USNF非無(wú)菌制劑的微生物檢查微生物計(jì)數(shù)

非無(wú)菌制劑的微生物檢查：

微生物計(jì)數(shù)USP61培訓(xùn)專題總述計(jì)數(shù)培養(yǎng)基生長(zhǎng)能力測(cè)試和方法適用性產(chǎn)品檢驗(yàn)檢驗(yàn)方法提供了在有氧條件下嗜常溫菌和真菌的定量計(jì)數(shù)方法。（該方法不適用于含活性微生物作為活性組分的產(chǎn)品）如供試品具有抗菌活性，盡可能移除或中和。如使用滅活劑，應(yīng)證明其有效性及對(duì)微生物無(wú)毒性。如使用表面活性劑進(jìn)行樣品制備，應(yīng)證明其對(duì)微生物無(wú)毒性及其與所用滅活劑的相容性?？偸鲇?jì)數(shù)方法：薄膜過(guò)濾法平皿計(jì)數(shù)法最大概率法（MPN）：用于檢測(cè)極少數(shù)量的微生物，精密度、準(zhǔn)確度差，不適合用于霉菌傾注平板法表面涂布法back計(jì)數(shù)培養(yǎng)基生長(zhǎng)能力測(cè)試和方法適用性生長(zhǎng)能力測(cè)試計(jì)數(shù)方法適用性

生長(zhǎng)能力測(cè)試：總則菌液制備陰性對(duì)照培養(yǎng)基生長(zhǎng)測(cè)試結(jié)果判斷總則供試品微生物計(jì)數(shù)中所使用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行適用性檢查。供試品的微生物計(jì)數(shù)方法應(yīng)進(jìn)行方法適用性試驗(yàn)，以確認(rèn)所采用的方法適合于該產(chǎn)品的微生物計(jì)數(shù)。若檢驗(yàn)程序或產(chǎn)品發(fā)生變化可能影響檢驗(yàn)結(jié)果時(shí)，計(jì)數(shù)方法應(yīng)重新進(jìn)行適用性試驗(yàn)。名詞縮寫(xiě)解釋TAMC：TotalAerobicMicrobialCount總需氧微生物數(shù)TYMC：TotalYeastsandMoldsCount霉菌酵母菌總數(shù)TSA：大豆酪蛋白消化瓊脂TSB：大豆酪蛋白消化肉湯SDA：薩布羅葡萄糖瓊脂SDB：薩布羅葡萄糖肉湯PDA：馬鈴薯葡萄糖瓊脂試驗(yàn)菌株試驗(yàn)用菌株的傳代次數(shù)不得超過(guò)5代（從菌種保存中心獲得的冷凍干粉菌種為第0代），并采用適宜的菌種保藏技術(shù)進(jìn)行保存，以保證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特性。試驗(yàn)菌株的種類：白色念珠菌(ATCC10231)黑曲霉(ATCC16404)真菌金黃色葡萄球菌（ATCC6538)銅綠假單胞菌(ATCC9027)枯草芽孢桿菌(ATCC6633）細(xì)菌菌液制備按表1規(guī)定程序培養(yǎng)各試驗(yàn)菌株。取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物，用pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或pH7.2磷酸鹽緩沖液制成適宜濃度的菌懸液；如用于混懸黑曲霉芽孢，可在緩沖液中加入0.05%吐溫80。制備好的懸浮液在2小時(shí)內(nèi)使用，如存放在2℃-8℃則可延長(zhǎng)至24小時(shí)內(nèi)使用。作為制備黑曲霉或枯草芽孢桿菌的營(yíng)養(yǎng)菌體新鮮懸浮液后并稀釋的一種替代方法，可制備穩(wěn)定芽孢懸浮液并取一定體積的芽孢懸浮液用于試驗(yàn)接種。穩(wěn)定的芽孢懸浮液可在有效期內(nèi)存放于2℃-8℃。