質(zhì)譜分析儀-課件

第十九章質(zhì)譜分析儀第十九章質(zhì)譜分析儀1第一節(jié)質(zhì)譜分析的基本原理質(zhì)譜法是利用帶電粒子在磁場或電場中的運(yùn)動(dòng)規(guī)律，然后按照質(zhì)量或質(zhì)荷比（m/z）實(shí)現(xiàn)分離分析，測定離子質(zhì)量及其強(qiáng)度分布。這種按質(zhì)量或質(zhì)荷比大小順序排列而成的圖譜就是質(zhì)譜圖。第一節(jié)質(zhì)譜分析的基本原理質(zhì)譜法是利用帶電粒子在磁場或電場中2質(zhì)譜分析法主要是通過對(duì)樣品離子質(zhì)荷比的分析而實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品進(jìn)行定性和定量的一種方法電離裝置把樣品電離為離子質(zhì)量分析裝置把不同質(zhì)荷比的離子分開經(jīng)檢測器檢測之后可以得到樣品的質(zhì)譜圖1、基本定義3質(zhì)譜分析法主要是通過對(duì)樣品離子質(zhì)荷比的分析而實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品進(jìn)行定質(zhì)譜法是唯一可以確定分子質(zhì)量的方法；靈敏度高；樣品用量少，通常只需微克級(jí)樣品，檢出限可達(dá)10-14g；質(zhì)譜儀種類很多，應(yīng)用范圍廣，可進(jìn)行同位素分析，也可進(jìn)行化學(xué)分析，可進(jìn)行無機(jī)成分、有機(jī)結(jié)構(gòu)分析，生物樣品分析；被分析對(duì)象：氣體、液體、固體。2、質(zhì)譜分析的特點(diǎn)質(zhì)譜法是唯一可以確定分子質(zhì)量的方法；2、質(zhì)譜分析的特點(diǎn)43、質(zhì)譜分析的基本原理產(chǎn)生離子的方法：電子轟擊(EI)、化學(xué)電離(CI)、快原子轟擊(FAB)、電噴霧電離(ESI)等。電子轟擊離子化法是有機(jī)化合物電離的常規(guī)方法?；瘜W(xué)電離法可得到豐度較高的分子離子或準(zhǔn)分子離子峰。3、質(zhì)譜分析的基本原理產(chǎn)生離子的方法：電子轟擊(EI)、化學(xué)54、質(zhì)譜圖橫坐標(biāo)：m/e(質(zhì)荷比);縱坐標(biāo)：相對(duì)強(qiáng)度

最強(qiáng)的峰為基峰，規(guī)定其強(qiáng)度為100%.峰的強(qiáng)度與該離子出現(xiàn)的幾率有關(guān)。豐度最高的陽離子是最穩(wěn)定的陽離子。4、質(zhì)譜圖橫坐標(biāo)：m/e(質(zhì)荷比);縱坐標(biāo)：相對(duì)強(qiáng)度6大多數(shù)陽離子帶電荷+1，故其峰的m/e值為陽離子的質(zhì)量;m/e值最大的是母體分子的分子量.(除母體離子發(fā)生裂解等)。

