傳染病病例標本采集和運輸

病原微生物標本的采集、保存及運輸方法病原微生物標本的采集標本采集種類血液標本（抗凝血與非抗凝血）呼吸道標本上呼吸道標本（咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液、痰液等）下呼吸道標本（呼吸道抽取物、支氣管灌洗液、胸腔積液、肺組織活檢標本等）。消化道標本（糞便和肛拭子）尿液標本其他人體標本（腦脊液、皰疹液、淋巴結(jié)穿刺液等）尸體解剖標本采集媒介和動物標本采集環(huán)境標本采集病原微生物標本的采集標本采集中的注意事項采樣時生物安全的考慮采樣時間及部位采樣容器采樣標本的標識各種標本的采樣方法病原微生物標本的采集采樣時生物安全的考慮1)具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員；住院病例的標本由所在醫(yī)院醫(yī)護人員在當?shù)丶部貦C構(gòu)專業(yè)人員指導(dǎo)下采集。密切接觸者標本由當?shù)丶部貦C構(gòu)負責采集。2具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護水平相適應(yīng)的設(shè)備，包括個人防護用品（隔離衣、帽、口罩、鞋套、手套、防護眼鏡等）、防護材料、器材和防護設(shè)施等；3)具有有效的防止病原微生物擴散和感染的措施；4)具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術(shù)方法和手段。病原微生物標本的采集采樣時間及部位時間:一般在懷疑細菌感染時應(yīng)盡量在急性發(fā)病期和使用抗生素之前采集標本，進行細菌的分離培養(yǎng)，否則這種標本在分離培養(yǎng)時要加藥物拮抗劑。作病毒分離和病毒抗原檢測的標本，應(yīng)在發(fā)病初期和急性期采樣，因為此時病毒在體內(nèi)大量繁殖，檢出率高，病毒分類標本最好在發(fā)病1～2天內(nèi)采取。部位：根據(jù)致病菌在患者不同病期的體內(nèi)分布和排出部位，采集不同的標本。例如傷寒病人應(yīng)在發(fā)病早期未使用抗生素之前采血培養(yǎng)，在2～3周時停用抗生素2天后采糞便培養(yǎng)。全病程可做骨髓培養(yǎng)。病原微生物標本的采集采樣容器采集標本應(yīng)使用無菌容器，一個標本一個容器。對容器基本要求是選耐用材料制成，容器包裝好后可防滲漏。能承受空中地面運送過程中可能發(fā)生的溫度和壓力變化。病原微生物標本的采集采樣標本的標識包括種類、原始采樣容器、標本性質(zhì)、數(shù)量、運送人和接受人及其包裝日期、運輸日期、統(tǒng)一的識別編號及病人聯(lián)系方式、姓名、檢驗?zāi)康?、臨床診斷等信息。其他信息如病人信息（年齡、性別、完整地址），臨床資料（發(fā)病日期、臨床癥狀、治療史、可疑的發(fā)病原因、采樣前是否用抗生素），急性或恢復(fù)期標本，癥狀類似病人的其他標本。接收標本的實驗室也應(yīng)記錄接收日期和時間、接受標本者的姓名、標本性質(zhì)和狀態(tài)等。這些信息都是解釋檢驗結(jié)果所必需的。病原微生物標本的采集各種標本的采樣方法(1)血液采集全血：作血液病原培養(yǎng)時，嚴格用無菌穿刺法采靜脈血，移入無菌的有螺口的抗凝的容器或培養(yǎng)瓶中送檢。采集量為3-5毫升。做核酸檢測時，抗凝劑一般使用EDTA-K3或枸櫞酸鈉，不可用肝素。血清：用于檢測IgM的血清一般采于發(fā)病1個月內(nèi)；用于檢測IgG的血液應(yīng)收集兩次，第一次于發(fā)病初期（1～3天），越早越好，第二次血樣一般在恢復(fù)期（第一次采血后3～4周）。雙份血清同時檢測，如抗體滴度有4倍以上升高才有意義。（2）糞便采集：應(yīng)在急性腹瀉期及用藥前采集自然排出的糞便。采集時應(yīng)用滅菌棉拭子多點蘸取患者新鮮排出糞便的膿血、粘液、水樣便或稀便部分，采樣量一般3-5克。（3）咽拭子：令患者仰頭張口，用壓舌板壓舌，將無菌棉拭子伸入口腔，適度用力拭涂抹咽后壁和兩側(cè)扁桃體部位，放入盛有3-5mlHank’s液的采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封。病原微生物標本的采集各種標本的采樣方法（4）肛拭子：用棉花拭子在3-5mlHank’s液中浸濕，插入肛門2-3cm處，自肛門周圍皺襞處拭取，或在肛門口內(nèi)輕輕旋轉(zhuǎn)涂擦，然后插入盛有3-5mlHank’s液采樣管內(nèi)。

