新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求

新生兒遺傳代謝病篩查

采血技術實驗技術規(guī)范化要求四川省南充市婦幼保健院四川省新生兒疾病篩查南充分中心陳濤0817-223566512篩查標本達到實驗室時間（平均）3年篩查量分布篩查數(shù)量篩查中心比例（%）<1萬1813.641-<3萬3123.48>=3-<10萬6952.27>=10-20萬139.85>20萬10.76456789新生兒遺傳代謝病篩查血片

采集技術規(guī)范血片采集是新生兒遺傳代謝病篩查技術流程中最重要的環(huán)節(jié)。血片質量直接影響實驗室檢測結果，開展新生兒遺傳代謝病血片采集及送檢的醫(yī)療機構應當按本技術規(guī)范要求完成血片采集工作。10一、基本要求（一）采血機構設置。設有產科或兒科診療科目的醫(yī)療機構均應當開展新生兒遺傳代謝病篩查血片采集。（二）采血人員要求。1.具有與醫(yī)學相關的中專以上學歷，從事醫(yī)學臨床工作2年以上。2.接受過新生兒遺傳代謝病篩查相關知識和技能的培訓并取得技術合格證書。培訓內容包括：新生兒遺傳代謝病篩查的目的、原則、方法及網絡運行；濾紙干血片采集、保存、遞送的相關知識；新生兒遺傳代謝病篩查相關信息和檔案管理。11二、采血機構和人員職責（一）積極開展新生兒遺傳代謝病篩查的宣傳教育工作。（二）加強對本機構血片采集人員的管理和培訓。（三）承擔本機構新生兒遺傳代謝病篩查有關信息的收集、統(tǒng)計、分析和上報工作。（四）血片采集人員在實施血片采集前，應當將新生兒遺傳代謝病篩查的目的、意義、篩查疾病病種、條件、方式、靈敏度和費用等情況如實告知新生兒的監(jiān)護人，并取得書面同意。（五）認真填寫采血卡片，做到字跡清楚、登記完整?？ㄆ瑑热莅ǎ翰裳獑挝弧⒛赣H姓名、住院號、居住地址、聯(lián)系電話、新生兒性別、孕周、出生體重、出生日期、采血日期和采血者等。12二、采血機構和人員職責

（六）嚴格按照新生兒遺傳代謝病篩查血片采集步驟采集足跟血，制成濾紙干血片，并在規(guī)定時間內遞送至新生兒遺傳代謝病篩查實驗室檢驗。（七）因特殊情況未按期采血或不合格標本退回需要重新采血者，應當及時預約或追蹤采集血片。（八）對可疑陽性病例應當協(xié)助新生兒遺傳代謝病篩查中心，及時通知復查，以便確診或采取干預措施。（九）做好資料登記和存檔保管工作，包括掌握活產數(shù)、篩查數(shù)、新生兒采血登記信息、反饋的檢測結果及確診病例等資料，保存時間至少10年。13三、血片采集步驟（一）血片采集人員清洗雙手并佩戴無菌、無滑石粉的手套。（二）按摩或熱敷新生兒足跟，并用75%乙醇消毒皮膚。（三）待乙醇完全揮發(fā)后，使用一次性采血針刺足跟內側或外側，深度小于3毫米，用干棉球拭去第1滴血，從第2滴血開始取樣。（四）將濾紙片接觸血滴，切勿觸及足跟皮膚，使血液自然滲透至濾紙背面，避免重復滴血，至少采集3個血斑。（五）手持消毒干棉球輕壓采血部位止血。（六）將血片懸空平置，自然晾干呈深褐色。避免陽光及紫外線照射、烘烤、揮發(fā)性化學物質等污染。（七）及時將檢查合格的濾紙干血片置于密封袋內，密閉保存在2～8℃冰箱中，有條件者可0℃以下保存。（八）所有血片應當按照血源性傳染病標本對待，對特殊傳染病標本，如艾滋病等應當作標識并單獨包裝。14四、采血工作質量控制（一）血片采集的濾紙應當與試劑盒標準品、質控品血片所用濾紙一致。（二）采血針必須一人一針。（三）正常采血時間為出生72小時后，7天之內，并充分哺乳；對于各種原因（早產兒、低體重兒、正在治療疾病的新生兒、提前出院者等）未采血者，采血時間一般不超過出生后20天。（四）合格濾紙干血片應當為：1.至少3個血斑，且每個血斑直徑大于8毫米。2.血滴自然滲透，濾紙正反面血斑一致。3.血斑無污染。4.血斑無滲血環(huán)。（五）濾紙干血片應當在采集后及時遞送，最遲不宜超過5個工作日。（六）有完整的血片采集信息記錄。15新生兒遺傳代謝病篩查濾紙血片的采集（CLSI)16注意事項當采集血標本時應遵守注意事項。病人的標本可能感染了人類免疫缺陷病毒（HIV）或乙型肝炎病毒（HBV）。應遵守恰當?shù)难獦硬杉夹g來盡可能降低實驗室人員危險性，并且要戴手套。171.2 標本的可接受性

