實(shí)驗(yàn)一 量效關(guān)系曲線測(cè)定

實(shí)驗(yàn)一量效關(guān)系曲線測(cè)定第1頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月目的用寇氏法測(cè)定LD50和95％可信限

計(jì)算LD50理解其藥理學(xué)意義第2頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月條件1.劑量必須按等比級(jí)數(shù)（劑量對(duì)數(shù)按等級(jí)數(shù)）分組。2.各組動(dòng)物數(shù)應(yīng)相等。3.“反應(yīng)”應(yīng)大致呈正態(tài)分布。最小劑量組的死亡率（Pn）應(yīng)為0%，最大劑量組的死亡率（Pm）應(yīng)為100%；如果Pn<20%或Pm>80%需用校正公式計(jì)算；如Pn>20%或Pm<80%，則不能用此法計(jì)算。第3頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月試驗(yàn)方法1．預(yù)備實(shí)驗(yàn)（1）摸索上下限：用少量動(dòng)物逐步摸索出使全部動(dòng)物死亡的最小劑量（LD100）和一個(gè)動(dòng)物也不死亡的最大劑量（LD0）具體方法：據(jù)經(jīng)驗(yàn)或文獻(xiàn)定出一個(gè)估計(jì)中值，觀察2～3只動(dòng)物的死亡情況。如全死，則降低劑量；如全不死，則加大劑量再行摸索，直到找出Pm=100%和Pn=0%的劑量，此兩量分別為上下限。

第4頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月試驗(yàn)方法（2）確定組數(shù)，組距及各組劑量①組數(shù)：一般5～8組，可根據(jù)適宜的組距確定組數(shù)。②組距：指相鄰兩組劑量對(duì)數(shù)劑量之差，常用“i”來(lái)表示。i不宜過大，也不宜過小。組距大小主要取決于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)被試因素的敏感性。敏感性大者，組距可小些；敏感性小者，則組距應(yīng)大些。上下限之間的距離可作為敏感性大小的標(biāo)志。距離大，說(shuō)明敏感性??；距離小，則說(shuō)明敏感性大。一般要求i應(yīng)小于0.155，多在0.08～0.1之間。

第5頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月試驗(yàn)方法③確定組距方法：把上下限的劑量換算成對(duì)數(shù)值，設(shè)上限劑量的對(duì)數(shù)值為Xm，下限劑量的對(duì)數(shù)值為Xn，組數(shù)為n，則：

i＝（Xm-Xn）/（n-1）④確定各組劑量：由Xn逐次加i（或由Xm逐次減i），得出各組劑量的對(duì)數(shù)值，再分別查反對(duì)數(shù)，即得出各組劑量（呈等比級(jí)數(shù)排列）。第6頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月試驗(yàn)方法確定給藥劑量：r＝n-1√LD100/LD0r：各組劑量的公比；n：組數(shù)求得r后，自第一劑量組LD0開始乘以r，得相鄰的下一個(gè)組的劑量，依次類推。r與i的關(guān)系？第7頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月試驗(yàn)方法2．正式實(shí)驗(yàn)（1）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇與分組①選擇原則：可根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)而選取動(dòng)物，應(yīng)選擇對(duì)被試因素敏感的動(dòng)物。還要考慮動(dòng)物來(lái)源，經(jīng)濟(jì)價(jià)值及操作簡(jiǎn)便等條件。LD50常用小白鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來(lái)測(cè)得。第8頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月試驗(yàn)方法②分組原則：每組動(dòng)物數(shù)必須多于組數(shù)。因?yàn)槊拷M動(dòng)物數(shù)如少于組數(shù)，就不能充分反映各組死亡率的差別。③分組方法：首先，按性別將動(dòng)物雌雄分開，然后隨機(jī)分組。

第9頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月試驗(yàn)方法（2）給藥、觀察死亡數(shù)、求出死亡率①給藥途徑：可據(jù)不同藥物及動(dòng)物而定，小白鼠多用腹腔注射或灌胃法；也可靜脈注射。②給藥順序：間隔跳組方法。如共7組，先按2、

4、6組順序給藥，然后逆行按7、

5、3、1組的順序給藥。可避免藥物放置過久或動(dòng)物饑餓造成的偏向性誤差。第10頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月試驗(yàn)方法③觀察時(shí)間：直到動(dòng)物不再因藥物作用而死亡為止。在觀察期間應(yīng)注意保證食、水、溫度等生活條件，嚴(yán)防非被試因素引起的死亡。最后將死亡情況及各種數(shù)據(jù)填入相應(yīng)表格中。第11頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月試驗(yàn)方法3.計(jì)算公式①基本公式

Xm：死亡率為100﹪組的對(duì)數(shù)劑量；i：組距，即相鄰兩組劑量對(duì)數(shù)劑量之差；∑P：各組死亡率之和第12頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月試驗(yàn)方法②校正公式當(dāng)Pm>0.8或Pn<0.2時(shí)可用下公式計(jì)算Pm：最高死亡率；q：各組劑量存活率，q=1-p；

Pn：最低死亡率；P：各組死亡率第13頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)準(zhǔn)誤第14頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月lg-1（lgLD50±1.96×Sx50）LD50的95%可信限第15頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小白鼠18～22g雌雄兼用實(shí)驗(yàn)藥品鹽酸普魯卡因?qū)嶒?yàn)器材電子稱鼠籠1ml注射器第16頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月試驗(yàn)方法1.取小鼠40只，稱體重，按體重順序編號(hào)，并染色，按隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)法隨機(jī)分為4組，每組10只。2.藥液配制：按等比稀釋法（1：K）

V’=V/1-KV：各組需要的藥物總體積；V’：所需母液的總體積；K=1/r母液所需藥量（M）=V’Dmax/(20ml/kg)第17頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月試驗(yàn)方法給藥劑量：Dmax290、Dmin121.3mg/kg。3.腹腔注射0.2ml/10g。4.以呼吸停止為指標(biāo)，記錄死亡數(shù)。開始15min內(nèi)嚴(yán)密觀察，準(zhǔn)確結(jié)果為24h內(nèi)的死亡數(shù)5.整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，小鼠按正常條件喂養(yǎng)一天第18頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)程序1.動(dòng)物隨機(jī)分組2.試藥的配制3.按上述劑量給藥4.觀察記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果5.計(jì)算LD50第19頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月組別動(dòng)物數(shù)（只）劑量（mg/kg）對(duì)數(shù)劑量死亡數(shù)（只）死亡率存活率表1鹽酸普魯卡因LD50測(cè)定結(jié)果第20頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月ED50的測(cè)定LD50的觀察指標(biāo)是死亡和生存；ED50以翻正反射消失為入睡指標(biāo)，觀察藥物的催眠效應(yīng)。觀察時(shí)間：腹腔注射后30min