自身免疫性疾病的實(shí)驗(yàn)室檢測

自身免疫性疾病的實(shí)驗(yàn)室檢測第1頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二自身免疫性疾病

機(jī)體免疫系統(tǒng)受環(huán)境或遺傳等因素作用產(chǎn)生針對自身正?；蜃冃缘慕M織、器官、細(xì)胞、蛋白質(zhì)或酶類等自身抗原的免疫應(yīng)答（自身抗體或致敏T細(xì)胞），導(dǎo)致自身組織器官損傷或功能障礙所致的疾病。第2頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二第3頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二第4頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二常見自身抗體的檢測抗核抗體的檢測與應(yīng)用抗ENA抗體譜的檢測與應(yīng)用與小血管炎相關(guān)的自身抗體檢測與應(yīng)用與RA相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用與自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用與橋本甲狀腺炎相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用第5頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二

抗核抗體的檢測與應(yīng)用抗核抗體（antinuclearantibody，ＡＮＡ）是一組將自身各種細(xì)胞核成分作為靶抗原的自身抗體總稱。ＡＮＡ主要是ｌｇＧ，也有l(wèi)gM、lgA和lgD，無器官特異性。第6頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二抗核抗體的命名第7頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二第8頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二ＡＮＡ檢測方法：ＨＥｐ－２＋靈長類肝組織冷凍切片，與血清中ＡＮＡ結(jié)合，再加入酶標(biāo)抗人ｌｇＧ，復(fù)合物在熒光顯微鏡下觀察。第9頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二常見ＡＮＡ熒光染色模型均質(zhì)型（H）：高滴度均質(zhì)型主要見于SLE患者。顆粒型（S）：高滴度的顆粒型常見于MCTD，同時(shí)也見于SLE，硬化癥、SS等。核膜型（M）：主要見于原發(fā)性膽汁性肝硬化。核仁型（N）：高滴度對診斷硬皮病具有一定特異性。第10頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二常見自免的ＡＮＡ檢出率第11頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二抗ｄｓＤＮＡ抗體的檢測與應(yīng)用

檢測：綠蠅短膜蟲為基質(zhì)的ＩＩＦ法，高度特異性：蟲體動基體有環(huán)狀ｄｓＤＮＡ，不含其他核抗原。意義：ＳＬＥ患者的特征性標(biāo)志抗體，ＳＬＥ的重要診斷標(biāo)準(zhǔn)之一，該抗體參與ＳＬＥ的發(fā)?。盒纬啥喾N冷沉淀而致血管炎，ＳＬＥ腎炎及典型的蝶形紅斑均與該抗體有關(guān)，從而該抗體的滴度的動態(tài)測定可監(jiān)控治療。但ｄｓＤＮＡ抗體對ＳＬＥ的敏感性僅為３０％－５０％，ｄｓＤＮＡ抗體陰性不能排除ＳＬＥ的診斷。第12頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二抗核小體抗體（ａｎｔｉｎｕｃｌｅｏｓｏｍｅａｎｔｉｂｏｄｙ，ＡｎｕＡ）的檢測與應(yīng)用。常用ＥＬＩＳＡ法凋亡細(xì)胞產(chǎn)生核小體，ＳＬＥ患者的吞噬細(xì)胞清除能力受損，導(dǎo)致核小體大量積聚，產(chǎn)生抗核小體抗體。ＡｎｕＡ更早出現(xiàn)，臨床資料顯示，有１５％－１９％的抗ｄｓＤＮＡ抗體陰性的ＳＬＥ中ＡｎｕＡ陽性。第13頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二抗ENA抗體譜的檢測與應(yīng)用抗ENA抗體譜：可提取核抗原抗體的總稱。臨床常檢測的主要包括：抗Sm抗體：SLE標(biāo)記性抗體（30%-40%陽性檢出率）抗nRNP抗體：MCTD95%陽性檢出率（高滴度）抗SSA/Ro、抗SSB/La抗體：SS陽性檢出率分別為：70-80%和40%，抗SSB的特異性高于抗SSA?？蛇_(dá)50-60%。抗Sc1-70抗體：幾乎僅在PSS患者檢出，在PSS的陽性檢出率40%-60%抗Jo-1抗體：常見于多發(fā)性肌炎DM，檢出率40-50%，在PM/DM檢出率25%，單獨(dú)皮肌炎檢出率不足10%

抗ACA抗體：與局限性系統(tǒng)性硬化癥有關(guān)，亦可見于原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）第14頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二免疫印跡技術(shù)：固相載體常為吸附有抗原的硝酸纖維膜。原理：ENA抗原經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，按分子量大小形成區(qū)帶，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)參照物確定每一抗原區(qū)帶的分子量。然后轉(zhuǎn)印至硝酸纖維薄膜上制成抗原吸附載體膜。第15頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二血管炎相關(guān)的自身抗體檢測與應(yīng)用抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）是一組以人中性粒細(xì)胞胞漿成分為靶抗原的自身抗體。是系統(tǒng)性血管炎的標(biāo)志抗體。第16頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二ANCA熒光染色型與靶抗原第17頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二ANCA的臨床應(yīng)用第18頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用RF：以變性lgG的Fc段為靶抗原。常見的RF有l(wèi)gM型、lgG、lgA和lgE型，除RA之外的疾病中RF滴度較低＜40IU/ml。1、lgM型＞80IU/ml并伴有嚴(yán)重關(guān)節(jié)功能障礙時(shí)通常提示患者預(yù)后不良。2、lgG型與RA患者的滑膜炎、血管炎和關(guān)節(jié)癥狀密切相關(guān)，常伴隨lgM型同時(shí)出現(xiàn)，在正常人及非RA患者中很難檢出。3、lgA型與RA患者關(guān)節(jié)癥狀的嚴(yán)重程度及骨質(zhì)破壞有顯著相關(guān)性。第19頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二幾種疾病RF的檢出率第20頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二抗角蛋白抗體AKA主要見于RA患者，陽性率為30-55%，特異性可達(dá)95%-99%。其他疾病中檢出率極低。AKA是判斷RA預(yù)后的一個(gè)標(biāo)志性抗體，高滴度常提示疾病較為嚴(yán)重，AKA與RF很少平行出現(xiàn)。第21頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二抗環(huán)瓜氨酸肽抗體CCP：ELISA法檢測。對RA的特異性為96%。在RA早期階段就可測出，其特異性明顯高于RF，抗CCP陽性者更容易發(fā)生關(guān)節(jié)損害。第22頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用常見自身免疫性肝?。鹤陨砻庖咝愿窝住⒃l(fā)性膽汁性肝硬化、原發(fā)性硬化性膽管炎。第23頁，共24頁，2023年，2月20日，星期二1、抗平滑肌抗體ASMA：是自身免疫性肝炎AIH的血清學(xué)標(biāo)志抗體。陽性率90%。高滴度1:1000時(shí)對AIH的特異性達(dá)100%。AIH患者主要為lgG型，而在PBC與AIH重疊時(shí)，常以lgG和lgM同時(shí)出現(xiàn)。2、抗肝腎微粒體抗體LKM-1和抗肝細(xì)胞胞質(zhì)抗體LC-1為2型AIH的特異性標(biāo)志。3、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗體（SLA/LP）是