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基因工程及其應(yīng)用第2節(jié)視頻鏈接江蘇省濱海中學(xué)基因工程及其應(yīng)用第2節(jié)視頻鏈接江蘇省濱海中學(xué)1轉(zhuǎn)魚(yú)抗寒基因的番茄轉(zhuǎn)基因鮭魚(yú)高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的農(nóng)作物和具有抗逆性的作物新品種.抗蟲(chóng)害的玉米轉(zhuǎn)魚(yú)抗寒基因的番茄轉(zhuǎn)基因鮭魚(yú)高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的農(nóng)作物2什么是基因工程?
基因工程的原理是什么?本課聚焦:什么是基因工程?本課聚焦:3豆科植物的根瘤能夠固定空氣中的氮資料一:目前,全球的氮肥生產(chǎn)耗費(fèi)世界總電力的3%-4%,且農(nóng)作物只能吸收氮肥的1/10,造成了大面積土壤和水質(zhì)的污染。資料分析引入豆科植物的根瘤能夠固定空氣中的氮資料一:目前,全球的氮肥生產(chǎn)4蜘蛛能夠吐出蛛絲資料二:蛛絲是自然界最奇特的物質(zhì)之一,它具有極強(qiáng)的韌度,其韌度是同樣直徑鋼材的好幾倍。但與家蠶不同,蜘蛛不能家養(yǎng),因?yàn)樗鼈儠?huì)互相吞食,所以不可能建立人工飼養(yǎng)蜘蛛的農(nóng)場(chǎng)。30多年來(lái),科學(xué)家們一直試圖找到利用其他生物體來(lái)制造蛛絲的辦法。蜘蛛能夠吐出蛛絲資料二:蛛絲是自然界最奇特的物質(zhì)之一,它具有5資料三以往,治療糖尿病的胰島素是從動(dòng)物胰腺中提取的,從100千克豬、牛等動(dòng)物的胰腺只能提取3-4克胰島素,治療一個(gè)患者需宰殺40-50頭牛,這種藥物的造價(jià)就可想而知了。微生物可以有分泌產(chǎn)物,且微生物繁殖速率快資料三微生物可以有分泌產(chǎn)物,且微生物繁殖速率快6設(shè)想一能否讓禾本科的植物也能夠固定空氣中的氮?能否讓細(xì)菌“吐出”蛛絲?設(shè)想二能否讓微生物產(chǎn)生出人的胰島素、干擾素等珍貴的藥物?設(shè)想三經(jīng)過(guò)多年的努力,科學(xué)家于20世紀(jì)70年代創(chuàng)立了可以定向改造生物的新技術(shù)——基因工程。設(shè)想一能否讓禾本科的植物也能夠固定空氣中的氮?能否讓細(xì)菌“吐7基因工程:又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。通俗的說(shuō),就是按照人們的意愿,把一種生物的某種基因提取出來(lái),加以修飾改造,然后放到另一種生物的細(xì)胞里,定向地改造生物的遺傳性狀。原理:操作水平:結(jié)果:一、基因工程的定義目的基因供體細(xì)胞受體細(xì)胞基因重組DNA分子水平定向地改造生物的遺傳性狀,獲得人類所需要的品種。獲得新性狀基因工程:又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。通俗的說(shuō),就是8二、基因操作的工具1.基因的“剪刀”──限制性內(nèi)切酶(限制酶)一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列,并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。專一性如:EcoRI限制酶二、基因操作的工具1.基因的“剪刀”──限制性內(nèi)切酶(限制酶9限制性內(nèi)切酶(EcoRⅠ)作用過(guò)程點(diǎn)擊播放限制性內(nèi)切酶(EcoRⅠ)作用過(guò)程點(diǎn)擊播放10
被同一種限制酶切斷的幾個(gè)DNA是否具有相同的黏性末端?思考:被同一種限制酶切斷的幾個(gè)DNA是否具有相同的黏性末端?思11GAATTCCGTAGAATTCGGATT嘗試寫(xiě)出下列序列受EcoliI內(nèi)切酶作用后的黏性末端CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTCTTAAGGCATCTTAAGCCTAACTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATT練一練:GGCATCTTAAAATTCCGTAGGAATTCCGTAGAATTCGGATT嘗試寫(xiě)出下列序列122、基因的針線──DNA連接酶連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端連接起來(lái),使之成為一個(gè)完整的DNA分子。2、基因的針線──DNA連接酶連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)13DNA連接酶的作用過(guò)程點(diǎn)擊播放DNA連接酶的作用過(guò)程點(diǎn)擊播放14基因的針線:DNA連接酶
G
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G用同種限制酶切割DNA連接酶連接的是DNA骨架上的缺口,不是堿基間的氫鍵基因的針線:DNA連接酶
GAATTCC153、基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體
