艾滋病梅毒丙肝的檢測及解釋

關(guān)于艾滋病梅毒丙肝的檢測及解釋第一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三HIV實驗室檢測第二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三

檢測樣本HIV抗體酶免--血清/血漿，尿液快速檢測--血清/血漿/全血，唾液CD4：抗凝全血病載、基因型、耐藥：血漿

第三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三樣本保存抗體檢測：短期（1周）內(nèi)進行檢測的可存放于2～8℃，一周以上應存放于-20℃以下。

篩查陰性樣品，建議至少保存1～2個月；篩查陽性樣品，無論確證結(jié)果如何，均應將剩余的樣品保存至少10年

核酸檢測：血漿4天內(nèi)進行檢測的可存放于4℃，3個月以內(nèi)應存放于-20℃以下，3個月以上應置于-70℃以下。CD4：室溫（18～25℃）保存和運輸。要求48小時內(nèi)染色，染色后6小時內(nèi)分析；如采血后24小時內(nèi)染色，可在染色后24小時內(nèi)分析。

第四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三HIV抗體檢測

篩查試驗酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）

化學發(fā)光或免疫熒光試驗

快速檢測（RT）

確證試驗

免疫印跡試驗（WB）條帶免疫試驗放射免疫沉淀試驗（RIPA）免疫熒光試驗（IFA）

第五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三初篩和復檢流程

樣品初篩試驗篩查試劑陽性反應陰性反應復檢試驗原有試劑+另一不同原理（或廠家）試劑或另外兩種不同原理（或廠家）試劑均陽性反應一陰一陽均陰性反應確證試驗報告陰性圖1HIV抗體篩查檢測流程第六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三確證流程

第七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三

質(zhì)量控制試劑盒內(nèi)部對照：按照試劑盒要求設置使用室內(nèi)質(zhì)控品：外購、陽性對照/樣本稀釋ELISA檢測

20次內(nèi)—即刻法質(zhì)控

20次后，Levey-Jennings質(zhì)控圖更換試劑廠家必須重新制作質(zhì)控圖，同種試劑不同批號可繼續(xù)使用（注明批號）發(fā)現(xiàn)失控、位移及時查找原因，必要時重新開始質(zhì)控快速檢測更換批號進行質(zhì)量驗證注意反應時間、溫度、數(shù)量控制第八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三設備檢定、維護強檢設備酶標儀、移液器、高壓鍋、溫度計（可自行比對）自行維護生物安全柜、洗板機、洗眼器、水平（梅毒）旋轉(zhuǎn)儀溫度控制冰箱、溫箱/水浴箱內(nèi)放置經(jīng)檢定（比對）的溫度計高壓滅菌放置指示卡洗眼器定期進行維護第九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三SOP文件（1）樣品的接收、登記、處理、保存和運輸；（2）檢測方法和步驟；（3）試劑使用和保存；（4）儀器的使用維護和校準；（5）質(zhì)量控制要求及程序；（6）結(jié)果解釋與報告；（7）保密程序；（8）實驗室數(shù)據(jù)、相關(guān)文件記錄與保存；（9）不確定樣品追蹤和處理；（10）實驗室安全防護及實驗室的清理和消毒。

第十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三實驗室記錄檢測登記表試驗原始記錄（ELISA、快速、RPR/TURST）報告單/化驗單復檢化驗單—篩查陽性填寫，信息收集完整儀器使用、維護保養(yǎng)記錄質(zhì)控資料消毒記錄廢棄物處理登記冰箱溫度記錄人員健康檔案（體檢、疫苗接種記錄，化驗單、體檢報告）

第十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三實驗室生物安全

實驗室：Ⅱ級生物安全實驗室（BSL-2）

建立安全制度：S-SOP、意外事故處理預案、信息安全及保密制度培訓和管理：全員培訓、標準防護原則個人防護：防護用品與設施、健康監(jiān)護安全操作：樣品采集與管理、儀器設備使用、利器使用消費與污物處理

第十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三梅毒實驗室檢測技術(shù)第十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三梅毒螺旋體--梅毒的病原體

分類：螺旋體目（Spirochaetales）螺旋體科（Spirochaetaceae）密螺旋體屬（Treponema）蒼白螺旋體種（Treponemapallidum）分幾個亞種第十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三梅毒螺旋體（TP）小而纖細的螺旋狀微生物長5～20μm，粗細<0.2μm有6～12個規(guī)則的螺旋基本結(jié)構(gòu)為一原生質(zhì)的圓柱體，為兩層膜所圍繞行動緩慢而有規(guī)律

