瘧原蟲(chóng)的鏡檢技術(shù)

2015年瘧原蟲(chóng)鏡檢技術(shù)培訓(xùn)2015-3-17當(dāng)前1頁(yè)，總共90頁(yè)。2015年傳染病涉及的文件1《中國(guó)腹瀉病診斷治療方案》2《山東省霍亂監(jiān)測(cè)方案》3《霍亂防治手冊(cè)》（第6版）4《細(xì)菌性和阿米巴痢疾診斷標(biāo)準(zhǔn)》

當(dāng)前2頁(yè)，總共90頁(yè)。2015年傳染病實(shí)驗(yàn)室總要求以霍亂、手足口病、流感、人禽流感、流行性出血熱、布病、發(fā)熱伴血小板減少綜合征、碘缺乏病、瘧疾為主以霍亂為重點(diǎn)的傳染病、依托腹瀉病門(mén)診發(fā)現(xiàn)霍亂、傷寒、副傷寒、菌痢、O157H7大腸桿菌和其他腹瀉病例，包括副溶血弧菌空腸彎曲菌和小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌等病原菌逢瀉必檢逢疑必檢檢測(cè)率不低于30%，分離培養(yǎng)率必須達(dá)到10%二級(jí)以及以上醫(yī)療單位每年至少分離5株腸道致病菌當(dāng)前3頁(yè)，總共90頁(yè)。截至2014年12月，轄區(qū)11個(gè)檢測(cè)點(diǎn)應(yīng)檢血片7125張，復(fù)檢1316張（2張陽(yáng)性）.1-12月各檢測(cè)點(diǎn)復(fù)檢瘧原蟲(chóng)血片總計(jì)如下

千佛山醫(yī)院164齊魯花園醫(yī)院94歷下三院112安康醫(yī)院94市立一院146歷下醫(yī)院144省中醫(yī)156二鋼醫(yī)院45武警醫(yī)院137齊魯醫(yī)院120中心醫(yī)院19當(dāng)前4頁(yè)，總共90頁(yè)。

主要內(nèi)容瘧疾的危害和主要防治經(jīng)歷瘧疾快速診斷試劑盒簡(jiǎn)介。厚薄血膜的制作與染色。瘧原蟲(chóng)人體內(nèi)生活史簡(jiǎn)介。厚薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。當(dāng)前5頁(yè)，總共90頁(yè)。瘧疾的危害瘧疾是古老的地方性傳染病：在4,000年前我國(guó)已有瘧疾流行。瘧疾流行于熱帶、亞熱帶及溫帶邊緣地區(qū)，是重要蚊媒傳染病，現(xiàn)有107個(gè)國(guó)家，約32億人口受到瘧疾傳播的威脅，尤其是非洲最為厲害，建國(guó)前后我國(guó)每年至少有3,000萬(wàn)瘧疾患者，病死率約為1％。山東省年發(fā)病人數(shù)60年代初和70年代初曾分別高達(dá)600萬(wàn)和400萬(wàn)；魯南、魯西南的許多縣(市、區(qū)）發(fā)病率達(dá)40%—50%，一些村隊(duì)發(fā)病率高達(dá)80%以上。當(dāng)前6頁(yè)，總共90頁(yè)。瘧疾的危害瘧疾為全球危害最為嚴(yán)重的三大公共衛(wèi)生疾?。ò滩?、結(jié)核、瘧疾）之一政府的瘧疾日2000年起，每年4月25日為非洲瘧疾日?？紤]瘧疾的嚴(yán)重危害，WHO在2007年5月世界衛(wèi)生大會(huì)又將該日定為世界瘧疾日，旨在推動(dòng)全球進(jìn)行瘧疾防治。2008年4月25日為首個(gè)世界瘧疾日。衛(wèi)生部結(jié)合我國(guó)實(shí)際情況，決定將每年4月26日作為“全國(guó)瘧疾日”。當(dāng)前7頁(yè)，總共90頁(yè)。我國(guó)長(zhǎng)期防治經(jīng)歷和成效我國(guó)防治工作歷程1949—1959年：重點(diǎn)調(diào)查及防治試點(diǎn)研究階段1960—1979年：大力防治、控制流行階段1980—1999年：降低發(fā)病率階段2000年后：鞏固防治成果階段從控制走向消除

目前，在全國(guó)2858個(gè)縣（市、區(qū)）中，97.38%的縣（市、區(qū)）連續(xù)3年的發(fā)病率已降至1/萬(wàn)以下或無(wú)當(dāng)?shù)馗腥静±瑯?biāo)志著我國(guó)的瘧疾防治已由控制進(jìn)入消除。當(dāng)前8頁(yè)，總共90頁(yè)。瘧疾的實(shí)驗(yàn)室診斷1.病原學(xué)診斷：顯微鏡血涂片檢查結(jié)果陽(yáng)性；這種鏡檢確診最可靠。2.免疫學(xué)診斷：（1）循環(huán)抗原的檢測(cè)（2）循環(huán)抗體的檢測(cè)3.分子生物學(xué)技術(shù)：PCR和DNA探針已應(yīng)用與瘧疾的診斷。