（6）皰疹液：可同時采集多個皰疹作為一份標本。先用75%酒精對皰疹周圍的皮膚進行消毒，然后用消毒針將皰疹挑破用棉簽蘸取皰疹液，迅速將棉簽放入盛有3-5mlHank’s液中、在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封。如用于核酸檢測的標本采集采集咽拭子或肛拭子等用于檢測核酸時不能使用棉拭子和木質(zhì)拭子棒，因為這類材料中含有核酸擴增抑制劑，而要使用滅菌人造纖維拭子和塑料棒。病原微生物標本的采集各種標本的采樣方法（5）腦脊液：在無菌條件下由腰椎穿刺，用無菌試管收集3～5ml，（作厭氧培養(yǎng)時標本應(yīng)注入?yún)捬跗績?nèi)），操作最好在醫(yī)院內(nèi)由有經(jīng)驗的醫(yī)生按腰椎穿刺術(shù)進行。（6）皰疹液：可同時采集多個皰疹作為一份標本。先用75%酒精對皰疹周圍的皮膚進行消毒，然后用消毒針將皰疹挑破用棉簽蘸取皰疹液，迅速將棉簽放入盛有3-5mlHank’s液中、在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封。病原微生物標本的采集禽流感環(huán)境標本采集采樣液：可使用PH7.4-7.6Hank‘s或Eagle’s等培養(yǎng)液加入以下抗菌素和0.5%BSA(也可以使用MEM、EMEM、DMEM，價格相對較高)：采樣液最好現(xiàn)配現(xiàn)用氨芐青霉素(2x106IU/L)：主要對G+菌作用強鏈霉素(200mg/L)：主要對G-菌，結(jié)核桿菌有抑制作用兩性菌素B(2x106IU/L):主要為抗真菌作用慶大霉素(250mg/L):廣譜抗生素制霉菌素(0.5x106IU/L)

鹽酸氧氟沙星(60mg/L)：廣譜菌，對多數(shù)腸桿菌科細菌等G-菌較強的抗菌活性磺胺甲基異惡唑(0.2g/L)病原微生物標本的采集禽流感環(huán)境標本采集1、水標本禽類飲用水：在每個籠具旁的飲水槽采集一份飲用水標本,將水槽中的水樣用無菌的、一次性的玻璃棒或棉簽充分混勻后采集5-10ml置于15ml外螺旋蓋的管內(nèi)。水溝或水池:清洗禽類的污水:病原微生物標本的采集2、擦拭標本籠具表面擦拭標本：用蘸有采樣液的帶有聚丙烯纖維頭的拭子擦拭籠具表面禽類最常接觸的3-5個不同部位（包括籠具底部），然后將擦拭過的拭子放入含5ml采樣液的采樣管中，尾部棄去。也可以用多個拭子充分擦拭籠具表面后放到一個采樣管中宰殺或擺放禽肉案板表面的擦拭標本：如果宰殺或擺放禽肉使用不同的案板，可采集擦拭標本放到不同的采樣管中。方法與采集籠具表面擦拭標本的方法相同，拭子要擦拭禽肉接觸最多的部位病原微生物標本的采集3、糞便標本從禽舍或環(huán)境中采集新鮮禽類糞便樣品5g左右，放入含5ml采樣液的采樣管中，充分混勻。同一地點多份糞便標本可置于同一采樣管中。

4、其它標本籠具周圍標本（籠具下地面，籠具墊草等）內(nèi)臟拭子皮毛拭子等。病原微生物標本的保存總原則：根據(jù)標本種類及檢測內(nèi)容確定標本的保存方式。用于細菌檢測的標本：常需無菌、無抗生素保存，從而能確保目標細菌的存活并抑制其他微生物的過度生長。一般在4?C或室溫保存。用于病毒檢測的標本：一般應(yīng)放在保溫容器（0?C～4?C）里，不可放置超過2天，如不能立即分離病毒時，應(yīng)將標本凍存保存。若長期儲存，最好在－70?C凍存。病原微生物標本的保存如懷疑是寄生蟲，所取糞便中加入10%福爾馬林和PVA防腐劑（充分混合）。用于檢測抗原或抗體的標本可在4?C～8?C保存24～28h，在－20?C保存時間更長。檢測抗體的血清可在4?C保存約一個星期，最長10天；超過一周必須在-20?C下冷凍。病原微生物標本的保存實驗室必須對所有標本建立追蹤系統(tǒng)，此系統(tǒng)中必須嚴格注明標本基本信息，如標號，標本唯一識別碼，采樣日期，地點，采樣人等；患者的基本信息、臨床診斷檢測結(jié)果，以及實驗室檢測信息，如檢測項目、時間和結(jié)果。從而可隨時了解標本淶源信息，追蹤原始出處。病原微生物標本的包裝任何感染性材料的包裝和運輸都必須遵循WHO對傳染性物質(zhì)和診斷性標本的安全運送指南（WHO，1997）。標準的包裝方法和材料應(yīng)能確保即使在運送中包裝意外受損時也能保護人員的安全及標本的完整。因此運送標本時要進行三層包裝。病原微生物標本的包裝原始的容器應(yīng)該是防漏的，可盛容量不大于500ml。在原始容器與第二層包裝之間應(yīng)放置有吸附作用的材料。并輔以第二層防漏包裝。運輸標本的外包裝必須有明確的標簽，標明寄送人和接收人的詳細聯(lián)系方式、包裝日期和運輸日期等。

