抗體工程藥物優(yōu)秀公開課件

第五章抗體工程藥物抗體——機(jī)體在抗原性物質(zhì)的刺激下所產(chǎn)生的一種免疫球蛋白(主要由淋巴細(xì)胞所產(chǎn)生)，因其能與細(xì)菌、病毒或毒素等異源性物質(zhì)結(jié)合而發(fā)揮預(yù)防、治療疾病作用。抗體類藥物以其高特異性、有效性和安全性正在發(fā)展成為國際藥品市場上一大類新型診斷和治療劑。

一、抗體藥物的發(fā)展歷程第一代抗體藥物

動物多價抗血清。主要用于一些細(xì)菌感染性疾病的早期被動免疫治療。具有一定的療效，但異源性蛋白引起的較強(qiáng)的人體免疫反應(yīng)限制了這類藥物的應(yīng)用，因而逐漸被抗生素類藥物所代替。

第二代抗體藥物第三代抗體藥物一、抗體藥物的發(fā)展歷程第一代抗體藥物

第二代抗體藥物利用雜交瘤技術(shù)制備的單克隆抗體及其衍生物。第三代抗體藥物1.單克隆抗體-雜交瘤技術(shù)宣告誕生圖1.治療性抗體發(fā)展歷程和事件

2.應(yīng)用抗體治療淋巴瘤取得成功3.OKT3單抗被美國FDA批準(zhǔn)上市4.單抗用于腫瘤治療效果不佳

5.抗內(nèi)毒素單抗試用于治療敗血癥性休克失敗6.抗17-1A和ReoPro上市7.FDA批準(zhǔn)21個治療性單抗上市一、抗體藥物的發(fā)展歷程第一代抗體藥物

