實(shí)驗(yàn)1微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器洗滌及干熱滅菌課件

實(shí)驗(yàn)一微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器洗滌及干熱滅菌

目的要求實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)程序結(jié)果與思考題目的要求認(rèn)識(shí)微生物實(shí)驗(yàn)所需要的各種器皿，了解常用工具和儀器的名稱、用途。掌握對(duì)玻璃器皿的清洗、包扎方法與干熱滅菌的操作過(guò)程。實(shí)驗(yàn)原理微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)要求較高的無(wú)菌狀態(tài)，因此，實(shí)驗(yàn)所用的器皿，大多數(shù)要進(jìn)行消毒、滅菌從而用以培養(yǎng)微生物，所以對(duì)其質(zhì)量、規(guī)格、洗滌和包扎方法均有一定要求。清潔的玻璃器皿是實(shí)驗(yàn)得到正確結(jié)果的先決條件，包扎方法要能保證防止污染雜菌。空的玻璃器皿一般用干熱滅菌.

實(shí)驗(yàn)程序Ⅰ（儀器的認(rèn)識(shí)、清洗與包扎）（一）學(xué)習(xí)下列常用儀器的種類、規(guī)格和應(yīng)用范圍：①培養(yǎng)皿；②試管；③三角瓶；④燒杯；⑤吸管；⑥量筒。（二）學(xué)習(xí)玻璃器皿的洗滌方法：（三）學(xué)習(xí)各種器皿的包扎：由一底一蓋組成一套，常用的培養(yǎng)皿皿底直徑90mm，高15mm,皿底皿蓋均為玻璃制成。制成平板，可用于分離、純化、鑒定菌種、活菌計(jì)數(shù)以及測(cè)定抗生素、噬菌體的效價(jià)等。根據(jù)其大小和用途不同，有下列三種型號(hào)：(1)大試管(約18mm×180mm):

可裝倒平板用的培養(yǎng)基;

可作制備斜面用（需要大量菌體時(shí)用）裝液體培養(yǎng)基用于微生物的振蕩培養(yǎng)。(2)中試管[(13～15)mm×(100～150)mm]:

裝液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌或做斜面用,

用于細(xì)菌、霉菌、病毒等的稀釋和血清學(xué)試驗(yàn)。(3)小試管[(10～12)mm×100mm]:

一般用于糖發(fā)酵或血清學(xué)試驗(yàn)，和其它需要節(jié)省材料的試驗(yàn)。三角瓶:

100mL、250mL、500mL和1000mL

用來(lái)裝無(wú)菌水、培養(yǎng)基和振蕩培養(yǎng)微生物等。燒杯:

50mL、100mL、250mL、500mL和1000mL

用來(lái)配制培養(yǎng)基與各種溶液等。玻璃吸管:

1mL、2mL、5mL、10mL

玻璃器皿的洗滌方法:1、新玻璃器皿的洗滌

在2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時(shí)，用自來(lái)水沖洗干凈。2、舊玻璃器皿的洗滌（1）試管、培養(yǎng)皿、三角瓶：洗衣粉和去污粉洗刷，自來(lái)水沖洗

A裝有固體培養(yǎng)基：刮掉，洗滌

B帶菌的器皿：2%來(lái)蘇爾或0.25%新潔爾滅消毒液中浸泡24小時(shí)或煮沸0.5小時(shí)，然后洗滌

C

帶病原菌培養(yǎng)物的器皿：先高壓蒸汽滅菌，倒去培養(yǎng)物（2）玻璃吸管：吸管尖端與裝在水龍頭上的橡皮管連接，反復(fù)沖洗a

吸過(guò)血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管：立即投入盛有自來(lái)水的容器中浸泡，實(shí)驗(yàn)后集中沖洗。b

塞有棉花的吸管：用水將棉花沖出，然后沖洗c

吸過(guò)含有微生物培養(yǎng)物的吸管：2%來(lái)蘇爾或0.25%新潔爾滅消毒液中浸泡24小時(shí)然后洗d吸管內(nèi)壁有油垢：洗滌液中浸泡數(shù)小時(shí)，再?zèng)_洗

洗滌后，若內(nèi)壁的水均勻分布成一薄層，表示完全洗凈，若還掛有水珠，則需用洗滌液浸泡數(shù)小時(shí)，然后再用自來(lái)水沖洗。洗凈后的試管倒置于試管筐內(nèi)，三角瓶倒置于洗滌架上，培養(yǎng)皿的皿底和皿蓋分開，依次壓著皿邊排列倒扣在桌上,晾干.實(shí)驗(yàn)程序Ⅱ（干熱滅菌的原理和操作方法

）干熱滅菌是利用高溫使微生物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固性與其本身的含水量有關(guān)，在菌體受熱時(shí)，當(dāng)環(huán)境和細(xì)胞內(nèi)含水量越大，則蛋白質(zhì)凝固就越快，反之含水量越少，凝固緩慢。與濕熱滅菌相比，干熱滅菌所需溫度要高（160～170℃），時(shí)間要長(zhǎng)（1～2h），但干熱滅菌溫度不能超過(guò)180℃，否則，包器皿的紙或棉塞就會(huì)燒焦，甚至引起燃燒。原理實(shí)驗(yàn)程序Ⅱ（干熱滅菌的原理和操作方法

）1．裝入待滅菌物品

將包好的待滅菌物品（培養(yǎng)皿、吸管等）放入電烘箱內(nèi)，關(guān)好箱門。物品不要擺得太擠，以免妨礙空氣流通；不要接觸電烘箱內(nèi)壁的鐵板，以防包裝紙烤焦起火。2．升溫

接通電源，撥動(dòng)開關(guān)，打開電烘箱排氣孔，讓溫度逐漸上升。當(dāng)溫度升至100℃時(shí)，關(guān)閉排氣孔。3．恒溫

當(dāng)溫度升達(dá)到160～170℃時(shí)，恒溫調(diào)節(jié)器會(huì)自動(dòng)控制調(diào)節(jié)溫度，保持此溫度2h