大多數(shù)陽離子帶電荷+1，故其峰的m/e值為陽離子的質(zhì)量;71、分子離子峰試樣分子在高能電子撞擊下失去一個(gè)外層電子而形成的帶正電荷的離子，即；M+為分子離子或母體離子。分子離子的質(zhì)量與化合物的分子量相等。5、質(zhì)譜圖中離子主要類型1、分子離子峰M+為分子離子或母體離子。分子離子的質(zhì)量與8一般有機(jī)分子的電離電位在7-15eV，幾乎所有的有機(jī)分子都有可以辨認(rèn)的分子離子峰。芳香環(huán)分子可產(chǎn)生較強(qiáng)的分子離子峰；高分子量的脂肪醇、醚及胺等產(chǎn)生較小的分子離子峰；若不考慮同位素的影響，分子離子峰一般具有最高質(zhì)量。分子離子峰的穩(wěn)定性越大，那么質(zhì)譜圖上對(duì)應(yīng)的分子離子峰越高。有機(jī)化合物分子離子峰的穩(wěn)定性順序：芳香化合物＞共軛鏈烯＞烯烴＞脂環(huán)化合物＞直鏈烷烴＞酮＞胺＞酯＞醚＞酸＞支鏈烷烴＞醇一般有機(jī)分子的電離電位在7-15eV，幾乎所有的有機(jī)分子都有9分子離子峰：質(zhì)譜圖上質(zhì)荷比最大的峰分子離子峰：質(zhì)譜圖上質(zhì)荷比最大的峰10[氮規(guī)則]當(dāng)分子中含有偶數(shù)個(gè)氮原子或不含氮原子時(shí),分子量應(yīng)為偶數(shù)；當(dāng)分子中含有奇數(shù)個(gè)氮原子時(shí),分子量應(yīng)為奇數(shù)。[氮規(guī)則]112、碎片離子峰分子離子產(chǎn)生后可能具有較高的能量，將會(huì)通過進(jìn)一步碎裂或重排而釋放能量，碎裂后產(chǎn)生的離子形成的峰稱為碎片離子峰。碎片離子峰的峰高與化學(xué)鍵斷裂及分子結(jié)構(gòu)有關(guān)，碎片離子峰越穩(wěn)定它的峰高也越高。烯烴多在雙鍵旁的第一個(gè)鍵上開裂：

烷烴化合物斷裂多在C-C之間發(fā)生，且易發(fā)生在支鏈上：2、碎片離子峰烯烴多在雙鍵旁的第一個(gè)鍵上開裂：

烷烴化合物斷12如：正己烷如：正己烷133、亞穩(wěn)離子峰若質(zhì)量為m1的離子在離開離子源受電場加速后，在進(jìn)入質(zhì)量分析器之前，由于碰撞等原因很容易進(jìn)一步分裂失去中性碎片而形成的m1+m2+△m這種亞穩(wěn)離子峰的表觀質(zhì)量用m*表示，它與m1、m2的關(guān)系為：m*=（m2）2/m1

式中m1為母離子的質(zhì)量，m2為子離子的質(zhì)量。亞穩(wěn)離子峰具有離子峰寬（約2-5個(gè)質(zhì)量單位）、相對(duì)強(qiáng)度低、m/z不為整數(shù)等特點(diǎn)，因而很容易從質(zhì)譜圖中觀察。3、亞穩(wěn)離子峰14例如：CH4M=1612C+1H×4=16M13C+1H×4=17M+112C+2H+1H×3=17M+113C+2H+1H×3=18M+2分子離子峰同位素離子峰

因?yàn)椋诩淄橹?，I17/I16=0.011。所以，在丁烷中，出現(xiàn)一個(gè)13C的幾率是甲烷的4倍，則分子離子峰m/z=59、58的強(qiáng)度之比I59/I58=4×0.011=0.044；4、同位素離子峰有些元素具有天然存在的穩(wěn)定同位素，會(huì)在質(zhì)譜圖上出現(xiàn)一些M+1，M+2，M+3的峰，由這些同位素形成的離子峰稱為同位素離子峰。同位素離子峰相對(duì)峰高取決于分子中同位素的種類、數(shù)量和豐度。例如：CH4M=16分子離子峰同位素離子峰15CHCHCHCZHR1R2R3R4CHCHR3R4HCCZHR1R2

5、重排離子峰在兩個(gè)或兩個(gè)以上鍵的斷裂過程中，某些原子或基團(tuán)從一個(gè)位置轉(zhuǎn)移到另一個(gè)位置發(fā)生重排，并丟失掉中性分子或碎片后而形成的離子，稱為重排離子。質(zhì)譜圖上相應(yīng)的峰為重排離子峰。其中最常見的一種是麥?zhǔn)现嘏?。這種重排形式可以歸納如下：

