臨床微生物標(biāo)本采集及運送

臨床微生物標(biāo)本采集、轉(zhuǎn)運與處理微生物標(biāo)本規(guī)范化采集的重要性正確采集、處理與運送細菌培養(yǎng)的標(biāo)本直接關(guān)系到致病菌培養(yǎng)的正確性與陽性率的高低，是臨床細菌檢驗成功的關(guān)鍵。標(biāo)本質(zhì)量的好壞直接影響診斷結(jié)果的正誤，不當(dāng)?shù)臉?biāo)本可導(dǎo)致假陰性、假陽性結(jié)果的出現(xiàn)，因此標(biāo)本采集與處理的規(guī)范化是準確、及時地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎(chǔ)。好的微生物檢驗標(biāo)本可提升實驗室工作效率及病患照顧質(zhì)量，降低醫(yī)療成本。臨床標(biāo)本的分類發(fā)現(xiàn)感染應(yīng)及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查，二、三級醫(yī)院微生物標(biāo)本送檢率不應(yīng)低于70%。盡量在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本。標(biāo)本采集時應(yīng)嚴格執(zhí)行無菌操作，減少或避免機體正常菌群及其他雜菌污染。標(biāo)本采集后應(yīng)立即送至實驗室。床邊接種可提高病原菌檢出率。以棉拭子采集的標(biāo)本如咽拭、肛拭或傷口拭子，宜采用插入運送培養(yǎng)基送檢。混有正常菌群的標(biāo)本如咳痰、尿液、傷口拭子，不可置肉湯培養(yǎng)基內(nèi)送檢。盛標(biāo)本容器須經(jīng)滅菌處理，但不得使用消毒劑。送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗?zāi)康模箤嶒炇夷苷_選用相應(yīng)的培養(yǎng)基和適宜的培養(yǎng)環(huán)境。血培養(yǎng)采集的臨床指征

一般患者出現(xiàn)以下一種體征時可作為采血的重要指征：發(fā)熱（≥38℃）或（低溫≤36℃）寒戰(zhàn)白細胞增多（特別有“核左移”未成熟的或桿狀核白細胞）皮膚黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、血壓降低、CRP升高及呼吸快特殊患者（如血液?。┏霈F(xiàn)粒細胞減少（成熟的多形核白細胞＜1000×109/L）、血小板減少等，或同時具備上述幾種體征的臨床可疑菌血癥應(yīng)采集血培養(yǎng)新生兒菌血癥，進行血培養(yǎng)同時應(yīng)增加尿液和腦脊液培養(yǎng)對入院危重感染患者在未進行系統(tǒng)性抗菌藥物治療之前，應(yīng)及時采集血培養(yǎng)采血量：血液中細菌和真菌的檢出率依賴于足夠的血量，但并非越多越好，超過一定數(shù)量的采血量會稀釋培養(yǎng)基內(nèi)的肉湯，使肉湯無法有效中和血中的抑制物質(zhì)（補體、抗體、抗生素）。血量與培養(yǎng)液的比例以1：10為宜，但對已接受抗菌藥物長達10天以上的患者，采血量與培養(yǎng)基的比例應(yīng)為1：20或大于1：20為宜。