分子生物學(xué)、血清學(xué)技術(shù)發(fā)展迅猛，但是確診瘧疾的“金標(biāo)準(zhǔn)”

仍然是病原學(xué)診斷顯微鏡檢查瘧原蟲(chóng)?！?/p>

快速診斷試紙條可與鏡檢瘧原蟲(chóng)相互補(bǔ)充。

當(dāng)前9頁(yè)，總共90頁(yè)。OptiMALIT卡瘧疾快速診斷試劑盒當(dāng)前10頁(yè)，總共90頁(yè)。OptiMALIT卡瘧疾快速診斷試劑盒使用說(shuō)明書(shū)當(dāng)前11頁(yè)，總共90頁(yè)。4.將吸血后的毛細(xì)管豎立于凹槽2中，捏出全部血液并與凹槽中稀釋液混勻約1分鐘。當(dāng)前12頁(yè)，總共90頁(yè)。當(dāng)前13頁(yè)，總共90頁(yè)。生產(chǎn)公司：深圳市康百得生物科技有限公司；

價(jià)格：45元/人份，包裝：24人份/最小包裝；保質(zhì)期：6個(gè)月。當(dāng)前14頁(yè)，總共90頁(yè)。血膜的制作（取血時(shí)間）采血時(shí)間現(xiàn)癥病人和流調(diào)普查時(shí)可不考慮取血時(shí)機(jī)。但在診斷或需要某期瘧原蟲(chóng)作標(biāo)本時(shí)，則應(yīng)掌握適宜的取血時(shí)機(jī)。瘧疾典型的臨床表現(xiàn)分前驅(qū)期、發(fā)冷（寒戰(zhàn)）期、發(fā)熱期、出汗期和間歇期五期。

間日瘧在前驅(qū)期相當(dāng)于肝內(nèi)期瘧原蟲(chóng)發(fā)育，因原蟲(chóng)密度太低，鏡檢多為陰性。發(fā)冷（寒戰(zhàn)）期相當(dāng)于紅內(nèi)期成熟裂殖體漲破紅細(xì)胞期，鏡檢多為裂殖體和環(huán)狀體。發(fā)熱期，外周血中以環(huán)狀體（小滋養(yǎng)體）為主，也可見(jiàn)到裂殖體；出汗期因原蟲(chóng)密度太低，鏡檢多為陰性。發(fā)作后數(shù)小時(shí)（h），間歇期外周血中以大滋養(yǎng)體為主，形態(tài)較易辯認(rèn)，為診斷的有利時(shí)機(jī)；發(fā)作36-48h，可檢出裂殖體；發(fā)作1-2次后，配子體出現(xiàn)較多。惡性瘧較理想的取血時(shí)間是在發(fā)作后至20h內(nèi)取血，初發(fā)患者退熱后常查不到原蟲(chóng)。末梢血血檢到惡性瘧原蟲(chóng)配子體，是在末梢血出現(xiàn)環(huán)狀體之后的10天左右。當(dāng)前15頁(yè)，總共90頁(yè)。取血部位和血量

采血部位和取血方法：核對(duì)編號(hào)、信息耳垂或無(wú)名指（嬰幼兒母趾或足跟），通常在耳垂取血，先用75%酒精棉球消毒取血部位，待酒精干后，用左手拇指和食指緊捏耳垂上方或無(wú)名指指尖，右手持消毒針迅速刺入皮膚，不宜過(guò)深或過(guò)淺。然后用右手中指輕輕擠壓出血。厚血膜血量約一粒大米（即火柴頭）大小。

取血方法有小技巧當(dāng)前16頁(yè)，總共90頁(yè)。血膜的制作用于檢查瘧原蟲(chóng)的血涂片有兩種：一種是將血液涂呈薄膜狀，稱(chēng)薄血膜；一種是血液涂成圓盤(pán)，稱(chēng)厚血膜。無(wú)特殊要求的可厚薄血膜分載玻片涂制。發(fā)熱病人血片標(biāo)本片當(dāng)前17頁(yè)，總共90頁(yè)。血膜的制作（涂片操作）涂制厚、薄血膜的位置通常將厚、薄血膜涂在一張載玻片上。方法是將載片分為6等分，第1、2格備貼標(biāo)簽及編號(hào)用；厚血膜涂在第3格中央，薄血膜涂在第4格前緣至第6格中部。作為標(biāo)本的血片每張玻片涂厚、薄血膜各1個(gè)；門(mén)診和發(fā)熱病人血片每片1人，涂2個(gè)厚血膜1個(gè)薄血膜，以防血膜脫落而影響檢查；