病原微生物標本的包裝國際民航組織《危險品航空安全運輸技術(shù)細則》中將感染性物質(zhì)分為A和B兩類。A類指人感染后發(fā)病的可能性大，傳染性強，對人群危害性大的烈性感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)。高度懷疑具有嚴重危害性的感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)也屬于A類。A類感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)[聯(lián)合國編號UN2814和UN2900（只導(dǎo)致動物致?。采用P620包裝要求。

A類之外，僅具有一般危險性，引起感染的機會較少的感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)為B類（聯(lián)合國編號UN3373），采用P650包裝要求。A類包裝和B類包裝區(qū)別1A類包裝B類包裝定義對人或動物致死或永久性致殘不符合列入A類標準的感染性物質(zhì)運輸專用名稱感染性物質(zhì)，可感染人的診斷標本或臨床標本或生命物質(zhì)B類英文運輸專用名InfectioussubstanceaffecinghumansBiologicalsubstane,categoryBUN編號UN2814UN3373運輸對象《名錄》中規(guī)定的第一類、第二類病原微生物及其樣本；第三類中包裝分類為A類的病原微生物《名錄》中規(guī)定的第三類、第四類病原微生物及其樣本UN專用標記需要不需要A類包裝和B類包裝區(qū)別2

A類包裝B類包裝主容器防水、防穿刺、防泄漏防破損、防泄漏次級容器防水、防穿刺、防泄漏防破損、防泄漏外包裝最小邊長≥100mm至少有一個表面≥100mm×100mm危險申報單需要不需要標識客機單包裝主容器最大運輸量液體50mL,固體50g液體1L,固體4KgUN3373A類感染性物質(zhì)的包裝材料B類感染性物質(zhì)的包裝材料A類感染物質(zhì)的標識B類感染物質(zhì)的標識UN3373Biologicalsubstance,

CategoryB（生物物質(zhì)，B類）病原微生物標本的實驗室間傳遞應(yīng)制定對危險材料運輸?shù)恼吆统绦?，包括危險材料在實驗室內(nèi)、實驗室所在機構(gòu)內(nèi)及機構(gòu)外部的運輸，應(yīng)符合國家和國際規(guī)定的要求。應(yīng)以防止污染人員或環(huán)境的方式運輸危險材料，并有可靠的安保措施。危險材料應(yīng)置于被批準的本質(zhì)安全的防漏容器中運輸。病原微生物標本的運輸?shù)孛孢\送標本時注意將裝有標本的箱子緊緊固定在交通工具上，車上還應(yīng)備有吸水材料、消毒劑、手套、口罩、護目鏡、密封防水的廢棄物容器等防護用品。為避免路途顛簸引起標本溶血，可在運送前分離血清。在國際、國家、商業(yè)的有關(guān)規(guī)定允許下，診斷標本也可空運，應(yīng)注意規(guī)范包裝。

病原微生物標本的運輸分離培養(yǎng)細菌、病毒的標本大多數(shù)要求冷藏運送。腦膜炎球菌等應(yīng)在35?C～37?C保溫運送。血液標本用于細菌、病毒或寄生蟲分離時，需低溫保存，不能冷凍。用冰塊而不是干冰運送。做立克次體類微生物的全血標本要求干冰保存和冷凍運送。檢測核酸樣品的運送要求低溫快速。從標本采集到檢測的間隔時間要盡可能短，并盡可能將標本處于冷藏狀態(tài)。檢測前保存時間較長時則需冷凍標本防止核酸降解。我國對病原微生物菌（毒）種及樣本運輸?shù)挠嘘P(guān)規(guī)定盡量陸路運輸；報衛(wèi)生主管部門批準（跨省報衛(wèi)生部）包裝、容器和標識符合要求二人護送，不能通過城市公交發(fā)生泄漏2小時內(nèi)報告《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》《可感染人類的高致病性病原微生物（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》已于2005年11月24日經(jīng)衛(wèi)生部部務(wù)會議討論通過，現(xiàn)予以發(fā)布，自2006年2月1日起施行?！犊筛腥救祟惖母咧虏⌒圆≡⑸锞ǘ荆┓N或樣本運輸管理規(guī)定》目的：為加強可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸?shù)墓芾?，保障人體健康和公共衛(wèi)生，依據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》、《病原微生物實驗室生物安全管理條例》等法律、行政法規(guī)的規(guī)定，制定本規(guī)定。定義：本規(guī)定所稱可感染人類的高致病性病原微生物（毒）種或樣本是指在《人間傳染的病原微生物名錄》中規(guī)定的第一類、第二類病原微生物菌（毒）種或樣本。

