長(zhǎng)壽家系外周血白細(xì)胞端粒長(zhǎng)度測(cè)定,人體生理學(xué)論文

長(zhǎng)壽家系外周血白細(xì)胞端粒長(zhǎng)度測(cè)定,人體生理學(xué)論文端粒是位于染色體末端的特殊構(gòu)造，對(duì)于維持染色體的穩(wěn)定具有重要作用。端粒長(zhǎng)度〔TL〕會(huì)隨著細(xì)胞的分裂進(jìn)行性縮短。當(dāng)TL縮短到達(dá)某個(gè)界線時(shí)，端粒對(duì)染色體末端的保衛(wèi)作用消失，進(jìn)而出現(xiàn)細(xì)胞的復(fù)制性衰老，因而，TL可用作細(xì)胞或個(gè)體衰老的生物學(xué)標(biāo)記之一〔1〕.白細(xì)胞端粒長(zhǎng)度〔LTL〕隨年齡增大呈現(xiàn)的動(dòng)態(tài)變化形式可綜合反映端粒的遺傳狀況、修復(fù)能力、機(jī)體的炎癥程度及氧化應(yīng)激水平，忠實(shí)地記錄細(xì)胞和機(jī)體的整個(gè)生命歷程和生物學(xué)年齡，因而被以為是重要的衰老生物學(xué)標(biāo)記。當(dāng)前，用體細(xì)胞進(jìn)行端粒動(dòng)態(tài)變化的研究多使用白細(xì)胞作為模型〔2〕.廣西巴馬地區(qū)因其獨(dú)特的長(zhǎng)壽現(xiàn)象已成為研究人類(lèi)長(zhǎng)壽與衰老的基地之一。本研究對(duì)廣西巴馬地區(qū)長(zhǎng)壽家系外周血白細(xì)胞進(jìn)行相對(duì)TL的測(cè)定，討論LTL在長(zhǎng)壽家系內(nèi)的遺傳趨勢(shì)及其與長(zhǎng)壽的相關(guān)性。1材料與方式方法1.1對(duì)象主要為廣西巴馬地區(qū)長(zhǎng)壽家系〔BLF〕,共得到1301人，男744人，女557人，平均年齡〔55.3828.67〕歲；另設(shè)3個(gè)對(duì)照組，分別為本地的非長(zhǎng)壽家系〔BNLF〕,外地〔廣西百色地區(qū)平果縣〕的長(zhǎng)壽家系〔PLF〕及非長(zhǎng)壽家系〔PNLF〕.華而不實(shí)BNLF283人，男171人，女112人，平均年齡〔45.0526.81〕歲；PLF308人，男193人，女115人，平均年齡〔51.0630.25〕歲；PNLF482人，男302人，女180人，平均年齡〔39.6525.34〕歲，見(jiàn)表1.長(zhǎng)壽家系定義為調(diào)查時(shí)家系中至少有1位90歲的老人，非長(zhǎng)壽家系是與長(zhǎng)壽家系無(wú)血緣關(guān)系且家族史中無(wú)90歲的老人。研究對(duì)象均為壯族，采樣前已對(duì)受試群體進(jìn)行常規(guī)問(wèn)診和體檢，基本屬于健康群體。1.2標(biāo)本的采集與處理抽取每個(gè)研究對(duì)象上肢肘靜脈血4ml,ACD抗凝，凍存?zhèn)溆谩?.3研究方式方法解凍凍存的外周血，用經(jīng)典苯酚/氯仿法提取DNA,-20℃保存。TL測(cè)定參照文獻(xiàn)〔3,4〕.1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0軟件，LTL資料為偏態(tài)分布，進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)為正態(tài)分布。組間比擬用t檢驗(yàn)及協(xié)方差分析；LTL與年齡的相關(guān)關(guān)系用Spearson相關(guān)及偏相關(guān)分析。2結(jié)果2.1不同性別間的LTL除BNLF的40~年齡段和PLF的65~年齡段女性LTL明顯長(zhǎng)于男性外，各年齡段男性和女性的LTL均無(wú)明顯差異不同〔P0.05〕.見(jiàn)表2.2.2家系間LTL的比擬BLF90~年齡段的LTL明顯長(zhǎng)于PLF〔P=0.000〕,該趨勢(shì)在不同性別分層后仍存在。同時(shí)，BLF在除15年齡段外的其他年齡段的LTL顯著長(zhǎng)于PLF〔P=0.011〕.見(jiàn)表2.BLF65~年齡段〔近似于長(zhǎng)壽老人的第一胎子女〕的LTL長(zhǎng)于BNLF、PLF及PNLF〔均P=0.021〕三個(gè)對(duì)照家系；同時(shí)，BLF90~高齡段的LTL與三個(gè)對(duì)照家系65~年齡段的水平相當(dāng)〔P=0.232、0.675、0.521〕,提示BLF的子女可從親代中遺傳到較長(zhǎng)的端粒。見(jiàn)表2.2.3LTL與年齡的關(guān)系以性別和組別為控制變量，應(yīng)用偏相關(guān)分析顯示總體人群的LTL與年齡的相關(guān)系數(shù)為〔n=2374,r=-0.316,P=0.000〕;控制組別的偏相關(guān)分析顯示總體男性的LTL與年齡的相關(guān)系數(shù)為〔n=1410,r=-0.302,P=0.000〕,女性為〔n=964,r=-0.335,P=0.000〕;控制性別的偏相關(guān)分析顯示四個(gè)家系各自的LTL與年齡的相關(guān)系數(shù)分別為〔BLF:r=-0.303,P=0.000;BNLF:r=-0.327,P=0.000;PLF:r=-0.389,P=0.000;PNLF:R=-0.252,P=0.000〕.