動(dòng)物腦多頭蚴病研究進(jìn)展

動(dòng)物腦多頭蚴病研究進(jìn)展牟靜;楊應(yīng);韋雷;楊光友【摘要】腦多頭蚴病是由多頭絳蟲的幼蟲寄生于家畜所引起的疾,人也可感,但相對(duì)較.該病通常對(duì)動(dòng)物是致命,給世界許多地區(qū)的養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失.論文主要介紹了不同藥物對(duì)該病的療,以及腦多頭蚴不同抗原成分免疫原性、分子分類和相關(guān)抗原基因的研究進(jìn).【期刊名稱《動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展》【年(卷),期】2010(031)002【總頁(yè)數(shù)4頁(yè)(P96-99)【關(guān)鍵詞腦多頭蚴;診治;分子生物;免疫學(xué)【作者】牟靜;楊應(yīng)東;韋雷;楊光友【作者單位四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué),四川雅安,625014;四川省攀枝花農(nóng)科學(xué)研究院牧水所,四川攀枝花,617061;四川省攀枝花市農(nóng)林科學(xué)研院畜牧水產(chǎn)所,四川攀枝花,617061;四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)醫(yī)學(xué)院,四川安,625014【正文語(yǔ)種中文【中圖分類】S852.734腦多頭蚴俗稱腦包蟲病是由帶科、多頭屬(Multiceps)的多頭絳蟲(M.multiceps)的中絳期幼蟲(腦多頭蚴Coenuruscerebralis寄生于牛、羊等有蹄類草食動(dòng)物所引起的一種寄生蟲,是危害牛、羊養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的主要寄生蟲病之一。本病多發(fā)于腦部,動(dòng)物感染該病后臨床上主要表現(xiàn)以神經(jīng)機(jī)能障礙為主的綜合征[1],感嚴(yán)時(shí)起骨縮穿孔[2],且染體時(shí)囊皮和組織在[3],此外,幼移至?xí)r成傷細(xì)過腦創(chuàng)途徑,從引起繼發(fā)感染[4]。臨床上該病還與腦脊髓絲蟲混合感染的報(bào)道[5]。中間宿主為綿羊、山羊、黃牛、水牛和牦牛等有蹄類草食動(dòng),牛感染多頭蚴病比羊少[6-7]偶見于馬、駱駝、兔和,腦多頭蚴的包囊曾在人的胸鎖乳頭肌、腋窩和眼睛中發(fā)現(xiàn)。至1998年,北美洲各國(guó)所報(bào)道的人患該病的病例就達(dá)50多例[8。該病全年均可發(fā),但多見于春天或早夏。一般母羊的患病率高于公羊。該病呈世界性分,但在以飼養(yǎng)綿羊、山羊?yàn)橹饕?jīng)濟(jì)來源的非洲及東南亞的發(fā)展中國(guó)家最為常[9-10]。我國(guó)黑龍江、吉林、甘肅、青海、四川等23省均布,其中以、夏地發(fā)率高寧該對(duì)致率為6%～53%,每年造成巨經(jīng)濟(jì)失,其危害居病首。此,鑒于該病全界畜業(yè)來的大失,已越來多受到各國(guó)重。1免疫學(xué)1.1抗原成分腦多頭蚴抗原主要有原頭節(jié)可溶性抗原、囊壁可溶性抗原和囊液抗原3種。孫曉林等[11]通過二維電泳分析了其抗原成,3種腦頭抗原同多斑點(diǎn)3個(gè),原頭節(jié)溶性原和壁可性原共多肽點(diǎn)14個(gè),原頭可溶抗原囊液抗原共同肽斑點(diǎn)5個(gè),囊壁可溶性原和液抗共同多斑點(diǎn)5個(gè)腦多蚴抗原結(jié)構(gòu)對(duì)較雜,囊液和原頭分別有31和42條多,并且者均在與球蚴和細(xì)囊尾相同的20ku和38ku的多。成節(jié)片抗主帶有4條,分子量分別為73、8、12、134ku;原頭節(jié)排泄泌(ES抗原帶有2條,子量別為33ku和108ku時(shí),泳(IEF技術(shù),對(duì)自然感染綿羊的腦多頭蚴的頭節(jié)可溶性抗原、囊壁可溶性抗原和囊液抗原進(jìn)行了分,分析結(jié)果表明囊液的酯酶同工酶較頭節(jié)和囊壁豐富;3抗中脂的電帶較少,甚至沒有發(fā)現(xiàn)有蛋白糖脂白電帶。