標(biāo)本片發(fā)熱病人血片標(biāo)簽當(dāng)前18頁(yè)，總共90頁(yè)。薄血膜的制作薄血膜

用推片一端邊緣的中點(diǎn)從取血部分①取約1～1.5微升的血量（相當(dāng)于1/4火柴頭大小），使血滴與平置的載玻片接觸，并形成25～350夾角，待血液向兩側(cè)擴(kuò)展約②2cm～2.5cm寬時(shí)，均勻而迅速地從右向左推成舌狀薄血膜（約2.5cm長(zhǎng)）。推制時(shí)速度要均勻，血滴大小、推片與載玻片之間夾角大小及展開(kāi)血膜的速度快慢等常影響血膜的厚薄。制成的薄血膜應(yīng)在玻片上形成平鋪的血細(xì)胞，細(xì)胞之間互相接觸而不相互重疊。③薄血膜外觀：舌狀厚薄均勻，無(wú)劃痕，④位于玻片1/2～1/3處【左半部分（或第4—6份）】

。當(dāng)前19頁(yè)，總共90頁(yè)。熟練工作者的推片姿勢(shì)當(dāng)前20頁(yè)，總共90頁(yè)。

厚血膜的制作厚血膜

用推片的左下角，從取血部位刮?、偌s4～5微升血量（相當(dāng)于火柴頭大小），使血滴與平置的載玻片接觸，再由里向外一個(gè)方向旋轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)2～4圈，涂成②直徑0.8～1cm大小圓形厚血膜(厚血膜的厚度以一個(gè)油鏡視野內(nèi)可見(jiàn)到5～10個(gè)白細(xì)胞為宜)，③厚血膜的位置，位于玻片右1/3處。④厚血膜外觀：圓形厚薄均勻，無(wú)劃痕。過(guò)厚易于脫落，過(guò)薄達(dá)不到檢出率的要求，以油鏡視野5-10個(gè)WBC為宜。當(dāng)前21頁(yè)，總共90頁(yè)。標(biāo)準(zhǔn)的瘧疾厚薄血膜位置當(dāng)前22頁(yè)，總共90頁(yè)。各種不同的瘧疾血片涂制法標(biāo)準(zhǔn)血片（1人）門(mén)診發(fā)熱病人血片（1人）居民普查血片（2人）當(dāng)前23頁(yè)，總共90頁(yè)。血膜的制作血膜編號(hào)

血膜制成后，立即在玻片面上寫(xiě)上受檢者的號(hào)碼，以防差錯(cuò)，依次順序插入標(biāo)本盒內(nèi)。當(dāng)前24頁(yè)，總共90頁(yè)。染液的種類(lèi)

染液種類(lèi)：瘧原蟲(chóng)的染色，目前臨床上應(yīng)用最廣泛的是瑞氏（Wrightstain）和吉氏染液（Giemsastain）。這些染液中的主要染劑都包含美藍(lán)、伊紅和由美藍(lán)氧化所成的天青，所以稱(chēng)多色性染劑。

我們主要用吉氏染液，它具有方便，染色效果穩(wěn)定，便于長(zhǎng)期保存的優(yōu)點(diǎn)。瑞氏染色，染色時(shí)間短，但染色效果不如吉氏穩(wěn)定，主要在門(mén)診量大的門(mén)診實(shí)驗(yàn)室使用。當(dāng)前25頁(yè)，總共90頁(yè)。染液的染色原理

染色原理是染料于被染物的陰陽(yáng)離子互相吸附而結(jié)合的一種化學(xué)反應(yīng)。紅、白細(xì)胞和瘧原蟲(chóng)所含蛋白質(zhì)的氨基酸電離出的陰陽(yáng)離子與酸堿染料伊紅、美藍(lán)有色集團(tuán)所帶的陰陽(yáng)離子相互結(jié)合便被染上不同的顏色。

瘧原蟲(chóng)和白細(xì)胞的胞漿被染成藍(lán)色，紅細(xì)胞、瘧原蟲(chóng)和白細(xì)胞核被染成紫紅色。

紅、白細(xì)胞和瘧原蟲(chóng)的蛋白質(zhì)均由氨基酸組成，每個(gè)氨基酸電離出一個(gè)帶正電荷的-NH3+和一個(gè)帶負(fù)電荷的-COO-。多色染劑的堿性染料美藍(lán)的有色基團(tuán)帶陽(yáng)離子，可與細(xì)胞中帶負(fù)電荷的-COO-部分結(jié)合，使之成為藍(lán)色。瘧原蟲(chóng)、淋巴和大單核細(xì)胞的胞漿、嗜堿性白細(xì)胞的顆粒等酸性蛋白質(zhì)，故被染成藍(lán)色。酸性染料伊紅的有色基團(tuán)帶陰離子，可與細(xì)胞中帶正電荷的-NH2+部分結(jié)合，使之呈紅色；但美藍(lán)與伊紅都不能使瘧原蟲(chóng)和白細(xì)胞的核著色，可美藍(lán)氧化后產(chǎn)生的天青有媒染作用，于是，在媒染物與染料的共同作用下，瘧原蟲(chóng)和白細(xì)胞核被染成紫紅色。當(dāng)前26頁(yè)，總共90頁(yè)。染液的種類(lèi)及染色原理注意：蛋白質(zhì)和氨基酸都是兩性電解質(zhì)，要求染液的pH值7.0-7.2較好。

