十五艾滋病抗病毒治療的耐藥檢測方法

HIV-1耐藥及耐藥檢測中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院艾滋病研究所張旻

HIV病毒模式圖HIV病毒顆粒由基因組RNA、外膜蛋白Env、衣殼蛋白Gag、逆轉(zhuǎn)錄酶RT，蛋白酶PRO及整合酶IN組成HIV生活周期吸附－穿入－脫殼－生物合成－組裝成熟和釋放HIV基因組模式圖我國及國際兩種不同抗HIV治療方案效果比較治療方案國內(nèi)治療病毒抑制效果國際治療病毒抑制效果平均治療時(shí)間(月)載量<LDL例數(shù)總例數(shù)病毒抑制率(%)AZT+ddI+NVP7.5197027.1%a45%d4T+ddI+NVP3.910613876.8%b85%注：上標(biāo)字母相同表示組間無顯著差異，上標(biāo)字母不同表示組間差異顯著項(xiàng)目周期:五年,2005年7月-2010年6月。第一期兩年，2005年7月-2007年6月．全球基金將根據(jù)第一期執(zhí)行情況確定后三年的投入。項(xiàng)目實(shí)施地區(qū)：廣西、貴州、湖南、江西、四川、新疆、云南７個?。ㄗ灾螀^(qū)），35個地(州、市），76個項(xiàng)目縣（市、區(qū)）。178云南63江西95湖南105貴州7635合計(jì)115新疆104四川135廣西縣（市、區(qū)）地(州、市)項(xiàng)目省

總經(jīng)費(fèi)預(yù)算：五年總經(jīng)費(fèi)為9807萬美元,其中全球基金支持約6374萬美元,中國政府配套約3433萬美元.配套比例逐年增加，由第一年的20%，增加到第五年的50%。

兩年經(jīng)費(fèi)預(yù)算：二年預(yù)算約為3100萬美元,其中全球基金支持約2400萬美元,中國政府配套約700萬美元.

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全球基金支持經(jīng)費(fèi)配套經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目總經(jīng)費(fèi)廣西3,605,6091,060,6364,666,245貴州2,365,191697,4453,062,636湖南2,487,791724,4503,212,241江西1,735,176506,2112,241,387四川2,623,645771,1363,394,781新疆3,137,663922,7394,060,402云南4,470,6641,310,9545,781,618中央3,511,1781,002,3204,513,498合計(jì)23,936,9176,995,89130,932,808目標(biāo)六：建立服務(wù)網(wǎng)絡(luò)，確保針對艾滋病病人/感染者開展的治療、關(guān)懷和支持等活動的開展，包括母嬰阻斷。活動：在項(xiàng)目省建立和運(yùn)轉(zhuǎn)耐藥監(jiān)測實(shí)驗(yàn)室,開展耐藥監(jiān)測工作,幫助擴(kuò)展和改進(jìn)國家耐藥監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)各省省級建立實(shí)驗(yàn)室定為哨點(diǎn)的項(xiàng)目縣按方案采集血樣需要設(shè)了解霸的主腎題:什么糕是耐糊藥性?藥物躬的作杰用靶敢點(diǎn)與許機(jī)制?與病撞毒的悄哪些檔基因辭有關(guān)?耐藥危性是縣怎么蕉產(chǎn)生霞的?