第二代抗體藥物利用雜交瘤技術(shù)制備的單克隆抗體及其衍生物。第三代抗體藥物基因工程抗體

基因工程抗體優(yōu)點(diǎn)①通過基因工程技術(shù)的改造，可以降低甚至消除人體對抗體的排斥反應(yīng)；②基因工程抗體的分子量較小，可以部分降低抗體的鼠源性，更有利于穿透血管壁，進(jìn)入病灶的核心部位；③根據(jù)治療的需要，制備新型抗體；④可以采用原核細(xì)胞、真核細(xì)胞和植物等多種表達(dá)形式，大量表達(dá)抗體分子，大大降低了生產(chǎn)成本。二、抗體藥物的應(yīng)用進(jìn)展目前正在進(jìn)行開發(fā)和已經(jīng)投入市場的抗體藥物主要用途：器官移植排斥反應(yīng)的逆轉(zhuǎn)腫瘤免疫診斷腫瘤免疫顯像腫瘤導(dǎo)向治療哮喘、牛皮癬、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡、急性心梗、膿毒癥、多發(fā)性硬化癥及其他自身免疫性疾病抗獨(dú)特型抗體作為分子瘤苗治療腫瘤多功能抗體（雙特異抗體、三特異抗體、抗體細(xì)胞因子融合蛋白、抗體酶等）（一）抗體診斷試劑1、血清學(xué)鑒定用的抗體類試劑鑒定病原菌的抗體試劑乙型肝炎病毒表面抗原的反向被動血凝診斷試劑妊娠診斷試劑抗ABO血型系統(tǒng)血清2、免疫標(biāo)記技術(shù)用的抗體類試劑熒光抗體診斷試劑（1）熒光抗體的制備（2）免疫熒光測定方法免疫酶抗體診斷試劑（1）免疫酶染色法用抗體診斷試劑（2）酶免疫測定用抗體診斷試劑放射免疫用抗體診斷試劑放射免疫用抗體診斷試劑放射免疫技術(shù)是將放射性核素分析的高度靈敏性與抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合起來建立的檢測技術(shù)。放射性核素標(biāo)記抗體的方法：①氯胺-T法②Iodogen氏法抗原的測定有：①夾心法②間接法③竟?fàn)幏ǔＳ脴?biāo)記抗體試劑①HBsAg放射性核素標(biāo)記抗體診斷試劑②HBeAg放射性核素標(biāo)記抗體診斷試劑③HAV抗原放射性核素標(biāo)記抗體診斷試劑④AFP放射性核素標(biāo)記抗體診斷試劑⑤CEA放射性核素標(biāo)記抗體診斷試劑放射免疫顯像優(yōu)點(diǎn)：①在體內(nèi)確切腫瘤定位作用，準(zhǔn)確性達(dá)90%，靈敏度達(dá)100%。②在體內(nèi)可檢出0.5cm大小的病灶，并可檢出肺腦的轉(zhuǎn)移灶。③小分子抗體易到達(dá)腫瘤部位，可顯著提高N/NT值。④抗體在腫瘤部位可保留6-9日。⑤能觀擦抗體在血中的半衰期和可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)。建立預(yù)定位技術(shù)需解決3個問題：①抗體在腫瘤組織滯留要7d以上。②Ab-DTPA偶聯(lián)物比較穩(wěn)定；③內(nèi)源性金屬離子對DTPA的封閉作用要小。（二）抗體治療藥物以抗體為載體的導(dǎo)向治療藥物，還不成熟。1、放射性核素標(biāo)記的抗體治療藥物抗體作為放射性核素的導(dǎo)向載體，標(biāo)記操作簡便用量小。放射性核素標(biāo)記的抗體對腫瘤細(xì)胞殺傷較大。3、毒素偶聯(lián)的抗體藥物1）免疫毒素及其換代制品在導(dǎo)向藥物中，毒素和抗體的交聯(lián)物稱為免疫毒素。第一代免疫毒素是包含有A、B鏈完整毒素和抗體的交聯(lián)物，其中B鏈非特異性結(jié)合，使其僅在體外應(yīng)用。第二代免疫毒素是利用抗體或抗體片段與毒素的A鏈或與A鏈相似的單鏈核糖體失活蛋白的結(jié)合物。因此避免了第一代免疫毒素的非特異性，故能在體內(nèi)有一定的抗腫瘤作用。第三代免疫毒素：重組免疫毒素用基因克隆方法改造毒素基因和小分子抗體基因重組表達(dá)。特異性好、穩(wěn)定性強(qiáng)、滲透性佳、免疫源性低、可大量制備。3）免疫毒素的臨床應(yīng)用治療腫瘤、自身免疫病并能克復(fù)組織移植排斥反應(yīng)，可單獨(dú)給藥也可包裹在脂質(zhì)體及其它微粒中給藥。三、國際抗體藥物的研究和產(chǎn)業(yè)化現(xiàn)狀全球2001年抗體藥物的發(fā)展現(xiàn)狀來源階段嵌合人源化人鼠其他合計(jì)上市6907022新藥申請011103Ⅲ期1838020Ⅱ期627145860Ⅰ期511681040合計(jì)16522424181342004年已有22個抗體藥物上市，以人源化和嵌合抗體為主。轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物生產(chǎn)抗體，其價格低廉，發(fā)展前景可喜。全球有超過225家公司正在研發(fā)臨床治療用單克隆抗體，預(yù)估有335個產(chǎn)品正在研發(fā)中，其中64%進(jìn)入臨床前研究。臨床應(yīng)用：癌癥占50%，自體免疫疾病占18%，感染占13%，心血管疾病占6%，器官移植排斥占5%，其他疾病占8%。圖2抗體藥物的銷售趨勢

