食品中亞硝酸鹽含量測(cè)定方法的研究

食品中亞硝酸鹽含量測(cè)定方法的研究

亞硝酸鹽是一種強(qiáng)致癌物質(zhì)，可引起各種人體癌。目前,廣泛使用的亞硝酸鹽測(cè)定方法為國(guó)標(biāo)法——鹽酸萘乙二胺分光光度法。該法相對(duì)簡(jiǎn)單、快速,但是國(guó)標(biāo)中對(duì)該法規(guī)定較為籠統(tǒng),對(duì)實(shí)驗(yàn)中影響結(jié)果的某些因素并未提及,在實(shí)際操作中容易使實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成偏差。本文針對(duì)亞硝酸鹽測(cè)定中幾個(gè)重要的影響因素進(jìn)行了研究,為確保測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度提供了依據(jù)。11.1材料和機(jī)器1.1.1試驗(yàn)試劑亞硝酸鈉、對(duì)氨基苯磺酸、鹽酸萘乙二胺、鹽酸、氫氧化鈉,以上試劑均為分析純。1.1.2主要設(shè)備UV754N紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司),電子天平(上海第二天平儀器廠)。1.2方法1.2.1配制亞硝酸鈉標(biāo)液0.4%對(duì)氨基苯磺酸溶液:稱取0.4g對(duì)氨基苯磺酸,溶于100mL20%鹽酸中,置于棕色瓶,避光保存;0.2%鹽酸萘乙二胺溶液:稱取0.2g鹽酸萘乙二胺,溶于100mL蒸餾水中,置于棕色瓶中避光保存;亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液:準(zhǔn)確稱取0.1000g干燥至恒重的亞硝酸鈉,加水溶解移入500mL容量瓶中,定容,混勻(此液為儲(chǔ)備液,亞硝酸鈉濃度為200μg/mL);亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液:臨用前,吸取亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液5.00mL,置于200mL容量瓶中,定容(此液為使用液,亞硝酸鈉濃度為5.0μg/mL)。1.2.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.2.顯色溫度的選擇在鹽酸萘乙二胺法中,影響顯色的因素可能有顯色時(shí)間、顯色溫度和樣品pH值等。顯色時(shí)間采用10min、15min、20min、25min、30min、35min、40min7個(gè)水平進(jìn)行實(shí)驗(yàn);顯色溫度采用20℃、30℃、40℃、50℃、60℃5個(gè)水平進(jìn)行實(shí)驗(yàn);樣品pH值采用3、4、5、6、7、8、9、10、11這9個(gè)水平進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。1.2.2.2.亞硝酸鹽的測(cè)定按國(guó)標(biāo)22.1分析結(jié)果的影響亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸重氮化后,再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紫紅色燃料,之后與標(biāo)準(zhǔn)比較定量,測(cè)得亞硝酸鹽含量。因此,顯色時(shí)間可能會(huì)對(duì)分析結(jié)果有一定影響。為此,我們對(duì)不同顯色時(shí)間下的分析結(jié)果進(jìn)行了研究,結(jié)果見(jiàn)圖1所示。本試驗(yàn)在室溫(20℃),pH自然的條件下進(jìn)行。由圖1可以看出,顯色時(shí)間的確對(duì)分析結(jié)果有一定的影響,特別是顯色時(shí)間較短時(shí),影響尤為顯著。從圖1可以看出,顯色時(shí)間在15分鐘內(nèi)變化較大,15～25分鐘間變化緩慢,25分鐘時(shí)吸光度最大,而后趨于穩(wěn)定。因此,在測(cè)定時(shí),一般可將顯色時(shí)間控制在15～30分鐘內(nèi)。2.2顯色條件對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響一般來(lái)說(shuō),溫度對(duì)化學(xué)反應(yīng)的速度影響較大,溫度愈高,反應(yīng)速度愈快。為此,本實(shí)驗(yàn)對(duì)不同溫度條件下的實(shí)驗(yàn)結(jié)果情況進(jìn)行了研究,結(jié)果見(jiàn)圖2.圖2為顯色時(shí)間為15min,pH自然的條件下的實(shí)驗(yàn)結(jié)果情況。結(jié)果顯示,吸光度隨著溫度的升高而在變化,當(dāng)顯色溫度達(dá)到室溫(20℃)后,吸光度值趨于穩(wěn)定。因此,在測(cè)定時(shí),將顯色溫度控制在室溫條件下進(jìn)行即可。2.3樣品對(duì)ph的影響亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸重氮化需要在弱酸性條件下進(jìn)行,樣品酸堿性狀態(tài)可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生一定的影響,因此,對(duì)不同pH條件的樣品情況進(jìn)行了研究,結(jié)果見(jiàn)圖3。圖3可知,在樣品pH小于7時(shí)吸光度與pH值正相關(guān),樣品pH大于7.0時(shí)負(fù)相關(guān),樣品pH等于7時(shí)吸光度最大。因此,在測(cè)定時(shí)應(yīng)將樣品的pH控制在7.0左右。3顯色時(shí)間和樣品ph的影響亞硝酸鹽的測(cè)定是食品安全檢測(cè)中一項(xiàng)重要的工作,為了保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確性,我們需要對(duì)影響分析結(jié)果的幾個(gè)因素有充分的了解。實(shí)驗(yàn)表明,在測(cè)定食品中亞硝酸鹽含量時(shí),溫度、顯色時(shí)間和樣品pH均對(duì)分析結(jié)果有一定的影響。在具體實(shí)驗(yàn)操作中,在室溫不低于19℃的條件下,無(wú)需對(duì)溫度進(jìn)行調(diào)控,但需要對(duì)顯色時(shí)間和樣品pH嚴(yán)格控制。其中,顯色時(shí)間在滿足國(guó)標(biāo)規(guī)定的15分鐘后,其變化對(duì)結(jié)果仍有一定影響,如果把握好顯色時(shí)間會(huì)使檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確。在實(shí)際操作中,尤其是樣品較多時(shí),顯色時(shí)間很難精確掌控。如果同批檢測(cè)樣品較多,也可統(tǒng)一延長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)間至20分鐘甚至25分鐘以上,待吸光度穩(wěn)定后再檢測(cè),可消除樣品之間的偏差。對(duì)于多數(shù)