可以發(fā)生這類重排的化合物有:酮、醛、酸、酯、含P=O，＞S=O的化合物、烯烴類和苯類化合物等。16CHCHCHCZHR1R2R3R4CHCHR3R4HCCZH1.質(zhì)量測量范圍它是指質(zhì)譜儀能夠進(jìn)行分析的樣品的相對(duì)原子質(zhì)量范圍，以原子質(zhì)量單位來進(jìn)行計(jì)量。一個(gè)原子質(zhì)量單位（1u）就是處于基態(tài)12C中性原子的質(zhì)量的1/12。

在非精確測量中，常直接以原子或分子量大小來表示。質(zhì)量單位：amu或u，Da或D，1D=0.99734u第二節(jié)質(zhì)譜儀性能指標(biāo)1.質(zhì)量測量范圍第二節(jié)質(zhì)譜儀性能指標(biāo)17不同儀器： 四極桿：4000Da 離子阱質(zhì)譜：4000Da 磁質(zhì)譜：10000Da 傅立葉變換離子回旋共振質(zhì)譜儀（FT-MS） 50000Da 飛行時(shí)間質(zhì)譜：無上限不同要求： 氣相色譜：800Da 液相質(zhì)譜：2000Da 生物分子：10000Da或更大不同儀器： 四極桿：4000Da182.分辨本領(lǐng)指質(zhì)譜儀分辨相鄰質(zhì)量數(shù)離子的能力。定義為：兩個(gè)相等強(qiáng)度的相鄰峰(質(zhì)量分別為m1和m2)，當(dāng)兩峰間的峰谷不大于峰高的10%時(shí)，則可認(rèn)為兩已分開，那么分辨率R=m1/(m2-m1)=m1/mR與離子通道半徑r、加速器和收集器狹縫寬度、離子源的性質(zhì)和質(zhì)量等因素有關(guān)。2.分辨本領(lǐng)19質(zhì)量數(shù)為28的三種分子組成的精確質(zhì)量若儀器分辨力很低，如RP=200，則對(duì)以上三個(gè)分子不能分開，混為一峰若要分開以下混合物，則必需有如下分辨力CO-C2H4:(RP)2=27.994914/(28.031299-27.994914)=770N2-C2H4:(RP)3=28.006158/(28.031299-28.006158)=1100CO-N2:(RP)1=27.994914/(28.006158-27.994914)=2490當(dāng)儀器分辨力達(dá)到770時(shí)，只能夠只分開CO-C2H4

。當(dāng)儀器分辨力達(dá)到1100時(shí)，能夠分開CO-C2H4和N2-C2H4當(dāng)儀器分辨力超過2500時(shí)，三者全部分開。一般低分辨儀器在2000左右。10000以上時(shí)稱高分辨。FT-MS分辨力可達(dá)2百萬。質(zhì)量數(shù)為28的三種分子組成的精確質(zhì)量若儀器分辨力很低，如RP203、掃描時(shí)間色譜峰的數(shù)據(jù)點(diǎn)數(shù)目和峰寬以及掃描時(shí)間有關(guān)較短的掃描時(shí)間，可以獲得良好的峰型，但是不利于信號(hào)采集較長的掃描時(shí)間，有助于信號(hào)采集，但是峰型不好峰型和信號(hào)，二者需折衷考慮3、掃描時(shí)間色譜峰的數(shù)據(jù)點(diǎn)數(shù)目和峰寬以及掃描時(shí)間有關(guān)214靈敏度質(zhì)譜儀的靈敏度有絕對(duì)靈敏度、相對(duì)靈敏度和分析靈敏度。絕對(duì)靈敏度：儀器可以檢測到的最小樣品量；相對(duì)靈敏度：儀器可同時(shí)檢測的大組分與小組分的含量比值；分析靈敏度：輸入儀器的樣品量與儀器輸出的信號(hào)的比值。

