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文檔簡介

免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig):是由漿細(xì)胞合成和分泌的一組具有抗體活性的蛋白質(zhì)。現(xiàn)在是1頁\一共有40頁\編輯于星期三重鏈性質(zhì),Ig分5類:IgG(γ)、IgA(α)、IgM(μ)、IgD(δ)、IgE(ε)輕鏈性質(zhì),Ig分2型:κ、λIg占血漿蛋白總量:20%檢測意義:反應(yīng)機(jī)體的免疫功能、診斷疾病Ig含量:血清IgG、IgA、IgM:g/L、IgD、IgE:mg/L體液IgG、IgA、IgM:mg/L

現(xiàn)在是2頁\一共有40頁\編輯于星期三現(xiàn)在是3頁\一共有40頁\編輯于星期三現(xiàn)在是4頁\一共有40頁\編輯于星期三第一節(jié)血清IgG、IgA、IgM測定現(xiàn)在是5頁\一共有40頁\編輯于星期三IgG的特性和功能IgG于出生后3個(gè)月開始合成,是血清中含量最高的免疫球蛋白IgG多為單體,半衰期約為23天,占血清免疫球蛋白總量的75%~80%大多數(shù)抗感染抗體與自身抗體均為IgG類IgG是唯一能通過胎盤的抗體有四個(gè)亞型(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)現(xiàn)在是6頁\一共有40頁\編輯于星期三現(xiàn)在是7頁\一共有40頁\編輯于星期三現(xiàn)在是8頁\一共有40頁\編輯于星期三IgM的特性和功能為五聚體,是分子量最大的Ig,稱巨球蛋白。IgM激活補(bǔ)體能力比IgG強(qiáng)天然血型抗體是IgMIgM是個(gè)體發(fā)育過程最早能產(chǎn)生的抗體,胚胎晚期已能合成,新生兒臍帶血中若IgM水平升高,表示該兒曾有宮內(nèi)感染IgM是抗原刺激后出現(xiàn)最早的抗體,故檢測IgM水平可用于傳染病的早期診斷有2個(gè)亞型(IgM1、IgM2)現(xiàn)在是9頁\一共有40頁\編輯于星期三IgA的特性和功能分為血清型和分泌型兩種,血清型IgA主要由腸系膜淋巴組織中的漿細(xì)胞產(chǎn)生。而分泌型IgA(SIgA)是由呼吸道、消化道、泌尿生殖道等處的固有層中漿細(xì)胞產(chǎn)生。主要存在于初乳、唾液、淚液,以及呼吸道消化道和泌尿生殖道黏膜表面的分泌液中。分泌型IgA的合成和主要作用部位在黏膜分2個(gè)亞型:(IgA1、IgA2)現(xiàn)在是10頁\一共有40頁\編輯于星期三現(xiàn)在是11頁\一共有40頁\編輯于星期三一、血清IgG、IgA、IgM測定測定方法

單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法免疫濁度法現(xiàn)在是12頁\一共有40頁\編輯于星期三原理誤差主要原因評(píng)價(jià)

單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法現(xiàn)在是13頁\一共有40頁\編輯于星期三免疫濁度法直接透射比濁法速率散射比濁法注意點(diǎn)評(píng)價(jià)現(xiàn)在是14頁\一共有40頁\編輯于星期三二、血清IgG、IgA、IgM測定的臨床意義年齡年齡與血中Ig含量有一定關(guān)系高Ig血癥:多克隆Ig增高(感染);單克隆Ig增高(免疫增殖?。┑虸g血癥:

先天性低Ig血癥(免疫缺陷?。?;獲得性低Ig血癥(蛋白丟失).現(xiàn)在是15頁\一共有40頁\編輯于星期三第二節(jié)血清IgD、IgE測定

正常人血清中IgD含量很低,半衰期2.8天。膜結(jié)合型IgD(mIgD)構(gòu)成BCR,是B細(xì)胞分化發(fā)育成熟的標(biāo)志。未成熟B細(xì)胞僅表達(dá)mIgM成熟B細(xì)胞表達(dá)mIgM和mIgD活化的B細(xì)胞或記憶B細(xì)胞mIgD逐漸消失

