殺蟲劑室內(nèi)生物活性測定試驗要求

殺蟲劑

室內(nèi)生物活性測定試驗要求農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所二○○八年十一月殺蟲劑室內(nèi)生物活性測定試驗基本要求主要技術(shù)要點存在問題基本要求試驗藥劑：一般要求用原藥。對照藥劑：原藥，作用機理、作用方式或結(jié)構(gòu)類似，防治相同靶標(biāo)已獲登記常用品種。供試靶標(biāo)：種類與申請登記的靶標(biāo)相同，室內(nèi)連續(xù)飼養(yǎng)2代以上，個體大小和生理狀態(tài)一致。室內(nèi)難飼養(yǎng)試蟲，可以選擇近似種或同屬蟲種。濃度設(shè)置：5個有效濃度。重復(fù)次數(shù)：4次。試驗方法：根據(jù)藥劑特性和生物試材特點，采用或參照?農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗準(zhǔn)則殺蟲劑?（1－6部分，8－14部分）。數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析：計算出LC50、LC90、95％置信限、b值及其標(biāo)準(zhǔn)誤混配制劑室內(nèi)配比篩選試驗：采用?農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗準(zhǔn)則殺蟲劑?第7部分－混配的聯(lián)合作用測定（5個配比，每個配比5個有效濃度）主要技術(shù)要點

藥劑配置方法試驗藥劑試蟲調(diào)查時間試驗方法

主要技術(shù)要點試驗?zāi)康乃巹┨匦栽囼灧椒ㄉ镌嚥臋z查結(jié)果結(jié)果分析主要技術(shù)要點把握試驗?zāi)康氖谴_定生物試材生育期的依據(jù)，是確定試驗方法的依據(jù)之一。確定藥劑室內(nèi)生物活性可采用的方法主要有點滴法、藥膜法、夾毒葉片法、浸葉法、浸蟲法、培養(yǎng)基混藥法等確定藥劑作用方式觸殺活性測定：點滴法、藥膜法等胃毒活性測定：葉片夾毒法等內(nèi)吸活性測定：連續(xù)浸液（幼苗水培法）等熏蒸活性測定：錐形瓶法等確定藥劑最適宜防治期卵、低齡幼蟲（若蟲、若螨）、高齡幼蟲（若蟲、若螨）、成蟲（成螨）主要技術(shù)要點把握藥劑特性藥劑的理化性質(zhì)－在各種溶劑中的溶解度藥劑的理化性質(zhì)確定藥劑配置方法試驗方法

室內(nèi)生測試驗常用的有機溶劑有丙酮、二甲基亞砜、甲醇、乙醇等；表面活性劑：Triton-X100，吐溫80。作用機理、作用方式、作用特點確定對照藥劑、試驗方法和調(diào)查時間主要技術(shù)要點把握各種試驗方法的特點點滴法：溶劑的選擇一般為丙酮，有些丙酮中溶解度低的藥劑可以加一定比例的其它有機溶劑；點滴不熟練的人員可以在丙酮中加一定比例的丁酮以便降低揮發(fā)的速度。夾毒葉片法：藥劑稀釋與點滴法基本相同，溶劑的選擇一般為丙酮，有些在丙酮中溶解度低的藥劑可以加一定比例的其它有機溶劑，但不能用水；進行藥劑處理前，試蟲一般要停飼4－8小時，也就是要試蟲饑餓4－8小時；做好夾毒葉片接蟲2－4小時后一定要淘汰未食完一張完整葉碟的試蟲。藥膜法：藥膜的基質(zhì)為玻璃表面或濾紙表面時，應(yīng)選用有機溶劑形成藥膜，溶劑的選擇一般為丙酮，有些丙酮中溶解度低的藥劑可以加一定比例的其它有機溶劑；藥膜的基質(zhì)為植物葉片時，應(yīng)選用以水為連續(xù)相的溶液，溶液中除了依據(jù)藥劑的性質(zhì)加少量有機溶劑外，要有標(biāo)準(zhǔn)的表面活性劑（0.1~1%）。葉片的浸漬時間一般為10秒左右，然后陰干。主要技術(shù)要點把握好試驗靶標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)化一般要選擇和防治對象同種的試蟲進行室內(nèi)試驗，特殊情況下可以選擇近緣種或同屬；室內(nèi)飼養(yǎng)一段時間的試蟲作為蟲源，特殊的試蟲，或不能在室內(nèi)完成連續(xù)多代飼養(yǎng)的試蟲，可以考慮室內(nèi)飼養(yǎng)一代或兩代或從田間采集卵塊待孵化出幼蟲用于試驗（注意要多個卵塊的幼蟲隨機混合后用于測定）。直接用田間蟲源測定時需要很大的樣本容量，一般不推薦（特殊情況除外，例如某些介殼蟲等）試蟲的發(fā)育階段要與田間防治蟲態(tài)接近；試蟲的蟲齡、個體大小（體重等）、生理年齡要一致；主要技術(shù)要點把握試驗結(jié)果檢查試蟲死亡的標(biāo)準(zhǔn)要一致；檢查結(jié)果的時間要依據(jù)藥劑的性質(zhì)定，一般從幾個小時到幾天不等，對于昆蟲生長調(diào)節(jié)劑以及昆蟲病原微生物一般要在72小時以上；記錄非觀察指標(biāo)以外的現(xiàn)象。主要技術(shù)要點把握好結(jié)果分析空白對照死亡率原則上不應(yīng)該太高，一般小于5%可以不進行校正，大于5%要校正，大于20%視為無效測定，重新試驗；一般要求測定藥劑要有5個或5個濃度以上，每個濃度要4次重復(fù)，檢查結(jié)果時4個重復(fù)的數(shù)據(jù)不要合并，每個重復(fù)單獨進入機值分析；進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，計算LC50（LD50）及其置信限、LC95（LD95）及其置信限、b值及其標(biāo)準(zhǔn)誤差。存在問題藥劑濃度設(shè)置不能保證5個有效濃度；空白對照設(shè)置不合理；混