陰性對(duì)照為確認(rèn)試驗(yàn)條件是否符合要求，應(yīng)以稀釋劑代替供試品進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)，陰性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。供試品檢查時(shí)也需進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)。如果陰性對(duì)照有菌生長(zhǎng)，應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。培養(yǎng)基生長(zhǎng)測(cè)試每一批成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按培養(yǎng)基處方配制的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行適用性檢查。按表1

所述，接種不多于100cfu的菌液到大豆酪蛋白消化肉湯和大豆酪蛋白消化瓊脂或薩布羅葡萄糖瓊脂，各自進(jìn)行培養(yǎng)。結(jié)果判斷對(duì)于固體培養(yǎng)基，測(cè)得的促生長(zhǎng)作用與標(biāo)準(zhǔn)接種液的計(jì)算值相比，相差不得超過(guò)兩倍。對(duì)于新鮮配制的接種液，微生物的生長(zhǎng)應(yīng)與上一次檢驗(yàn)并批準(zhǔn)的培養(yǎng)基批次的結(jié)果相似。液體培養(yǎng)基若與上一次檢驗(yàn)并批準(zhǔn)的培養(yǎng)基批次的結(jié)果相似，可清晰地看見(jiàn)微生物的生長(zhǎng)，亦認(rèn)為是適宜的。back計(jì)數(shù)方法適用性樣品制備接種與稀釋中和/去除抗菌活性產(chǎn)品存在情況下的微生物的恢復(fù)生長(zhǎng)結(jié)果與解釋非脂質(zhì)脂質(zhì)不溶于水產(chǎn)品氣霧劑或噴霧劑透皮貼劑水溶性產(chǎn)品一般可分根據(jù)供試品得到理化特性與生物學(xué)特性，采取適宜的方法制備供試液。供試液制備若需加溫時(shí)，應(yīng)均勻加熱，且溫度不應(yīng)超過(guò)45℃。供試液從制備至加入檢驗(yàn)用培養(yǎng)基，不得超出1小時(shí)。樣品制備水溶性產(chǎn)品：用pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液，pH7.2磷酸鹽緩沖液或大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基將供試品溶解或稀釋（一般制備成1:10的稀釋液）。必要時(shí)，調(diào)節(jié)pH值至6-8.如需進(jìn)一步稀釋則使用相同的稀釋液。不溶于水的的非脂質(zhì)產(chǎn)品：用pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液，pH7.2磷酸鹽緩沖液或大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基將供試品溶解或稀釋（一般制備成1:10的稀釋液）。對(duì)于潤(rùn)濕性差的物質(zhì)可加入表面活性劑，如1g/L吐溫80助混。必要時(shí)，調(diào)節(jié)pH值至6-8。如需進(jìn)一步稀釋則使用相同的稀釋液。脂質(zhì)產(chǎn)品：用無(wú)菌十四烷酸異丙酯溶解，或?qū)⒐┰嚻放c最少量并能使供試品乳化的無(wú)菌吐溫80或其它非抑制性無(wú)菌的表面活性劑混合。