1.2不同抗成分疫性腦多蚴有較的抗成分,每種抗原免原性不一致,有的抗僅作為診斷原,有些抗原以作免用抗。VerterA等[12]用六鉤蚴分泌抗原免疫羊后試驗(yàn)分2組當(dāng)用600卵染羊,28只羊中僅3只得保而被感染;當(dāng)用5000個(gè)蟲卵感染,30只羊中就有11只獲得保護(hù)。初步表明六鉤蚴分泌抗原具有較好的免疫原性。用六鉤蚴抗原免疫4周8周、8周12周羔羊可得很好免疫護(hù);而對(duì)懷孕90d～120d母用鉤抗進(jìn)免疫,其生產(chǎn)羔未疫羊產(chǎn)羔對(duì)蚴侵襲沒免力。原節(jié)溶抗、壁性原原節(jié)S原有好免原性,而囊液抗免原較。羊壁抗免后能100%抵抗多頭絳蟲卵攻擊感染,而經(jīng)液粗原免疫只有3/4的羔羊獲得抵抗力。免疫羊抗體滴度與免疫保護(hù)力之間呈正相[13]。而羔羊經(jīng)原頭節(jié)ES抗原和原頭節(jié)可溶性抗原免疫后有2/3的羔能抵抗多絳蟲蟲卵攻擊感染,而余下1/3羔羊腦中頭蚴囊的大、原節(jié)的量及大小小于用抗免疫對(duì)照組[14]。用多頭絳蟲原頭節(jié)、囊壁、囊液層析純化抗原及原頭節(jié)排泄分ES)抗原對(duì)綿羊免疫及攻擊感染多頭絳蟲蟲卵后的血清進(jìn)行LIA測(cè),綿羊在3次免疫,血清抗體效價(jià)迅速升,第3次免疫后1周～2周達(dá)到峰,在攻擊蟲卵后抗體效價(jià)開始下但之后抗體效價(jià)仍維持在較高水平。原頭節(jié)可溶性抗原免疫的羊和原頭節(jié)ES抗原免疫的羊其血清抗體總體水平要高于囊壁和囊液抗原免疫的,原頭節(jié)ES抗原和原頭節(jié)層析純化抗原的敏感性、特異性要高于囊壁和囊液層析抗原。運(yùn)用酸性α-萘酯酶染色法及姬姆薩染色法染,綿羊在3次免疫,T淋細(xì)胞量不同度增加,酸性細(xì)胞數(shù)量增加不明顯,但在攻擊感染后都明顯增加,淋巴細(xì)胞數(shù)量在免疫后即開始增加,細(xì)胞免疫增強(qiáng)[15-16。2分子生物學(xué)2.1分子分類RobinB[17]采用CRRFP方法對(duì)來自于不同地區(qū)的帶科絳蟲(細(xì)粒棘球絳蟲Echinococcusgranulosus多房棘球絳蟲E.multilocularis,水泡帶絳蟲Taeniahydatigena,羊帶絳蟲T.ovis豆?fàn)顜Ы{蟲T.pisiformis,多頭多頭絳蟲T.multiceps和連續(xù)多頭絳蟲T.serialis進(jìn)行了親緣關(guān)系比較,發(fā)現(xiàn)這幾種帶科絳蟲的IT2在內(nèi)有的差同時(shí),該學(xué)又對(duì)9種絳蟲(巨帶絳蟲,水絳蟲,豆?fàn)罱{蟲,羊帶蟲,多頭頭蟲,連續(xù)絳蟲,牛帶蟲,豬帶絳和帶蟲)的體AH酶1素C酶1因列進(jìn)究,結(jié)果明AH酶1因在5.9～30.8%之間,而細(xì)胞色素C氧化酶1基因序列差異在2.5～18%之間。其中頭多頭蟲與連續(xù)多頭絳、牛帶蟲和亞帶絳蟲源性較。VarcasiaA等[18]比較了薩丁尼亞、意大利的多頭多頭絳蟲遺傳變異情況,其NDH酶1基因序列差異為1.27%～2.54%細(xì)胞色素C酶1列為0.22%0.67%。ZhangL等[19]對(duì)肯亞帶科絳蟲ND1、CO1基因序列比較分析發(fā),里吉斯絳蟲與水皰絳蟲的同源性較,T.madoquae與連續(xù)多頭絳蟲、多頭絳蟲和牛帶絳蟲的同源性較高。2.2抗原基因GauciC等[20]克隆了腦多頭絳蟲六鉤蚴抗原基因Tm16和Tm18并與ST谷胱甘肽移酶)在腸希中合表達(dá),表達(dá)產(chǎn)加疫劑(Quil)免疫羊,免疫后每只攻感多絳蟲卵5500個(gè),的9有5蟲亡,而免疫的20只羊中無1只死,說明Tm16、Tm18重組原對(duì)綿具有較的免疫保護(hù)性。此外,該學(xué)者在此試驗(yàn)基礎(chǔ)上,隨機(jī)選擇了6個(gè)農(nóng)場(chǎng)的32只10周齡2因Tm18免保護(hù)間驗(yàn),其中照組424只,免疫組208只次疫后40多月,有32只羊發(fā)而免疫組僅1只羊發(fā),統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯,兩組羊發(fā)病差異性顯著(χ2=14.08;P＜0.0001。