-圍繞其長軸旋轉(zhuǎn)中前后移動

-伸縮其圈間之距離而移動

-全身彎曲如蛇行第十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三

生物學特性-1免疫性：人對TP產(chǎn)生細胞免疫和體液免疫。細胞免疫對感染過程的影響尚不清楚。特異性抗體：TP可導致人體產(chǎn)生多種抗體。其中TP的脂質(zhì)激發(fā)機體產(chǎn)生的特異性抗體，在初次感染后產(chǎn)生，保持終生，但對清除機體內(nèi)的TP無作用。另一些種特異性抗體可與很多種非致病性螺旋體發(fā)生交叉反應。第十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三生物學特性-2反應素：TP破壞機體組織，使組織釋放一種抗原性心磷脂,以及螺旋體自身的磷脂類物質(zhì)，可以激發(fā)機體產(chǎn)生反應素，能同從動物如牛心肌中提取的心磷脂發(fā)生反應，通過試驗來檢測。反應素水平與梅毒感染過程相平行，抗梅治療后約半年轉(zhuǎn)陰，但反應素并非感染TP后所特有。第十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三生物學特性-3致病性：自然條件下TP只感染人，尚未證明梅毒螺旋體能產(chǎn)生內(nèi)毒素和外毒素，致病機理尚不清楚。傳染性：感染早期傳染性最強，隨著病程的延長傳染性越來越小。臨床上未經(jīng)治療的病人，在感染后1～2年內(nèi)最具有傳染性，一般認為4年以上幾乎不通過性接觸傳染，但保持對胎兒的傳染性。抵抗力：TP在體外僅能存活數(shù)小時，40℃時失去傳染力，煮沸立即死亡；對干燥特別敏感，一般的消毒劑均能容易將其殺滅。血庫的血液和血漿中可存活24小時以上，三日后全部死亡。第十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三生存條件厭氧寄生物，在人體內(nèi)可長期生存，體外不易存活干燥、肥皂水及一般消毒劑如1:1000苯酚、新潔爾滅、酒精均可于短時間將其殺死在血液中4℃經(jīng)3日可死亡，故在血庫冰箱冷藏3日以上的血液就無傳染性溫度的影響：41-42℃時可生活1-2小時，在48℃僅半小時即失去感染力，100℃立即死亡。對寒冷抵抗力強，在0℃時，可生活48小時，如將梅毒病損標本置于冰箱內(nèi)，經(jīng)1周仍可致病。在低溫（-78℃）保存數(shù)年，仍可保持其形態(tài)、活動及毒性在封存的生理鹽水稀釋的組織液中可生活10小時左右在潮濕的器具或濕毛巾中，亦可生存數(shù)小時在干燥環(huán)境中可見迅速死亡第十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三宿主梅毒螺旋體只感染人類人是梅毒的唯一傳染源第二十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三傳播途徑性接觸是主要的傳染途徑未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性隨著病期的延長，傳染性越來越小到感染后4年，通過性接觸一般無傳染性母嬰傳播在妊娠7周時，梅毒螺旋體即可通過胎盤傳染（未經(jīng)治療者），病期>4年雖已無性傳播，但妊娠時仍可傳染給胎兒,病期越長，傳染性越小;第二十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三常用梅毒實驗室檢測方法病原學檢測血清學檢測第二十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三病原學檢查原理：一期、二期梅毒時，取硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損部位組織液或淋巴結(jié)穿刺術(shù)得到的組織液，在暗視野顯微鏡下，光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發(fā)出亮光，從而可根據(jù)其特殊形態(tài)和運動方式進行檢測。方法：（1）暗視顯微鏡檢查（2）鍍銀染色法（3）核酸檢測（血液標本？）注：梅毒螺旋體目前體外人工培養(yǎng)還沒有獲得成功，僅能通過接種兔睪丸等部位進行有限增殖。

第二十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三病原學檢查的臨床意義螺旋體檢查是診斷早期梅毒的最佳方法，對于患者的早期診斷、及時治療、預后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。如未見到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性。第二十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三梅毒血清學檢測方法(1)非梅毒螺旋體抗原血清學試驗（非特異性梅毒抗體）(2)梅毒螺旋體抗原血清學試驗（特異性梅毒抗體）兩類方法。問題：為什么梅毒診斷需要上述兩類血清學檢測方法？第二十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三非梅毒螺旋體抗原血清學試驗原理梅毒螺旋體一旦感染人體，宿主可對螺旋體表面的脂質(zhì)作出免疫應答，產(chǎn)生抗類脂抗原的抗體（非特異性抗體）。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的非特異性抗體可長期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，非特異性抗體可以逐漸減少滴度至轉(zhuǎn)為陰性。問題：臨床上非梅毒螺旋體抗原血清學試驗為什么需要做定性和定量兩種檢測方法？