4靈敏度22第三節(jié)質(zhì)譜儀儀器組成按質(zhì)量分析器(或者磁場種類)可分為靜態(tài)儀器和動(dòng)態(tài)儀器，即穩(wěn)定磁場（單聚焦及雙聚焦質(zhì)譜儀）和變化磁場（飛行時(shí)間和四極桿質(zhì)譜儀）。MS儀器一般由進(jìn)樣系統(tǒng)、電離源、質(zhì)量分析器、真空系統(tǒng)和檢測系統(tǒng)構(gòu)成。第三節(jié)質(zhì)譜儀儀器組成按質(zhì)量分析器(或者磁場種類)可分為靜態(tài)23真空系統(tǒng)樣品入口檢測器數(shù)據(jù)系統(tǒng)質(zhì)量分析器離子化方法大氣

真空系統(tǒng)樣品入口檢測器數(shù)據(jù)系統(tǒng)質(zhì)量分析器離子化方法大氣241、進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)的作用是高效重復(fù)地將樣品引入到離子源中，并且不能造成真空度的降低。常用的進(jìn)樣裝置有：間歇式進(jìn)樣直接探針進(jìn)樣色譜進(jìn)樣系統(tǒng)（GC-MS、HPLC-MS）高頻感藕等離子體進(jìn)樣系統(tǒng)（ICP-MS）1、進(jìn)樣系統(tǒng)252.電離源將引入的樣品轉(zhuǎn)化成為碎片離子的裝置。根據(jù)樣品離子化方式和電離源能量高低，通常可將電離源分為：氣相源：先蒸發(fā)再激發(fā)，適于沸點(diǎn)低于500oC、對(duì)熱穩(wěn)定的樣品的離子化，包括電子轟擊源、化學(xué)電離源、場電離源、火花源；解吸源：固態(tài)或液態(tài)樣品不需要揮發(fā)而直接被轉(zhuǎn)化為氣相，適用于分子量高達(dá)

105的非揮發(fā)性或熱不穩(wěn)定性樣品的離子化。包括場解吸源、快原子轟擊源、激光解吸源、離子噴霧源和熱噴霧離子源等。硬源：離子化能量高，如EI。伴有化學(xué)鍵的斷裂，譜圖復(fù)雜，可得到分子官能團(tuán)的信息；軟源：離子化能量低，如場解吸源。產(chǎn)生的碎片少，譜圖簡單，可得到分子量信息。因此，應(yīng)根據(jù)分子電離所需能量的不同來選擇不同電離源。2.電離源26

常見的幾種離子化方式如下表常見的幾種離子化方式如下表27電子轟擊源(ElectronImpact，EI)作用過程：采用高速(高能)電子束沖擊樣品，從而產(chǎn)生電子和分子離子M+，M+繼續(xù)受到電子轟擊而引起化學(xué)鍵的斷裂或分子重排，瞬間產(chǎn)生多種離子。水平方向：燈絲與陽極間(70V電壓)—高能電子—沖擊樣品—正離子垂直方向：G3-G4加速電極(低電壓)---較小動(dòng)能---狹縫準(zhǔn)直G4-G5加速電極(高電壓)---較高動(dòng)能---狹縫進(jìn)一步準(zhǔn)直--離子進(jìn)入質(zhì)量分析器。特點(diǎn)：使用最廣泛，譜庫最完整；電離效率高；結(jié)構(gòu)簡單，操作方便；但分子離子峰強(qiáng)度較弱或不出現(xiàn)（因電離能量最高）。電子轟擊源(ElectronImpact，EI)28電子轟擊源

式中M為待測分子，M+為分子離子或母體離子。

當(dāng)電子轟擊源具有足夠高的能量時(shí)(一般為7OeV)，大多數(shù)化合物（電離能為10eV）分子不僅可能失去一個(gè)電子形成分子離子，而且有可能進(jìn)一步發(fā)生鍵的斷裂，形成大量的各種低質(zhì)量數(shù)的碎片正離子和中性自由基，這些碎片離子可用于化合物的結(jié)構(gòu)鑒定。電子轟擊源式中M為待測分子，M+為分子離子或母體離子293、真空系統(tǒng)質(zhì)譜儀中離子的產(chǎn)生及經(jīng)過系統(tǒng)必須處于高真空狀態(tài)。其中，離子源中的真空度：1.3×10-4-1.3×10-5Pa，質(zhì)量分析器中的真空度：1.3×10-6Pa