染液偏酸時(shí)，所帶的正電荷增加，易于伊紅結(jié)合，使紅細(xì)胞和瘧原蟲(chóng)的核染成鮮紅色，而淋巴細(xì)胞和原蟲(chóng)的胞漿著色較差；反之，當(dāng)染液偏堿時(shí)，紅細(xì)胞和嗜伊紅白細(xì)胞的顆粒等被染成紫藍(lán)色，不易觀察。當(dāng)前27頁(yè)，總共90頁(yè)。姬氏染液母液配置方法

取姬氏粉0.5克置于研缽中，加25ml甘油充分研磨，倒入60或100ml帶有玻塞的有色玻瓶中。在研缽中加少量甲醇，洗去甘油濃液混入瓶?jī)?nèi)，至25ml甲醇洗凈缽中甘油染液為止，塞緊瓶塞，充分搖勻，置于55—60℃水浴中或溫箱內(nèi)24h或室溫內(nèi)3—5天，多加搖動(dòng)，即成原液。姬氏染液是目前較優(yōu)良的血膜染劑，即使在炎熱天氣中，亦可經(jīng)久不變。材料：1、姬氏粉0.5克2、甘油25ml3、甲醇25ml

注意事項(xiàng)：

1.高純度試劑。

2.所用器皿絕對(duì)無(wú)水（伊紅在水溶液內(nèi)遇到美藍(lán)或天青即可互相化合而產(chǎn)生沉淀，從而失去染色力）。

3.邊加邊磨，充分研磨；整個(gè)染色液配制時(shí)間不能少于5個(gè)小時(shí)。

當(dāng)前28頁(yè)，總共90頁(yè)。姬氏染液的染色方法

先用甲醇或無(wú)水酒精固定薄血膜,再用清水對(duì)厚血膜溶脫血紅蛋白，然后再進(jìn)行染色。注意：吸取母液時(shí)，不要晃動(dòng)瓶子,以免沉淀物泛起影響染色效果.

成批血片染色：將已用甲醇固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入3%吉氏染液稀釋液（3毫升吉氏原液加緩沖液或凈水97毫升，混勻）浸沒(méi)血片，同時(shí)對(duì)厚薄血膜染色30min（根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)際情況，酌情增減染色時(shí)間和濃度），然后用清水輕輕將染液漂洗干凈，將血片標(biāo)本（血膜面朝下）插于晾干板上晾干，包裝，鏡檢。

單張血片染色：將處理好的血膜，加姬氏母液1-2滴，加中性蒸餾水15-30滴，染色30分鐘左右，然后用清水輕輕將片上的染液沖洗干凈，晾干鏡檢。較理想的染色結(jié)果是紅細(xì)胞為淡紅或淡紫紅色，瘧原蟲(chóng)的胞質(zhì)呈藍(lán)色，核為紫紅色，瘧色素為棕褐色。當(dāng)前29頁(yè)，總共90頁(yè)。操作1（快染）

配制5%染液，（每張血片約需染液2ml）：量筒內(nèi)量2ml緩沖液或新鮮涼開(kāi)水，直接滴加吉氏原液7滴，混勻，滴入待染標(biāo)本的厚薄血膜上，染色10min，清水細(xì)緩沖洗，晾干鏡檢。（一般配制5%-10%，染色時(shí)間短，一定掌握好時(shí)間。）操作2(慢染)配制3%染液：在染色量筒內(nèi)量2ml蒸餾水或新鮮涼開(kāi)水，再滴加吉氏原液4滴，混勻，滴入待染標(biāo)本上，染色30~40min。清水細(xì)緩沖洗，晾干鏡檢。（一般配制2.5%-3%染液，染色效果穩(wěn)定。）吉氏染液濃度門(mén)診染色當(dāng)前30頁(yè)，總共90頁(yè)。影響染色效果的因素（1）染劑、溶劑的質(zhì)量（2）染液的新舊（3）染液稀釋后使用時(shí)間（4）染液的稀釋濃度（5）染色時(shí)間（6）染色用水（7）沖洗方法

當(dāng)前31頁(yè)，總共90頁(yè)。血片制作與染色注意事項(xiàng)