小心混合，若需要可在水浴中進(jìn)行，然后加入預(yù)熱的稀釋劑使成1∶10供試液，混合，并在最短時(shí)間內(nèi)形成乳狀液。必要時(shí)，用含適宜濃度的無(wú)菌吐溫80或其他非抑制性無(wú)菌表面活性劑的稀釋劑進(jìn)一步10倍系列稀釋。氣霧劑或噴霧劑：在無(wú)菌條件下將供試品轉(zhuǎn)移至膜過(guò)濾裝置或無(wú)菌的容器中以便下一步取樣。從每個(gè)待測(cè)容器中取出全部含量或指定劑量的供試品進(jìn)行檢驗(yàn)。透皮貼劑：去掉透皮貼劑的防粘層，將粘貼面朝上放置在無(wú)菌玻璃或塑料器皿上。在粘貼面上覆蓋一層適宜的無(wú)菌多孔材料（如無(wú)菌紗布），避免貼膏劑粘貼在一起。然后將其轉(zhuǎn)移至適宜體積并含有滅活劑（如吐溫80或卵磷脂）的稀釋液的容器中，用力振蕩至少30分鐘，制成供試液。接種與稀釋將足量的細(xì)菌懸浮液加入按“樣品制備”項(xiàng)下制備的樣品和對(duì)照（不含待驗(yàn)材料）中，所得接種液中細(xì)菌含量不得過(guò)100cfu。接種的懸浮體積不得超過(guò)稀釋供試品體積的1%。為確認(rèn)供試品中的微生物能被充分檢出，首先應(yīng)選擇最低的稀釋倍數(shù)的樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)。如因?yàn)楫a(chǎn)品具有抗菌活性或溶解性差而不能實(shí)現(xiàn)時(shí)，應(yīng)采取適宜的方法對(duì)供試品進(jìn)一步處理。如樣品的生長(zhǎng)抑制作用無(wú)法用其它方法避免，則可將其中和、稀釋或過(guò)濾后加入等份的微生物懸浮液。中和/去除抗菌活性供試液接種后，按下列“微生物在產(chǎn)品存在下的恢復(fù)生長(zhǎng)”項(xiàng)中所述規(guī)程進(jìn)行培養(yǎng)。所得微生物的數(shù)量應(yīng)與對(duì)照液中微生物數(shù)量相似。若微生物的生長(zhǎng)受到抑制（減少超過(guò)一半），可采用下述方法消除供試品的抑菌活性，確保其結(jié)果有效性。（1）增加稀釋液或培養(yǎng)基體積；（2）在稀釋劑中加入適宜的中和劑；（3）薄膜過(guò)濾；（4）結(jié)合（1）、（2）、（3）使用。（中和劑可用于中和抗菌劑的活性（參見(jiàn)表）。優(yōu)先在滅菌前將中和劑加入至稀釋劑或培養(yǎng)基中。使用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行空白對(duì)照，以證明其有效性和對(duì)微生物無(wú)毒性）干擾物質(zhì)可用的中和劑或中和方法戊二醛，水銀劑亞硫酸氫鈉酚類，乙醇，醛類，吸附物稀釋醛類甘氨酸季胺類化合物（QACs），對(duì)羥基苯甲酸酯，雙胍類化合物卵磷脂碘酒，對(duì)羥基苯甲酸酯聚山梨酯水銀劑巰基醋酸鹽水銀劑，鹵化物，醛類硫代硫酸鹽乙二胺四乙酸鹽（EDTA）鎂或鈣離子表：消除干擾物質(zhì)常用的中和劑或中和方法中和劑——可用于中和抗菌劑的活性（參見(jiàn)下表）。（1）優(yōu)先在滅菌前將中和劑加入至稀釋劑或培養(yǎng)基中。（2）使用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行空白對(duì)照，以證明其有效性和對(duì)微生物無(wú)毒性）若沒(méi)有適宜的方法消除供試品的抑菌活性，那么所接種的微生物分離失敗可看成是供試品的抗菌活性引起的，同時(shí)表明該供試品不能被試驗(yàn)菌污染。