成人10~15ml兒童3~5ml嬰幼兒1~2ml骨髓1~2ml標(biāo)本采集常規(guī)消毒病人采血部位，抽一定量血液后，另換一無菌針頭，消毒接種瓶口后將血液接種在瓶內(nèi)（一瓶需氧，一瓶厭氧），輕輕搖勻。采集要點：1.每一對血培養(yǎng)應(yīng)當(dāng)從身體的不同部位采集2.用來培養(yǎng)的血應(yīng)當(dāng)是靜脈血而不是動脈血3.盡量避免從靜脈導(dǎo)管中抽血4.皮膚和瓶子的消毒非常關(guān)鍵采集時機：應(yīng)在病人發(fā)病初期或發(fā)熱高峰到來之前采集。一般情況下應(yīng)盡量選擇在使用抗菌藥之前進行，在24h內(nèi)采集2-3份血培養(yǎng)（一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單份血培養(yǎng)）。如患者已經(jīng)應(yīng)用抗菌藥物進行治療，應(yīng)在下一次用藥之前采血培養(yǎng)。采血套數(shù)檢測靈敏度血培養(yǎng)瓶的運送采集后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)立即送檢（室溫<24h）如不能立即送檢，需室溫保存或置35°~37°孵箱中，切勿冷藏上呼吸道標(biāo)本采集的臨床指征懷疑上呼吸道感染時如發(fā)熱、咽部疼痛等，尤其是懷疑化膿性鏈球菌感染或念珠菌感染時進行咽拭子培養(yǎng)。標(biāo)本采集采集注意事項采集標(biāo)本應(yīng)于抗生素治療前，以晨起進食前為宜，取樣前數(shù)小時內(nèi)不得用消毒藥物漱口或涂抹病灶部位。取樣部位應(yīng)準確，反復(fù)涂抹數(shù)次，避免接觸口腔、舌粘膜和唾液?？谇槐砻娼M織的標(biāo)本不適于細菌學(xué)評價。咽拭子禁用于會厭發(fā)炎患者。檢查白喉棒狀桿菌，應(yīng)取疑為白喉假膜邊緣部的分泌物；扁桃體部位標(biāo)本取扁桃體小窩處為宜。下呼吸道（痰培養(yǎng)）標(biāo)本采集的臨床指征咳嗽咳痰是下呼吸道感染最常見的癥狀?？┭ㄅ菽?、鮮血和痰中帶血等呼吸困難，呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛發(fā)熱伴WBC增高尤其是中性粒細胞或CRP明顯增高胸部影像學(xué)檢查提示感染可能標(biāo)本采集自然咳痰法以晨痰為佳。采集標(biāo)本前應(yīng)用清水漱口或用牙刷（不用牙膏）清潔口腔和牙齒，有假牙者應(yīng)取下假牙（為減少口腔正常菌群污染標(biāo)本），用力咳出呼吸道深部的痰（非后鼻部分泌物、非唾液），痰液直接吐入無菌容器中，盡快送檢。否則有的細菌（如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌）在外界可能死亡。不能及時送檢的標(biāo)本，室溫保存≤2h。標(biāo)本質(zhì)量合格標(biāo)本的判斷標(biāo)準外觀：觀察顏色、粘度、有無血絲或膿。若標(biāo)本為水狀且很明顯是唾液，則應(yīng)拒收。為了判定是否來自下呼吸道的痰，需檢查是否為合格的痰標(biāo)本：WBC>25個/低倍視野，鱗狀上皮細胞<10個/低倍視野為合格標(biāo)本。采集合格標(biāo)本對細菌的診斷極為重要。注意事項在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本對于細菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次，連續(xù)2~3天；不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀形狀改變懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢，也可收集24h痰液。痰培養(yǎng)標(biāo)本的運送標(biāo)本采集后正確蓋好，防止泄露或容器外部留有殘留物采集后的標(biāo)本應(yīng)立即送往實驗室（室溫≤2ｈ）申請抗酸桿菌檢查或真菌培養(yǎng)的痰液如不能及時送檢，應(yīng)放入4℃冰箱，以免雜菌生長，但存放時間應(yīng)不超過24ｈ懷疑嗜血桿菌或肺炎鏈球菌感染時，標(biāo)本應(yīng)立即送檢，切忌冷藏中段尿培養(yǎng)采集的臨床指征1.尿痛、尿急、尿頻等典型的尿路感染癥狀2.出現(xiàn)血尿或膿尿3.泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前4.留置導(dǎo)尿管時間太長，患者出現(xiàn)發(fā)熱5.尿常規(guī)中WBC高和（或）亞硝酸鹽陽性

尿感根據(jù)感染部位分為：

上尿路感染（腎盂腎炎）下尿路感染（膀胱炎、尿道炎)