運(yùn)載體必須同時(shí)滿足三個(gè)要求:①具有一到多個(gè)限制酶的酶切位點(diǎn),以便與外源基因連接;②能進(jìn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并能復(fù)制、表達(dá);③具有標(biāo)記基因,便于目的基因的篩選.3、基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體運(yùn)載體必須同時(shí)滿足三個(gè)要求:163、基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體常用的運(yùn)載體:質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒等標(biāo)記基因,便于進(jìn)行檢測(cè)。質(zhì)粒存在于許多細(xì)菌和酵母菌等生物中,是細(xì)胞染色體外能夠自主復(fù)制的很小的環(huán)狀DNA分子.3、基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體常用的運(yùn)載體:質(zhì)粒、噬17三、基因工程基本步驟1、獲取目的基因三、基因工程基本步驟1、獲取目的基因18提取目的基因的方法用限制酶切斷成許多片段⑴直接分離基因——鳥(niǎo)槍法將供體生物的DNA用限制酶切割為許多片段,再用運(yùn)載體將這些片段都運(yùn)載到受體生物的不同細(xì)胞中去。只要有一個(gè)細(xì)胞獲得了需要的目的基因并得以表達(dá),基因工程就算成功了。
該法最大的缺點(diǎn)是帶有很大的盲目性,工作量大,成功率低。且不能將真核生物的基因轉(zhuǎn)移到原核生物中去。提取目的基因的方法用限制酶切斷成許多片段⑴直接分離基因——19⑵人工合成基因法DNA合成儀有兩種方法:
①逆轉(zhuǎn)錄法:以信使RNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下利用脫氧核苷酸合成DNA(基因)。
②化學(xué)合成法:根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸順序推算出信使RNA核糖核苷酸順序,再據(jù)此推算出基因DNA的脫氧核苷酸順序。用游離脫氧核苷酸直接合成相應(yīng)的基因。⑵人工合成基因法DNA合成儀有兩種方法:
①逆轉(zhuǎn)錄20用與提取目的基因相同的限制酶切割質(zhì)粒使之出現(xiàn)一個(gè)切口,將目的基因插入切口處,讓目的基因的黏性末端與切口上的黏性末端互補(bǔ)配對(duì)后,在DNA連接酶的作用下連接形成重組DNA分子。2、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合用與提取目的基因相同的限制酶切割質(zhì)粒使之出現(xiàn)一個(gè)切口,將213、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞導(dǎo)入擴(kuò)增常用的受體細(xì)胞:菌類和動(dòng)植物細(xì)胞3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞導(dǎo)入擴(kuò)增常用的受體細(xì)胞:菌類和動(dòng)植224、目的基因的表達(dá)和檢測(cè)大量的受體細(xì)胞接受不多的目的基因。處理的受體細(xì)胞中真正攝入了目的基因的很少,必須將它從中檢測(cè)出來(lái)。將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)形成菌落,檢測(cè)菌落中是否有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。淘汰無(wú)表達(dá)產(chǎn)物的菌落,保留有表達(dá)產(chǎn)物的進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。無(wú)表達(dá)產(chǎn)物無(wú)表達(dá)產(chǎn)物有表達(dá)產(chǎn)物無(wú)表達(dá)產(chǎn)物
4、目的基因的表達(dá)和檢測(cè)大量的受體細(xì)胞接受不多的目的基因23第二節(jié)-基因工程及其應(yīng)用ppt課件24第一步:獲取目的基因基因工程基本步驟:第二步:目的基因與運(yùn)載體結(jié)合第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞第四步:目的基因的表達(dá)和檢測(cè)第一步:獲取目的基因基因工程基本步驟:第二步:目的基因與運(yùn)載25?如何讓大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素?①?gòu)募?xì)胞中分離出DNA①②③④⑤⑥②限制酶截取DNA片斷③分離大腸桿菌中的質(zhì)粒④DNA重組⑤用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌⑥培養(yǎng)大腸桿菌克隆大量基因?如何讓大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素?①?gòu)募?xì)胞中分離出DNA①②③④26轉(zhuǎn)化的實(shí)質(zhì):基因重組轉(zhuǎn)化的實(shí)質(zhì):基因重組271、什么是基因工程?