但是，供試品也可能僅對(duì)一些特定的微生物具有抑制作用，而對(duì)試驗(yàn)菌株之外或試驗(yàn)菌株中代表性較差的其他菌株沒(méi)有抑制作用。因此，根據(jù)微生物的生長(zhǎng)和特定的可接受標(biāo)準(zhǔn)，用最高稀釋級(jí)別的供試液進(jìn)行檢驗(yàn)。產(chǎn)品存在蒙情況下的情微生物恢源復(fù)生長(zhǎng)應(yīng)對(duì)所翻列的各會(huì)種微生矮物進(jìn)行有單獨(dú)檢索驗(yàn)。只近對(duì)加入品試驗(yàn)菌元株的微臘生物進(jìn)需行計(jì)數(shù)運(yùn)。傾注平皿血法計(jì)數(shù)法薄膜過(guò)濾法平板計(jì)數(shù)法最大概率數(shù)（MPN）表面涂布法薄膜過(guò)濾刊法—所用的囑濾膜標(biāo)臘示孔徑脖不得大省于0.45虎μm.選擇濾崗膜的材爽質(zhì)應(yīng)保忙證其細(xì)偽菌截留疲的能力染不受供哭試品及廚其他組為分影響糕。每種埋微生物索使用單憲獨(dú)的薄不膜過(guò)濾妥器。按“樣品袖制備”、艦“接種于廢稀釋”、婚“中和/去除抗菌華活性”項(xiàng)樣下所述制妥備樣品，針然后轉(zhuǎn)移滔至薄膜過(guò)核濾器后迅肥速過(guò)濾，暢并用適宜爭(zhēng)體積的稀裝釋劑沖洗木濾膜。用于確冤定TAMC時(shí)，將陸濾膜轉(zhuǎn)衣移至TSA的表面盤(pán)；用于確定TYM礦C時(shí)，將濾海膜轉(zhuǎn)移至SDA的表面。TSA培養(yǎng)基平板計(jì)貸數(shù)法——每種培梁養(yǎng)基至殊少制備溝兩份平借板計(jì)數(shù)辭，結(jié)果株以平均足值表示乏。傾注平肚板法——先取1mL按“樣品隆制備”、貝“接種與盜稀釋”和備“中和/去除抗菌益活性”項(xiàng)翁下所述制股備的樣品蒼加入直徑篇為90m泳m的培養(yǎng)皿滿，后加入15-2外0mL溫度不超喝過(guò)45℃TSA或SDA，混勻犧，凝固游，按表1所述培凈養(yǎng)。如仰使用更筋大的培鞏養(yǎng)皿，構(gòu)應(yīng)相應(yīng)厲增加瓊晃脂培養(yǎng)攜基的用乞量。每聲種培養(yǎng)蹦基取其兆計(jì)數(shù)的路算術(shù)平搞均值，川并計(jì)算挽原接種劉液的cfu值。表面涂布汽法——取15-2截0mL溫度不超嘴過(guò)45℃TSA或SDA注入直冶徑為90m其m的培養(yǎng)楊皿，凝得固，制塊成平板狂。如使都用更大竹的培養(yǎng)冒皿，應(yīng)巨相應(yīng)增辨加瓊脂塊培養(yǎng)基倡的用量潛。干燥倚培養(yǎng)皿脊，可用堪層流柜厘或培養(yǎng)塌箱進(jìn)行刻干燥。戀量取不疫少于0.1鬼mL的按“怨樣品的洞制備”逃、“接膏種與稀敏釋”和屠“中和/去除抗叮菌活性營(yíng)”項(xiàng)下位所述制逝備的樣撐品，并湯將其鋪般展在培瓶養(yǎng)基的艘表面。執(zhí)培養(yǎng)和符計(jì)數(shù)方原法同傾幫注平板滿法。最大概率狐數(shù)法（MPN）——精密度沒(méi)和準(zhǔn)確箏度要低鑒于薄膜隱過(guò)濾法少和平板掘計(jì)數(shù)法鎖。MPN法只適郵用于無(wú)直其它方步法可選款時(shí)TAMC的計(jì)數(shù)，叛本法不適袖用于霉菌第計(jì)數(shù)。若罪使用MPN法，按暫下述程估序進(jìn)行娃操作。按“樣品結(jié)制備”、牌“接種與徐稀釋”和伙“中和/去除抗菌噸活性”項(xiàng)睛下所述，態(tài)至少制備環(huán)三份連續(xù)富稀釋10倍的供意試液（俗即3個(gè)稀釋秋級(jí)別）獎(jiǎng)。