
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常見(jiàn)藥用植物純露抑菌性試驗(yàn)
純露是指芳香植物在水中蒸餾和提取過(guò)程中從芳香植物中提取的飽和蒸餾原液。它是精精劑的一種副產(chǎn)品。它由各種組成,純、新鮮和優(yōu)雅的味道組成。1材料和方法1.1試驗(yàn)材料和試劑1.1.1醫(yī)藥與植物1.1.2細(xì)菌、桿菌培養(yǎng)大腸桿菌(Escherichiacoli)、金黃色葡萄球菌(Staphyloccusaureus)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis),由衡水學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室提供。1.1.3試驗(yàn)藥物牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂(均為國(guó)產(chǎn)分析純),蒸餾水、超純水。1.2儀器、設(shè)備、儀器SW-CJ-2F超凈工作臺(tái)、BSD-250全溫振蕩培養(yǎng)箱、SPX-150B-Z生化培養(yǎng)箱、BGZ-140電熱鼓風(fēng)干燥箱、YXQ-LS-50SII立式壓力蒸汽滅菌鍋、移液槍、蒸餾裝置、游標(biāo)卡尺、pH計(jì)、皮膚水分測(cè)試儀。1.3測(cè)試方法1.3.1水溶液整理法選取常見(jiàn)的藥用植物蒲公英、生姜、薄荷,蒸餾水清洗干凈,在超凈工作臺(tái)中將材料和超純水按1∶2的比例加入蒸餾瓶中,整理裝置使其處于密閉狀態(tài),用水蒸氣蒸餾法1.3.2菌種培養(yǎng)的模擬在超凈工作臺(tái)中,用接種環(huán)分別將枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌菌斑在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上劃線,37℃培養(yǎng)3d。挑取單菌落接種于牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中,37℃震蕩培養(yǎng)20~24h,使菌液濃度達(dá)到1×101.4純露菌試驗(yàn)1.4.1抑制紙蟲菌的方法用打孔器將濾紙裁成6mm的圓片,干熱滅菌備用。在凈化工作臺(tái)中進(jìn)行無(wú)菌操作,將活化濃度為1×101.4.2自然沉降試驗(yàn)本試驗(yàn)將3種藥用植物純露,在無(wú)菌條件下用移液器分別吸取150μl的純露在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上,用涂布棒涂布均勻。以滅菌的超純水為空白對(duì)照。在衡水學(xué)院實(shí)驗(yàn)樓進(jìn)行自然沉降試驗(yàn)30min。沉降結(jié)束后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)16~24h,計(jì)數(shù)并統(tǒng)計(jì)結(jié)果。經(jīng)過(guò)培養(yǎng)計(jì)數(shù)后,觀測(cè)培養(yǎng)皿中菌落的生長(zhǎng)狀況,以此來(lái)判斷純露的抑菌效果1.5純度露酸的測(cè)定1.6比較純粹露皮的性能選用人體法2結(jié)果與分析2.13抑菌能力檢測(cè)本試驗(yàn)選用枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌3種菌種對(duì)3種純露進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn)。通過(guò)試驗(yàn)得出3種純露對(duì)枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果明顯,但對(duì)大腸桿菌無(wú)抑菌作用。其中蒲公英、生姜、薄荷純露對(duì)枯草芽孢桿菌平均抑菌圈直徑分別為12.48mm、11.30mm、10.90mm,對(duì)枯草芽孢桿菌的敏感度達(dá)到中度敏感,抑菌強(qiáng)度:蒲公英>生姜>薄荷。蒲公英、生姜、薄荷純露對(duì)金黃色葡萄球菌平均抑菌圈直徑分別為15.63mm、13.25mm、12.07mm,對(duì)金黃色葡萄球菌的敏感度達(dá)到中度敏感,抑菌強(qiáng)度:蒲公英>生姜>薄荷。蒲公英純露對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌均表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑菌性,結(jié)果如表2。2.2不同藥用植物純露培養(yǎng)效果比較通過(guò)自然沉降試驗(yàn),統(tǒng)計(jì)各培養(yǎng)皿的菌落數(shù),所選3種藥用植物純露培養(yǎng)皿的菌落數(shù)明顯低于對(duì)照菌落數(shù),比較結(jié)果如圖1,通過(guò)本試驗(yàn)可以證明,這3種藥用植物純露均具有抑菌性,抑菌效果:蒲公英>生姜>薄荷。2.3純露ph值的測(cè)定用pH計(jì)測(cè)定3種純露的酸堿性,測(cè)定結(jié)果顯示3種純露均為弱酸性,蒲公英純露pH值為5.40,生姜純露pH值為5.53,薄荷純露pH值為5.61,人體皮膚的pH范圍是4.2~6.52.4純露皮膚水分變化率將純露和5%的甘油分別涂抹到手臂內(nèi)側(cè),利用皮膚水分測(cè)試儀對(duì)2h內(nèi)的皮膚水分變化率進(jìn)行測(cè)定。在0~90min內(nèi),蒲公英和薄荷純露的皮膚水分變化率高于5%甘油,具有顯著性差異(P<0.05),在達(dá)到120min時(shí)無(wú)顯著性差異。在0~120min內(nèi),生姜純露的皮膚水分變化率均低于5%甘油。純露保濕性能測(cè)定結(jié)果表明,蒲公英和薄荷純露保濕能力高于5%甘油,可以作為一種天然保濕劑使用。3菌株純露的抑菌性測(cè)定本試驗(yàn)選用蒲公英、生姜、薄荷3種常見(jiàn)藥用植物進(jìn)行純露的提取,研究了這3種純露對(duì)枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌3種細(xì)菌的抑菌性,并對(duì)這3種純露的pH值、皮膚水分變化率進(jìn)行測(cè)定。3.2ph值對(duì)皮膚有抑純露酸堿度測(cè)定試驗(yàn)中,得出3種純露均呈弱酸性,與人體正常皮膚所需pH值相符,適合做皮膚的護(hù)理產(chǎn)品,不會(huì)因?yàn)閜H值對(duì)皮膚產(chǎn)生刺激。3.3合理篩選使用成分配的材料通過(guò)皮膚水分變化率的測(cè)定可以得出,蒲公英和薄荷純露保濕能力高于5%甘油,可以作為天然保濕劑使用,其中蒲公英純露的保濕性能最佳。綜合以上試驗(yàn)結(jié)果表明,蒲公英純露在供試的3種藥用植物純露中抑菌性最強(qiáng),保濕性能最佳。對(duì)藥用植物的綜合利用和開(kāi)發(fā)有借鑒意義,可以為蒲公英附加值產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)要注意試驗(yàn)操作誤差,如在純露提取過(guò)程,需要反復(fù)摸索藥用植物和超純水的比例,保證純露的提取效率;菌種的放置時(shí)間會(huì)對(duì)菌種的活性產(chǎn)生影響,避免菌種存放時(shí)間過(guò)久,若菌種活性降低也可以通過(guò)多次接種保持菌種的活性,試驗(yàn)過(guò)程中要排除因菌種活性降低對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響。蒲公英、生姜、薄荷。用pH計(jì)分別測(cè)定3種純露的酸堿度。3.1純露的抑菌效果在抑菌性試驗(yàn)中,紙片法試驗(yàn)得出3種純露均對(duì)枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌具有抑菌作用,且對(duì)
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