一般質(zhì)譜儀都采用機(jī)械泵預(yù)抽真空后，再用高效率擴(kuò)散泵連續(xù)地運(yùn)行以保持真空。現(xiàn)代質(zhì)譜儀采用分子泵可獲得更高的真空度。高真空的作用：

a）避免離子源燈絲損壞；

b）減少引起其它分子離子反應(yīng)，避免質(zhì)譜圖的復(fù)雜化；

c）防止用作加速離子的幾千伏高壓引起放電。3、真空系統(tǒng)高真空的作用：30各類真空泵各類真空泵314、質(zhì)量分析器

質(zhì)譜儀的質(zhì)量分析器位于離子源和檢測器之間，它的功能是利用不同方式將樣品離子按質(zhì)荷比m/z大小分開。質(zhì)量分析器的主要類型有：磁分析器（單聚焦質(zhì)量分析器，雙聚焦質(zhì)量分析器）、飛行時(shí)間分析器、四極濾質(zhì)器（即四級(jí)桿）等。4、質(zhì)量分析器質(zhì)譜儀的質(zhì)量分析器位于離子源32（1）單聚焦質(zhì)量分析器：它由單個(gè)扇形（90o或60o）或半圓形（180o）的均勻磁場組成。（1）單聚焦質(zhì)量分析器：它由單個(gè)扇形（90o或60o）或半圓33單聚焦質(zhì)量分析器單聚焦質(zhì)量分析器只是將m/z相同而入射方向不同的離子聚焦到一點(diǎn)（或稱實(shí)現(xiàn)了方向聚焦）。但對(duì)于m/z相同而動(dòng)能（或速度）不同的離子不能聚焦，故其分辨率相對(duì)較低，一般為5000。

單聚焦質(zhì)量分析器單聚焦質(zhì)量分析器只是將m/z相同而入射方向34（2）雙聚焦質(zhì)量分析器：為克服動(dòng)能或速度“分散”的問題，即實(shí)現(xiàn)所謂的“速度(能量)聚焦”，在離子源和磁分析器之間加一靜電分析器（ESA），如下圖所示，于兩個(gè)扇形電極板上加一直流電位Ve，離子通過時(shí)的曲率半徑為re=U/V，即不同動(dòng)能的離子re不同，換句話說，相同動(dòng)能的離子的re相同----能量聚焦了！

：

當(dāng)離開入射狹縫的離子束在穿過靜電分析器的環(huán)形通道時(shí)，離子所受到的向心力等于離心力時(shí)有：

所以，離子運(yùn)動(dòng)的軌道半徑r可通過外加靜電場來加以控制，只有動(dòng)能相同的離子才能通過中間狹縫，實(shí)現(xiàn)能量聚焦。（2）雙聚焦質(zhì)量分析器：當(dāng)離開入射狹縫的離子束在穿過靜電35具有不同的方向，也就是說，發(fā)射角度不同具有不同的動(dòng)能具有相同質(zhì)荷比的離子在進(jìn)入入射狹縫時(shí)可以采用單聚焦質(zhì)量分析器聚焦于出射狹縫采用單聚焦質(zhì)量分析器不能完全聚焦于出射狹縫要采用雙聚焦質(zhì)量分析器具有不同的方向，也就是說，發(fā)射角度不同具有不同的動(dòng)能具有相同36

它是一種無磁動(dòng)態(tài)質(zhì)量分析器，根據(jù)不同質(zhì)荷比的離子在無場分離區(qū)中的速度不同，引起漂移時(shí)間的差異來實(shí)現(xiàn)分離。（3）飛行時(shí)間質(zhì)量分析器(TOF)反射型直線型飛行時(shí)間質(zhì)量分析器它是一種無磁動(dòng)態(tài)質(zhì)量分析器，根據(jù)不同質(zhì)荷比的離子在無場分37