從每張一稀釋現(xiàn)級(jí)別中里取出三坑等份的1g或1mL供試液接度種于三個(gè)壓含9-10辣mL大豆酪蛋稍白消化肉福湯試管。虜必要時(shí)，壟往培養(yǎng)基陵中加入表制面活性劑壩或滅活劑點(diǎn)。于30℃-35℃培養(yǎng)所有教試管中的限微生物，星培養(yǎng)時(shí)間秋不超過(guò)3天。如因借供試品的灘性質(zhì)導(dǎo)致羊難以讀取冶結(jié)果或?qū)Y(jié)果不確野定，再次定用相同的前肉湯或大課豆酪蛋白牌消化瓊脂星在相同的職溫度下培蒜養(yǎng)1-2天，讀禁取再次合培養(yǎng)的示結(jié)果。追根據(jù)表2確定每侵克或每便毫升供翠試品中刷微生物申的最大絞概率數(shù)裕。表2結(jié)果與解順釋在驗(yàn)證布薄膜過(guò)明濾法和將平板計(jì)迅數(shù)法的察方法適植用性時(shí)剪，任一將種試驗(yàn)補(bǔ)微生物電所得的番平均計(jì)喬數(shù)值與惰“接種歲與稀釋消”項(xiàng)下追所述不古含供試轟品的對(duì)磨照組所舟得值的單差異不董得超過(guò)嗎兩倍。逃在驗(yàn)證MPN法的適雕用性時(shí)糟，接種輪液所得男的計(jì)算子值應(yīng)在霞對(duì)照組暴結(jié)果的95%置信區(qū)素間內(nèi)。任一種渡檢驗(yàn)方麗法中有反一種或差多種試糾驗(yàn)微生使物的結(jié)運(yùn)果未能梁符合上價(jià)述標(biāo)準(zhǔn)林的，應(yīng)叮選擇與換標(biāo)準(zhǔn)最紐奉接近的涉檢驗(yàn)方魂法和條皺件來(lái)檢搏測(cè)樣品閑。bac蓄k產(chǎn)品檢拉驗(yàn)檢驗(yàn)用量產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果解透析檢驗(yàn)用量除另有渴規(guī)定，朵一般供巷試品的賭檢驗(yàn)量度為10g或10m訪L。對(duì)于耀氣霧劑傻或噴霧鋼劑，取10瓶劑量。色透皮貼劑時(shí)取10片。用于制成片劑元、膠囊劑趣、注射劑繁等的原料藥狐的取樣發(fā)量可適底當(dāng)減少駱：?jiǎn)挝缓羷┝亢啃∮诨虻扔?mg；或每克/每毫升(對(duì)于非達(dá)劑量單澤位顯示煉的制劑)含量小于1mg。在此情蓄況下，待遞測(cè)樣品量幟不得少于10個(gè)劑量第單位的桌含量或10g或10mL產(chǎn)品中的達(dá)含量。對(duì)于取陽(yáng)樣量有貿(mào)限或批賓量特別表小（如厲，小于100越0m朽L或100井0g）的作為畜原料藥的剩物料，除蛙另有規(guī)定刮外，檢驗(yàn)添量應(yīng)為批犯量的1%。對(duì)于一伸批中所另含的化酒學(xué)實(shí)體輛總量少衡于200個(gè)劑量謝單位的董產(chǎn)品（鑄如用于獎(jiǎng)臨床試肺驗(yàn)的樣悉品），嗎取樣量袖可減至2個(gè)劑量單說(shuō)位，或少笑于100的產(chǎn)品取1個(gè)劑量單稈位。從散裝物泛料或制劑塵容器中隨烤機(jī)取樣。夠可將足量芝容器內(nèi)的結(jié)供試品混瓦合以取所乓需量的樣春品。產(chǎn)品檢測(cè)薄膜過(guò)惠濾法使用可邪將濾膜陽(yáng)轉(zhuǎn)移至捷培養(yǎng)基僑的過(guò)濾糊裝置。僻按照“計(jì)數(shù)方傍法適用芬性”項(xiàng)下所述計(jì)制備樣品冒。將適宜剝量的供試召品轉(zhuǎn)移分環(huán)別轉(zhuǎn)移至浩兩個(gè)濾膜陽(yáng)中，迅速渣過(guò)濾，用聞適宜的方搖法沖洗濾淘膜。將其中舒一個(gè)濾嗚膜轉(zhuǎn)移強(qiáng)至大豆裙酪蛋白奮消化瓊競(jìng)脂培養(yǎng)臨基的表誓面用于賊確定TAMC，將另一潛個(gè)濾膜轉(zhuǎn)凡移至薩布臉羅葡萄糖磁瓊脂培養(yǎng)暮基的表面冤用于確定TYMC。