●使用前載玻片一定要清潔，否則會(huì)影響血片制作和鏡檢結(jié)果?！窈裱じ稍飼r(shí)勿加熱，加熱會(huì)使原蟲(chóng)變形，影響鏡檢結(jié)果?！衽渲媚敢簳r(shí)過(guò)濾可除去雜質(zhì)顆粒，有助于提高鏡檢質(zhì)量?！窆潭ū⊙r(shí)勿將甲醇觸碰到厚血膜。●沖洗染液時(shí)，水流輕緩，勿沖走厚血膜。當(dāng)前32頁(yè)，總共90頁(yè)。1.在學(xué)習(xí)鏡檢瘧原蟲(chóng)之前，必須先對(duì)正常厚薄血膜中各種血細(xì)胞的形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和染色性質(zhì)加以識(shí)別。2.鏡檢瘧原蟲(chóng)，首先學(xué)看薄血膜，在基本上掌握薄血膜中瘧原蟲(chóng)形態(tài)后，再學(xué)習(xí)鏡檢厚血膜。3.鏡檢瘧原蟲(chóng)一般只查厚血膜，薄血膜僅作為原蟲(chóng)分類(lèi)時(shí)參考和血片編號(hào)之用。4.鏡檢瘧原蟲(chóng)須用油鏡頭配合5X低倍目鏡鏡檢，當(dāng)發(fā)現(xiàn)疑難問(wèn)題時(shí)再調(diào)換10X目鏡進(jìn)行觀察。5.檢查時(shí)應(yīng)從厚血膜的上緣開(kāi)始，使血膜從上而下，自左至右，順序地查完整個(gè)血膜。一般情況下，厚血膜四周（稍薄些）瘧原蟲(chóng)數(shù)量較多，且形態(tài)較清楚，鏡檢時(shí)不要忽略。每張厚血膜檢查時(shí)間最少不低于20分鐘。血片的鏡檢當(dāng)前33頁(yè)，總共90頁(yè)。

看完血片后，若為陽(yáng)性，應(yīng)立即按血片編號(hào)登記原蟲(chóng)的種、期，以防差錯(cuò)。為檢查后記錄結(jié)果方便起見(jiàn)，對(duì)瘧原蟲(chóng)的種、期可使用英文字母縮寫(xiě)作為代號(hào)：間日瘧：P．v(Plasmodiumvivax)

惡性瘧：P．f(P．falciparum)

三日瘧：P．m(P．malarae)

卵形瘧：P．o(P．ovale)

環(huán)狀體：R(Ringform)

大滋養(yǎng)體：T(trophozoite)

裂殖體：

S(Schizont)

配子體：G(Gametocyte)當(dāng)前34頁(yè)，總共90頁(yè)。如何確定瘧原蟲(chóng)血片為陰性●

檢查全部厚血膜未查見(jiàn)瘧原蟲(chóng)?！?/p>

最少檢查100個(gè)厚血膜油鏡視野未查見(jiàn)瘧原蟲(chóng)。鏡檢時(shí)間最少不低于20分鐘。當(dāng)前35頁(yè)，總共90頁(yè)。

借助瘧原蟲(chóng)生活史簡(jiǎn)圖，復(fù)習(xí)一下紅內(nèi)各期原蟲(chóng)形態(tài)當(dāng)前36頁(yè)，總共90頁(yè)。生活史

含成熟瘧原蟲(chóng)子孢子按蚊叮咬人子孢子隨唾液進(jìn)入人體血液約30分鐘侵入肝細(xì)胞裂體增殖成熟裂殖體（含數(shù)以萬(wàn)計(jì)裂殖子）肝細(xì)胞破裂裂殖子侵入紅細(xì)胞（開(kāi)始紅細(xì)胞內(nèi)期發(fā)育）發(fā)育小滋養(yǎng)體（環(huán)狀體）攝食營(yíng)養(yǎng)、發(fā)育大滋養(yǎng)體核分裂、發(fā)育未成熟裂殖體核進(jìn)一步分裂裂殖體（成熟）被寄生紅細(xì)胞破裂裂殖子釋放入血流一部分被巨噬細(xì)胞吞噬。一部分再侵入紅細(xì)胞，開(kāi)始新的一輪發(fā)育。一部分裂殖子在紅細(xì)胞內(nèi)不再進(jìn)行裂體增殖，而發(fā)育成雌，雄配子體。在蚊體內(nèi)進(jìn)行有性生殖。由生活史容易看出，瘧原蟲(chóng)對(duì)人體的主要致病階段是紅細(xì)胞內(nèi)期的裂體增殖期；主要是指紅細(xì)胞內(nèi)期的無(wú)性體——小滋養(yǎng)體到成熟裂殖體，而不是紅細(xì)胞內(nèi)期的無(wú)性體——配子體；可具有流行病學(xué)意義的瘧疾傳染源為外周血內(nèi)有配子體的現(xiàn)癥病人和帶蟲(chóng)者，可見(jiàn)早期診斷治療的重要性。復(fù)發(fā)由肝內(nèi)期遲發(fā)型子孢子引起。

當(dāng)前37頁(yè)，總共90頁(yè)。人類(lèi)四種瘧原蟲(chóng)的基本特征感染人的瘧原蟲(chóng)有四種:惡性瘧原蟲(chóng)P.falciparum