第二十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三非梅毒螺旋體抗原血清學原理方法包括：（1）快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗(RPR)

（2）甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）（3）性病研究實驗室試驗(VDRL)等。基本成分是心磷脂卵磷脂和膽固醇抗原抗體結(jié)合形成復合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所見上述方法的敏感性和特異性都基本相似第二十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三非梅毒螺旋體抗原血清學試驗原理示意圖第二十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三非梅毒螺旋體抗原血清學試驗操作要點1、儀器：水平旋轉(zhuǎn)儀，轉(zhuǎn)速？轉(zhuǎn)幅？2、定性試驗加樣：吸取0.05mL血清(漿)放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個圈內(nèi)加抗原：將抗原輕輕搖勻，用9號針頭加1滴抗原反應：水平旋轉(zhuǎn)儀旋轉(zhuǎn)8分鐘(23℃-29℃），亮光下觀察結(jié)果？滴/mL，1滴=？ul第二十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三非梅毒螺旋體抗原血清學試驗操作要點1、儀器：水平旋轉(zhuǎn)儀，轉(zhuǎn)速、轉(zhuǎn)幅2、定性試驗加樣：吸取0.05mL血清(漿)放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個圈內(nèi)加抗原：將抗原輕輕搖勻，用9號針頭加1滴抗原反應：水平旋轉(zhuǎn)儀旋轉(zhuǎn)8分鐘(23℃-29℃），亮光下觀察結(jié)果60滴/mL，1滴=17ul100r/min約18mm第三十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三非梅毒螺旋體抗原血清學試驗操作要點3、定量試驗稀釋夜準備：在反應紙板圈內(nèi)加入50uL生理鹽水（根據(jù)需要確定圈數(shù)),勿將鹽水涂開加樣：吸取50uL血清（漿）與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布整個圈內(nèi)。下同定性試驗。？1:21:41:81:161:321:641:2561:1281:512定量試驗結(jié)果判斷血清稀釋度結(jié)果？1:21:41:81:16+----？++---？++++-？問題：定量試驗原倍血清滴度是多少？問題：定量試驗血清稀釋需要使用試管嗎？第三十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三非梅毒螺旋體抗原血清學試驗操作要點3、定量試驗稀釋夜準備：在反應紙板圈內(nèi)加入50uL生理鹽水（根據(jù)需要確定圈數(shù)),勿將鹽水涂開加樣：吸取50uL血清（漿）與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布整個圈內(nèi)。下同定性試驗。1:11:21:41:81:161:321:641:2561:1281:512定量試驗結(jié)果判斷血清稀釋度結(jié)果1:11:21:41:81:16+----1:1++---1:2++++-1:8第三十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三TRUST1:16非梅毒螺旋體抗原血清學試驗結(jié)果判斷RPR1:2561:11:21:41:81:161:11:21:41:81:161:321:641:1281:2561:5121:321:641:1281:2561:512第三十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三非梅毒螺旋體抗原血清學試驗臨床意義早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后一期梅毒1年后轉(zhuǎn)為陰性二期梅毒2年后轉(zhuǎn)為陰性。晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50%病人血清反應仍為陽性。第三十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三非梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義非梅毒螺旋體抗原血清試驗方法簡單、快速、敏感性和特異性較好。適用于大量人群的篩查。因治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療效觀察、判愈、復發(fā)或再感染的指征。梅毒病期敏感性(%)特異性(%)一期86（77-99）-二期100隱性98(95-100)（一般滴度>1:8，但不排除<1:8）晚期73非梅毒-98(93-99)第三十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三非梅毒螺旋體抗原血清學試驗特點假陽性反應技術(shù)性假陽性反應一般是由于操作錯誤引起的假陽性反應，經(jīng)過重復試驗即可排除。生物學假陽性反應(一般滴度小于1:8），應采用梅毒螺旋體抗原血清學試驗如TPPA等進行排除。假陰性反應：前帶現(xiàn)象、后帶現(xiàn)象血清固定：臨床問題第三十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三梅毒螺旋體抗原血清學試驗原理抗原為梅毒螺旋體特異蛋白（包括螺旋體重組特異抗原），檢測梅毒患者血中特異性抗梅毒螺旋體抗原的抗體。感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試驗呈陽性，則患者終身陽性。問題：梅毒螺旋體抗原血清學試驗的定量試驗在梅毒診療中有意義嗎？第三十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三梅毒螺旋體抗原血清學試驗方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(TPPA)