如下圖，由燈絲發(fā)射出的電子在電場作用下射向陽極，運(yùn)動(dòng)中央的電子在離子化區(qū)與氣體分子碰撞并使之電離，在電子控制極上施加一個(gè)不大的負(fù)脈沖電壓，引出離子化區(qū)中的正離子，在加速區(qū)上加直流負(fù)電壓，使離子得到加速而獲得動(dòng)能，以速度v飛越長約1m的無場漂移區(qū)。直線型飛行時(shí)間質(zhì)量分析器的工作原理如下圖，由燈絲發(fā)射出的電子在電場作用下射向陽極，運(yùn)動(dòng)中38其速度v為：

由此可見，t取決于m/z的平方根之差。也就是說，離子的質(zhì)量越小，運(yùn)動(dòng)速度越快，運(yùn)行時(shí)間也就越短，也就越早到達(dá)接收器。此離子達(dá)到無場漂移管另一端的時(shí)間為：故對(duì)于具有不同m/z的離子，到達(dá)終點(diǎn)的時(shí)間差：其速度v為：由此可見，t取決于39（4）四極桿濾質(zhì)器

它由四根互相平行的金屬電極組成，如下圖所示。在兩個(gè)相對(duì)的極桿之間加電壓(U+Vcos

t)，在另兩個(gè)相對(duì)的極桿上加-(U+Vcost)。與前述雙聚焦儀的靜電分析器類似，離子進(jìn)入可變電場后，只有具合適的曲率半徑的離子可以通過中心小孔到達(dá)檢測器。改變U和V并保持U/V比值一定，可實(shí)現(xiàn)不同m/z離子的檢測。（4）四極桿濾質(zhì)器在兩個(gè)相對(duì)的極桿之間加電壓(U+Vcos405、檢測與記錄質(zhì)譜儀中常用的檢測器有法拉第杯、電子倍增器及閃爍計(jì)數(shù)器、照相底片等。現(xiàn)代質(zhì)譜儀中的檢測器常采用電子倍增管?，F(xiàn)代質(zhì)譜儀的記錄一般都采用較高性能的計(jì)算機(jī)對(duì)產(chǎn)生的信號(hào)進(jìn)行快速接收與處理，同時(shí)通過計(jì)算機(jī)可以對(duì)儀器條件進(jìn)行嚴(yán)格的監(jiān)控，從而提高精密度和靈敏度。

5、檢測與記錄41碎片離子重排裂解碰撞裂解

設(shè)一有機(jī)化合物由A，B，C和D組成，當(dāng)蒸汽分子進(jìn)入離子源，受到電子轟擊可能發(fā)生下列過程而形成各種類型的離子如下：舉例：分子離子第四節(jié)質(zhì)譜解析碎片離子重排裂解碰撞裂解設(shè)一有機(jī)化合物由A，B，C和D組42解析未知物的圖譜，可按下述程序進(jìn)行。第一步對(duì)分子離子區(qū)進(jìn)行解析（推斷分子式）（1）確認(rèn)分子離子峰，并注意分子離子峰對(duì)基峰的相對(duì)強(qiáng)度比，這對(duì)判斷分子離子的穩(wěn)定性以及確定結(jié)構(gòu)是有一定幫助的。（2）注意是偶數(shù)還是奇數(shù)，如果為奇數(shù)，而元素分析又證明含有氮時(shí)，則分子中一定含有奇數(shù)個(gè)氮原子。（3）注意同位素峰中M+1/M及M+2/M數(shù)值的大小，據(jù)此可以判斷分子中是否含有S、CI、Br，并可初步推斷分子式。（4）根據(jù)高分辨質(zhì)譜測得的分子離子的m/z值，推定分子式。解析未知物的圖譜，可按下述程序進(jìn)行。43第二步對(duì)碎片離子區(qū)的解析（推斷碎片結(jié)構(gòu)）