間日瘧原蟲(chóng)P.vivax三日瘧原蟲(chóng)P.malariae

卵形瘧原蟲(chóng)P.ovale

當(dāng)前38頁(yè)，總共90頁(yè)。惡性瘧

P.falciparum●

四種瘧原蟲(chóng)中致病力最強(qiáng)；●無(wú)免疫力者感染后出現(xiàn)急性癥狀，不及時(shí)治療可危及生命；●在我國(guó)主要流行于云南省和海南省。當(dāng)前39頁(yè)，總共90頁(yè)。間日瘧

P.vivax

●

間日瘧原蟲(chóng)分布于我國(guó)大部分地區(qū)，主要是中部地區(qū)?！褚痖g日瘧，病程呈良性，但有復(fù)發(fā)。

當(dāng)前40頁(yè)，總共90頁(yè)。瘧色素的形成血紅蛋白消化→{

}珠蛋白→氨基酸→合成原蟲(chóng)蛋白血紅素→高鐵血紅素→瘧色素當(dāng)前41頁(yè)，總共90頁(yè)。人體瘧原蟲(chóng)的基本結(jié)構(gòu)瘧原蟲(chóng)基本構(gòu)造為細(xì)胞質(zhì)（胞漿）、核和瘧色素這三要素。1.細(xì)胞漿被染成蔚藍(lán)色或深藍(lán)色，隨著蟲(chóng)體發(fā)育長(zhǎng)大，細(xì)胞漿逐漸增多。2.核即細(xì)胞核或染色質(zhì)粒，核染成鮮紅色。3.瘧色素不著色，顏色和顆粒的形狀，因瘧原蟲(chóng)種類(lèi)而異。間日瘧原蟲(chóng)黃褐色、型呈短棒狀；惡性瘧原蟲(chóng)黑褐色、型呈細(xì)砂狀。當(dāng)前42頁(yè)，總共90頁(yè)。薄血膜中間日瘧、惡性瘧各期瘧原蟲(chóng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)當(dāng)前43頁(yè)，總共90頁(yè)。薄血膜中常見(jiàn)的血液成分中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞血小板單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞紅細(xì)胞當(dāng)前44頁(yè)，總共90頁(yè)。薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài)間日瘧環(huán)狀體感染的紅細(xì)胞：脹大不明顯，基本正常。蟲(chóng)體大?。狠^大，約為紅細(xì)胞直徑1/3。胞漿：環(huán)狀，淺藍(lán)色。核：紅色，一個(gè)，偶有二個(gè)。瘧色素：無(wú)。當(dāng)前45頁(yè)，總共90頁(yè)。

約占寄生紅細(xì)胞的1/3，很少見(jiàn)到一個(gè)紅細(xì)胞寄生2個(gè)環(huán)狀體和一個(gè)環(huán)狀體有2個(gè)核。當(dāng)前46頁(yè)，總共90頁(yè)。薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài)

惡性瘧環(huán)狀體感染的紅細(xì)胞：大小正常,顏色較深。蟲(chóng)體大?。狠^小，約為紅細(xì)胞直徑1/5-1/6。胞漿：藍(lán)色，環(huán)狀纖細(xì),有時(shí)位于紅細(xì)胞的邊緣。常見(jiàn)多個(gè)原蟲(chóng)同寄生于一紅細(xì)胞的現(xiàn)象。核：紅色一個(gè),常有二個(gè)。瘧色素：無(wú)。當(dāng)前47頁(yè)，總共90頁(yè)。惡性瘧原蟲(chóng)--環(huán)狀體環(huán)纖細(xì),約為RBC直徑的1/6，RBC不脹大核1個(gè)，但2個(gè)常見(jiàn)，紅細(xì)胞常含2個(gè)以上原蟲(chóng)當(dāng)前48頁(yè)，總共90頁(yè)。薄血膜間日瘧大滋養(yǎng)體形態(tài)感染的紅細(xì)胞：脹大褪色，出現(xiàn)形狀大小相等、分布均勻、數(shù)目較多、鮮紅色的薛氏小點(diǎn)。蟲(chóng)體大?。狠^大。胞漿：不規(guī)則，淺藍(lán)色，出現(xiàn)阿米巴偽足，有空泡。核：紅色，一個(gè)。瘧色素：有，細(xì)小桿狀，黃褐色，分布不均勻。當(dāng)前49頁(yè)，總共90頁(yè)。間日瘧大滋養(yǎng)體

蟲(chóng)體不規(guī)則，較大；阿米巴樣空泡明顯；瘧色素細(xì)小，黃褐色。當(dāng)前50頁(yè)，總共90頁(yè)。

間日瘧大滋養(yǎng)體當(dāng)前51頁(yè)，總共90頁(yè)。惡性瘧大滋養(yǎng)體受感染紅細(xì)胞：大小正常，顏色較深，可出現(xiàn)較粗、大小不一、分布不勻、數(shù)目較少紅色茂氏小點(diǎn)。蟲(chóng)體大?。狠^小。胞漿：藍(lán)色，圓形，堅(jiān)實(shí)，體積小。核：一個(gè)，紅色。瘧色素：較細(xì)的黑褐色顆粒，常集成塊。

