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文檔簡介
免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)實驗一HIV抗體初篩實驗免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)獲得性免疫缺陷綜合征
是由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的以CD4+T細(xì)胞減少為主要特征,同時伴反復(fù)機會感染、惡性腫瘤及中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變的一組綜合征。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)HIV感染的免疫學(xué)檢驗方法主要針對病毒抗原和抗病毒抗體的檢測以及免疫細(xì)胞數(shù)量和功能的分析。HIV抗體初篩實驗主要包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗、快速檢測試驗(明膠顆粒凝集試驗、免疫滲濾試驗和免疫層析試驗)等。ELISA是最常用的HIV抗體初篩實驗方法。本實驗采用雙抗原夾心ELISA法檢測人血清中HIV抗體。檢測方法免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)在符合Ⅱ級生物安全實驗室(BSL-2)要求的艾滋病檢測實驗室中進(jìn)行。實驗條件免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)將HIV抗原包被于固相載體,加入待檢樣品和酶標(biāo)記的HIV抗原,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,洗滌,加底物顯色。通過酶標(biāo)儀檢測吸光度A450nm值,根據(jù)A450nm值判斷HIV抗體的存在與否。實驗原理免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)抗原酶標(biāo)板。2.洗滌液PBS-Tween20。3.辣根過氧化物酶標(biāo)記的HIV抗原。4.辣根過氧化物酶底物溶液。5.底物稀釋液PBS-1%BSA。6.終止液2mol/lH2SO4溶液。7.對照血清臨床標(biāo)本篩選獲得的陽性血清和陰性血清。8.酶標(biāo)儀、洗板機。試劑與器材免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)操作步驟編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板設(shè)陰性對照2孔、陽性對照3孔,空白對照2孔加樣:分別在相應(yīng)孔加入待檢標(biāo)本、陰性、陽性對照100μl,用封板膜封板后置37℃溫育60min。洗滌:用洗板機清洗,在干凈濾紙上拍干。加酶:每孔加酶結(jié)合物100μl(空白對照孔除外),充分混勻,置37℃溫育30min。洗滌:用洗板機清洗,在干凈濾紙上拍干。顯色:每孔加入底物緩沖液50μl,TMB50μl,振蕩混勻,37℃避光顯色10min。測定:每孔加終止液50μl,振蕩混勻。在450nm波長下,酶標(biāo)儀測定各孔A450nm值。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)結(jié)果判斷計算臨界值:臨界值=陽性對照值×10%。正常情況下,陽性對照孔的A450nm值≥,樣品A450nm值≥臨界值者為HIV抗體陽性。正常情況下,陰性對照孔的A450nm值≤,樣品A450nm值<臨界值者為HIV抗體陰性。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)注意事項實驗中設(shè)立陽性與陰性對照。底物顯色時間不宜過長。注意生物安全。對初篩呈陽性反應(yīng)的樣品,應(yīng)進(jìn)行復(fù)檢試驗。如復(fù)檢均呈陰性,則報告HIV抗體陰性(-);如均呈陽性反應(yīng),或一陰一陽,應(yīng)送HIV確證實驗室進(jìn)行確證試驗。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)臨床意義作為HIV感染的篩查實驗。HIV有兩個血清型:HIV-1和HIV-2,后者少見。此試驗陽性者應(yīng)進(jìn)一步作確證試驗。思考題ELISA是檢測HIV抗體的常用方法,但并不是唯一的方法?;瘜W(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗、免疫膠體金以及免疫層析實驗等均可用于HIV抗體的檢測,試比較各種方法之間的優(yōu)缺點。第三軍醫(yī)大學(xué)吳超