那些大因素蔥促使梁耐藥洗性病選毒株鈴出現(xiàn)?耐藥堵性分姻類與模耐藥并機(jī)制堆。如何邀檢測痰耐藥危株?檢測村中注慨意事趁項(xiàng)。什么智是HI妙V耐藥忠性?HI俊V耐藥沈性是戶指病意毒通荒過自填身的洲遺傳巧變異睡，產(chǎn)沒生對話藥物剖抑制瞞作用邁，使臺藥物俊敏感穗性降場低或獻(xiàn)不敏脅感的踩現(xiàn)象企。什么翅是H想IV璃耐藥漫性?藥物濃度病毒抑制率(%)野生型病毒耐藥株1000IC50,WTIC50,MT50耐藥倍數(shù)IC松50托=桐5守0%抑制蘆濃度藥物薪的作朽用靶躬點(diǎn)與蜻機(jī)制說?藥物攝的作轟用靶刮點(diǎn)與項(xiàng)機(jī)制眠：全國艾滋病定點(diǎn)醫(yī)院檢測技術(shù)研討班An譜ti清re話tr比ov租ir末al兄D擁ru箭gs揉2銜00拔4NR表TI謎s貨NN獎RT礦Is禮PI冬sZi危do蘆vu等di沫ne市Ne宣vi懸ra灘pi典ne叮*厘S乳aq疏ui武na胖vi榨rDi殘da味no跡si門ne樹D替el疾av棒ir古di叢ne抹Ri羊to愛na祝vi翼rSt詞av逐ud恰in挎e撞E規(guī)fa樹vi轉(zhuǎn)re篩nz扯*揀I淡nd己in鎮(zhèn)av向irLa頁mi帖vu幻玉di懇ne數(shù)*Ne戒lf刃in未av籃ir績*Za竭lc糞it繁ab鐵in逢e燙Am見pr提en賽av左irAb鉤ac迷av亮ir觀Lop盒in奇av洞ir喘/rCo藥mb襖iv召ir烤A但ta番za熄na與vi武rTr加iz壓iv御irFo羊sa埋mp倡re擠na望vi腳rDi香da都no可si共ne切E盼CSt帶av父ud膜in埋e未SRFT界CNu怕cl飛eo顫ti砍de僅R爛TITe謙no灶fo味vi疲rEn烤tr臨y沸In搭hi著bi烈to悔rsT2色0藥物眨的作菠用靶越點(diǎn)與寇機(jī)制讓：藥物作用機(jī)制核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑被靶細(xì)胞的細(xì)胞酶磷酸化后，以三磷酸的形式與天然三磷酸競爭，從而參與病毒DNA的合成，由于該抑制劑經(jīng)過化學(xué)修飾，將導(dǎo)致病毒DNA鏈合成終止。非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑是一組結(jié)構(gòu)多樣化的化合物，通過非競爭性的方式結(jié)合于或者接近于病毒逆轉(zhuǎn)錄酶的活性位點(diǎn)，從而抑制病毒逆轉(zhuǎn)錄酶的活性。蛋白酶抑制劑肽類似物，通過接合于病毒蛋白酶的活性位點(diǎn)來抑制酶的活性，使之不能將病毒合成的多聚前體蛋白水解為病毒的各種結(jié)構(gòu)蛋白和酶的組成部分。耐藥浩性是收怎么混產(chǎn)生吊的?病毒縮慧自身容因素—內(nèi)因藥物刊的選研擇壓孝力—外因耐藥間性是枝怎么聽產(chǎn)生給的?病毒對自身棒因素—內(nèi)因—HI翠V-值l的逆煉轉(zhuǎn)錄迅酶（RT）不具恐有DN碌A(chǔ)聚合桃酶的損校正御功能派，因此臺，在半復(fù)制泛過程贈中，閣病毒胃核酸程表現(xiàn)凈出高美度的鬧錯誤縮慧傾向幅性?！诓∑鸲镜谋俑咚賯蓮?fù)制竄過程肢中，譜高頻盟率突顫變在法很短虜?shù)臅r(shí)繡間內(nèi)猾隨時(shí)發(fā)僚生。每個妨復(fù)制丑周期鍛產(chǎn)生誤一個鮮突變漆點(diǎn)；每天艷產(chǎn)生109–回1010個新孩病毒粒；病毒答基因?qū)毥M中鼓平均井每個罰堿基壤每天吼突變隊(duì)一次耐藥件性是諒怎么留產(chǎn)生疤的?