將含大帶豆酪蛋白好消化瓊脂提的培養(yǎng)皿置于30℃-35℃培養(yǎng)3-5天，含薩筑布羅葡萄桃糖瓊脂的樸培養(yǎng)皿置于20℃-25℃培養(yǎng)5-7天。計(jì)漲算每克/每毫升產(chǎn)乘品所含微給生物的cfu值。在檢測(cè)透威皮貼劑時(shí)句，按“樣棕品制備”羨項(xiàng)下所述秀，分別將柳總體積10%的供試液埋通過(guò)兩個(gè)皆無(wú)菌濾膜揮，將其中滔一個(gè)濾膜悶轉(zhuǎn)移至大鳥(niǎo)豆酪蛋白石消化瓊脂紗培養(yǎng)基的矛表面用于爭(zhēng)確定TAMC，將另一搶個(gè)濾膜轉(zhuǎn)繭移至薩布頌羅葡萄糖汽瓊脂培養(yǎng)秋基的表面筋用于確定TYMC。平板計(jì)價(jià)數(shù)法傾注平俘板法——按照“計(jì)數(shù)法的適姻用性”挨項(xiàng)下所帖述制備碰樣品。趁每個(gè)稀歲釋水平蜓的每種煮培養(yǎng)基孝至少制析備2個(gè)培養(yǎng)皿吃，將含大卸豆酪蛋白急消化瓊脂血的培養(yǎng)皿置于30℃-35℃培養(yǎng)3-5天，含牽薩布羅屢葡萄糖吊瓊脂的濤培養(yǎng)皿置于20℃-25℃培養(yǎng)5-7天。選叫擇相應(yīng)等稀釋度默的培養(yǎng)雷皿并使TAMC的菌落數(shù)捏少于250個(gè)且TYMC得菌落數(shù)燥少于50個(gè)。取每添種培養(yǎng)基怠計(jì)數(shù)的算挎術(shù)平均值財(cái)，并計(jì)算春每克/每毫升怨產(chǎn)品中幼微生物滿的cfu值。表面涂布信法——按照“計(jì)數(shù)法的適用死性”項(xiàng)下鋒所述制備留樣品。每偉個(gè)稀釋水覺(jué)平的每種飲培養(yǎng)基至躁少制備2個(gè)培養(yǎng)皿芒。培養(yǎng)過(guò)掠程及cfu值的計(jì)拖算按“獨(dú)傾注平硬板法”宵項(xiàng)所述列。最大概率茶法按照“計(jì)數(shù)法的適潑用性”順項(xiàng)下所煌述制備閉并稀釋要樣品。恩將所有車(chē)試管置于30℃-35℃培養(yǎng)3-5天。必咽要時(shí)采域用適宜著的方法升再次培爸養(yǎng)。記駐錄每個(gè)動(dòng)稀釋水蹲平下顯鋪示微生惡物增長(zhǎng)幫的試管漁數(shù)。參憑照表2確定每克/每毫升產(chǎn)彈品中所含砍微生物的稱最大概率其數(shù)。結(jié)果解析總需氧微寺生物數(shù)（TAM鑼C）被認(rèn)衛(wèi)為與大鑰豆酪蛋厲白消化融瓊脂中堵檢出的市微生物cfu值相等千，如在本此培養(yǎng)園基中檢悼出真菌掀菌落，熊亦算作澤是TAM百C的一部病分。霉菌酵母草菌總數(shù)（TYMC）被認(rèn)插為與薩軟布羅葡亡萄糖瓊議脂中檢殖出的微幟生物cfu值相等價(jià)，如在指此培養(yǎng)費(fèi)基中檢椒出細(xì)菌茶菌落，補(bǔ)亦算作業(yè)是TYM鴉C的一部女分。如TYMC值因細(xì)沫菌生長(zhǎng)失而超出粘可接受嚼范圍，虎可使用村含抗生偉素的薩摟布羅葡愛(ài)萄糖瓊額脂。如梢結(jié)果由MPN法產(chǎn)生恩，則計(jì)般算值為T(mén)AMC。如規(guī)定了坊微生物限炭度的可接圣受標(biāo)準(zhǔn)，藥其解析如星下：101cfu:最大可接脊受數(shù)=2芹0；102cfu:最大可接聯(lián)受數(shù)=20絡(luò)0；103cfu期:最大可盟接受數(shù)=2肯000；……謝謝觀看菌株試驗(yàn)菌株的制備促生長(zhǎng)試驗(yàn)