免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)實驗二HIV確認(rèn)實驗免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)HIV抗體初篩試驗陽性者,須作確證試驗。確證實驗必須在專門的艾滋病確證實驗室中進(jìn)行,并最終確定患者是否感染HIV。確證試驗方法包括免疫印跡試驗、條帶免疫試驗、放射免疫沉淀試驗、免疫熒光試驗等。免疫印跡實驗(WesternBlot,WB)是用以檢測HIV抗體的首選確證試驗方法,其檢測結(jié)果常常被作為鑒別其他檢驗方法優(yōu)劣的“金標(biāo)準(zhǔn)”。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)以硝酸纖維素膜為載體的抗原條,組合了HIV-1全病毒抗原和HIV-2gp36重組蛋白抗原。當(dāng)抗原條與被檢血清及對照血清接觸時,如血清標(biāo)本有HIV-1/HIV-2特異性抗體,將會與抗原條上的HIV-1/HIV-2gp36抗原結(jié)合。結(jié)合的抗體再與酶標(biāo)二抗結(jié)合,加入底物顯色,觀察結(jié)果判斷。實驗原理免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)抗原硝酸纖維膜條
20條2.印跡緩沖液(10×)
12ml3.漂洗緩沖液(10×)
60ml4.底物BCIP/NBT溶液
50ml5.結(jié)合物
70μl陰性對照血清
70μl弱陽性對照血清
70μl強陽性對照血清
70μl9.反應(yīng)槽、搖床、移液管、吸引器試劑與器材免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)操作步驟取出反應(yīng)槽,每一槽內(nèi)加2ml漂洗緩沖液。用鑷子小心地夾住抗原條編號端放入漂洗緩沖液中,編號面朝上,每槽1條,讓溶液完全覆蓋。將反應(yīng)槽放置搖床,搖動5~10分鐘后吸棄漂洗液。每槽加入印跡緩沖液2ml,然后分別加入20μl待檢血清或血漿,并用本試劑盒中的對照血清作平行對照。在室溫下將反應(yīng)槽在搖床上搖動60分鐘。旋搖完畢后,吸棄印跡緩沖液。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)每槽加入2ml漂洗緩沖液,旋搖5分鐘后,吸棄漂洗緩沖液,共漂洗3次,每次5分鐘。在每槽中加入2ml結(jié)合物稀釋液,旋搖45分鐘。從槽中吸棄結(jié)合物稀釋液,重復(fù)步驟6。每槽中加入底物2ml,旋搖15分鐘。吸去底物液,每槽中加入2ml蒸餾水,旋搖5分鐘后,終止反應(yīng)。將抗原條放于二張濾紙間吸干水分后觀察結(jié)果。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)結(jié)果判斷1.對照血清檢測結(jié)果判定要求①HIV-1強陽性對照血清:必需出現(xiàn)gp160/gp120和gp41、p24帶型,以及p66、p55/p51、p34、p17帶型判定為陽性,HIV-2gp36應(yīng)為陰性。②HIV-1弱陽性對照血清:在gp160、gp120和gp41、p24帶型中至少出現(xiàn)二條,判定為陽性。其他位置其可能出現(xiàn)弱帶,但對分析并非必需。HIV-2gp36應(yīng)為陰性。③HIV-2陽性對照血清:必需出現(xiàn)gp36重組蛋白帶型。④陰性對照血清:應(yīng)無上述的特異性帶型出現(xiàn)。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)2.被檢血清/血漿的判定標(biāo)準(zhǔn)有下列情況之一者判定為HIV-1抗體陽性。①至少一條env帶和一條pol帶;②至少一條env帶和一條gag帶;③至少一條env帶、一條gag帶和一條pol帶;④至少二條env帶;有HIV-2gp36重組蛋白帶型出現(xiàn)者判定為HIV-2抗體陽性,需用HIV-2確認(rèn)試劑進(jìn)一步檢測。無HIV抗體特異性帶型出現(xiàn)者判定為HIV抗體陰性。出現(xiàn)HIV特異性抗體帶型,但帶型不足以確認(rèn)陽性者,判定為HIV抗體可疑。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)注意事項實驗中必須同時設(shè)定HIV-1強陽性、HIV-1弱陽性和HIV-1+2陰性血清對照。如果抗原條和血清樣品作用時間過長,陰性樣品也可能出現(xiàn)弱帶。凡溶血、脂血或混濁樣品均為不宜檢測標(biāo)本。試驗中操作應(yīng)注意生物安全。底物顯色時間,一般控制在30分鐘內(nèi)。時間太長,本底變深;如果強陽性血清色帶增深時可提前終止反應(yīng);若弱陽性對照血清色帶較淺,可以適當(dāng)延長反應(yīng)時間。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)臨床意義
用于在初篩試劑判斷為HIV陽性(如ELISA法)基礎(chǔ)上的血清或血漿樣本,進(jìn)行確證是否為HIV-1陽性及診斷是否感染了HIV-2。