VarcasiaA等通過血清學(xué)分析發(fā)現(xiàn),60只接的中除1只外(98%)均能產(chǎn)生免疫應(yīng)答應(yīng)[21]。李永光等[22]用腦多頭蚴原頭節(jié)克隆了該蟲硫氧還蛋白過氧化物酶(TmTx)基因段,構(gòu)建重組達(dá)質(zhì)粒pGEX-4T-TmTpx,成功表達(dá)了43ku的融合蛋白。表達(dá)產(chǎn)物純化后免疫家,采集血清用LSA測(cè)定抗體效價(jià),發(fā)現(xiàn)兔抗TmTpx重組蛋白的抗體能與多頭蚴原頭節(jié)抗原發(fā)生特異性反說明該重組蛋白具有較好的免疫原性。3診斷在流行,可根據(jù)本病特異的癥狀、病史和頭部觸診等作出初步診斷。確診多頭蚴病是很困難,它容易與其臨床癥狀相同的其他疾病相混,如李斯特桿菌病和鼻蠅蛆綜合征等。靠動(dòng)物轉(zhuǎn)圈的方向以及頭偏斜的方向可初步判斷包囊存在的位置。已報(bào)道血清學(xué)診斷有間接ELIA法、斑點(diǎn)免疫金濾法[23]后者具簡(jiǎn)單、方便和快捷的優(yōu),在感染后35d的血清樣本中就能檢測(cè)出抗體。物理診斷有CT成像技術(shù)、MRI磁力共振成像技,已成功地應(yīng)用于檢測(cè)腦多頭蚴病以及包囊的確切位置和大[24]。分子診斷近年來應(yīng)用于囊蟲病上的診斷技,如限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析PR-RF、多重PR(utpxPCR)等[25]。4防治藥物奧芬噠唑和100mL/L的吡喹酮復(fù)方注射液對(duì)該病均有一定的療,大劑量?jī)?nèi)服丙硫苯咪(55mg/kg每日1次連用2d)也可治愈該[26]。此外,在給藥方法上,沈秀英等[27]采用藥物增量法與藥物聯(lián)合法治療該該法可以較好的解決藥物治療囊蟲病過程中發(fā)生的顱內(nèi)壓增高的問題。CiamakC[28]使用丙硫咪唑、芬苯噠唑和吡喹酮進(jìn)行了羊腦多頭蚴病的藥物療效對(duì)比試驗(yàn),療效最好的是丙硫咪唑(25mg/kg,口服,連用6d),其次是芬苯噠唑與吡喹酮的聯(lián)合用藥(100mg/kg,口服)以及吡喹酮(25mg/kg,服用7d)。除藥物治療該病以采用外科手術(shù)法切除包囊,這也是成功治愈該病的方法之[29]。在預(yù)防該病,首先應(yīng)加大科普宣傳,普及科學(xué)知識(shí),利用多種途徑使村民、牧民了解腦包蟲病的傳播、發(fā)生、發(fā)展、預(yù)防的一般常識(shí)。對(duì)易感多頭蚴病的屠宰動(dòng)物嚴(yán)格檢疫,對(duì)病畜尸體進(jìn)行無害化處,防止犬吃到帶有多頭蚴的牛、羊等動(dòng)物的腦和脊髓。定期對(duì)犬進(jìn)行驅(qū)蟲,對(duì)犬糞進(jìn)行無害化處理,從而防止或避免犬糞污染牧場(chǎng)飼料及飲水[30]。5展望隨著細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)以及免疫標(biāo)記等技術(shù)的迅猛發(fā),對(duì)腦多頭蚴病各方面的研究將會(huì)進(jìn)一步深入。目,該病只能采用藥物和手術(shù)治療。相信隨著疫苗的研究和開發(fā)將會(huì)為該病的控制提供更為行之有效的方法。參考文:[1]PauamA.Paasitosestattenteeuologiuenuroparsiticinfctios[J].RevueFranophoneesLaoratoirs,200,399:1-53.[2]UsluU,OzdeLrO.ilatralboeperfrationausedyCoenruscereralisnashep:Caseeport[J].TurkieParaztolDeg,200,30(4:282-284.[3]ShamaDK,ChuhanPP.CoenrosistatusinAfro-sianegionArevie[J].SmllRuinntRe,200664(3):17-20.[4]ChritodoulpoulsG.TwoareclniclmaifetationsfcoenurosisnsheepJ].VetPaasitol2007143(3-):368370.