藥物跑的選呢?fù)駢含F(xiàn)力—外因—在藥西物選鍋擇壓朵力下衣，耐毯藥變而異株艙完全量取代縫藥物膚敏感弱株最惰快能發(fā)確生在14至28天內(nèi)脅?！癢湯il疫d”達(dá)t長yp廊e墓vi悟ru縣s(d雄ru蓋g檢su薪sc船ep替ti溫bl舌e)“M價(jià)ut肌an孩t”敬v振ir熊us(d殼ru丑g方re舟si切st塵an溝t)Dr獻(xiàn)ug霉P株re刑ss譜ur甘eTI魂MEVi達(dá)ra攜l許Dy拒na某mi扎cs奮a棄nd呢D去ru螞g柏Re票si爪st討an息ceVi肉ra車l坑Lo側(cè)ad&Re反pl定ic旨at帽io期n宿Ra給teVi鞭r(nóng)a效l質(zhì)Lo糊ad&Re億pl寨ic幫at晶io吧n擊Ra華teTI盡MELo航wRe慎pl始ic赤at音io冒nRa里te&Vi吳ra哪l陵Lo府a(chǎn)dLe吼ss善“接fi樂t”鞭v嗎ir撒usPr驗(yàn)es贊su覺re果:師Dr隆ug做APr蔬es鄰su脾re古:倍Dr字ug興BPr悔es飲su禁re疏:孤Dr割ug朗C枝,.素..播.(C獻(xiàn)om爐bi沉ne枕d)胞U舟se敞o隨f賣Ac維ti底ve侄A糧nt希ir允et測ro獻(xiàn)vi躍ra矩l歸Ag蕩en遠(yuǎn)ts耐藥扎性是掀怎么浴產(chǎn)生性的?—耐藥皮株是忙在病話毒自評發(fā)性店的、淘高頻控率的家基因管突變召中產(chǎn)生，熟在藥坡物選常擇性斥的壓窗力下捎優(yōu)勢戰(zhàn)復(fù)制蹲的結(jié)警果。那些柿因素欲促使末耐藥棄性病簽毒株郊出現(xiàn)閘?病毒載量耐藥株出現(xiàn)時(shí)間300,0000.130,00013,00010300100301,0001.那些纖因素爺促使久耐藥肝性病膊毒株妻出現(xiàn)趕?病毒纏學(xué)失概敗率(%郊)02040608010軋0>9恩590行-9浙580翻-9哄070薄-8御0<7賊0服藥茅依從含性(%更)82旦.171與.466記.754鼻.621需.72.那些褲因素奮促使強(qiáng)耐藥頓性病盼毒株符出現(xiàn)乎?服藥樸依從歡性(%圈)2.那些新因素偶促使京耐藥濕性病士毒株碰出現(xiàn)怠?藥物紗配伍歪不當(dāng)家—未藥代徑顯著樂不同簽藥物底配伍3.024483612時(shí)間(小時(shí))藥物濃度潛在病毒復(fù)制區(qū)IC90IC50最后一次用藥

第一天第二天單藥治療S.Tayloretal.11thCROIAbs131那些嘆因素側(cè)促使刺耐藥賠性病齊毒株新出現(xiàn)炕?—戲細(xì)胞世周期列依賴嬸性藥深物AZ愿T,飾D垂4T狠(優(yōu)活化熊期細(xì)滾胞)DD厲I漠(靜兔止相幼細(xì)胞窮)蛋白塑酶抑散制劑扭(磁活化沉期細(xì)叮胞)—菠非細(xì)海胞周醬期依字賴性庫藥物3T烘C,冒F宇TC防,返A(chǔ)b創(chuàng)ac符av襯irTe頂no復(fù)fo角vi禾rNN燃RT堪Is3.般藥扯物配刃伍不圍當(dāng)—熊缺娘乏對擠某一茂時(shí)相傘細(xì)胞乎內(nèi)病紡毒抑竊制或防抑制猶不足那些拒因素掀促使奮耐藥矛性病昨毒株程出現(xiàn)陷?—隨胃腸良道吸盆收不帆好：會嘔吐鍛，腹遵瀉；—估隨意盯間歇寫服藥編；—奮與中墾藥或使其他翼藥物明同時(shí)抱服用黑。4.決其午他因鏈素什么濫是好榴治療改方案授?—純能快標(biāo)速抑農(nóng)制病題毒；—到不易臂產(chǎn)生婚耐藥忽性；—灰可長塌期維丹持；耐藥濟(jì)性分溝類1、僅原發(fā)爺性耐水藥(器Pr做im磨ar棋y遮re攜si論st嚷an萬ce衡):白病逐人在揚(yáng)接受后抗病搖毒治折療前煌產(chǎn)生銳了藥銷物作歐用靶美點(diǎn)的月變異衣，或姥者感吳染了語耐藥癥毒株眠，均應(yīng)降低斷抗病暮毒藥何物的消敏感鞠性。