現(xiàn)在是16頁\一共有40頁\編輯于星期三

IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白,主要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌,為親細(xì)胞抗體,引起I型超敏反應(yīng);與機(jī)體抗寄生蟲免疫也可能有關(guān)。現(xiàn)在是17頁\一共有40頁\編輯于星期三一、血清IgD測定及臨床意義測定方法:

放射免疫分析法化學(xué)發(fā)光免疫分析法免疫比濁法

酶聯(lián)免疫吸附法現(xiàn)在是18頁\一共有40頁\編輯于星期三IgD:生物功能不詳

增高:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、變態(tài)反應(yīng)性疾病、敗血癥、新生兒溶血病

降低:意義不大現(xiàn)在是19頁\一共有40頁\編輯于星期三二、血清IgE測定及臨床意義測定方法總IgE測定:放射免疫分析法

化學(xué)發(fā)光免疫分析法免疫比濁法酶聯(lián)免疫吸附法特異性IgE測定:免疫斑點(diǎn)法酶聯(lián)免疫吸附法現(xiàn)在是20頁\一共有40頁\編輯于星期三IgE臨床意義:

增高:變態(tài)反應(yīng)性疾病、寄生蟲感染、病毒感染、自身免疫性疾病。

降低:意義不大現(xiàn)在是21頁\一共有40頁\編輯于星期三第三節(jié)尿液及腦脊液Ig測定

正常人尿液中的Ig含量甚微,當(dāng)機(jī)體的免疫功能異?;蜓装Y反應(yīng)引起腎臟疾病時(shí),可導(dǎo)致腎小球?yàn)V過膜分子屏障破壞或電荷屏障受損,從而引起球蛋白及其他大分子蛋白質(zhì)漏出增多。生理情況下,Ig根據(jù)其分子量大小,通過血腦屏障的難易度不同,IgG、IgA、IgM在腦脊液中的濃度遞減。病理狀態(tài)時(shí),腦脊液組分發(fā)生改變。現(xiàn)在是22頁\一共有40頁\編輯于星期三現(xiàn)在是23頁\一共有40頁\編輯于星期三分子屏障:腎小球?yàn)V過屏障現(xiàn)在是24頁\一共有40頁\編輯于星期三電荷屏障:1上皮細(xì)胞2基底膜3內(nèi)皮細(xì)胞4被濾過物質(zhì)現(xiàn)在是25頁\一共有40頁\編輯于星期三一、尿液Ig測定及臨床意義尿液:

腎小球?yàn)V膜受損程度:選擇性蛋白尿指數(shù)(selectiveproteinuriaindex,SPI)標(biāo)本:晨尿或隨機(jī)尿SPI=(尿IgG/血清IgG)/(尿TRF/血清TRF)SPI≤0.1選擇性微小病變型腎病SPI≥0.2非選擇性膜性腎病、膜增殖性腎炎、腎病綜合癥

現(xiàn)在是26頁\一共有40頁\編輯于星期三增高有臨床意義:腎病、免疫增殖病可根據(jù)尿內(nèi)Ig增高的類型幫助鑒別診斷腎小球疾病的種類現(xiàn)在是27頁\一共有40頁\編輯于星期三二、腦脊液Ig測定及臨床意義腦脊液:

