發(fā)現(xiàn),第一個(gè)在和DNA分子的體外構(gòu)建等。微生物包括五類:病毒、細(xì)菌、放線菌、真菌、野生動物。.課題導(dǎo)入:講解課題背景和課堂目標(biāo)。課題背景:19世紀(jì)中期,關(guān)系到法國經(jīng)濟(jì)命脈的釀造業(yè)曾一度遭受毀滅性打擊。在生產(chǎn)過程中,出現(xiàn)了葡萄酒變酸、變味的怪事。經(jīng)過一番研究,法國科學(xué)家巴期德發(fā)現(xiàn),導(dǎo)致生產(chǎn)失敗的根源在于發(fā)酵物混入雜菌。由此人們認(rèn)識到保持培養(yǎng)物純凈的重要性。防止雜菌入侵,獲得純凈的培養(yǎng)物,是研究和應(yīng)用微生物的前提。在實(shí)驗(yàn)室培閱讀、傾聽。情景導(dǎo)入本章和本節(jié)目標(biāo)。
養(yǎng)微生物,一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件,另一方面需要確保其他微生物無法混入。在本課題,我們將通過培養(yǎng)大腸桿菌實(shí)驗(yàn),學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)的基本技術(shù)。課題目標(biāo):祇了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識;b.進(jìn)行無菌技術(shù)的操作;環(huán)節(jié)* ?:講授新課c.進(jìn)行微生物的培養(yǎng)。一、基礎(chǔ)知識(一)培養(yǎng)基環(huán)節(jié)* ?:講授新課c.進(jìn)行微生物的培養(yǎng)。一、基礎(chǔ)知識(一)培養(yǎng)基.概念:講解培養(yǎng)基概念:由人工方法配制而成的,專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)基質(zhì)。.種類標(biāo)淮了培養(yǎng)基類型#配制特點(diǎn)主要應(yīng)用口胡理性質(zhì)*固固培養(yǎng)基#加入瓊脂較多口菌種分離,短,計(jì)數(shù)口半周體埼養(yǎng)基F加入瓊脂較少F菌種保存-液體培養(yǎng)基*不加入瓊脂。工業(yè)生凡正饃強(qiáng)養(yǎng)「展示培養(yǎng)基相關(guān)圖片,講解根據(jù)物理性質(zhì)劃分的培養(yǎng)基種類、用途。讀、聽。了解工口養(yǎng)基相關(guān)知識。3.成分(1)基本成分展示1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成表格,讓學(xué)生分析回答問題。3.成分(1)基本成分展示1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成表格,讓學(xué)生分析回答問題。培養(yǎng)基成分提供的主要營養(yǎng)物質(zhì)牛肉膏5g碳源、磷酸鹽和維生素蛋白胨10g氮源和維生素NaCl5g無機(jī)鹽H2O定容至1000ml氫元素、氮元素問題1:培養(yǎng)基包括哪些基本成分?分析、回答。水、碳源、氮源、無機(jī)鹽問題2:從細(xì)胞的化學(xué)元素組成來看,培養(yǎng)基中為什么都含有這些營養(yǎng)成分?C、H、O、N、P、S是構(gòu)成細(xì)胞原生質(zhì)的基本元素,約占原生質(zhì)總量的97%以上。【小結(jié)】共同歸納培養(yǎng)基的基本成分和主要來源。營養(yǎng)物質(zhì)含義主要來源碳源能提供碳元素的物質(zhì)無機(jī)物:CO2、NaHCO3;有機(jī)物:糖類、脂肪酸、石油、花生粉餅等營養(yǎng)物質(zhì)含義主要來源碳源能提供碳元素的物質(zhì)無機(jī)物:CO2、NaHCO3;有機(jī)物:糖類、脂肪酸、石油、花生粉餅等納、氮源能提供氮元素的物質(zhì)無機(jī)物:N2、NH3、氨鹽、硝酸鹽;有機(jī)物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等答。傾聽、閱讀、思考、回答。比較、回答。了解消毒和滅菌方法。水細(xì)胞生命活動必不可少的物質(zhì)培養(yǎng)基、大氣、代謝產(chǎn)物無機(jī)鹽提供除碳、氮兀素以外的各種重要元素,包括某些大量元素培養(yǎng)基、大氣(2)特殊成分和條件提醒學(xué)生培養(yǎng)基還需要滿足不同微生物生長對PH、氧氣、特殊營養(yǎng)物質(zhì)的要求:如乳酸桿菌時(shí)需要添加維生素,霉菌需要將培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)為酸性,細(xì)菌時(shí)需要將pH調(diào)節(jié)為中性或微堿性。(二)無菌技術(shù)講解:無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中,所有防止雜菌污染的方法。強(qiáng)調(diào)無菌操作是培養(yǎng)微生物成功的關(guān)鍵。.主要方面講解無菌技術(shù)主要方面:(1)對實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒;(2)將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行火菌;(3)為避免周圍微生物污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近旁進(jìn)行;(4)避免已火菌處理的材料用具與周圍物品相接觸。.消毒與火菌的比較列表讓學(xué)生進(jìn)行比較。項(xiàng)目理化因素強(qiáng)度消滅微生物數(shù)量是否消滅芽抱和抱子消毒溫和部分否火菌強(qiáng)烈全部是3.常用的消毒與火菌的方法讓學(xué)生閱讀教材“實(shí)驗(yàn)室常用的消毒和火菌方法”材料,共同歸納常用的消毒與火菌的方法,回答問題。(1)消毒方法:①日常生活經(jīng)常用到的是煮沸消毒法;②對一些不耐高溫的液體,則使用巴氏消毒法(作簡要介紹);③對接種室、接種箱或超凈工作臺首先噴灑石炭酸或煤酚皂等溶液以增強(qiáng)消閱讀、閱讀、歸納、回答。④實(shí)驗(yàn)操作者的雙手使用酒精進(jìn)行消毒;⑤飲水水源用氯氣進(jìn)行消毒。(2)滅菌方法:①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。問題1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有什么目的?還能有效避免操作者自身被微生物感染。問題2.請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要,請選擇合適的方法。(1)培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿;(2)玻棒、試管、燒瓶和吸管;(3)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手(1)、(2)需要滅菌;(3)需要消毒?!镜湫屠}】(2015?