免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)思考題HIV血清抗體檢測的初篩實驗和確認(rèn)實驗在檢測HIV感染的臨床意義及實驗原理上的差異?免疫印記實驗、條帶免疫試驗、放射免疫沉淀試驗及免疫熒光試驗(IFA)等均可用作HIV的確認(rèn)實驗,試分析免疫印記實驗應(yīng)用如此廣泛的原因?第三軍醫(yī)大學(xué)吳超免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)實驗三T細(xì)胞亞群的流式細(xì)胞儀檢測免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)HIV感染可導(dǎo)致免疫系統(tǒng)中CD4+T細(xì)胞數(shù)量減少以及CD4+T細(xì)胞/CD8+T細(xì)胞比例失調(diào),因此,CD4+T細(xì)胞計數(shù)可用于評價HIV感染者免疫狀況,輔助臨床進(jìn)行疾病分期。CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量還可評估HIV感染者機會性感染的風(fēng)險,輔助判斷是否進(jìn)行預(yù)防性治療。背景知識免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞計數(shù)的方法分為兩大類,一類是應(yīng)用流式細(xì)胞儀測定法,另一類是非流式細(xì)胞儀測定法。其中,流式細(xì)胞儀檢測是目前應(yīng)用較為普遍的一種方法,包括多平臺法和單平臺法。單平臺法僅需要流式細(xì)胞儀進(jìn)行群體細(xì)胞的相對計數(shù)。本實驗主要介紹單平臺法對T淋巴細(xì)胞的流式細(xì)胞檢測。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)流式細(xì)胞儀可檢測單細(xì)胞或微粒的信號,將待測細(xì)胞或微粒進(jìn)行熒光染色后制成懸液標(biāo)本,在一定氣體壓力下將待測樣品壓入流動室,待測細(xì)胞在鞘液的包裹下單行排列,依次通過流式細(xì)胞儀的檢測區(qū)域。單平臺方法即應(yīng)用三色、四色流式試劑配以內(nèi)參絕對計數(shù)微球,加上流式細(xì)胞儀淋巴細(xì)胞亞群獲取和分析軟件,一步即可獲得T細(xì)胞亞群的相對數(shù)(百分比)和絕對數(shù)。通過使用已知數(shù)量的參考微球為內(nèi)參,可通過獲取的目標(biāo)細(xì)胞與參考微球的比例、參考微球數(shù)量和樣品體積,得到每微升的淋巴細(xì)胞數(shù)量。實驗原理免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)TruCOUNT絕對計數(shù)管。TriTEST三色試劑CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PerCP或MultiTEST四色試劑CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD4-APC。FACSLysingSolution(10X)蒸餾水(μm過濾)配制成1X濃度的溶血素;PBS鞘液μm過濾;BDCaliBRITEBeads及BDTruCOUNTcontrols。流式細(xì)胞儀。試劑與器材免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)操作步驟1.標(biāo)本制備:采集外周靜脈血2-3ml,EDTA-K3抗凝。標(biāo)本與試劑用前輕輕搖勻;2.準(zhǔn)確加入20μl熒光試劑和50μl全血,充分混勻;3.充分混勻,室溫(20~25℃)避光反應(yīng)15min;4.加入450μlFACS溶血液(1X),充分混勻;5.充分混勻,室溫(20~25℃)避光放置15min;內(nèi)流式檢測。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)單平臺一步法由計算機軟件直接出結(jié)果并打印出報告單,報告單的內(nèi)容包括如下:項目單位參考正常值范圍CD3+/CD45+%56%~85%CD3+絕對數(shù)個/μl1027~2086CD3++CD8+/CD45+%15%~34%CD3++CD8+絕對數(shù)個/μl323~836CD3++CD4+/CD45+%30%~54%CD3++CD4+絕對數(shù)個/μl706~1125CD4+/CD8+比值1~2結(jié)果判斷免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)注意事項用于流式細(xì)胞儀免疫表型檢測的抗凝劑K2EDTA、K3EDTA、酸性枸櫞酸葡萄糖溶液(ACD)或肝素抗凝一般要求48h內(nèi)染色,染色后6h內(nèi)分析。如采血后24h內(nèi)染色,則可在染色后24h內(nèi)分析。在室溫(18~25℃)保存和運輸樣品,避免極端溫度(結(jié)冰或大于37℃)。高溫季節(jié),需用隔熱容器盛裝樣品,并將其置于有冰袋和吸熱物質(zhì)的容器中。溶血、凝血或結(jié)冰的樣品應(yīng)視為不合格樣品,超過檢測允許時間的樣品不可檢測。