梅毒螺旋體血球凝集試驗(TPHA)梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）化學發(fā)光免疫分析法（CLIA）梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(RT)熒光螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗（WB）第三十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三TPPATPPA試驗用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒與人血清中的抗梅毒螺旋體抗體結(jié)合，產(chǎn)生可見的凝集反應，具有較高的敏感性和特異性。

TPPA是目前WHO公認的梅毒抗原血清學試驗的“金標準”，常用于新方法、新試劑的參照標準。第三十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三+明膠顆粒梅毒抗原+抗原致敏顆?？乖旅纛w粒血液中抗體抗原抗體凝集TPPA試驗原理示意圖第四十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三414+：粒子光滑覆蓋整個孔底，有時邊緣有折疊3+：粒子光滑覆蓋大部分底2+：粒子光滑聚集覆蓋孔底，周圍有一細胞環(huán)1+：粒子光滑集聚覆概孔底，周圍有一明顯細胞環(huán)±：粒子沉集孔底，中央形成一小點–：粒子緊密沉積孔底中央

TPPA試驗結(jié)果判讀敏感性特異性病期一期二期隱性臨床試驗a100100100美國CDC8810010095a:均為RPR陽性標本第四十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三ELISA/

CLIAELISA試驗是用重組梅毒螺旋體抗原包被固相板條，加上梅毒血清和單克隆抗體酶標記物，形成抗原抗體復合物與酶標記物結(jié)合，用酶聯(lián)檢測儀判定試驗陽性反應。本法可用于大樣本血清檢測?；瘜W發(fā)光法的臨床應用意義基本同ELISA化學發(fā)光法的敏感性？？第四十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三梅毒免疫層析快速檢測方法（全血法）第四十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三梅毒免疫層析快速檢測方法（血清、血漿法）第四十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義作為非梅毒螺旋體抗原血清試驗(如RPR等)初篩陽性標本的確證試驗，排除RPR假陽性。不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結(jié)果進行診斷。不能作為療效觀察的指標。第四十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三梅毒血清學試驗結(jié)果解釋（梅毒臨床診斷參考依據(jù)）

試驗結(jié)果參考結(jié)果解釋*梅毒螺旋體抗原血清試驗非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性陽性可能為現(xiàn)癥梅毒陰性陽性非梅毒螺旋體血清試驗假陽性陽性陰性臨床治愈的早期梅毒（既往感染者）或極早期梅毒陰性陰性排除梅毒感染或極早期梅毒問題：此結(jié)果解釋適用于先天（胎傳）梅毒嗎？第四十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三先天（胎傳）梅毒的實驗室診斷《預防艾滋病、梅毒和乙肝母嬰傳播工作實施方案》第四十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三梅毒暴露嬰兒的評估梅毒暴露嬰兒：嬰兒RPR檢測不能使用臍帶血，因其易被母體血液污染，從而出現(xiàn)假陽性結(jié)果檢查先天梅毒臨床表現(xiàn)：非免疫性水腫、黃疸、肝脾大、鼻炎、皮疹、末端肢體假性麻痹對可疑病灶或體液進行暗視野顯微鏡檢查第四十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三先天梅毒的實驗室檢測梅毒暴露嬰兒：

暗視野顯微鏡檢梅毒螺旋體陽性梅毒螺旋體IgM抗體陽性*RPR/TRUST檢測陽性，滴度比母親分娩前最近一次滴度高4倍及以上RPR/TRUST監(jiān)測隨訪中，任何一次滴度不下降或反而上升滿18月齡后，

TPPA檢測陽性（哪一類抗體？）*IgM抗體反映近期感染，可幫助鑒別嬰兒先天梅毒第四十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三梅毒IgM抗體（TP-IgM）IgM抗體的產(chǎn)生是感染后的早期體液免疫應答反應。IgM分子比IgG較大，所以IgM抗體不能通過胎盤屏障。而母親的IgG抗體可以通過胎盤屏障傳給胎兒。因此若在新生兒血中檢測到IgG抗體不能作為先天梅毒的診斷依據(jù)，而IgM抗體可為先天梅毒的診斷依據(jù)。IgM抗體檢測其特異性較高，IgM抗體反映近期感染，可幫助鑒別嬰兒先天梅毒。但敏感性較低，因此，IgM抗體檢測陰性，不能排除先天梅毒感染。第五十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三先天梅毒檢測流程

嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學試驗定量檢測梅毒暴露嬰兒母親、嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學試驗定量檢測組織或分泌物暗視野顯微鏡檢，有條件進行IgM抗體檢測報告母親、嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學試驗檢測滴度水平報告嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學試驗檢測滴度水平報告暗視野顯微鏡檢或IgM抗體檢測結(jié)果陽性陰性或沒有梅毒感染的癥狀有梅毒感染的癥狀

第五十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三

梅毒實驗室檢測策略思考方法選擇依據(jù)敏感性、特異性（試劑評估）操作流程（可及性）試劑的價格、結(jié)果時間（可接收性）根據(jù)目的選擇檢測方法及檢測策略?？刹捎萌魏我活惷范狙鍖W檢測方法作為篩查試驗。？初篩目的和方法選擇第五十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三第五十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三54陽性

梅毒螺旋體血清試驗

（ELISA）

陰性

報告：

ELISA陰性

陽性

RPR定性/定量試驗

陰性

推薦TPPA復檢

陽性

報告：

ELISA陽性

RPR陽性及滴度

果

陰性

報告：

ELISA陽性

TPPA陽性

RPR陰性

報告：

ELISA陽性

TPPA陰性

RPR陰性

報告：

ELISA陽性

RPR陰性

果

第五十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三非梅毒螺旋體抗原血清試驗快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗(RPR)甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）性病研究實驗室試驗(VDRL)血清學檢測試劑的種類梅毒螺旋體抗原血清試驗梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(TPPA)

梅毒螺旋體血球凝集試驗(TPHA)梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(RT)熒光螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS）化學發(fā)光免疫分析法（CLIA）梅毒IgM抗體檢測（IgM）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗（WB）第五十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三HCV的檢測及意義第五十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三

丙型病毒性肝炎為法定傳染性疾病。第五十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三Alberti,JHepatol1999;31:17-24Seef,Hepatology2002;36:S35-46Fanetal,WorldJGastroenterol2004;10:2867-2869感染后20年HCV感染患者比例100%慢性丙肝患者比例85%肝硬化患者比例10-50%肝癌患者比例1-23%丙肝相關(guān)死亡率患者比例4-15%在全球，丙肝是死亡率第十的傳染性疾病在中國，丙肝是死亡率第五的傳染性疾病丙肝：高危害通常為沉默感染，人體感染HCV20年、或更長時間無任何癥狀表現(xiàn)。第五十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三丙肝：無預防性疫苗，但可治愈丙肝疾病將是中國的沉重經(jīng)濟負擔:1170-2160億元/年乙型肝炎疫苗的推廣，新感染病例顯著下降；由于丙型肝炎缺乏有效的預防性疫苗，有可能成為影響人民健康的主要肝臟疾病我國首部《丙肝防治指南》所指出的，通過聚乙二醇干擾素+利巴韋林，使用足夠劑量治療一年，丙肝的治愈率可以達到七、八成左右，這也是目前國際上丙肝治療的最佳方案。GhanyM,etal.Hepatology2009;49:1335–74第五十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三第六十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三中國丙肝臨床早期篩查亟待加強中國疾病預防控制中心公共衛(wèi)生監(jiān)測與信息服務中心，施小明,等.疾病監(jiān)測2006;21:493.185/358465/1826100/432數(shù)據(jù)源自國內(nèi)30個省(自治區(qū)、直轄市)共250家醫(yī)療機構(gòu)，采樣15501例，有效樣本13714例丙肝是中國漏報率最高的法定傳染病第六十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三假陰性和假陽性是困惑抗HCV檢測的主要問題間接法自身的缺陷可能出現(xiàn)假陽性和IgM的漏檢。采用第2代(Abbott)和第3代(Ortho)EIA試劑，假陽性率可達30%抗原位點的選擇以及抗原的純化是影響檢測靈敏度和特異性的重要因素；SLE,RA，某些感染性疾病等引起高濃度的免疫球蛋白造成假陽性（RF的干擾；高濃度非特異性IgG可吸附到固相載體上或包被的抗原上）SOD超氧化歧化酶干擾廠家之間的靈敏度和特異性存在著一定差異，從而導致抗-HCV檢測結(jié)果不一致；同一廠家的不同批試劑間亦會有較大差異。第六十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三采用間接ELISA法檢測抗體是評估HCV感染的初篩手段HCV特異性抗體陽性反映了患者體內(nèi)病毒存在，一旦抗HCV陽性，終生難以轉(zhuǎn)陰。HCV抗體檢測的雙抗原夾心ELISA法HCV抗原檢測方法的建立HCV的RNA和抗原在患者體內(nèi)呈間歇陽性；病毒基因型復雜易變異，基因水平的檢測質(zhì)量不夠穩(wěn)定；重組免疫印跡實驗（RIBA）被認為是HCV監(jiān)測的金標準。必須規(guī)范HCV實驗檢測評估和報告體系第六十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三Chiron公司推出了相應的確認實驗—重組免疫印跡實驗（RIBA）。RIBA被認為是HCV抗體檢測的“金標準”。HCV抗體檢測結(jié)果不一致的標本，使用確認試劑檢測。至少2條HCV特異性條帶且為≥1+的條帶反應模式判讀為陽性結(jié)果。陰性為無HCV特異性反應條帶。Recombinantimmunoblotassay(RIBA)OthertestssuchasMatrixHCV2.0(Abbott),Liatek-III(Organon),Inno-LiaHCVAbIII(Innogenetics),MurexWesternblot(Abbott),DeciscanHCVPlus(Bio-Rad)andHCVblot3.0(Genelabs)RIBA被認為是HCV抗體檢測的“金標準”。第六十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三HCVBlot3.0（MP，麗珠）

