神經(jīng)組織染色法神經(jīng)膠質(zhì)細胞

病理檢驗技術(shù)

安徽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校方安寧神經(jīng)膠質(zhì)細胞染色概述1.神經(jīng)膠質(zhì)細胞是一種有許多突起的細胞，分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)細胞2.神經(jīng)膠質(zhì)細胞細胞突沒有軸突和樹突之分，細胞質(zhì)內(nèi)沒有尼氏體，無核仁，沒有傳導(dǎo)神經(jīng)沖動的功能3.HE染色只能顯示細胞核，用特殊的銀染色或免疫細胞化學(xué)方法可顯示細胞的全貌應(yīng)用1.神經(jīng)膠質(zhì)細胞染色主要用于神經(jīng)膠質(zhì)腫瘤的診斷與鑒別2.神經(jīng)膠質(zhì)細胞染色有金屬浸潤法和非金屬浸潤染色法3.這兩類染色，均要求取材新鮮，固定及時，使用器皿要清洗干凈，防止污染Mallory磷鎢酸蘇木素染色法Cajal星形細胞染色法1.試劑配制（1）組織固定液（甲醛溴化銨溶液）：溴化銨2g

福爾馬林15ml

蒸餾水加至100ml（2）Cajal氯化金染色液：1%氯化金10ml

氯化汞0.5g

蒸餾水60ml先將氯化汞溶于10ml蒸餾水中，并加熱促溶，再與氯化金溶液混合，最后加入剩余的50ml蒸餾水。該染色液性能不穩(wěn)定，應(yīng)于使用前配制，過濾后使用。Cajal星形細胞染色法2.染色步驟（1）組織固定：新鮮組織須在甲醛溴化銨溶液中固定3～8天，如果此前組織已經(jīng)過其他溶液固定，須再用該固定液固定24h（2）冷凍切片15～20μm（3）蒸餾水漂洗（50ml蒸餾水中加4～5滴福爾馬林）（4）蒸餾水洗（5）組織片浸入20℃的Cajal氯化金液4～6h，避光，保持20℃恒溫（6）蒸餾水洗3次，每次1min（7）5%硫代硫酸鈉固定5min（8）50%乙醇洗，然后將組織片貼附于潔凈的載玻片上（9）脫水、透明、封固Cajal星形細胞染色法3.染色結(jié)果星形膠質(zhì)細胞呈紫黑色背景灰紅色Holzer磷鉬酸結(jié)晶紫法1.試劑配制（1）結(jié)晶紫三氯甲烷溶液：結(jié)晶紫0.5g

無水乙醇2ml

三氯甲烷8ml混勻即可（2）磷鉬酸乙醇溶液：0.5%磷鉬酸水溶液10ml95%乙醇20ml

使用前混合Holzer磷鉬酸結(jié)晶紫法1.試劑配制（3）三氯甲烷乙醇溶液：三氯甲烷8ml

無水乙醇2ml

使用前混合（4）苯胺三氯甲烷溶液：苯胺-Aniline

4ml

三氯甲烷6ml1%醋酸1～2滴Holzer磷鉬酸結(jié)晶紫法2.染色步驟（1）石蠟切片，脫蠟至水（2）磷鉬酸乙醇溶液3～5min（3）直接入三氯甲烷乙醇溶液，至組織片呈灰白色（灰白色同色）為止（4）在組織片上滴加結(jié)晶紫甲烷溶液1min（5）直接滴入10%溴化鉀（6）用紙吸干切片上的溶液（7）入苯胺三氯甲烷溶液快速分化（8）二甲苯洗2次（9）透明、封固Holzer磷鉬酸結(jié)晶紫法3.染色結(jié)果神經(jīng)膠質(zhì)纖維及細胞核為藍色Holzer磷鉬酸結(jié)晶紫法4.注意事項（1）滴入10%溴化鉀溶液時，以出現(xiàn)金黃色為止（2）分化脫色較快，須用顯微鏡控制Weil-DavenPort小膠質(zhì)及少突膠質(zhì)細胞染色法1.試劑配制氨銀染色液：氫氧化銨2ml10%硝酸銀染色液15～18ml氫氧化銨2ml，緩慢滴入10%硝酸銀染色液15～18ml，邊加邊搖，直至呈現(xiàn)穩(wěn)定的乳白色為止。

Weil-DavenPort小膠質(zhì)及少突膠質(zhì)細胞染色法2.染色步驟（1）石蠟切片，脫蠟至水；冷凍切片，入10%氨銀染色液（2）蒸餾水洗3次（3）氨銀染色液染色15min（4）10%福爾馬林溶液還原，直至切片呈咖啡色為止（5）蒸餾水洗3次（6）5%硫代硫酸鈉溶液5min（7）充分水洗，如為冷凍切片用紙將周圍的水吸干（8）脫水、透明、封固Weil-DavenPort小膠質(zhì)及少突膠質(zhì)細胞染色法3.染色結(jié)果小膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞呈黑色背景呈淡黃或無色Anderson染色法1.試劑配制（1）混合媒染液：將亞硫酸鈉5g，碘片5g，草酸2.5g溶于95ml蒸餾水中，再加入冰醋酸5ml，密封貯存。臨使用前加入等量5%氯化鐵水溶液，混勻即可。（2）Pal漂白液：1%草酸水溶液25ml1%亞硫酸鈉水溶液25ml

使用前等量混合即可Anderson染色法1.試劑配制（3）維多利亞藍染色液：維多利亞藍1.5g

蒸餾水100ml（4）Lugol碘液：碘片1g

碘化鉀2g蒸餾水加至100mlAnderson染色法2.染色步驟（1）石蠟切片，脫蠟至水（2）蒸餾水洗（3）混合媒染液12～15min（4）水洗5min（5）0.25%高錳酸鉀溶液，充分氧化5min（6）Pal漂白液漂白，直至切片呈白色為止（7）蒸餾水洗5min（8）60℃的1.5%維多利亞藍染色液染色15～20min，須保持60℃恒溫（9）Lugol碘液處理1min（10）用紙將切片上的碘液吸干，二甲苯洗2次（11）苯胺油、二甲苯等量混合液分化，直至神經(jīng)膠質(zhì)纖維呈現(xiàn)淡藍色，細胞核呈現(xiàn)藍色為止（12）透明、封固Anderson染色法3.染色結(jié)果星形膠質(zhì)細胞、神經(jīng)膠質(zhì)纖維以及細胞核均呈現(xiàn)藍色小結(jié)1.神經(jīng)膠質(zhì)細胞主要用于神經(jīng)膠質(zhì)腫瘤的診