當(dāng)前52頁(yè)，總共90頁(yè)。惡性瘧大滋養(yǎng)體當(dāng)前53頁(yè)，總共90頁(yè)。紅細(xì)胞：脹大，褪色，可有薛氏小點(diǎn)。胞漿：較不規(guī)則，空泡小或消失，淺藍(lán)色。核：紅色，分裂為二個(gè)以上。色素：黃褐色，分布不均勻。間日瘧未成熟裂殖體當(dāng)前54頁(yè)，總共90頁(yè)。薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài)間日瘧未成熟裂殖體

當(dāng)前55頁(yè)，總共90頁(yè)。惡性瘧未成熟裂殖體紅細(xì)胞：大小正常，顏色較深，可有茂氏小點(diǎn)。大?。狠^小。胞漿：規(guī)則，圓形或卵圓形，藍(lán)色。核：分裂為二個(gè)以上，紅色。色素：黃褐色顆粒，常集成黑褐色團(tuán)塊。當(dāng)前56頁(yè)，總共90頁(yè)。間日瘧成熟裂殖體紅細(xì)胞：脹大，褪色，可見(jiàn)薛氏小點(diǎn)。大小：個(gè)體較大。胞漿和核：裂殖子12~24個(gè)，通常為16~18個(gè)，排列不規(guī)則，核紅色，胞漿淺藍(lán)色。瘧色素：黃褐色，常集于瘧原蟲(chóng)的一邊。當(dāng)前57頁(yè)，總共90頁(yè)。間日瘧裂殖體當(dāng)前58頁(yè)，總共90頁(yè)。惡性瘧成熟裂殖體紅細(xì)胞：大小正常，顏色較深，可見(jiàn)茂氏小點(diǎn)。大?。合x(chóng)體較小。胞漿和核：裂殖子8~32

個(gè)，通常為8~18個(gè)，排列不規(guī)則，核紅色，胞漿藍(lán)色。色素：黑褐色，集中于中央或一側(cè)。當(dāng)前59頁(yè)，總共90頁(yè)。惡性瘧成熟裂殖體

裂殖子8～32個(gè)，通常8～18個(gè)，排列不規(guī)則瘧色素集中成團(tuán)塊狀蟲(chóng)體占紅細(xì)胞體積的2/3至3/4當(dāng)前60頁(yè)，總共90頁(yè)。薄血膜間日瘧雌（大）配子體形態(tài)形狀大?。簣A形或橢圓形，較大。胞漿：深藍(lán)色。核：一個(gè)，較小，深紅色，常偏于一邊，核周可見(jiàn)明顯不染色帶。瘧色素：黃褐色，均勻散在，數(shù)目較多。當(dāng)前61頁(yè)，總共90頁(yè)。間日瘧原蟲(chóng)雌配子體

當(dāng)前62頁(yè)，總共90頁(yè)。間日瘧雄（小）配子體形態(tài)形狀大?。簣A形，蟲(chóng)體較大。胞漿：淺藍(lán)色。核：一個(gè)，較大，疏松，位于中央，淺紅色，周?chē)忻黠@不著色帶。瘧色素：黃褐色，散在分布。當(dāng)前63頁(yè)，總共90頁(yè)。間日瘧原蟲(chóng)雄配子體當(dāng)前64頁(yè)，總共90頁(yè)。惡性瘧雌（大）配子體形態(tài)形狀：新月形，兩端稍尖。胞漿：深藍(lán)色。核：一個(gè)，較小，致密，深紅色，位于中央，核周可見(jiàn)透明不染色帶。瘧色素：黑褐色，密布于核的周?chē)?。?dāng)前65頁(yè)，總共90頁(yè)。薄血膜惡性瘧雄（?。┡渥芋w形態(tài)形狀：臘腸形，兩端鈍圓。胞漿：淺藍(lán)色或淡紫紅色。核：一個(gè)，較大，疏松，位于中央，淺紅色，核周可見(jiàn)不染色帶。瘧色素：黑褐色，松散分布于核周?chē)?。?dāng)前66頁(yè)，總共90頁(yè)。將（未）成熟雌配子體與成熟大滋養(yǎng)體

(核分裂前，剛要進(jìn)入裂殖體前期)的形態(tài)鑒別蟲(chóng)體大小:幾乎充滿(mǎn)被寄生的紅細(xì)胞核:一個(gè)，較大且致密，周?chē)幸蝗瞻椎牟蝗旧珟О麧{:邊緣清楚，不含空泡瘧色素:顆粒較多較粗，均勻散在蟲(chóng)體大小:不超過(guò)被寄生紅細(xì)胞的3/4核:一個(gè)，延長(zhǎng)呈帶狀，周?chē)鸁o(wú)明顯的不染色帶胞漿:邊緣不整齊，多有空泡瘧色素:顆粒較少較細(xì)，分布不均勻當(dāng)前67頁(yè)，總共90頁(yè)。厚血膜中間日瘧、惡性瘧各期瘧原蟲(chóng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)當(dāng)前68頁(yè)，總共90頁(yè)。厚血膜中瘧原蟲(chóng)的形態(tài)