效在已荷經(jīng)開判展H上AA靜RT理的國冊家普版遍存隱在，累感染括了耐改藥毒湯株的吵病人凳很容搬易引壟起藥尺物治醫(yī)療失禽敗。2、剩繼發(fā)奶性耐扇藥(筐Se麗co卡nd組ar彼y扇re淹si儉st輩an御ce侵):獲病紙人已誰經(jīng)接瞧受了俘抗病縮慧毒治虛療并截產(chǎn)生我治療圣失敗龍，在薪藥物冠的選想擇壓卸力下餓產(chǎn)生撈的耐易藥。耐藥浙機(jī)制蠅：核苷飾和核糞苷類爺似物1、破壞線核苷貫類似譯物結(jié)餅合病宣毒D遺NA船的能揚(yáng)力M1滅84殼V學(xué)突變崇:侍RT嘗酶第踩18洽4位浴密碼翁子的氨嘴基酸基由蛋次氨酸載(M則)變峽成為枕纈氨兆酸(斷V)。拉擾米夫哭定(汗La善mi冬vu啟di援ne捧)Q1朵51糟M嶺mu扇ta忘ti楚on行:睛在H抗IV樸-1班中出怠現(xiàn)低蘆于5%阻；H泥IV己-2涌中出趴現(xiàn)頻壤率較粗高。耐藥屢機(jī)制伯：2、切除堵病毒懷DN不A鏈簽?zāi)┒烁诺暮硕鬈疹愑滤莆颰h拼ym搜id怎in織e夢an黎al貨og系ue彎s脂mu菊ta悟ti森on辟s:鎮(zhèn)突夜變引榨起A顛TP蜻或者六焦磷益酸介碗導(dǎo)的器切除笨DN悠A鏈舌3‘灘末端布核苷續(xù)類似勿物。核苷屬和核王苷類淡似物耐藥廣機(jī)制候：非核永苷逆仍轉(zhuǎn)錄削酶抑胳制劑科(N里NR凱TI繳)突變漏降低拌了抑炸制劑建對酶沉的結(jié)裂合力訴。不姥同于襪核苷燈逆轉(zhuǎn)質(zhì)錄酶蹈抑制延劑，拒其單他一突泉變就攪能導(dǎo)銜致高勵度耐賭藥。鴉如K暈10敏3N漆、Y間18洽1C。耐藥秒機(jī)制淋：K1槽03趨N突蒜變的練機(jī)制耐藥旨機(jī)制雙：蛋白軟酶抑貼制劑

HIV蛋白酶由兩個同樣的蛋白質(zhì)鏈組成。這兩個蛋白質(zhì)鏈在一起就如同核桃的兩半，而蛋白酶的活性位點(diǎn)就在兩個半殼的中間。

突變歸點(diǎn)的墊表示獻(xiàn)方法居：基因押的突脫變通頂常以礎(chǔ)字母堅(jiān)－數(shù)你字－憤字母娘的書虧寫方侄式來膝表示少，第剝一個凳字母閣代表柴野生緞型病霞毒株派特定悄密碼豎子處扣的氨萍基酸騾，第拜二個滅字母堅(jiān)代表壘在特港定密偏碼子歪處替菌換了役的氨蠅基酸隱，中籠間數(shù)憲字表羨示突扁變點(diǎn)壩的位庭置。竭例如嚴(yán)：逆建轉(zhuǎn)錄申酶（在RT挺）K喝10刮3N佩的突晃變表吳示逆金轉(zhuǎn)錄筋酶第攪10奸3位水密碼的子的汁氨基全酸由天天冬辛酰胺窩（K應(yīng)）變嘉成為迎賴氨趁酸（液N）污。如何戴檢測褲耐藥缺株：目前躁耐藥荒性檢慚測有黨兩種騎方法研，即表型瘡檢測謊及基猜因型朱檢測。表擔(dān)型檢干測通永過用腹藥期愿間的約病毒束培養(yǎng)噸進(jìn)行強(qiáng)，而接基因殃型檢爭測則竊通過在分子保生物治學(xué)方射法檢嚴(yán)測與階耐藥壁性相跡關(guān)的寶病毒刃基因左突變擾。基月因型麗檢測跌的費(fèi)續(xù)用較豪低，含技術(shù)濃也相牧對容翅易，店可在祝樣品恥收集蝦后1泛～2牙周得布到結(jié)嘴果，劇但分節(jié)析基佛因型衡耐藥油檢測另時(shí)，榮需要陜掌握進(jìn)大量膛相關(guān)狡知識妥，如舟突變滾與抗懶病毒氣藥物描及其鄙它藥潛物的幫交叉炭耐藥境等，詢才能魄對結(jié)鋤果進(jìn)醋行正章確的槽分析渣。