江蘇)做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí),下列敘述正確的是()演練、回演練、回答。B.倒平板時(shí),應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上進(jìn)行無菌技術(shù)操作。口為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落進(jìn)行無菌技術(shù)操作。D.用記號筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí),應(yīng)標(biāo)記在皿底上【答案】D二、實(shí)驗(yàn)操作(一)制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基讓學(xué)生閱讀教材,講解制備步驟:.計(jì)算:根據(jù)配方比例,計(jì)算100mL培養(yǎng)基各成分用量。.稱量:準(zhǔn)確稱取各成分。稱取牛肉膏和蛋白胨時(shí)動作要迅速,目的是防止牛肉膏吸收空氣中水分。.溶化:①加水加熱熔化牛肉膏;②加入蛋白胨和氯化鈉繼續(xù)加熱;③加入瓊脂;④用蒸餾水定容到100mL。整個(gè)過程不斷用玻棒攪拌,目的是防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。.調(diào)pH:用1mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至偏堿性。.滅菌:將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中,加塞包扎后用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌;所用培養(yǎng)皿用報(bào)紙包扎后用干熱滅菌箱滅菌。.倒平板:待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)在酒精燈火焰附近操作進(jìn)行。閱讀、傾聽、思考、回答?!痉椒c(diǎn)撥】倒平板的方法及注意事項(xiàng)閱讀、傾聽、思考、回答。圖文講解倒平板的方法及注意事項(xiàng),讓學(xué)生回答問題。①火焰旁右手拿錐形瓶,左手拔出棉塞;②右手拿錐形瓶,使錐形瓶的瓶口迅速通過火焰;③左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙,右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,立刻蓋上皿蓋。④待平板冷卻凝固后,將平板倒過來放置。問題1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時(shí),才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?問題2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?問題3.平板冷凝后,為什么要將平板倒置?問題4.在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?(二)純化大腸桿菌講述:微生物接種方法很多,最常用的接種方法有:平板劃線法和稀釋涂布平
板法。.平板劃線法(1)定義和目的講解平板劃線法定義和目的:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)回線的操作,將聚集的菌鐘逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次回線后,可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是菌落。分離后,一個(gè)菌體便會形成一個(gè)菌落,這是消除污染雜菌的通用方法,也是用于篩選菌株的最簡便方法之一。(2)操作步驟讓學(xué)生閱讀教材平板劃線法操作圖文資料,講解操作步驟,讓學(xué)生回答問題。①將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒直至燒紅。②在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán),并打開大腸桿菌的菌種試管的棉塞。③將菌種試管□通過火焰達(dá)到消滅試管口雜菌的目的。④將冷卻的接種環(huán)伸入到菌液中取出一環(huán)菌種。⑤將菌種試管口再次通過火焰后塞上棉塞。⑥將皿蓋打開一條縫隙,把接種環(huán)伸入平板內(nèi)劃3?5條平行線,蓋上皿蓋,不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基。⑦灼燒接種環(huán),冷卻后從第一區(qū)劃線末端開始向第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)上述過程,完成三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將第五區(qū)的劃線與第一區(qū)劃線相連。⑧將平板倒置放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。問題1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?問題2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?問題3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?.稀釋涂布平板法(1)定義和目的講解定義和目的:將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋,并將不同稀釋度菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí),即可獲得單個(gè)細(xì)菌形成傾聽、思考。閱讀、傾聽、思考、回答。進(jìn)行微生物培養(yǎng)。的標(biāo)準(zhǔn)菌落。(2)操作步驟讓學(xué)生閱讀教材稀釋涂布平板法的系列稀釋操作和涂布平板操作圖文材料,講解相關(guān)操作步驟,讓學(xué)生回答問題。系列稀釋操作之混勻。涂布平板操作【典型例題】將涂布㈱松在盛有灑粕的燒林中將沾有少量酒精的涂布耨在火始上弓?燃r待酒祐燃,西■jGSa1c令去1n$①取盛有9mL的標(biāo)準(zhǔn)菌落。(2)操作步驟讓學(xué)生閱讀教材稀釋涂布平板法的系列稀釋操作和涂布平板操作圖文材料,講解相關(guān)操作步驟,讓學(xué)生回答問題。系列稀釋操作之混勻。涂布平板操作【典型例題】將涂布㈱松在盛有灑粕的燒林中將沾有少量酒精的涂布耨在火始上弓?燃r待酒祐燃,西■jGSa1c令去1n$①取盛有9mL水的無菌試管6支,傾聽、閱讀、思考、回答。編號101、102、103、104、105、106。②用灼燒冷卻的移液管吸取1mL菌液
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