厚血膜由于用血量較多，涂制的血膜小，紅細(xì)胞重疊且干燥慢，致使蟲(chóng)體皺縮，空泡消失，胞漿變形，各期瘧原蟲(chóng)的體積都略微縮小，其中只有大、小滋養(yǎng)體的形態(tài)有較大改變，而裂殖體和配子體的形態(tài)則無(wú)明顯變化。INTITUTEOFTROPICALDISEAASESHAINAN當(dāng)前69頁(yè)，總共90頁(yè)。厚血膜環(huán)狀體形態(tài)

環(huán)狀體：胞漿呈環(huán)狀或向核的一側(cè)或兩側(cè)收縮，使環(huán)的中間斷裂，或圍繞核。間日瘧原蟲(chóng)的環(huán)較大，常呈分號(hào)“；”和感嘆號(hào)“！”狀；惡性瘧原蟲(chóng)的環(huán)纖細(xì)，常呈冒號(hào)“：”、飛鳥(niǎo)“⌒.⌒”、V狀和斷環(huán)狀。間日瘧小滋養(yǎng)體惡性瘧小滋養(yǎng)體當(dāng)前70頁(yè)，總共90頁(yè)。厚血膜間日瘧大滋養(yǎng)體形態(tài)

間日瘧大滋養(yǎng)體呈阿米巴樣運(yùn)動(dòng)，胞漿常斷裂幾塊或縮成圓形，核和瘧色素均被包在胞漿之中，著色深，只隱約可見(jiàn)紅色的核和黃綠色的瘧色素。胞漿可皺縮斷裂成幾個(gè)塊狀，大小不一，似互不連接。核位于胞漿之中或外邊。瘧色素分布不均勻。有些僅見(jiàn)胞漿和瘧色素而核看不清楚。大滋養(yǎng)體當(dāng)前71頁(yè)，總共90頁(yè)。厚血膜惡性瘧

大滋養(yǎng)體形態(tài)

惡性瘧原蟲(chóng)大滋養(yǎng)體與薄血膜形態(tài)相似，常呈圓形，體小結(jié)實(shí)，瘧色素細(xì)小，金黃色，結(jié)成塊狀后，呈黑褐色。大滋養(yǎng)體當(dāng)前72頁(yè)，總共90頁(yè)。厚血膜裂殖體形態(tài)裂殖體間日瘧原蟲(chóng)、惡性瘧原蟲(chóng)的裂殖體前期及成熟裂殖體，除蟲(chóng)體略微縮小著色較深外，均與薄血膜相似。

間日瘧裂殖體惡性瘧裂殖體當(dāng)前73頁(yè)，總共90頁(yè)。厚血膜間日瘧配子體形態(tài)間日瘧原蟲(chóng)的配子體呈圓形或卵圓形，除蟲(chóng)體略縮小且著色深外，均與薄血膜相似。雄配子體核大，疏松，圓形或呈星狀，胞漿較少，著色淡，瘧色素顆粒大，數(shù)量較多，散在分布。雌配子體與圓形成熟的大滋養(yǎng)體相似，但配子體瘧色素顆粒粗大，多而散在分布。大配子體小配子體當(dāng)前74頁(yè)，總共90頁(yè)。厚血膜惡性瘧配子體形態(tài)

配子體呈新月形或臘腸形，如血膜干燥較慢，則可縮成圓形，核居中，瘧色素圍在核周，外圍一圈胞漿。此外，還可見(jiàn)配子體的胞漿部分或全部消失，只留下核和瘧色素，或核和胞漿均消失，只留下一些瘧色素。大配子體小配子體當(dāng)前75頁(yè)，總共90頁(yè)。厚薄血膜的優(yōu)缺點(diǎn)及適用范圍薄血膜：用血量少1-1.5ul，瘧原蟲(chóng)的形態(tài)完整，便于瘧原蟲(chóng)蟲(chóng)種的鑒定。為保證檢測(cè)的敏感性，常耗時(shí)較多，不適用于大規(guī)模調(diào)查；常出現(xiàn)漏診。厚血膜：用血量較多4-5ul，瘧原蟲(chóng)胞漿和核有一定程度的固縮，較難識(shí)別；但須查范圍小，節(jié)省時(shí)間，陽(yáng)性檢出率較高。

當(dāng)前76頁(yè)，總共90頁(yè)。紅細(xì)胞通常脹大

薛氏點(diǎn)明顯成熟環(huán)狀體粗大滋養(yǎng)體有阿米巴樣偽足可見(jiàn)不同發(fā)育期的原蟲(chóng)

間日瘧（P.vivax）鑒定要點(diǎn)當(dāng)前77頁(yè)，總共90頁(yè)。環(huán)狀體釬細(xì),紅細(xì)胞不漲大一個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)可有幾個(gè)環(huán)狀體環(huán)狀體內(nèi)可有2個(gè)核