表曲型檢慢測可合以直璃接檢客測病清毒的增耐藥鋤性，求但操資作復(fù)則雜、頃耗時(shí)構(gòu)，技彩術(shù)要際求高不，且饑非常孟昂貴秒，因耕此目宣前國晶際上怕廣泛雙應(yīng)用癥于臨怎床的蛋是基煙因型柜耐藥朵檢測胡。如何亂檢測青耐藥移株：TranslationintolinearstringofaminoacidsFoldingintofunctionalproteinHIVRNA表型檢測基因型檢測基因捉型和予表型斯檢測檢測尊中注半意事功項(xiàng):—虜在病靜人仍最在治螺療失胃敗的皺方案幫上收尋集樣輛品，紹可保證耐托藥株帖占總辰病毒頓量的攜20獻(xiàn)%以領(lǐng)上；—膀病毒櫻載量便<衰10匯00綢時(shí),企可畢出現(xiàn)紀(jì)假陰貓性。我國減HI供V耐羞藥性滑本底敗抽樣努調(diào)查旁結(jié)果1)斤對于膨RT怎基因冒區(qū)共耐完成售對2燦1個侄省區(qū)馬共1晌43昂個樣盼本的詠測序客，僅混有2距例發(fā)煙現(xiàn)具旅有輕牽微耐屬藥（肥占總柱樣本萍數(shù)的隨1.扭4%艇）2)符對于兼蛋白錢酶基霸因區(qū)妖本次羅調(diào)查紡共完慢成2鼠0個渣省區(qū)牌16耍8個猾樣本滾的分死析，倚僅發(fā)捧現(xiàn)有圖2例欄樣本亭（占跪總樣炸本數(shù)姓1.貓21這%）惠具有直輕微邊耐藥飛。結(jié)論填：當(dāng)預(yù)前我測國H念I(lǐng)V袖耐藥畝性處巴于較閥低狀涼態(tài)，征對于躺幾乎礙所有居藥物斬敏感柏，我現(xiàn)國抗烏HI糊V藥摟物的廈使用怖如果并有計(jì)氣劃的念開展忠，應(yīng)評當(dāng)會趕有較供好的量效果紐奉，但滑應(yīng)加喜強(qiáng)治爹療依膀從性核促進(jìn)奸工作希和耐株藥毒漆株的白監(jiān)測廊工作恩。HI蠶V基念因型月耐藥跳性檢傍測岔（未序列堤測定鋤法）檢棗測幻玉流北程病人宅血漿燥標(biāo)本HI講V業(yè)R伐NA病毒狐c(diǎn)裁DN隸AHI撈V姥RT游和P廳R基島因片把段序列攤測定結(jié)果始解釋RN唯A提借取逆轉(zhuǎn)蓄錄PC們R擴(kuò)經(jīng)增特定肝的解霧釋系扯統(tǒng)標(biāo)本新鮮胡ED役TA濕抗凝本血漿仁，或底-8螺0℃保存鴿，避炎免反剝復(fù)凍喝融病毒擁RN湯A提姻?。≦i秒ag驅(qū)en共公司圈試劑項(xiàng)盒）裂解嬌標(biāo)本條，滅吉活R龍NA富酶加到奴離心芝柱中帳，R浪NA籮與硅眨膠膜伐結(jié)合洗兩獲次，翻去除園雜質(zhì)用無諷RN晌A酶堆的緩躺沖液矮洗脫它RN蹤蝶A收集民RN兵A備施用優(yōu)點(diǎn)橫：操心作簡射便、壘快速覆、得刷率高逆轉(zhuǎn)嶺錄依R狠NA逃cD傷NA反應(yīng)堤體系欄：10遼XB方uf道fe鉤r爽1ldN捷TP壟0販.5l外側(cè)購反向邊引物馳1lRN仔as獲e炎in計(jì)hi畜bi喇to瞞r族0扛.2鄙5lM-攜Mu椒LV唱R剛T耀0撞.2奧5lDE計(jì)PC較水壟2lRN蜂A模按板紙5l42宴℃水君浴1欣小時(shí)聲，9夫5℃籃5哥分鐘窄滅活密RT巢式季PC熔R擴(kuò)脂增病或毒蛋神白酶怨和逆投轉(zhuǎn)錄咽酶基框因第一撓輪擴(kuò)雙增反沫應(yīng)體蜂系：10四XB犬uf勁fe走r董5lMg毯Cl23ldN篇TP劫1l外側(cè)鴿正向繪引物炒1l外側(cè)羨反向遲引物反1lTa嫁q酶裙0.壤5l水寧2旬9.渴5lcD悉NA辯模板楚10l94℃5m霜in地，9綱4℃30邀se議c，亮55℃30閘se賢c，齡72℃2.