（1）找出主要碎片離子峰。并根據(jù)碎片離子的質(zhì)荷比，確定碎片離子的組成。常見碎片離子的組成見下表第二步對(duì)碎片離子區(qū)的解析（推斷碎片結(jié)構(gòu)）44（2）注意分子離子有何重要碎片脫去

（3）找出亞穩(wěn)離子峰，利用m*=m22/m1，確定m1與m2的關(guān)系，確定開裂類型。（2）注意分子離子有何重要碎片脫去

（3）找出亞穩(wěn)離子峰，利45第三步提出結(jié)構(gòu)式根據(jù)以上分析，列出可能存在的結(jié)構(gòu)單元及剩余碎片，根據(jù)可能的方式進(jìn)行連接，組成可能的結(jié)構(gòu)式第三步提出結(jié)構(gòu)式46當(dāng)前主要的高分辨儀器（HRGC/HRMS）生產(chǎn)商有3家，分別是沃特世（Waters）、賽默飛世爾科技（ThermoFisherScientific）、日本電子（JEOL）。第五節(jié)高分辨氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀當(dāng)前主要的高分辨儀器（HRGC/HRMS）生產(chǎn)商有3家，分別47Waters簡介沃特世(Waters)公司是全球最大的液相色譜、質(zhì)譜及相關(guān)產(chǎn)品專業(yè)生產(chǎn)廠家之一，擁有實(shí)力最雄厚的研究機(jī)構(gòu)和世界最大的色譜柱生產(chǎn)廠之一，是較早同時(shí)生產(chǎn)液相色譜儀器、化學(xué)品及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)三大液相色譜要素的廠商；Waters產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于制藥、生物技術(shù)、食品和飲料、聚合物、環(huán)境等各個(gè)領(lǐng)域，是較早能提供整體解決方案的供應(yīng)商；

Waters公司高分辨儀器型號(hào)為WatersAutopremier。Waters簡介沃特世(Waters)公司是全球最大的液相色48ThermoFisher簡介賽默飛世爾科技是全球科學(xué)服務(wù)領(lǐng)域的領(lǐng)導(dǎo)者，在全球范圍內(nèi)服務(wù)超過35萬家客戶。客戶包括醫(yī)藥和生物公司，大學(xué)、科研院所和政府機(jī)構(gòu)等；旗下有ThermoScientific和FisherScientific兩個(gè)品牌；賽默飛世爾科技進(jìn)入中國發(fā)展已有30余年，在中國的總部設(shè)于上海，并在北京、廣州、香港、成都、沈陽等地設(shè)立了分公司，員工人數(shù)超過1400名，服務(wù)于第一線的專業(yè)人員超過800名

；ThermoFisher高分辨儀器型號(hào)為MAT95和ThermofisherDFS，MAT95為老型號(hào)產(chǎn)品，現(xiàn)在型號(hào)為ThermofisherDFSThermoFisher簡介賽默飛世爾科技是全球科學(xué)服務(wù)領(lǐng)49JEOL簡介日本電子株式會(huì)社（JEOL）是國際資深分析儀器生產(chǎn)商。JEOL目前面向中國及全球，生產(chǎn)銷售各型掃描電子顯微鏡、透射電子顯微鏡、電子探針、掃描探針顯微鏡、X射線熒光光譜儀、核磁共振設(shè)備、質(zhì)譜儀等設(shè)備；

在中國國內(nèi)，眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、科學(xué)院部門、科研所、大專院校、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、政府機(jī)構(gòu)和企業(yè)單位都有JEOL的產(chǎn)品。日本電子在北京、上海、廣州、武漢、成都設(shè)有辦事處；

JEOL高分辨儀器型號(hào)為JMS-800D。JEOL簡介日本電子株式會(huì)社（JEOL）是國際資深分析儀器生50產(chǎn)品特點(diǎn)

ThermoFisherDFS質(zhì)譜部分：高性能的環(huán)形ESA靜電場色譜部分：自己公司產(chǎn)品，雙氣相色譜進(jìn)樣方式接高分辨磁質(zhì)譜耗電少：最大功率12Kw檢測器：電子倍增管最小尺寸：3.14m*3.35m