應(yīng)報告所有相關(guān)數(shù)據(jù)的正常值范圍,且每個實驗室都應(yīng)測定參考數(shù)值。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)臨床意義①用于HIV感染者的疾病分期:凡CD4+T淋巴細(xì)胞<200/μl或CD4+T淋巴細(xì)胞的百分比<14%的HIV感染者可歸入艾滋病。②判斷HIV感染的臨床合并癥:如CD4+T淋巴細(xì)胞<200/μl時,易發(fā)生卡氏肺囊蟲肺炎;而巨細(xì)胞病毒感染和鳥分支桿菌感染常發(fā)生于CD4+T淋巴細(xì)胞<50/μl的病人,極少見于CD4+T淋巴細(xì)胞>100/μl的病人。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)思考題T淋巴細(xì)胞的流式細(xì)胞檢測技術(shù)包括多平臺法和單平臺法,試述兩種方法的差異?第三軍醫(yī)大學(xué)吳超免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)臨床見習(xí):HIV抗體初篩試驗免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)了解HIV抗體初篩試驗的實驗室要求和檢測流程與質(zhì)量控制,熟悉用于HIV抗體初篩試驗的樣品種類與采集要求,掌握HIV抗體初篩試驗中ELISA檢測方法原理與結(jié)果分析。見習(xí)要點免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)采用雙抗原夾心ELISA法檢測血清中HIV(1+2)抗體。HIV抗原包被于固相載體,加入待檢樣品和酶標(biāo)記的HIV抗原,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,洗滌,加底物顯色。通過酶標(biāo)儀檢測吸光度(OD值),根據(jù)OD值判斷HIV抗體的存在與否?;驹砻庖呷毕菪约膊〉拿庖邔W(xué)檢測系統(tǒng)樣品的采集與要求HIV抗體初篩試驗可采用血清、血漿樣品。1.采樣前準(zhǔn)備根據(jù)檢測項目的具體要求,確定采集樣品的種類、處理、保存及運輸?shù)臅r限和方法,按照臨床采血技術(shù)規(guī)范的要求操作,遵守生物安全要求。檢查所需物品是否已備齊,是否在有效期內(nèi),有無破損,是否足量,特別應(yīng)檢查受檢者信息與樣品容器表面的標(biāo)記是否一致,并注明樣品采集時間。選擇合適的室內(nèi)(外)采血空間,受檢者坐(臥)于合適的位置,準(zhǔn)備采血用具、皮膚消毒用品、采血管及試管架、硬質(zhì)廢棄物容器等。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)2.采集和處理樣品①血漿:將采集的抗凝全血1500~3000r/min離心15min,上層即為血漿,吸出置于合適的容器中,備用。②血清:根據(jù)需要,用一次性注射器(或真空采血管)抽取5~10ml靜脈血,室溫下自然放置1~2h,待血液凝固、血塊收縮后再用1500~3000r/min離心15min,吸出血清,置于合適的容器中,備用。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)3.樣品的保存用于HIV抗體檢測的血清或血漿樣品,短期(1周)內(nèi)進(jìn)行檢測的可存放于2~8℃,一周以上應(yīng)存放于-20℃以下。艾滋病檢測篩查實驗室檢測的篩查陽性樣品應(yīng)及時送確證實驗室,而篩查陰性樣品,可根據(jù)具體需要決定保存時間,建議至少保存1~2個月。特殊用途或?qū)m楉椖康臉悠犯鶕?jù)具體要求確定保存時間。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)4.樣品的運送根據(jù)符合生物安全要求;要獲得相應(yīng)部門批準(zhǔn)并由具有資質(zhì)的人員專程護(hù)送。應(yīng)采用三層容器對樣品進(jìn)行包裝,隨樣品應(yīng)附有與樣品唯一性編碼相對應(yīng)的送檢單。送檢單應(yīng)標(biāo)明受檢者姓名、樣品種類等信息,并應(yīng)放置在第二層和第三層容器之間。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)1.初篩試驗根據(jù)檢測目的選用符合要求的篩查試劑對樣品進(jìn)行初篩檢測,對呈陰性反應(yīng)的樣品,可出具HIV抗體陰性(-)報告;對呈陽性反應(yīng)的樣品,需要進(jìn)一步做復(fù)檢試驗和確證試驗。篩查程序免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)2.復(fù)檢試驗對初篩呈陽性反應(yīng)的樣品,應(yīng)使用原有試劑和另外一種不同原理(或廠家)的試劑,或另外兩種不同原理或不同廠家的試劑進(jìn)行復(fù)檢試驗。如果初篩檢測使用抗原抗體聯(lián)合試劑,則復(fù)檢必須包括一種抗原抗體聯(lián)合試劑。