炭5m輝in塑3義0循杜環(huán)巢式始PC避R擴(kuò)卵增病秀毒蛋屋白酶榮和逆筋轉(zhuǎn)錄吼酶基尚因第二逝輪擴(kuò)厚增反啄應(yīng)體鏡系：10滅XB飽uf揚(yáng)fe逆r時(shí)5lMg賣Cl23ldN震TP碗1l內(nèi)側(cè)淋正向而引物抬1l內(nèi)側(cè)柿反向斗引物稈1lTa服q酶姐0.伴5l水母2龜9.轉(zhuǎn)5l第一煎輪擴(kuò)隸增產(chǎn)森物悠1外0l94℃5m島in驚，9鐵4℃30請se拾c，害55℃30膠se茫c，倘72℃2.恭5m蠢in嚴(yán)3胡0循午環(huán)擴(kuò)增信產(chǎn)物辛鑒定扶：瓊摟脂糖慮凝膠姜電泳擴(kuò)增像產(chǎn)物盞純化QI非Aq悠ui委ck劫G膠el魄e國xt咬ra換ct韻io性n試桿劑盒核酸創(chuàng)序列廊測定雙脫熊氧鏈噴末端剛終止略法:Pr班ot目ea涉se伴:CC耀TC字AA誦AT風(fēng)CA棚CT寬CT允TT悉GG同CA煤AC混GA倒CC囑CC么TC朋GT鐘CA晉CA繳GT肉AA役AG濫AT擋AG僵GG壤GG促GC蓮AA綱TT固AA遠(yuǎn)AG蔑GA奸AG邁CT萄CT磨AT廈TA哲GA陷TA送CA葡GG詢AG逐CA津GA網(wǎng)TG早AT來AC授AG較TA鄭TT手AG噴AA懇GA夏AA使TG襖AA寫TT嬌TG芽CC除AG眉GA進(jìn)AA虎AT輛GG跡AA蘇AC盛CA錢AA舞AA辯TG把AT稀AG稅GG認(rèn)GG紀(jì)AA館TT屑GG敗AG宋GT奧TT彈TA筐TC擦AA疊AG拆TA澤AG噸AC鉆AG越TA吸TG睬AT求CA非GG鞏TA嘴TC捆CA甘TA遙GA鄉(xiāng)豐AA裳TC拴TG貍TG蛋GA透CA慶TA劫AG避GC筆TG脹TA疲GG睡TA剪CA役GT法AT賞TA商AT志AG括GA命CC禮TA繳CA叢CC愧AG董TC訓(xùn)AA糠CA砍TA萌AT田TG狼GG諸AG葵AA態(tài)AT刮CT征GT芝TG計(jì)AC佳TC館AG犯AT始TG臟GT殼TG權(quán)CA飲CT在TTRT胃:AA嚼AT懶TT鴉TC郵CC漂AT嫂TA德GT詢CC腎TA雖TT宰GA羊AA陽CT篩GT輸AC震CA騙GT火AA房誠AA幫TT丈AA近AG讓CC嘴AG齒GA繪AT倡GG倡AT法GG帖CC慌CA訓(xùn)AA膏AG乖TT蝦AA羅AC墳AA西TG河GC降CA潑TT虎GA遷CA毛GA筐AG誦AA吼AA芽AA補(bǔ)TA促AA亞AG踏CA舅TT薪AG樣TA麻GA跨AA香TT意TG彼TA桿CA歐GA尸AA糠TG唐GG賀AA吩AG就GA述AG脈GA康A(chǔ)A停AA益TT臂TC藝AA浩AA民AT古TG華GG喂CC縱TG店AA招AA辟TC醫(yī)CA罩TA墳CA箱AT辜AC淹TC貼CA腳GT束AT區(qū)TT孫GC功CA杰TA向AA郊GA估AA尿AA刷AG鼠AC棉AG維TA淺CT紙AA糧AT撐GG豪AG息AA銹AA英TT用AG節(jié)TA渴GA馬TT必TC密AG婚AG構(gòu)AA泛CT倉CA烈AT扎AA川AA鑰GA候AC最TC踩AA攏GA撕CT展TT灘TG盾GG舅AA盆GT宣TC嚇AA糞TT鹽AG勢GA弓AT隙AC托CA桑CA底TC貞CC蹤蝶GC呢AG倉GA桿TT泥AA脊AA磁CA亡GA依AA初AA騎AT謀CT榴GT黃AA閃CA糠GT借CC絹TG成GA姓TG夏TG閉GG苦TG螞AT篇GC嗽AT字AT尸TT刪CT如CA哄GT轟CC租CT轉(zhuǎn)TT窄AG幫AT碧AA生AG渾AC貝TT避CA怎GG怨AA找GT葛AC昏AC摘TG罪CA殼TT木TA村CC拾AT室AC潛CT屋AG聯(lián)TG互TA捕AA谷CA鐘AT甚GA群GA粘CA慶CC舒AG宜GG當(dāng)AT起TA友GA袖TA申TC洪AG塵TA半CA挑AT立GT冤AC絲式TT盛CC都AC勺AG納GG紫AT串GG顏AA車AG鑄GA旅TC遇AC稠CA沫GC賣AA傍TA勻TT樣CC帥AA慚TG板TA魚GT幟AT郵GA奇CA魂AA架GA凳TC雪TT陸AG垮AG叛CC薦TT訊TT摘AG碗GA菊AA虹CA此AA發(fā)AT種CC壇AG輝AC造AT俗AG援TT吐AT伴CT族AT崖CA他AT哀AC牧AT些GG林AT脫GA枕TT抬TG襪TT相AG還TA阿GG希AT腳CT牧GA扛CT到TA聯(lián)GA矩AA冒TA朽GG捆GC按AG篇CA估TA亞GA致GC慘AA淡AA鹽AT略AG啟AG進(jìn)GA糠AC拒TG顆AG優(yōu)AC務(wù)AA握CA江TC潔TG圖TT稍GA堆GG跨TG講GG嫩GA功TT園TA金CC孟AC垂AC煮CA徹GA橋CA瘡AA本AA爐AC令A(yù)T戒CA百GA樣GA晉GG樂AC婆CT熊TC冊CA狀TA利用膨網(wǎng)絡(luò)滴工具以確定養(yǎng)耐藥繁性突歐變并謠進(jìn)行種耐藥盈性解勵釋W(xué)e僅b站曾點(diǎn)：視ht含tp必:/兵/HI毯V鍵Dr過ug澡R非es蹤蝶is低ta懼nc剝e捷Al余go挑ri肥th礙m2HI住V返Dr迎ug喜R賄es師is脾ta文nc啞e她Al拴go儉ri爛th愁m3HI厘V瞇Dr標(biāo)ug逢r面es捏is暮ta役nc疼e賭da觀ta榴ba脫seHI插V誼Dr妖ug放R黎es丑is瞎ta楚nc貧e膠Al佛go扶ri賽th熊m1高度筍耐藥液：大于慮60已分中度梅耐藥答：30茫－5水9分低度芹耐藥抽：15泰－2忽9分潛在附低度返耐藥?。?0歷－1翅4分敏感好：0－耀9分耐藥害性突拖變計(jì)勉分HI旬V-錄1耐搖藥性抬檢測奸的臨遵床指秘征：（1）抗欣病毒剩治療今病毒丑學(xué)失女?dāng)⌒杞鹨某兛构┎《狙褐委煵罘桨咐葧r(shí)應(yīng)牙進(jìn)行籃耐藥蜘性檢狐測以專協(xié)助租選擇強(qiáng)有效噸的抗擱病毒煉藥物申。（2）抗謎病毒傾治療發(fā)病毒域載量說下降纏不理須想時(shí)估可進(jìn)待行HI踏V-屠1的耐茂藥性寒檢測父。（3）抗乓病毒蠅治療蓮失敗諷需要館進(jìn)行撐耐藥亂性檢國測時(shí)要，應(yīng)誓該在作病人兩仍在舒服藥鞏時(shí)或毯停藥尋后立奸即（4周內(nèi)匯）進(jìn)棋行檢臥測。HI老V-最1耐輛藥性尤檢測窩的臨倒床指斧征：（4）急摧性HI顏V－1感染面的病談人進(jìn)秋行抗覽病毒旨治療賊，最躍好進(jìn)缺行耐城藥性炮檢測舊，對乒于選棋擇合品適的井抗病羊毒藥華物、桶取得孟最佳貓抗病似毒效筐果很京有益州處。（5）對鑄于未劍經(jīng)抗垮病毒粒治療芒的慢溜性HI夏V感染百者不精一定繡要做椒耐藥撿性檢痕測，浴但當(dāng)圖有跡森象顯色示感罩染的配是耐狗藥性HI沿V毒株登時(shí)（盞例如洪感染洞來自為于正鋒在服卸用抗評病毒敢藥物勞的病富人）熟，就捏應(yīng)當(dāng)只進(jìn)行扛耐藥蒜性檢鍛測。（6）不評推薦安對病搞毒載膨量<1妹00湖0c壩p/油ml的病剃人做尾病毒珍載量燈檢測叼，因風(fēng)為病陰毒水那平太男低很退難擴(kuò)么增出癢目的能基因應(yīng)片段耐藥丘性檢決測結(jié)汪果的買解釋HI息V-凳1的擁耐藥始性不同是全盯或無擴(kuò)的現(xiàn)酒象，性基因綠型和照表型增耐藥多性檢蠻測結(jié)枕果的撇分析扶和解竹釋都取有困樣難所有粗抗病始毒治鳴療都眨是聯(lián)墨合用央藥，船他們蜓之間凱是相錦互協(xié)拳同的頃，即姻對一姐種藥角物的籍敏感比性降僵低并六不干超擾同速一治魔療方閉案中蘋其他籌藥物莫的抗趁病毒舒活性懶。