血腦屏障受損程度:白蛋白商值白蛋白商值(ALBquotient,QALB):QALB=[(AlbCSF/AlbS)×1000]QALB〈9時(shí),提示血腦屏障無明顯受損9-15輕度受損急慢性病毒感染、多發(fā)性硬化、神經(jīng)梅毒、帶狀皰疹神經(jīng)節(jié)炎、腦萎縮15-33中度受損急性神經(jīng)疏螺旋體病、條件致病性腦膜炎、吉蘭-巴雷綜合征33-100重度受損化膿性腦膜炎、單純皰疹性腦炎、結(jié)核性腦膜炎等細(xì)菌感染性疾病〉100完全破裂現(xiàn)在是28頁\一共有40頁\編輯于星期三區(qū)分鞘內(nèi)免疫球蛋白來源:IgG生成指數(shù)和24hIgG合成率IgG生成指數(shù)=QIgG/Qalb(QIgG=IgGCSF/IgGS,Qalb=AlbCSF/Albs)IgG合成率/24h=[(IgGCSF-IgGS/541)-(AlbCSF-AlbS/243)×(IgGS/AlbS)×0.43×500IgG生成指數(shù)和24hIgG合成升高時(shí),表明CSF中的IgG主要有中樞神經(jīng)系統(tǒng)鞘內(nèi)合成,多見于多發(fā)性硬化癥現(xiàn)在是29頁\一共有40頁\編輯于星期三第四節(jié)血清IgG亞類測定及臨床意義Ig亞類:IgG1、IgG2、IgG3、IgG4,其含量依次下降測定方法:

單向免疫擴(kuò)散法免疫比濁法(常用)放射免疫分析法酶聯(lián)免疫吸附法現(xiàn)在是30頁\一共有40頁\編輯于星期三臨床意義:IgG亞類的含量隨年齡的不同而變化IgG亞類缺陷可表現(xiàn)為:反復(fù)呼吸道感染、腹瀉、中耳炎、鼻竇炎、支擴(kuò)以及哮喘等IgA缺乏癥常伴有IgG2缺陷,某些病毒感染IgG1、IgG2、IgG3下降顯著IgG亞類異常增高主要見于Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)現(xiàn)在是31頁\一共有40頁\編輯于星期三第五節(jié)M蛋白測定及臨床意義

M蛋白:B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖產(chǎn)生的異常單克隆免疫球蛋白臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等

現(xiàn)在是32頁\一共有40頁\編輯于星期三M蛋白測定蛋白區(qū)帶電泳:經(jīng)典方法計(jì)算蛋白含量和百分比免疫比濁法:免疫球蛋白定量準(zhǔn)確性高、快速免疫電泳:M蛋白分型免疫固定電泳:M蛋白分型及鑒定,分辨率高現(xiàn)在是33頁\一共有40頁\編輯于星期三GAMκλIgG-κ型M蛋白Marker免疫固定電泳模式圖現(xiàn)在是34頁\一共有40頁\編輯于星期三第六節(jié)輕鏈測定及臨床意義本周蛋白的檢測

樣本:尿液方法:免疫電泳、加熱沉淀(簡便易行)κ–Ig和λ-Ig定量檢測

樣本:尿液、血液方法:單向免疫擴(kuò)散法、免疫比濁法(常用,準(zhǔn)確、快速)應(yīng)用:M蛋白血癥的分型及鑒定現(xiàn)在是35頁\一共有40頁\編輯于星期三第七節(jié)冷球蛋白的檢測冷球蛋白:

在低溫下發(fā)生沉淀,加溫后又復(fù)溶的免疫球蛋白在低溫時(shí)產(chǎn)生冷沉淀的機(jī)制尚不十分明確多數(shù)冷球蛋白為免疫復(fù)合物,其抗原可以是外源性的,也可以是內(nèi)源性的現(xiàn)在是36頁\一共有40頁\編輯于星期三冷球蛋白的類型及臨床意義

I型:為單克隆冷球蛋白型,占25%~40%;最常見為IgG或IgM。多見于免疫增生性疾病

Ⅱ型:單克隆和多克隆混合型冷球蛋白,占15%~25%;最常見的組合為IgM-IgG。多見于自身免疫性疾病

Ш型:多克隆混合型冷球蛋白,約占50%;最常見的組合為IgM-IgG。多見于自身免疫性疾病以及感染性疾病現(xiàn)在是37頁\一共有40頁\編輯于星期三標(biāo)本:在體溫條件下采集和保存靜脈血4ml,不加抗凝劑檢測:靜脈血水浴離心冰箱37℃37℃0-4℃1-2h沉淀24h內(nèi),單克隆冷球蛋白數(shù)天后出現(xiàn)為混合型冷球蛋白驗(yàn)證:將冷沉淀物置于pH4.0的0.1M乙酸鈉緩沖液

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