男性可出現(xiàn)前列腺炎標(biāo)本采集一般認為來自正常尿液是無菌的，而尿道口有正常菌群寄生，標(biāo)本的采集必須無菌操作。1.女性（female）：成年女性外陰部以肥皂水清洗，再用無菌水洗凈，用無菌紗布擦拭，然后排尿棄去前段尿，留取中段尿3毫升，置于無菌容器內(nèi)。2.男性（male）：用肥皂水清洗尿道口，后用清水洗后取中段尿。包皮過長者為防止包皮內(nèi)細菌污染，可將包皮翻開沖洗后再取中段尿。3.兒童（children）：采集中段尿較困難。如尿中細菌明顯增多，可高度懷疑尿路感染，無細菌則可否定，細菌數(shù)中度增加時，有必要用膀胱穿刺術(shù)（vesicopuncture）或?qū)颍╱rethralcatheterization）采集尿液。留取中段尿簡單易行，又無感染的危險。通常取晨起第一次尿送檢。尿液在膀胱內(nèi)停留6-8h以上（給細菌足夠的繁殖時間）尿標(biāo)本必須用無菌帶螺帽的容器采集，否則為拒收標(biāo)本。痰培養(yǎng)容器？NO。。。腦脊液培養(yǎng)采集的臨床指征在生理情況下，血液和腦脊液之間有血腦屏障，阻礙各種微生物通過血液進入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。因此正常人的腦脊液是絕對無菌的。當(dāng)懷疑結(jié)核性、化膿性、流行性、霉菌性腦膜炎時進行腦脊液培養(yǎng)。嚴格無菌操作標(biāo)本采集以70%酒精或2%碘酊消毒背部下方，并麻醉之，然后以一特制通管針，輕輕的由第三與第四腰椎間的中線部位穿刺入脊髓蛛網(wǎng)膜，采集約3-5ml腦脊液于3支無菌試管中，每支試管至少1-2ml，然后馬上將第2根（或第1根）送至實驗室。做腦脊液培養(yǎng)時，建議同時做血培養(yǎng)。腰穿時必須作徹底消毒和無菌操作。腦脊液標(biāo)本的運送采集后應(yīng)正確蓋好，防止泄漏或容器外部留有殘留物。常溫立即送檢，實驗室收到標(biāo)本后應(yīng)立即接種。腦脊液標(biāo)本送檢的理想時間為15分鐘內(nèi)，半小時送檢是可接受的，如果送檢時間超過1小時，則會影響結(jié)果。注：某些細菌具有自溶酶，放置時間過長易自溶死亡，因此，標(biāo)本應(yīng)立即送檢，并且保溫（禁止放冰箱，因腦膜炎雙球菌遇冷死亡）穿刺液培養(yǎng)穿刺液主要包括：膽汁胸水腹水心包液關(guān)節(jié)液腦脊液

在正常人體中，上述體液均是無菌的。有感染的情況下檢出的細菌，在排除污染后應(yīng)視為病原菌，及時給予正確的治療。

采集的臨床指征臨床上出現(xiàn)胸腔積液（胸水）、腹腔積液（腹水）、關(guān)節(jié)液、心包腔積液、鞘膜腔積液等情況時，多因漿膜腔發(fā)生循環(huán)障礙、炎癥、癌浸潤等病變，腔內(nèi)液體滲漏增加所致。標(biāo)本采集一般由臨床醫(yī)師在無菌操作下穿刺抽取或外科手術(shù)采集標(biāo)本。取５～１０ｍｌ于無菌肝素抗凝管中（０.５ｍｇ肝素可抗凝５ｍｌ標(biāo)本），充分混勻后立即送檢，不能有凝塊。大便培養(yǎng)采集指征腹瀉病人應(yīng)盡量在急性期（３天內(nèi)）、在用抗生素前留取標(biāo)本以提高病原菌的檢出率，陳舊標(biāo)本影響檢出陽性率。連續(xù)出現(xiàn)膿血、黏液、糊狀、米泔樣等形狀異常的糞便。疑似細菌性食物中毒患者，大便培養(yǎng)可作為一個輔助檢查手段。懷疑感染傷寒沙門菌、細菌性痢疾的患者。胃腸道感染懷疑霍亂等弧菌感染者。標(biāo)本采集無需特別準備，但最好不要住院超過３ｄ，在使用抗生素前采集最佳。自然排便后，可挑取新鮮糞便中有膿血、黏液部分的糞便約２～３ｇ，液體糞便取絮狀物２～３ｍｌ，糊狀、米泔樣等性狀異常的糞便盛于無菌的容器中或置于保存液中送檢。大便標(biāo)本的運送標(biāo)本采集后應(yīng)正確蓋好，防止泄漏或容器外部留有殘留物。糞便標(biāo)本：室溫1小時內(nèi)送至。直腸拭子（proctoswab）：室溫1小時內(nèi)送至。高度懷疑霍亂弧菌感染的標(biāo)本室溫1小時內(nèi)送至，運送必須符合特殊標(biāo)本的安全要求。堿性蛋白胨水