2000年銷售額已達(dá)29億美元，2002年接近40億美元，平均年增長率為30%，2008年預(yù)估市場銷售將達(dá)140億美元。全球抗體藥物市場份額分布美國其他國家第三世界國家90%10%＜1%四、我國抗體藥物的研究和產(chǎn)業(yè)化現(xiàn)狀截止目前已經(jīng)獲得了一大批針對各種抗原的鼠源性單克隆抗體。(1)細(xì)胞表面抗原，如血型抗原、白細(xì)胞分化抗原、組織相容性抗原、膜受體等。(2)腫瘤相關(guān)抗原，如胃癌、肝癌、大腸癌、結(jié)腸癌、肺癌、卵巢癌、腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌等。(3)病原微生物，如流感病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒等病毒抗原；痢疾桿菌脂多糖，沙門氏菌等細(xì)菌抗原；惡性瘧原蟲、血吸蟲等寄生蟲抗原；大腸桿菌內(nèi)毒素、破傷風(fēng)類毒素等微生物毒原抗原。(4)其它抗原，如細(xì)胞因子、酶、血漿原蛋白、免疫球蛋白、補(bǔ)體、激素等。

針對上述抗原的鼠單抗大部分被用于實(shí)驗(yàn)研究，如抗原分類、鑒定和功能研究、抗原基因克隆、蛋白分離純化等，有一部分抗體用于檢驗(yàn)、疾病診斷、預(yù)后判斷等，少部分鼠單抗也被用于人類疾病治療研究。

目前，我國已批準(zhǔn)的診斷性單抗有31個，已有7個治療性單抗產(chǎn)品獲準(zhǔn)在我國上市應(yīng)用，其中5個為國外進(jìn)口產(chǎn)品。中國SFDA批準(zhǔn)上市和進(jìn)入臨床的抗體藥物抗體名稱商品名廠家抗體類型研發(fā)階段適應(yīng)癥Muromonab-CD3Orthoclone奧多生物技術(shù)公司（OrthoBiotech）鼠源批準(zhǔn)上市抑制排斥反應(yīng)Rituximab利妥昔羅氏（Roche）公司嵌合批準(zhǔn)上市治療非何杰金淋巴瘤Trastuzumab和曲妥珠羅氏（Roche）公司人源化批準(zhǔn)上市治療乳腺癌Basiliximab巴利昔諾華制藥（Novartis）嵌合批準(zhǔn)上市各種器官移植的抗排斥治療，尤其在對腎移植后急性排斥反應(yīng)的治療Trastuzumab賀塞汀基因工程技術(shù)公司（Genentech）人源化批準(zhǔn)上市注射用鼠源性抗人T淋巴細(xì)胞CD3抗原單克隆抗體

武漢生物制品研究所

鼠源批準(zhǔn)上市抗腎移植單抗OKT3抗人IL-8單克隆抗體乳膏

東莞宏遠(yuǎn)逸士生物技術(shù)藥業(yè)有限公司

鼠源批準(zhǔn)上市牛皮癬的治療

碘［131I］人鼠嵌合型腫瘤細(xì)胞核單克隆抗體注射液（131I-chTNT）

上海美恩生物技術(shù)有限公司

嵌合批準(zhǔn)上市國家Ⅰ類新藥，用于多種實(shí)體瘤

中國SFDA批準(zhǔn)上市和進(jìn)入臨床的抗體藥物抗體名稱商品名廠家抗體類型研發(fā)階段適應(yīng)癥碘［131I］肝癌片段抗體注射液

美妥昔第四軍醫(yī)大學(xué)

成都華神集團(tuán)鼠源完成臨床待批上市用于原發(fā)性肝癌的靶向治療

H-R3北京百泰生物藥業(yè)公司

人源化

Ⅱ期臨床

實(shí)體瘤治療

注射用鼠抗人T淋巴細(xì)胞CD3表面抗原單克隆抗體

濟(jì)南天康生物制品有限公司

鼠源臨床研究抗移植排斥

注射用抗腎病綜合癥出血熱病毒單克隆抗體（I型）

武漢生物制品所第四軍醫(yī)大學(xué)

鼠源臨床研究治療出血熱抗人肝癌單抗

中科院細(xì)胞所

鼠源臨床研究抗乙型腦炎單抗

北京生物制品所第四軍醫(yī)大學(xué)

鼠源臨床研究注射用重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體-抗體融合蛋白

上海美恩生物技術(shù)有限公司嵌合臨床研究美國的藥物臨床試驗(yàn)研究進(jìn)程