淀粉中還原糖的測定課件

還原糖的測定

3,5-二硝基水楊酸比色法班級：生科2班姓名：胡雨雨同組人：張賢明實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握還原糖和總糖測定的基本原理。2.學(xué)習(xí)比色法測定還原糖的操作方法和分光光度計(jì)的使用。實(shí)驗(yàn)原理

還原糖是具有還原性的糖類的統(tǒng)稱。分子中含有游離醛基或者酮基的單糖和含有游離醛基的二糖都具有還原性。如葡糖糖、果糖、半乳糖、乳糖、阿拉伯糖、麥芽糖等。在堿性條件下，還原糖與3，5一二硝基水楊酸共熱，3，5一二硝基水楊酸被還原為3-氨基-5-硝基水楊酸（棕紅色物質(zhì)），還原糖則被氧化成糖酸及其他產(chǎn)物。一定范圍內(nèi)，還原糖的量與棕紅色物質(zhì)顏色深淺的程度成一定的比例關(guān)系，540nm波長下測定棕紅色物質(zhì)的消光值，查對標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算，便可分別求出樣品中還原糖和總糖的含量。注意事項(xiàng)1.沸水浴時(shí)應(yīng)將試管口用保鮮膜封住，以防止水分蒸發(fā)引起體積誤差。2.應(yīng)該待反應(yīng)體系穩(wěn)定后進(jìn)行比色（約10min）。3.比色時(shí)，比色皿中盛放的溶液體積不應(yīng)過多，一般在2/3~3/4。4.比色時(shí)不能將溶液濺在儀器面板和儀器內(nèi)。5.標(biāo)準(zhǔn)曲線制作與樣品含糖量測定應(yīng)同時(shí)進(jìn)行，一起顯色和比色。6.實(shí)驗(yàn)完成后洗凈儀器，放回原位。實(shí)驗(yàn)步驟1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制實(shí)驗(yàn)步驟按照上表取7支試管配好試劑，將各管搖勻，在沸水浴中加熱5min，取出后立即冷卻至室溫，再以蒸餾水定容至25ml，混勻。在540nm波長下，用0號管調(diào)零，分別讀取1-6號管的吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo)，葡萄糖毫克數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。實(shí)驗(yàn)步驟以吸光度為縱坐標(biāo)，葡萄糖毫克數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)驗(yàn)步驟2.

樣品中還原糖和總糖含量的測定

樣品中還原糖的提取：準(zhǔn)確稱取3.0g食用面粉，放在50ml三角瓶中，先以少量蒸餾水調(diào)成糊狀，然后加25ml蒸餾水，攪勻，置于50℃恒溫水浴中保溫20min，使還原糖浸出。離心，用2Oml蒸餾水洗殘?jiān)?，再過濾，將兩次的濾液全部收集在50ml的容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，混勻，作為還原糖待測液。實(shí)驗(yàn)步驟3）顯色和比色，取2支25ml刻度試管，編號，按下表所示的量操作。根據(jù)函數(shù)y=0.595x-0.046可得葡萄糖含量樣品光密度平均值=(0.112+0.121)/2=0.1165其他方法糖含量定量測定的方法除此之外還有①高效液相色譜法（HPLC）②苯酚-硫酸法③蒽酮法④雙折射現(xiàn)象心得從結(jié)果中所得到的的心得并不是所有的糖有甜的味道，只有少數(shù)結(jié)構(gòu)簡單的糖是有甜味的，如葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、果糖、乳糖等，充斥于各種甜食之中的就是它們。自然界存在的多數(shù)糖——多糖，吃起來并不甜，各種糧食都是含糖大戶，主要是淀粉和糊精。糧食不僅可以提供能量，而且還是B族維生素、膳食纖維、礦物質(zhì)的重要來源，因此人們的生活中的確不能沒有它。當(dāng)我們食用面食時(shí)，雖然食用的是主食，但事實(shí)上其中的一半都是糖分所以對于不同身體素質(zhì)的人要注意合理食用面食。眾所周知，糖分?jǐn)z入過多會導(dǎo)致不同的疾病，攝入過多的糖分，多余不能消化的糖分，會被身體儲存起來，青少年在飲食中攝入過多糖分，他們成年后患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)會明顯升高。但其實(shí)正常食用面食并不會導(dǎo)致嚴(yán)重的疾病，重要是合理安排膳食，合理搭配就好了。實(shí)驗(yàn)誤差分析1.在稱取面粉時(shí)候，濾紙上有少許淀粉未倒干凈，或者電子天平不太準(zhǔn)確造成的質(zhì)量上的誤差。2.在定容和移