以上結(jié)果表示清楚，LTL隨年齡增大而逐步縮短，這種變化趨勢(shì)在性別分層后沒(méi)有變化。3討論本結(jié)果顯示隨年齡增大，LTL逐步縮短，與其他學(xué)者的結(jié)果〔5~7〕一致，也與我們對(duì)該群體口腔黏膜細(xì)胞端粒長(zhǎng)度〔OTL〕的研究結(jié)果一致〔3,4〕,講明LTL與衰老之間有密切關(guān)系，換言之，LTL能夠當(dāng)作衰老的生物學(xué)標(biāo)記之一。在各地的長(zhǎng)壽研究結(jié)果中，女性的數(shù)量明顯多于男性，本次調(diào)查也顯示長(zhǎng)壽女性的數(shù)量遠(yuǎn)多于男性，這與Tabatabaie等〔8〕、Boyden等〔9〕的研究結(jié)果一致，表示清楚女性個(gè)體在長(zhǎng)壽表型中有一定的優(yōu)勢(shì)〔3〕.有研究表示清楚〔10〕,女性的端粒長(zhǎng)于男性，其機(jī)制可能與雌激素的抗氧化效果有關(guān)。因而，有人揣測(cè)女性的LTL長(zhǎng)于男性，然而本次研究結(jié)果并非如此，各家系均沒(méi)顯示女性在LTL上的優(yōu)勢(shì)，盡管BNLF的40~年齡段和PLF的65~年齡段顯示了女性LTL長(zhǎng)于男性，但其可能與家系中年齡和性別構(gòu)成不同及樣本量過(guò)小有關(guān)。該結(jié)果與我們對(duì)該群體的OTL研究結(jié)果亦類(lèi)似〔3〕.表示清楚除LTL的變化對(duì)長(zhǎng)壽及衰老的影響外，遐齡的獲得可能還存在其他因素〔3〕.TL與人類(lèi)〔包括長(zhǎng)壽老人〕的生命壽限密切相關(guān)〔3,11〕.At-zmon等〔11〕對(duì)德系猶太百歲老人的研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)壽老人的第一代子女與其相匹配的普通人相比具有較長(zhǎng)的TL,講明TL在長(zhǎng)壽群體中有一定的遺傳優(yōu)勢(shì)。本研究中，該趨勢(shì)在不同性別中均存在。同時(shí)，BLF在除15年齡段外的其他年齡段的LTL顯著長(zhǎng)于PLF,這些差異可能主要受不同家系遺傳背景、自然環(huán)境等因素的影響。長(zhǎng)壽家系在巴馬地區(qū)較普遍，巴馬人群長(zhǎng)期以來(lái)寓居地偏遠(yuǎn)、交通閉塞，婚姻半徑小，致使其遺傳背景較單一。而平果地區(qū)的長(zhǎng)壽家系多為散發(fā)，遺傳背景相對(duì)復(fù)雜，工業(yè)污染相對(duì)較大。兩家系中處于較低年齡段個(gè)體的LTL比擬并無(wú)差異，但隨年齡的增加，卻出現(xiàn)了明顯變化，講明環(huán)境因素可能在LTL的縮短中起到一定作用。但我們的研究還僅僅是一項(xiàng)橫向研究，尚無(wú)法比擬兩家系間的LTL縮短率。BLF65~年齡段的LTL長(zhǎng)于BNLF、PLF及PNLF三個(gè)對(duì)照家系；同時(shí)，BLF90~高齡段的LTL與三個(gè)對(duì)照家系65~的水平相當(dāng)，該現(xiàn)象與Atzmon等〔11〕的結(jié)果類(lèi)似，他們解釋為遐齡者之所以擁有較長(zhǎng)的端粒，可能為生存差異所致，即端粒較短者由于各種衰老相關(guān)性疾病導(dǎo)致死亡而被淘汰出自然人群，獲得遐齡的個(gè)體因逃避了此類(lèi)疾病及其所致的端?？s短，故而端粒較長(zhǎng)，再遺傳給子代，使子代也保持了較長(zhǎng)的端粒。我們揣測(cè)BLF的LTL長(zhǎng)于PNLF,然而并沒(méi)有得到預(yù)測(cè)料想的結(jié)果。在PNLF15~年齡段的男性、65~年齡段的總體及女性中，均顯示了BLFLTL短于PNLF,分析原因可能與PNLF的年齡構(gòu)成偏小有關(guān)。首先，PNLF作為外地區(qū)的普通家系，沒(méi)有長(zhǎng)壽老人，導(dǎo)致其年齡構(gòu)成總體上低于BLF;其次，PNLF15歲年齡段的平均年齡均明顯低于BLF.值得注意的是，PLF的LTL總體水平也小于PNLF,其原因可能也與年齡構(gòu)成及樣本量的差異有關(guān)。因而，有必要加大樣本量進(jìn)一步核實(shí)。以下為參考文獻(xiàn)1EpelES,BlackburnEH,LinJ,etal.Acceleratedtelomereshorteninginresponsetolifestress〔J〕。ProcNatlAcadSciUSA,2004;101〔49〕:17312-5.2BenetosA,OkudaK,LajemiM,etal.Telomerelengthasanindicatorofbiologicalaging:thegendereffectandrelationwithpulsepressureandpulsewavevelocity〔J〕。Hypertension,2