生物安全(病原微生物學(xué)課程的)

A

ControversialIssue禽流感、“超級病菌”、SARS…………“逃逸”?目前，公眾對科學(xué)的態(tài)度十分矛盾。公眾期望科技新發(fā)展能夠繼續(xù)提高生活水準，但他們又懷疑科學(xué)，因為他們不懂科學(xué)。

——斯蒂芬.霍金當前第1頁\共有44頁\編于星期四\19點A

ControversialIssue20世紀70年代初,“基因工程”的淘金時代。但部分與微生物打交道的研究人員開始擔心超級細菌等生物問題的出現(xiàn)。媒體宣揚，反對“基因工程”的風潮。1974年，擔憂達到高潮。包括多名諾貝爾獎得主在內(nèi)的一批科學(xué)家在《自然》雜志上撰文，呼吁在認真研究基因工程風險之前，停止相關(guān)的研究工作。當前第2頁\共有44頁\編于星期四\19點生物安全Biosafety基于生物技術(shù)發(fā)展有可能帶來的不利影響，人們提出了生物安全的概念。生物安全（biosafety）是指避免危險生物因子造成實驗室人員傷害，或避免危險生物因子污染環(huán)境、危害公眾的措施。當前第3頁\共有44頁\編于星期四\19點病原微生物危害程度分類科學(xué)家將實驗室中所用的微生物，根據(jù)危險程度，劃分為了不同級別?！恫≡⑸飳嶒炇疑锇踩芾項l例》（國務(wù)院令第424號）第七條

：國家根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度，將病原微生物分為四類

當前第4頁\共有44頁\編于星期四\19點第一類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。

主要包括29種病毒，如克里米亞-剛果出血熱病毒、埃博拉病毒、馬爾堡病毒、天花病毒和猴痘病毒等。目前無疫苗可預(yù)防。高致病性病原微生物第二類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。

包括51種病毒，朊粒，10種細菌，4種真菌。例如：高致病性禽流感病毒、艾滋病毒、SARS冠狀病毒、細菌中的炭疽芽胞桿菌、結(jié)核分枝桿菌、霍亂弧菌等；真菌中的粗球孢子菌等。部分已有疫苗可用當前第5頁\共有44頁\編于星期四\19點如腸道病毒、肝炎病毒、流感病毒等75種病毒；金黃色葡萄球菌等145種細菌；白假絲酵母菌、新生隱球菌、馬內(nèi)菲青霉菌等真菌對人類致病的常見微生物主要屬于第三類微生物第三類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。

當前第6頁\共有44頁\編于星期四\19點第四類病原微生物第四類病原微生物，是指在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。

如大腸埃希菌，其生物學(xué)性狀已清楚當前第7頁\共有44頁\編于星期四\19點摘自《人間傳染的病原微生物名錄》

表1：病毒分類名錄

序號病毒名稱危害程度分類實驗活動所需生物安全實驗室級別運輸包裝分類f備注病毒培養(yǎng)a動物感染實驗b未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作c滅活材料的操作d無感染性材料的操作eA/BUN編號英文名中文名分類學(xué)地位1Alastrimvirus類天花病毒痘病毒科

ABSL-4BSL-3BSL-2BSL-1AUN2814

3Easternequineencephalitisvirus東方馬腦炎病毒披膜病毒科BSL-3ABSL-3BSL-3BSL-2BSL-1AUN2814僅培養(yǎng)物A類4Ebolavirus埃博拉病毒絲狀病毒科BSL-4ABSL-4BSL-3BS-2BSL-1AUN2814

42Hantavirusescausehemorrhagicfeverwithrenalsyndrome引起腎綜合征出血熱的漢坦病毒布尼亞病毒科BSL-2ABSL-3BSL-2BSL-1BSL-1AUN2814有疫苗。僅病毒培養(yǎng)物為A類當前第8頁\共有44頁\編于星期四\19點與致病微生物接觸就存在安全問題

