放射免疫試驗詳解演示文稿

放射免疫試驗詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有38頁\編輯于星期四（優(yōu)選）放射免疫試驗現(xiàn)在是2頁\一共有38頁\編輯于星期四引言放射免疫試驗以放射性核素為特征，通過測定放射性強度評估抗原-抗體反應(yīng)的強度，從而實現(xiàn)對待測物質(zhì)的定量（或定性）分析。放射免疫試驗將放射性核素的高靈敏性與抗原-抗體間的高特異性結(jié)合于一體，具有較高的分析敏感性和分析特異性?，F(xiàn)在是3頁\一共有38頁\編輯于星期四引言放射免疫試驗創(chuàng)立了兩種重要標(biāo)記免疫分析模式即競爭性免疫分析（放射免疫分析方法）和非競爭性免疫分析（免疫放射分析方法），同時，也創(chuàng)立了固相吸附分離方法，以及劑量-反應(yīng)曲線的數(shù)學(xué)處理模型，為酶免疫試驗和發(fā)光免疫試驗奠定理論和實踐基礎(chǔ)?，F(xiàn)在是4頁\一共有38頁\編輯于星期四本章目錄第一節(jié)放射免疫分析方法第二節(jié)免疫放射分析方法第三節(jié)兩種方法比較第四節(jié)臨床應(yīng)用第五節(jié)關(guān)鍵因素現(xiàn)在是5頁\一共有38頁\編輯于星期四重點提示放射免疫分析方法（原理）免疫放射分析方法（原理）現(xiàn)在是6頁\一共有38頁\編輯于星期四第一節(jié)放射免疫分析方法現(xiàn)在是7頁\一共有38頁\編輯于星期四相關(guān)知識放射免疫分析方法radioimmunoassay,RIA；首個用于超微量物質(zhì)定量的標(biāo)記免疫分析技術(shù)；發(fā)明人：Yalow

andBerson1959現(xiàn)在是8頁\一共有38頁\編輯于星期四一、分析原理放射免疫分析方法競爭性免疫分析模式標(biāo)記抗原和待檢抗原同質(zhì)分析體系中的抗體限量現(xiàn)在是9頁\一共有38頁\編輯于星期四分析原理圖：放射免疫分析方法原理示意圖（1）現(xiàn)在是10頁\一共有38頁\編輯于星期四圖：放射免疫分析方法原理示意圖（2）現(xiàn)在是11頁\一共有38頁\編輯于星期四技術(shù)（操作）要點抗原抗體反應(yīng)標(biāo)本與試劑混合并溫浴分離技術(shù)分離結(jié)合標(biāo)記物與游離標(biāo)記物發(fā)射性測量數(shù)據(jù)處理現(xiàn)在是12頁\一共有38頁\編輯于星期四二、抗原-抗體反應(yīng)競爭模式平衡法非平衡法溫浴條件溫度酸堿度基質(zhì)圖：非平衡法現(xiàn)在是13頁\一共有38頁\編輯于星期四三、分離技術(shù)非均相免疫分析結(jié)合標(biāo)記物（Bind，B）游離標(biāo)記物（Free，F(xiàn)）分離方法聚乙二醇沉淀法雙抗體法現(xiàn)在是14頁\一共有38頁\編輯于星期四分離技術(shù)圖：聚乙二醇-雙抗體法(特異性和低成本）現(xiàn)在是15頁\一共有38頁\編輯于星期四四、放射性測量和數(shù)據(jù)處理抗原-抗體（溫?。┓蛛x結(jié)合標(biāo)記物放射性測量數(shù)據(jù)處理現(xiàn)在是16頁\一共有38頁\編輯于星期四放射性測量放射性核素

125Iγ射線測量儀器采用γ計數(shù)器現(xiàn)在是17頁\一共有38頁\編輯于星期四

圖：標(biāo)準(zhǔn)曲線實例：現(xiàn)在是18頁\一共有38頁\編輯于星期四第二節(jié)免疫放射分析方法現(xiàn)在是19頁\一共有38頁\編輯于星期四相關(guān)知識免疫放射分析

immunoradiometricassay，IRMA非競爭性免疫分析發(fā)明人：Miles

andHales1968現(xiàn)在是20頁\一共有38頁\編輯于星期四一、分析原理（1）免疫放射分析單位點法適合測定小分子抗原雙位點法適合測定小分子抗原現(xiàn)在是21頁\一共有38頁\編輯于星期四一、分析原理（2）圖：免疫放射分析（單位點法）測定原理示意圖現(xiàn)在是22頁\一共有38頁\編輯于星期四一、分析原理（3）圖：免疫放射分析（雙位點法）測定原理示意圖現(xiàn)在是23頁\一共有38頁\編輯于星期四一、分析原理（4）雙位點法一對互相匹配的抗體捕獲抗體（與固相載體連接）檢測抗體（標(biāo)記放射性核素）非競爭性免疫分析模式體系中抗體保持過量現(xiàn)在是24頁\一共有38頁\編輯于星期四技術(shù)要點抗原抗體反應(yīng)B、F的分離放射性測量數(shù)據(jù)處理現(xiàn)在是25頁\一共有38頁\編輯于星期四二、分離技術(shù)固相吸附分離法固相材料捕獲抗體將結(jié)合標(biāo)記物捕獲于固相材料表面，而游離標(biāo)記物分布于液相中，經(jīng)洗滌去除液相中的游離標(biāo)記物?，F(xiàn)在是26頁\一共有38頁\編輯于星期四固相吸附技術(shù)現(xiàn)在是27頁\一共有38頁\編輯于星期四固相吸附技術(shù)包被

Coating將捕獲抗體吸附于固相材料表面的過程封閉blocking用高溶度蛋白溶液封閉空白結(jié)合位點現(xiàn)在是28頁\一共有38頁\編輯于星期四數(shù)據(jù)處理（實例）圖：標(biāo)準(zhǔn)曲線現(xiàn)在是29頁\一共有38頁\編輯于星期四第三節(jié)兩種方法的比較現(xiàn)在是30頁\一共有38頁\編輯于星期四RIA&IRMA現(xiàn)在是31頁\一共有38頁\編輯于星期四RIA&IRMA放射免疫分析液相狀態(tài)的抗原與抗體反應(yīng)免疫放射分析固相表面與液相狀態(tài)之間的抗原抗體反應(yīng)抗體固相化對抗體結(jié)構(gòu)和功能的影響現(xiàn)在是32頁\一共有38頁\編輯于星期四第四節(jié)臨床應(yīng)用現(xiàn)在是33頁\一共有38頁\編輯于星期四歷史地位方法建立

20世紀(jì)60年代快速發(fā)展

20世紀(jì)80年代～90年代現(xiàn)在是34頁\一共有38頁\編輯于星期四臨床應(yīng)用體內(nèi)激素水平

病原體抗原或抗體腫瘤標(biāo)志物藥物測定現(xiàn)在是35頁\一共有38頁\編輯于星期四臨床應(yīng)用現(xiàn)存檢測項目反三碘甲狀腺原氨酸（分子量651Da）、胃泌素（分子量2098Da）、醛固酮（分子量364Da）、血管緊張素-I（分子量1200Da）和血管緊張素-Ⅱ（分子量1046Da）現(xiàn)在是36頁\一共有38頁\編輯于星期四第五節(jié)關(guān)鍵因素現(xiàn)在是37頁\