[5田慶紅,李忠權(quán).山羊腦包蟲、腦脊髓絲蟲混合感染的診治[J].貴州畜牧獸醫(yī),2008,32(3):37.[6熊永蕃.淺談牛腦包蟲病的診斷治療[J].病蟲害防治,2007(1):44.[7]曹寬仁.牛腦包蟲病的診療[J].草食動(dòng)物,2008(1):41.[8]ScalaA,CanceddaGM,VarcasiaA,etal.AsurveyofTaeniamulticepscoenurosisinSardiniansheep[J].VetParasitol,2007,143(3-4):294-298.[9]DalimiA,SattarA,MotamediG.Astudyonintestinalhelminthesofdogs,foxesandjackalsinthewesternpartofIran[J].VetParasitol,2006,142(1-2):129-133.[10]ChristodoulopoulosG,TheodoropoulosG,PetrakosG.Epidemiologicalsurveyofcestode-larvadiseaseinGreeksheepflocks[J].VetParasitol,2008,153(3-4):368-373.[11]孫曉林,竇蘭清,朱興全,等.羊腦多頭蚴抗原的二維電泳分J].中國(guó)科技,99,75)5-.[1]VrterATsinR.PrlmnryrprtnhstmuainfmntytotearalsageofTeiamutcpsJ].etAso,98,(3:1516.[13]竇蘭清,付寶權(quán),柴忠威,等.多頭絳蟲抗原特性的研究——囊液和囊壁粗抗原的免疫原性[J].中國(guó)獸醫(yī)科技,1996,26(12):5-7.[14]竇蘭清,付寶權(quán),柴忠威,等.多頭絳蟲抗原特性的研究——原頭節(jié)及其排泄分泌抗原的免疫原性[J.中國(guó)獸醫(yī)科技,1997,8(27):9-10.[15]付寶權(quán),竇蘭清,朱興全,等.多頭絳蟲抗原特性的研究——綿羊免疫后及感染后的抗體消長(zhǎng)規(guī)律[J.中國(guó)獸醫(yī)科技,1998,28(3):8-9.[16]竇蘭清,付寶權(quán),柴忠威,等.多頭絳蟲抗原特性的研究——綿羊免疫及感染后的細(xì)胞應(yīng)答反應(yīng)研究[J.甘肅畜牧獸醫(yī),1998(6):7-9.[17]RobinB.CharacterisationoftaeniidcestodespeciesbyPCRRFLPofITS2ribosomalDNA[J].ActaTropica,1995,59(1):31-40.[18]VarcasiaA,LightowlersMW,CattoliG,etal.GeneticvariationwithinTaeniamulticepsinSardinia[J].WesternMediterranean(Italy),ParasitolRes,2006,9(5):622-626.[19]ZhangL,HuM,JonesA,etal.CharacterizationofTaeniamadoquaeandTaeniaregisfromcarnivoresinKenyausinggeneticmarkersinnuclearandmitochondrialDNA,andtheirrelationshipswithotherselectedtaeniids[J].MolCellProbes,2007,1(5-6):379-85.[20]GauciC,VuralG,VarcasiaA,etal.VaccinationwithrecombinantoncosphereantigensreducesthesusceptibilityofsheeptoinfectionwithTaeniamulticeps[J].IntJParasitol,2008,38(8-9):1041-1050.[21]VarcasiaA,TosciriG.Preliminaryfieldtrialofavaccineagainstcoenurosis[J].VetParasitol,2009,162(3-4):285-289