2、基因工程的原理是什么?課堂小結(jié):1、什么是基因工程?課堂小結(jié):28⒈要使目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組,所需的兩種酶是()①限制酶②DNA連接酶③解旋酶④還原酶A.①②B.③④C.①④D.②③2.基因工程的正確操作步驟是()
①使目的基因與運(yùn)載體結(jié)合
②將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
③檢測(cè)目的基因的表達(dá)是否符合特定性狀要求
④提取目的基因A.③②④①B.②④①③
C.④①②③D.③④①②積極思維:⒈要使目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組,所需的兩種酶是()積極思293.實(shí)施基因工程的第一步的一種方法是把所需的基因從供體細(xì)胞內(nèi)分離出來(lái),這要利用限制性內(nèi)切酶。一種限制性內(nèi)切酶能識(shí)別DNA分子的GAATTC順序,切點(diǎn)在G和A之間,這是利用了酶的()
A.高效性B.專一性
C.多樣性D.催化活性易受外界影響
⒋采用基因工程的方法培育抗蟲(chóng)棉,下列導(dǎo)入目的基因的作法正確的是()
①將毒素蛋白注射到棉受精卵中
②將編碼毒素蛋白的DNA序列,注射到棉受精卵中
③將編碼毒素蛋白的DNA序列,與質(zhì)粒重組,導(dǎo)入細(xì)菌,用該細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞,在進(jìn)行組織培養(yǎng)
④將編碼毒素蛋白的DNA序列,與細(xì)菌質(zhì)粒重組,注射到棉的子房并進(jìn)入受精卵中
A.①②B.②③C.③④D.④①3.實(shí)施基因工程的第一步的一種方法是把所需的基因從供體細(xì)胞內(nèi)30思維拓展:細(xì)菌和人是差異非常大的兩種生物,為什么通過(guò)基因重組后,細(xì)菌能夠合成人體的某些蛋白質(zhì)呢??思維拓展:細(xì)菌和人是差異非常大的兩種生物,為31第二節(jié)-基因工程及其應(yīng)用ppt課件32水母水母33四、基因工程的應(yīng)用1、基因工程與作物育種四、基因工程的應(yīng)用1、基因工程與作物育種34轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒轉(zhuǎn)魚(yú)抗寒基因的番茄獲得高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的農(nóng)作物和具有抗逆性的作物新品種。轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒轉(zhuǎn)魚(yú)抗寒基因的番茄獲得高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具35生長(zhǎng)快、肉質(zhì)好的轉(zhuǎn)基因魚(yú)(中國(guó))乳汁中含有人生長(zhǎng)激素的轉(zhuǎn)基因牛(阿根廷)獲得人們所需要的和具有優(yōu)良品質(zhì)的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生長(zhǎng)快、肉質(zhì)好的轉(zhuǎn)基因魚(yú)(中國(guó))乳汁中含有人生長(zhǎng)激素的轉(zhuǎn)基因362、基因工程與藥物研制我國(guó)生產(chǎn)的部分基因
工程疫苗和藥物許多藥品的生產(chǎn)是從生物組織中提取的。受材料來(lái)源限制產(chǎn)量有限,其價(jià)格往往十分昂貴。微生物生長(zhǎng)迅速,容易控制,適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。若將生物合成相應(yīng)藥物成分的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞內(nèi),讓它們產(chǎn)生相應(yīng)的藥物,不但能解決產(chǎn)量問(wèn)題,還能大大降低生產(chǎn)成本。2、基因工程與藥物研制我國(guó)生產(chǎn)的部分基因
工程疫苗和藥物37胰島素從豬、牛等動(dòng)物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰島素,其產(chǎn)量之低和價(jià)格之高可想而知。將合成的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌,每2000L培養(yǎng)液就能產(chǎn)生100g胰島素!使其價(jià)格降低了30%-50%!胰島素從豬、牛等動(dòng)物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取383、環(huán)境保護(hù)