如兩種試劑復(fù)檢均呈陰性反應(yīng),則報告HIV抗體陰性(-);如均呈陽性反應(yīng),或一陰一陽,需送艾滋病確證實驗室進(jìn)行確證試驗(圖圖HIV抗體篩查檢測流程)。如果抗原抗體聯(lián)合試劑檢測呈陽性反應(yīng),而抗體試劑檢測為陰性反應(yīng),則應(yīng)考慮進(jìn)行HIV-1p24抗原或核酸檢測,必要時進(jìn)行隨訪。艾滋病檢測篩查實驗室復(fù)檢判定為陽性反應(yīng)的樣品,確證實驗室可以直接進(jìn)行確證試驗。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)3.初篩和復(fù)檢流程圖HIV抗體篩查檢測流程樣品初篩試驗篩查試劑陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)復(fù)檢試驗原有試劑或同一試劑商不同原理試劑均陽性反應(yīng)一陰一陽均陰性反應(yīng)確證試驗報告陰性另一不同原理試劑或另外兩種不同試劑商試劑+免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)4.篩查試驗結(jié)果的報告HIV抗體篩查試驗用附表1
(見實驗指導(dǎo)教材)進(jìn)行報告,陰性反應(yīng)報告為“HIV抗體陰性(-)”;陽性反應(yīng)報告為“HIV抗體待復(fù)檢”。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)5.篩查試驗呈陽性反應(yīng)樣品的轉(zhuǎn)送如需送上級實驗室進(jìn)行復(fù)檢,需要核對身份,補充個人信息(如姓名和身份證號碼),必要時采集第二份血樣,持HIV抗體篩查報告,送當(dāng)?shù)匕滩『Y查中心實驗室,或直接送確證實驗室復(fù)檢。HIV抗體復(fù)檢試驗用附表2(見實驗指導(dǎo)教材)進(jìn)行報告,兩次檢測均陽性或一陰一陽報告為“HIV抗體待確證”;兩次檢測均陰性報告為“HIV抗體陰性(-)”。HIV抗體復(fù)檢報告需由1名檢驗人員和1名審核人員簽字。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)質(zhì)量控制
1.試劑盒內(nèi)部對照
試劑盒內(nèi)部對照質(zhì)控品即為試劑盒內(nèi)提供的陽性和陰性對照血清。試劑盒內(nèi)部對照用于判斷每次實驗的有效性,但不能作為室內(nèi)質(zhì)控品使用。每一次檢測臨床樣品時,必須有試劑盒內(nèi)部對照,而且只能在同批號的試劑盒中使用。內(nèi)部對照結(jié)果無效,必須重新試驗。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)2.室內(nèi)質(zhì)控品為非試劑盒組份的外部質(zhì)控品,是為了監(jiān)控檢測的重復(fù)性而設(shè)置的,包括強陽性、弱陽性和陰性質(zhì)控血清。也可以只設(shè)置一個弱陽性質(zhì)控,以該試劑盒臨界值(Cut-off)的2~3倍為宜。外部質(zhì)控品的作用是,判斷該批臨床樣品檢測的有效性,因此,每次實驗必須包含室內(nèi)質(zhì)控品,其結(jié)果無效,必須重新試驗。室內(nèi)質(zhì)控品可以是商品或?qū)嶒炇易孕兄苽?。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)3.建立質(zhì)控圖最常用的質(zhì)控圖是Levey-Jennings質(zhì)控圖,該圖使用累計和技術(shù)或趨勢分析技術(shù)的圖形提供系統(tǒng)偏移和漂移的狀況。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)(1)建立質(zhì)控圖參數(shù):外部質(zhì)控品的均值和標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)建立在實驗室常規(guī)使用方法對外部質(zhì)控品重復(fù)測定的基礎(chǔ)上。一般采用在不同批次檢測取得至少20個數(shù)據(jù);如果僅做少量批次的檢測,也至少做5個批次的檢測,每個批次中不少于4個質(zhì)控血清測定結(jié)果,以建立一個臨時性的均值和標(biāo)準(zhǔn)差,當(dāng)達(dá)到20批次數(shù)據(jù)后,替代臨時性的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。(2)繪制質(zhì)控圖:質(zhì)控圖是把檢測數(shù)據(jù)與已確定的(計算出的)“控制限”進(jìn)行比較的圖,包含一條中心橫線和其上、下兩條平行的控制線,并按時間順序點入本實驗室每批次試驗質(zhì)控血清的測定值。免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測系統(tǒng)(3)質(zhì)控規(guī)則及其使用:實驗室在報告實驗結(jié)果之前必須評
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