適用范圍：本規(guī)定適用于可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的運輸管理工作。《人間傳染的病原微生物名錄》中第三類病原微生物運輸包裝分類為A類的病原微生物菌（毒）種或樣本，以及疑似高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本，按照本規(guī)定進行運輸管理?！犊筛腥救祟惖母咧虏⌒圆≡⑸锞ǘ荆┓N或樣本運輸管理規(guī)定》運輸以上范圍內(nèi)規(guī)定的菌（毒）種或樣本（以下通稱高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本），應(yīng)當經(jīng)省級以上衛(wèi)生行政部門批準。未經(jīng)批準，不得運輸。申請單位：從事疾病預(yù)防控制、醫(yī)療、教學(xué)、科研、菌（毒）種保藏以及生物制品生產(chǎn)的單位，因工作需要，可以申請運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本。運輸申請：申請運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的單位（以下簡稱申請單位），在運輸前應(yīng)當向省級衛(wèi)生行政部門提出申請，并提交以下申請材料（原件一份，復(fù)印件三份）：1.可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）

種或樣本運輸申請表

（接收單位）具備從事高致病性病原微生物實驗活動資格的實驗室；（接收單位）取得有關(guān)政府主管部門核發(fā)的從事高致病性病原微生物實驗活動、菌（毒）種或樣本保藏、生物制品生產(chǎn)等的批準文件。

接收單位應(yīng)當符合以下條件：

1.具有法人資格；

2.具備從事高致病性病原微生物實驗活動資格的實驗室；

3.取得有關(guān)政府主管部門核發(fā)的從事高致病性病原微生物實驗活動、菌（毒）種或樣本保藏、生物制品生產(chǎn)等的批準文件。在固定的申請單位和接收單位之間多次運輸相同品種高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，可以申請多次運輸。多次運輸?shù)挠行跒?個月；期滿后需要繼續(xù)運輸?shù)?，?yīng)當重新提出申請。省內(nèi)運輸審批：

申請在省、自治區(qū)、直轄市行政區(qū)域內(nèi)運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，由省、自治區(qū)、直轄市衛(wèi)生行政部門審批。省級衛(wèi)生行政部門應(yīng)當對申請單位提交的申請材料及時審查，對申請材料不齊全或者不符合法定形式的，應(yīng)當即時出具申請材料補正通知書；對申請材料齊全或者符合法定形式的，應(yīng)當即時受理，并在5個工作日內(nèi)做出是否批準的決定；符合法定條件的，頒發(fā)《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本準運證書》；不符合法定條件的，應(yīng)當出具不予批準的決定并說明理由?？缡∵\輸審批：

申請跨省、自治區(qū)、直轄市運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，應(yīng)當將申請材料提交運輸出發(fā)地省級衛(wèi)生行政部門進行初審；對符合要求的，省級衛(wèi)生行政部門應(yīng)當在3個工作日內(nèi)出具初審意見，并將初審意見和申報材料上報衛(wèi)生部審批。

衛(wèi)生部應(yīng)當自收到申報材料后3個工作日內(nèi)做出是否批準的決定。符合法定條件的，頒發(fā)《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本準運證書》；不符合法定條件的，應(yīng)當出具不予批準的決定并說明理由。突發(fā)疫情

對于為控制傳染病暴發(fā)、流行或者突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處理的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的運輸申請，省級衛(wèi)生行政部門與衛(wèi)生部之間可以通過傳真的方式進行上報和審批；需要提交有關(guān)材料原件的，應(yīng)當于事后盡快補齊。根據(jù)疾病控制工作的需要，應(yīng)當向中國疾病預(yù)防控制中心運送高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，向中國疾病預(yù)防控制中心直接提出申請，由中國疾病預(yù)防控制中心審批；符合法定條件的，頒發(fā)《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本準運證書》；不符合法定條件的，應(yīng)當出具不予批準的決定并說明理由。中國疾病預(yù)防控制中心應(yīng)當將審批情況于3日內(nèi)報衛(wèi)生部備案。

運輸申請單位衛(wèi)生部科教司中國CDC(實驗