1974年丹麥某醫(yī)院臨床生化實驗室的工作人員體檢時發(fā)現(xiàn)肝炎發(fā)病率比普通人群高出7倍。1976年英國某醫(yī)學(xué)實驗室的工作人員體檢時發(fā)現(xiàn)結(jié)核菌感染者比其他人群高5倍。1978年英國報告一個商業(yè)洗衣房因清洗來自一實驗室的衣褲時發(fā)生6例雇員和1例參觀者感染。據(jù)統(tǒng)計，從事病原微生物研究的工作人員發(fā)生實驗室感染的概率較普通人群高5~7倍。當前第9頁\共有44頁\編于星期四\19點嚴重生物安全事故案例2003年9月新加坡實驗室人員感染SARS病毒2003年9月臺灣實驗室人員感染SARS病毒2004年4月我國國家CDC的SARS實驗室研究生感染SARS病毒并傳染給別人2011年3月至5月東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的28名師生相繼被確診感染了布魯氏菌病實驗室生物安全必須引起高度重視當前第10頁\共有44頁\編于星期四\19點實驗室生物安全當實驗室工作人員所處理的實驗對象含有致病的微生物及其毒素時，通過

1.實驗室的設(shè)計建造（二級屏障）：主要為實驗室氣流控制及滅菌設(shè)施

2.使用個體防護裝置（一級屏障）：生物安全柜和實驗服(或正壓防護服)

3.嚴格遵從標準化的工作及操作程序等綜合措施:（1）確保實驗室工作人員不受實驗對象侵染。（2）確保周圍環(huán)境不受其污染。當前第11頁\共有44頁\編于星期四\19點生物安全實驗室的分類生物安全實驗室應(yīng)用于涉及具有傳染可能性的微生物實驗。僅從事體外操作的實驗室的相應(yīng)生物安全防護水平：BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4（bio-safetylevel，BSL）從事動物活體操作的實驗室的相應(yīng)生物安全防護水平：ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4（animalbio-safetylevel，ABSL）當前第12頁\共有44頁\編于星期四\19點生物安全實驗室的分類其它兩種表達方式：physicalprotectionlaboratory:P1、P2、P3、P4containmentlaboratory：C1、C2、C3、C4或CL1、CL2、CL3、CL4當前第13頁\共有44頁\編于星期四\19點P1、P2實驗室14當前第14頁\共有44頁\編于星期四\19點15當前第15頁\共有44頁\編于星期四\19點生物危險警告標志16當前第16頁\共有44頁\編于星期四\19點當前第17頁\共有44頁\編于星期四\19點P3、P4實驗室18當前第18頁\共有44頁\編于星期四\19點Ⅲ級生物安全柜

（classⅢbiosafetycabinet）安全柜內(nèi)保持負壓，氣流只能從外部進入安全柜，使柜內(nèi)的病源微生物不能逸出，從而保護工作者同時其循環(huán)風和排風經(jīng)過高效過濾器(HEPA)過濾，又能保護產(chǎn)品和環(huán)境。當前第19頁\共有44頁\編于星期四\19點20當前第20頁\共有44頁\編于星期四\19點TheSwedishBSL-4Laboratory當前第21頁\共有44頁\編于星期四\19點最高防護實驗室——P4實驗室三級生物安全水平的防護實驗室的要求也適用于四級生物安全水平的最高防護實驗室，但需增加如下幾點：1.基本防護：P4實驗室分為III級安全柜型和正壓服型兩種前者指實驗室中所有微生物操作均在Ⅲ級生物安全柜中進行；后一種實驗室中的工作人員必須穿著正壓服，并有完備的生命支持系統(tǒng)，生物安全柜可采用Ⅱ級。當前第22頁\共有44頁\編于星期四\19點最高防護實驗室——P4實驗室2.進入控制：四級生物安全水平的最高防護實驗室必須位于獨立的建筑內(nèi)，或是在一個安全可靠的建筑中明確劃分出的區(qū)域內(nèi)。人員或物品的進出必須經(jīng)過氣鎖室或通過系統(tǒng)。人員進入時，需更換全部衣服，而離開時，再穿上自己的日常服裝前應(yīng)淋浴。當前第23頁\共有44頁\編于星期四\19點3.通風系統(tǒng)控制:設(shè)施內(nèi)應(yīng)保持負壓。供風和排風均需經(jīng)HEPA(高效過濾器)過濾4.污水的凈化消毒

5.廢棄物和用過物品的滅菌

6.必須要有供標本、實驗用品以及動物進入的氣鎖室

7.必須配備應(yīng)急電源和專用供電線路

8.必須安裝安全防護排水管最高防護實驗室——P4實驗室當前第24頁\共有44頁\編于星期四\19點當前第25頁\共有44頁\編于星期四\19點最高防護實驗室——P4實驗室1、實行雙人工作制，任何情況下嚴禁任何人單獨在實驗室內(nèi)工作。這一點在防護服型四級生物安全水平實驗室中工作時尤其重要。