本標準并不是解釋如果沒有完全按照標準采集的所有血斑標本定為不可接受的（即是不能進行檢測）。只是證明拒絕分析標本及表明其是不可接受的，如果進行檢測的話對于特定的分析物會產生不可靠、誤解或臨床上不準確的結果。既然，由于這一定義，不可接受的標本產生無用的信息，就不應分析檢測這樣的標本，并應通知負責采集血樣的人員盡快地重新采集可接受的標本。如果檢測了標本，事實上，實驗室承認標本的適當性，以及承擔負責分析結果的可靠性。182.1 足（后）跟（Heel）新生兒篩查時，推薦使用足跟采血，應從足跟掌側的中間或側面采集?！爸虚g”是指盡可能地靠近人體的中線，“側面”是指盡可能地遠離人體的中線?！罢苽取笔侵缸悴康男凶邆?。不能使用以前使用的穿刺部位或足跟的曲面?zhèn)取?93.濾紙血樣采集技術

3.1腳跟穿刺3.1.1準備步驟3.1.2預防措施3.1.3位置準備3.1.4采血部位的消毒3.1.5穿刺3.1.6直接應用3.1.6.1擠壓3.1.6.2多層3.1.7采集血樣3.1.8干燥3.1.9堆積3.1.10運輸3.1.11保存203.1.8 干燥

應避免接觸或污染血斑。血標本應放置在室溫(15oCto22oC)并避免陽光直照（非直接室內光線通常不會有害的），周圍無吸附物質的水平支架上至少三個小時。濾紙上的血斑不應加熱、堆積在一起、或在干燥的過程中接觸到其它的表面。213.1.9 堆積在一起

當不可避免地將暴露的干血斑成批地堆積在一起時，應采用下列的程序。在將標本放置在運輸容器中之前，除非標本有其它物理屏障隔開，如隔紙，玻璃紙，否則，應將采樣卡片的上的干血斑旋轉180o后再放置。223.1.10運輸（郵寄）

除非篩查實驗室有別的指導，應在采集標本后24小時內將采集血樣的卡片運輸?shù)交蜞]寄到實驗室，并保留適當?shù)母櫽涗浳募?。應避免在采集血樣場所的耽擱，相對于可能的耽擱其運輸環(huán)境應結構化來最大限度地提高運輸?shù)男省?33.1.11保存

如果實驗室要保存剩余的干血斑標本到更長的時間，必須保管好它們確保保存后其狀態(tài)未受到損害。一種方法是將標本保存在具有干燥劑和濕度指示卡的不漏氣的、可封口的塑料袋中。濕度應維持在低于30%。如果可能的話，陽性和陰性血斑質控品應與剩余標本放置在一起，這樣，當從保存環(huán)境中取出標本時可以通過檢測質控品的情況來檢查標本的完整性。244.4 運輸和包裝的預防措施標本不應放置在密封不透氣的容器中（塑料或橡皮信封）。必須遵守郵遞和地方運輸法規(guī)[17]。如果地方法規(guī)要求用防水容器包裝用于運輸，則必須包括足夠量的包裝好的干燥劑和濕度指示卡來保證干血片未暴露在過量的濕氣中。濕度和濕氣對干血斑標本的穩(wěn)定性和分析物的回收是有害的。具有生物危險的標本在運輸中應具有特殊的防護措施。254.4.2 包裝