（18/36T）

3+質(zhì)控帶(血清加樣）

核抗原帶NS3-1NS3-2NS4NS5

1+質(zhì)控帶(試劑加樣)GST質(zhì)控帶注：1，2，3為陽性樣本4為陰性樣本萬泰HCVRIBA試劑（24T）第六十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三幾個月前報告“陽性”，目前報告“陰性”？臨界值標本、弱陽性標本，如何處理？產(chǎn)婦發(fā)現(xiàn)抗-HCV陽性，可以哺乳嗎？無輸血及血制品史偶爾在外治療牙病三家醫(yī)院結(jié)果為什么不一致？

A院“S/CO3.5”，B院“弱陽”，C院“陰性”老人內(nèi)鏡術(shù)后檢查抗-HCV陽性，惹上麻煩？問題舉例第六十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三結(jié)果“時（-）時（+）”ELISA（+）、膠體金（-）”第六十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三醫(yī)院檢測（-）、而血站檢測（+）”嬰幼兒結(jié)果“（弱+）”第六十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三某方法孕婦多次出現(xiàn)“（假+）”并非僅僅是孕婦出現(xiàn)“（假+）”第六十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三對于不是很強的“（+）”結(jié)果的處理出現(xiàn)“（+）”結(jié)果時的處理方式第七十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三遇見這樣的事情，您不困惑？第七十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三二、丙型肝炎病毒實驗室檢測中的策略第七十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三《丙型肝炎病毒實驗室檢測技術(shù)規(guī)范》

2011年9月20日頒布實施起草單位：中國疾病預防控制中心性病艾滋病預防控制中心使用范圍：全國所有的丙型肝炎病毒檢測實驗室解釋權(quán)：中國疾病預防控制中心實施：衛(wèi)生部授權(quán)，中國疾病預防控制中心發(fā)布實施第七十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三在臨床診斷中規(guī)定了HCV抗體篩查陽性反應后必須進行補充實驗（免疫印跡或核酸檢測）在臨床診斷中引入S/CO比值的使用明確了丙肝檢測實驗室質(zhì)量控制第七十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三基本原則1.對于篩查試驗陰性樣品，不需要做進一步檢測，可報告“抗HCV陰性”2.對于篩查試驗陽性樣品，可選擇S/CO比值進行補充試驗，或非S/CO比值的補充試驗

a.高比值，可報告“抗HCV陽性”，不需要做補充試驗；低比值，應做RIBA.此方案適合特定的篩查試劑（已證實高比值，>95%補充試驗陽性）。

b.所有篩查試驗陽性標本，均進行RIBA；或先作HCVRNA檢測，陰性標本再測RIBA第七十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期三■補充實驗：

免疫印跡試驗

HCVRNA檢測HCV抗體的檢測方法■篩查試驗

酶聯(lián)免疫吸附試驗膠體金快速試驗化學發(fā)光試驗免疫熒光試驗