藥物桑即使中有耐敲藥性忽也可頸能有丹益處售，因鄰為有足耐藥源性突鄭變的剖病毒泉比敏驅(qū)感毒遼株的孕復(fù)制多適應(yīng)佛性要鑼差得蔬多。血清踐中藥喜物的英水平籍，特廣別是巾蛋白販酶類爺藥物以是高默度變胡化的老，如拖果能淹夠提鼓高血袍清中把蛋白串酶類忘藥物教的濃競度，劍低水煮平的沈蛋白貫酶耐歡藥性喜有時(shí)祝能夠賊被克境服。Nu多cl娃eo英si枝de努R魂es盾is困ta稱nc招e憶Mu歐ta濁t(yī)i位on坡sZi斜do裳vu乏di膚ne敏4獨(dú)1,殃6匙7,賀7勵0,陳2鵲10惕,悅21束5,鞏2選19咳(下TA杜Ms素)Di園da竟no目si萬ne舅6壤5,嘉7茅4,軍7癢5,摘1艙84Za洞lc暢it制ab叔in憤e尊65嘉,懸69膝,伙74叼,船18治4St忘av溫ud由in可e永41怪,喊67蒼,遵70閃,雷75絲式,拘21鍵0,籠2卡15碼,嘩21嬸9(磁TA討Ms里)La踢mi搭vu長di天ne投1啄84Ab腰ac譽(yù)av鳥ir幟4男1,丈6匠5,贊6聽7,丙7禾0,怕7剖4,挨1襯15乳,慣18薄4,巖2辜10嫌,些21震5,胳2攤19Mu檢lt勞in叨uc摧le拍os從id蹲e桿Re刷si貿(mào)st嬌an拴ceMu遷lt狀ip畏le捕T元AM出s在4紹1,蕉6工7,科7合0,座2冊10誓,秀21下5,以2俯1969部i她ns蜘er丹ti機(jī)on譽(yù)c族om麥pl撥ex啄41女,智62甩,爛67她,倘69裁,堪70盆,差21袖0,休2軍15龍,挑21記915拒1蛇co芬mp皂le渴x壞6蝕2,原7戰(zhàn)5,夠7瓶7,悔1孤16值,濫15冠1NN掘RT磨I隸Re綱si聾st妻an習(xí)ce落M譜ut灣at熊io嘉nsNe嫁vi窗ra閃pi鍬ne滋1腫00扒,縮慧10扛3,脈1籌06令,犧10拍8,妹1耗81營,忍18撿8,群1良90象,誦23楊0De碗la陣vi酒rd兵in乒e登10關(guān)3,銜1是81彩,摸23咸0,懸2派36Ef洋av歡ir荒en環(huán)z縫1昏00齡,寬10雄3,阻1腔08醬,硬18末8L鞏,輸19趟0,彼2便25擊,辨23彼0Pr亦ot敵ea休se趣R或es摘is扣ta鋼nc富e輔Mu夕ta專ti故on路sIn鄭di觀na小vi毀r修10詢,紋20業(yè),哲24欄,亡46痛,萌63跌,菊64眼,陪82竹,偵84畜,概90Ne險(xiǎn)lf輕in抓av芹ir奴3未0,鴨3潑5,淚3少6,扁4奴6,棚7圈1,嘴8版4,摩8孤8,耕9掉0Ri拴to望na李vi繼r悟8,侍1憐0,思2勞0,恐3群3,課3蘿6,悼5天4,附6開3,缸7怠1,庭8單2,百8臨4,華9保0Sa廢qu禿in錦av窗ir尚1比0,魔2忌4,妖3洞0,的4鍋6,冰4養(yǎng)8,戚5竟4,純6托3,誦6賭4,主7剃1,輩7嫩3,速7棍7,膀8兆1,鼓8返4,辟8依8,降9朗0Am干pr湊en斬av零ir愧10亞,叮32茫,符46浩,伐47桂,盛50貞V,蝴5耀4,他8裂4Lo鼻pi禿na瞞vi罩r/辦r佳10碑,榨20旺,敏24渣,帝46看,輕53匙,產(chǎn)63團(tuán),械71繁,速82杰,須84歉,絹90At床az協(xié)an慰av贊ir枕4匆8,術(shù)5酷0L換,燙71擺,翼84番,宅88白,爆90Ke芝y為mu匹ta耕ti盯on癢s:杰N厭uc慈le完os委id榮e瓶RT姑IM1必84需V:來h墨ig鮮h山le欠ve廊l初re法si成st罰an蓄ce參t匪o段3T川CK6渾5R揚(yáng):Re臭si琴st外an膛ce迫t山o醬al豎l鍵nu趴cl別eo渣si辰de陪R乖TI眾s鹽ex漢ce頌pt悟A資ZT維