包裝不應導致濾紙的受壓。在血斑標本運輸中在同一容器中不應放置化學或其它類型的標本。264.4.3 堆積放置

由于標本之間的濾?。ń徊嫖廴荆┛赡馨l(fā)生，標本與標本之間的接觸是不恰當?shù)?。如果堆積放置不可避免的話，可有幾種方法：(1) 對采集血樣的表格加上遮蓋紙片。(2) 將暴露的干血斑旋轉180度。(3) 標本之間放置玻璃紙。274.4.4 運輸時間

標本應在采集的24小時內送或郵寄到篩查實驗室。285.1 最少的預先打印的信息

下面列出的是達到篩查目的要求的最少的所需的信息。為了滿足其特殊的要求，根據(jù)篩查計劃可包括一些額外的信息。(1) 新生兒姓名,母親姓名,病人識別號(選擇:地址和電話號碼)。(2) 出生日期。(3) 出生體重。(4) 性別。(5) 喂奶狀況。(6) 標本采集時間和新生兒年齡（小時）。(7) 提供血樣的單位和地址。(8) 醫(yī)生的姓名和電話號碼。(9) 篩查計劃或實驗室和地址。(10)填寫分析實驗結果位置。(11)具有一定數(shù)量1/2寸（13mm）內徑在濾紙一側印有破折或點狀線的圈(選擇：在兩側印好的圈)。75uL血液可填滿標本采集圈，而100uL的血液會稍微超出印好的圈。(12)在濾紙部分標出濾紙的廠家和批號。295.2.3 標本卡片編號

每一標本采集卡片的連續(xù)編號應預先打印在卡片的每一信息部分，如果血斑部分從卡片上分開。應考慮標本識別號的持續(xù)唯一性。為了達到這一識別及干血片標本與新生兒資料表的聯(lián)系，條形碼是一適當?shù)姆椒ā?0如何采集可接受的血片標本

A1 準備A1.1洗手A1.2戴消毒無滑粉的手套以及不同的新生兒要更換手套A1.3確認新生兒的身份A2 采樣技術戴手套31

A2.1用70%酒精消毒新生兒足跟A2.2讓足跟自然干燥32

A2.3針刺部位應在如上圖所示的陰影區(qū)域

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A2.4用推薦長度的柳葉刀 進行如圖所示的針刺（深度小于2.0m）

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A2.5用消毒的棉球輕輕地拭去第一滴血（第一滴血含有組織液可能會稀釋樣本）A2.6等待形成大的血滴A2.7可用拇指進行溫柔的擠壓及間斷性地放松易于形成血滴

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A2.8輕輕地將濾紙卡片接觸血滴，用每一滴血滴在每一預先定好的圈內。觀察每一圈血流透過濾紙的情況。 A2.9所有使用過的用具均應放置在適當?shù)纳镂：Φ娜萜髦小?637

A2.10采集完標本后，應將新生兒的足抬高，使用消毒棉球壓著針刺位置。但不要使用膠粘帶。 A2.11讓血標本完全自然干燥，放置在水平支架上，如塑料的試管架，在室溫中放置至少3小時（不能堆積在一起或加熱）。A2.12標本干燥后，放置在批準的運輸容器中38

A3 易犯的錯誤A3.1殘留的酒精未能自然干燥可能稀釋標本，影響到實驗結果。A3.2在后彎曲的足后跟進行穿刺將使得血液從穿刺部位流出，使得正常的血斑難以形成。不能使用以前穿刺的部位。A3.3擠壓穿刺部位可能導致溶血，使得