WatersAutopremier質(zhì)譜部分：由兩個(gè)靜電場和一個(gè)磁場組成三場EBE結(jié)構(gòu)色譜部分：安捷倫公司產(chǎn)品7890變壓器：英制設(shè)備需要變壓器，但是比較小巧雙GC接口，可同時(shí)進(jìn)樣，或交替進(jìn)樣檢測器：光電倍增器

最小尺寸：4.5m*4.3m

JEOLJMS-800D質(zhì)譜部分：EB兩場結(jié)構(gòu)色譜部分：安捷倫公司產(chǎn)品7890變壓器：需要三臺(tái)變壓器體積較大檢測器：光電倍增器最小尺寸：4.5m*4.5m產(chǎn)品特點(diǎn)ThermoFisherDFSWat51技術(shù)指標(biāo)WatersAutopremierThermoFishersDFSJEOLJMS-800D技術(shù)指標(biāo)WatersAutopremier52第六節(jié)質(zhì)譜儀的臨床應(yīng)用蛋白質(zhì)分析Myoglobin用胰蛋白酶限制酶切后產(chǎn)生的肽段

（從堿性氨基酸的羧基端切斷）Myoglobin

GLSDGEWQQVLNVWGKVEADIAGHGQEVLIRLFTGHPETLEKFDKFKHLKTEAEMKASEDLKKHGTVVLTALGGILKKKGHHEAELKPLAQSHATKHKIPIKYLEFISDAIIHVLHSKHPGDFGADAQGAMTKALELFRNDIAAKYKELGFQG第六節(jié)質(zhì)譜儀的臨床應(yīng)用蛋白質(zhì)分析Myoglobin用胰蛋白53胰蛋白酶酶切Myoglobin產(chǎn)生的肽段及其分子量

1811.90 GLSDGEWQQVLNVWGK1606.85 VEADIAGHGQEVLIR1271.66 LFTGHPETLEK1378.83 HGTVVLTALGGILK1982.05 KGHHEAELKPLAQSHATK1853.95 GHHEAELKPLAQSHATK1884.01 YLEFISDAIIHVLHSK1502.66 HPGDFGADAQGAMTK748.43 ALELFR

胰蛋白酶酶切Myoglobin產(chǎn)生的肽段及其分子量181154實(shí)際質(zhì)譜分析所得的肽質(zhì)量指紋譜GLSDGEWQQVLNVWGKVEADIAGHGQEVLIRLFTGHPETLEKHGTVVLTALGGILKKGHHEAELKPLAQSHATKGHHEAELKPLAQSHATKYLEFISDAIIHVLHSKHPGDFGADAQGAMTKALELFR實(shí)際質(zhì)譜分析所得的肽質(zhì)量指紋譜GLSDGEWQQVLNVWG55實(shí)例：鼻咽癌病人血清標(biāo)志物檢測實(shí)例：鼻咽癌病人血清標(biāo)志物檢測56卵巢癌細(xì)胞培養(yǎng)液上清中分泌蛋白的SELDI-TOFMS檢測分析卵巢癌細(xì)胞培養(yǎng)液上清中分泌蛋白的SELDI-TOFMS檢測57MS/MS

串連質(zhì)譜分析原理示意圖MS/MS

串連質(zhì)譜分析原理示意圖58限制酶切蛋白質(zhì)為肽段EnzymaticDigestandFractionation限制酶切蛋白質(zhì)為肽段EnzymaticDigest59第一步MS分離各個(gè)肽段

第二步MS對(duì)其中的一個(gè)肽段進(jìn)行氨基酸序列分析MS/MS第一步MS分離各個(gè)肽段

第二步MS對(duì)其中的一個(gè)肽段進(jìn)行氨基酸60碰撞誘導(dǎo)解離CID中多肽分子結(jié)構(gòu)中鍵斷裂的多種可能性-HN-CH-CO-NH-CH-CO-NH-RiCH-R’biyn-iyn-i-1bi+1R”i+1i+1