2、在進入實驗室之前以及離開實驗室時，要求更換全部衣服和鞋子。

3、工作人員要接受人員受傷或疾病狀態(tài)下緊急撤離程序的培訓(xùn)。

4、在四級生物安全水平的最高防護實驗室中的工作人員與實驗室外面的支持人員之間，必須建立常規(guī)情況和緊急情況下的聯(lián)系方法。當前第26頁\共有44頁\編于星期四\19點P3、P4實驗室

——設(shè)備和管理的完美統(tǒng)一不僅僅是常規(guī)的紫外燈和熏蒸消毒，也不僅僅是靠空氣潔凈技術(shù)或一些滅菌設(shè)備，而是綜合了土建、暖通、給排水、電氣、工藝等各專業(yè)、各方面技術(shù)的硬件，以及實驗室操作規(guī)程等軟件措施而形成的綜合安全保障體系。P3、P4實驗室是實現(xiàn)生物安全的有力保障，但除了上述硬件設(shè)施外，更為關(guān)鍵的是必須要嚴格遵守實驗室的安全操作規(guī)程，才能真正發(fā)揮P3、P4實驗室的功能，達到生產(chǎn)安全的效果。當前第27頁\共有44頁\編于星期四\19點當前第28頁\共有44頁\編于星期四\19點中國第一個P4級別高等生物安全實驗室奠基儀式于2011年6月30日在鄭店（江夏）舉行。為期兩年實驗室建設(shè)工程。當前第29頁\共有44頁\編于星期四\19點生物安全需要法律的支持!當前第30頁\共有44頁\編于星期四\19點國際組織和國外病原微生物實室生物安全相關(guān)法規(guī)和指南1《實驗室生物安全手冊》（WHO）

1988年第一版，1993第二版，2004年第三版2《微生物危險等級的分類》（歐洲經(jīng)濟共同體EEC）

指令93/883《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全手冊》（美國）

1983年第一版，1993年第三版，1999年第四版；4《生物危害主要防護：生物安全柜的選擇、安裝和使用》

（美國）2000年第二版；5《實驗室生物安全指南》（加拿大）

1990年第一版，1996年第二版，2004年第三版當前第31頁\共有44頁\編于星期四\19點WHO

《實驗室生物安全手冊》

LaboratoryBiosafetyManual1983年第一版，是第一本國際通用的安全手冊，成為了統(tǒng)一的基本原則。主要與病原微生物實驗室有關(guān)當前第32頁\共有44頁\編于星期四\19點主要內(nèi)容生物安全指南實驗室生物安全保障實驗室設(shè)備（生物安全柜、安全設(shè)備）微生物學(xué)操作技術(shù)規(guī)范（包括實驗室技術(shù)、意外事故應(yīng)對方案、消毒滅菌和感染性物質(zhì)的運輸）生物技術(shù)介紹（新添重組DNA技術(shù)）安全組織和培訓(xùn)……《實驗室生物安全手冊》

LaboratoryBiosafetyManual當前第33頁\共有44頁\編于星期四\19點我國生物安全相關(guān)法規(guī)和標準《中華人民共和國傳染病防治法》(2004年8月頒布修訂版)《病原微生物實驗室生物安全管理條例》(2004年11月)《醫(yī)療廢物管理條例》當前第34頁\共有44頁\編于星期四\19點《中華人民共和國傳染病防治法》背景：03年的非典第二十二條：從事病原微生物實驗的實驗室和單位，應(yīng)符合國家規(guī)定的條件和技術(shù)標準。第二十六條：要求國家建立傳染病菌種、毒種庫。第五十三條：縣級以上衛(wèi)生部門須履行監(jiān)督檢查職責當前第35頁\共有44頁\編于星期四\19點《病原微生物實驗室生物安全管理條例》

國家對病原微生物實行分類管理，對實驗室進行分級管理。采集、運輸、保存病原微生物須滿足條件。國家實行統(tǒng)一的實驗室生物安全標準。當前第36頁\共有44頁\編于星期四\19點實驗室生物安全相關(guān)法規(guī)和指南當前第37頁\共有44頁\編于星期四\19點《實驗室生物安全通用要求》在參考了WHO、美國、加拿大和衛(wèi)生部的行業(yè)標準的基礎(chǔ)上，結(jié)合我國的實際情況編寫而成的我國生物安全實驗室必須按照其標準建立當前第38頁\共有44頁\編于星期四\19點《微生物和生物醫(yī)學(xué)實