殺蟲劑室內(nèi)生物活性測定試驗(yàn)要求

殺蟲劑

室內(nèi)生物活性測定試驗(yàn)要求農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所二○○八年十一月殺蟲劑室內(nèi)生物活性測定試驗(yàn)基本要求主要技術(shù)要點(diǎn)存在問題基本要求試驗(yàn)藥劑：一般要求用原藥。對照藥劑：原藥，作用機(jī)理、作用方式或結(jié)構(gòu)類似，防治相同靶標(biāo)已獲登記常用品種。供試靶標(biāo)：種類與申請登記的靶標(biāo)相同，室內(nèi)連續(xù)飼養(yǎng)2代以上，個(gè)體大小和生理狀態(tài)一致。室內(nèi)難飼養(yǎng)試蟲，可以選擇近似種或同屬蟲種。濃度設(shè)置：5個(gè)有效濃度。重復(fù)次數(shù)：4次。試驗(yàn)方法：根據(jù)藥劑特性和生物試材特點(diǎn)，采用或參照?農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗(yàn)準(zhǔn)則殺蟲劑?（1－6部分，8－14部分）。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析：計(jì)算出LC50、LC90、95％置信限、b值及其標(biāo)準(zhǔn)誤混配制劑室內(nèi)配比篩選試驗(yàn)：采用?農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗(yàn)準(zhǔn)則殺蟲劑?第7部分－混配的聯(lián)合作用測定（5個(gè)配比，每個(gè)配比5個(gè)有效濃度）主要技術(shù)要點(diǎn)

藥劑配置方法試驗(yàn)藥劑試蟲調(diào)查時(shí)間試驗(yàn)方法

主要技術(shù)要點(diǎn)試驗(yàn)?zāi)康乃巹┨匦栽囼?yàn)方法生物試材檢查結(jié)果結(jié)果分析主要技術(shù)要點(diǎn)把握試驗(yàn)?zāi)康氖谴_定生物試材生育期的依據(jù)，是確定試驗(yàn)方法的依據(jù)之一。確定藥劑室內(nèi)生物活性可采用的方法主要有點(diǎn)滴法、藥膜法、夾毒葉片法、浸葉法、浸蟲法、培養(yǎng)基混藥法等確定藥劑作用方式觸殺活性測定：點(diǎn)滴法、藥膜法等胃毒活性測定：葉片夾毒法等內(nèi)吸活性測定：連續(xù)浸液（幼苗水培法）等熏蒸活性測定：錐形瓶法等確定藥劑最適宜防治期卵、低齡幼蟲（若蟲、若螨）、高齡幼蟲（若蟲、若螨）、成蟲（成螨）主要技術(shù)要點(diǎn)把握藥劑特性藥劑的理化性質(zhì)－在各種溶劑中的溶解度藥劑的理化性質(zhì)確定藥劑配置方法試驗(yàn)方法

室內(nèi)生測試驗(yàn)常用的有機(jī)溶劑有丙酮、二甲基亞砜、甲醇、乙醇等；表面活性劑：Triton-X100，吐溫80。作用機(jī)理、作用方式、作用特點(diǎn)確定對照藥劑、試驗(yàn)方法和調(diào)查時(shí)間主要技術(shù)要點(diǎn)把握各種試驗(yàn)方法的特點(diǎn)點(diǎn)滴法：溶劑的選擇一般為丙酮，有些丙酮中溶解度低的藥劑可以加一定比例的其它有機(jī)溶劑；點(diǎn)滴不熟練的人員可以在丙酮中加一定比例的丁酮以便降低揮發(fā)的速度。夾毒葉片法：藥劑稀釋與點(diǎn)滴法基本相同，溶劑的選擇一般為丙酮，有些在丙酮中溶解度低的藥劑可以加一定比例的其它有機(jī)溶劑，但不能用水；進(jìn)行藥劑處理前，試蟲一般要停飼4－8小時(shí)，也就是要試蟲饑餓4－8小時(shí)；做好夾毒葉片接蟲2－4小時(shí)后一定要淘汰未食完一張完整葉碟的試蟲。藥膜法：藥膜的基質(zhì)為玻璃表面或?yàn)V紙表面時(shí)，應(yīng)選用有機(jī)溶劑形成藥膜，溶劑的選擇一般為丙酮，有些丙酮中溶解度低的藥劑可以加一定比例的其它有機(jī)溶劑；藥膜的基質(zhì)為植物葉片時(shí)，應(yīng)選用以水為連續(xù)相的溶液，溶液中除了依據(jù)藥劑的性質(zhì)加少量有機(jī)溶劑外，要有標(biāo)準(zhǔn)的表面活性劑（0.1~1%）。葉片的浸漬時(shí)間一般為10秒左右，然后陰干。主要技術(shù)要點(diǎn)把握好試驗(yàn)靶標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)化一般要選擇和防治對象同種的試蟲進(jìn)行室內(nèi)試驗(yàn)，特殊情況下可以選擇近緣種或同屬；室內(nèi)飼養(yǎng)一段時(shí)間的試蟲作為蟲源，特殊的試蟲，或不能在室內(nèi)完成連續(xù)多代飼養(yǎng)的試蟲，可以考慮室內(nèi)飼養(yǎng)一代或兩代或從田間采集卵塊待孵化出幼蟲用于試驗(yàn)（注意要多個(gè)卵塊的幼蟲隨機(jī)混合后用于測定）。直接用田間蟲源測定時(shí)需要很大的樣本容量，一般不推薦（特殊情況除外，例如某些介殼蟲等）試蟲的發(fā)育階段要與田間防治蟲態(tài)接近；試蟲的蟲齡、個(gè)體大?。w重等）、生理年齡要一致；主要技術(shù)要點(diǎn)把握試驗(yàn)結(jié)果檢查試蟲死亡的標(biāo)準(zhǔn)要一致；檢查結(jié)果的時(shí)間要依據(jù)藥劑的性質(zhì)定，一般從幾個(gè)小時(shí)到幾天不等，對于昆蟲生長調(diào)節(jié)劑以及昆蟲病原微生物一般要在72小時(shí)以上；記錄非觀察指標(biāo)以外的現(xiàn)象。主要技術(shù)要點(diǎn)把握好結(jié)果分析空白對照死亡率原則上不應(yīng)該太高，一般小于5%可以不進(jìn)行校正，大于5%要校正，大于20%視為無效測定，重新試驗(yàn)；一般要求測定藥劑要有5個(gè)或5個(gè)濃度以上，每個(gè)濃度要4次重復(fù)，檢查結(jié)果時(shí)4個(gè)重復(fù)的數(shù)據(jù)不要合并，每個(gè)重復(fù)單獨(dú)進(jìn)入機(jī)值分析；進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算LC50（LD50）及其置信限、LC95（LD95）及其置信限、b值及其標(biāo)準(zhǔn)誤差。存在問題藥劑濃度設(shè)置不能保證5個(gè)有效濃度；空白對照設(shè)置不合理；混