基因工程做成的“超級(jí)細(xì)菌”能吞食和分解多種污染環(huán)境的物質(zhì)。通常一種細(xì)菌只能分解石油中的一種烴類,用基因工程培育成功的“超級(jí)細(xì)菌”卻能分解石油中的多種烴類化合物。有的還能吞食轉(zhuǎn)化汞、鎘等重金屬,分解DDT等毒害物質(zhì)。3、環(huán)境保護(hù)基因工程做成的“超級(jí)細(xì)菌”能吞食和分解多種39
利用基因工程培育的“指示生物”能十分靈敏地反映環(huán)境污染的情況,卻不易因環(huán)境污染而大量死亡,甚至還可以吸收和轉(zhuǎn)化污染物。環(huán)境檢測(cè):用DNA探針檢測(cè)水中病毒的含量利用基因工程培育的“指示生物”能十分靈敏地反映環(huán)境污染的404、其他基因診斷:如用基因探針檢測(cè)肝類病毒、診斷遺傳病基因治療:把健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中,達(dá)到治療疾病的目的。4、其他基因診斷:如用基因探針檢測(cè)肝類病毒、診斷遺傳病41五、轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性閱讀P105資料分析,討論:你認(rèn)為應(yīng)該如何對(duì)待轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性問(wèn)題?五、轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性閱讀P105資料分析,討論42轉(zhuǎn)基因生物與食物安全反對(duì)實(shí)質(zhì)性等同。擔(dān)心滯后效應(yīng)。擔(dān)心出現(xiàn)新的過(guò)敏原。擔(dān)心營(yíng)養(yǎng)成分改變。把動(dòng)物蛋白轉(zhuǎn)入農(nóng)作物是否侵犯了素食者的權(quán)益?實(shí)質(zhì)性等同是轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物安全性評(píng)價(jià)的起點(diǎn)而非終點(diǎn)。多環(huán)節(jié)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)陌踩栽u(píng)價(jià),可以保證轉(zhuǎn)基因食物的安全??茖W(xué)家審慎的態(tài)度。沒(méi)有轉(zhuǎn)基因食物影響人體健康的實(shí)例。舉證排除法。轉(zhuǎn)基因生物與食物安全反對(duì)實(shí)質(zhì)性等同。實(shí)質(zhì)性等同是轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物43轉(zhuǎn)基因生物與環(huán)境安全會(huì)破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。重組的微生物在降解某些化合物時(shí)所產(chǎn)生的中間產(chǎn)物,可能造成二次污染。重組DNA與微生物雜交可能產(chǎn)生對(duì)人類有害的病原微生物。轉(zhuǎn)基因植物的花粉中含有的毒蛋白通過(guò)食物鏈有可能進(jìn)入動(dòng)物或人體。轉(zhuǎn)入的是自然界已有的基因,,不會(huì)破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性??梢詼p少農(nóng)藥用量。抗除草劑農(nóng)作物使農(nóng)田管理更容易。新聞報(bào)道不實(shí),公眾的過(guò)分擔(dān)憂。轉(zhuǎn)基因生物與環(huán)境安全會(huì)破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。轉(zhuǎn)入的是自然界已44雀巢:堅(jiān)持使用轉(zhuǎn)基因原料稱安全性已經(jīng)被證明雀巢:堅(jiān)持使用轉(zhuǎn)基因原料稱安全性已經(jīng)被證明45我國(guó)的行動(dòng)2001年5月,國(guó)務(wù)院公布《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例》,對(duì)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物的研究和試驗(yàn)、生產(chǎn)和加工、經(jīng)營(yíng)和進(jìn)出口等作了具體規(guī)定。趨利避害,不能因噎廢食。我國(guó)的行動(dòng)2001年5月,國(guó)務(wù)院公布《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理46練
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