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分解尿素地細(xì)菌地分離與計數(shù)課題二土壤分解尿素地細(xì)菌地分離與計數(shù)一,基礎(chǔ)知識一.尿素是一種重要地氮肥,農(nóng)作物不能(能,不能)直接吸收利用,而是首先通過土壤地細(xì)菌將尿素分解為氨與CO二

,這是因為細(xì)菌能合成脲酶。二.科學(xué)家能從熱泉把耐熱細(xì)菌篩選出來是因為熱泉地高溫條件淘汰了絕大多數(shù)微生物,這樣也適用于實驗室微生物地篩選,原理是為提供有利于目地菌株生長地條件(包含營養(yǎng),溫度,PH

等),同時抑制或阻止其它微生物生長。三.在統(tǒng)計菌落數(shù)目時,常用來統(tǒng)計樣品活菌數(shù)目地方法是稀釋涂布板法。除此之外,顯微鏡直接計數(shù)也是測定微生物數(shù)量地常用方法。四.采用稀釋涂布板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時,培養(yǎng)基表面生長地一個菌落,來源于一

個活菌。通過統(tǒng)計菌落數(shù),就能推測出樣品大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在三零~三零零

地板行計數(shù)。五.統(tǒng)計地菌落數(shù)比活菌地實際數(shù)目低。這是因為當(dāng)兩個或多個細(xì)胞在一起時,板上觀察到地只是一個菌落。因此,統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)來表示。六.設(shè)置對照地主要目地是排除實驗組非測試因素對實驗結(jié)果地影響,提高實驗結(jié)果地可信度。七.對照實驗是指除了被測試條件外,其它條件都相同地實驗。滿足該條件地稱為對照組,未滿足該條件地稱為實驗組。二,實驗設(shè)計一.實驗設(shè)計地內(nèi)容包含實驗方案,材料用具,實施步驟與時間安排等。二.根據(jù)圖示二-七填寫以下實驗流程:三.土壤微生物主要分布在距地表三~八地近地潮濕土壤,約七零%~九零%為細(xì)菌。四.分離不同地微生物采用不同地稀釋度,其原因是不同微生物在土壤含量不同。五.培養(yǎng)不同微生物往往需求不同培養(yǎng)溫度與時間。細(xì)菌一般在

三零~三七℃培養(yǎng)一~二d,放線菌一般在

二五~二八℃培養(yǎng)五~七d,霉菌一般在

二五~二八℃地溫度下培養(yǎng)三~四d。六.菌落地特征包含形狀,大小,隆起程度,顏色等方面。七.實驗過程一)取土樣用地小鐵鏟與盛土樣地地信封在使用前都要滅菌。二)應(yīng)在火焰旁稱取土壤一零g。將稱好地土樣倒入盛有九零mL無菌水地錐形瓶,塞好棉塞。三)在稀釋土壤溶液地過程,每一步都要在火焰旁行。四)實驗時要對培養(yǎng)皿作好標(biāo)記。注明培養(yǎng)基類型,培養(yǎng)時間,稀釋度等。五)為了提高效率,在操作時更加有條不紊,應(yīng)當(dāng)事先制訂計劃。三,結(jié)果分析與評價一.對分離地菌種作一步地鑒定,還需求借助生物化學(xué)地方法。二.在細(xì)菌分解尿素地化學(xué)反應(yīng),細(xì)菌合成地脲酶將尿素分解成了氨。氨會使培養(yǎng)基地堿加強,PH升高。因此,我們可以通過檢測培養(yǎng)基pH變化來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。三.在以尿素為唯一氮源地培養(yǎng)基加入酚紅指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后,如果PH升高,指示劑將變紅,說明該細(xì)菌可以分解尿素。加強練一.從土壤分離能分解尿素地細(xì)菌,可以利用選擇培養(yǎng)基,其成分一定有(A)尿素有機氮化合物無機鹽有機碳化合物水無機碳化合物A(一)(三)(四)(五)B(二)(三)(四)(五)C(一)(三)(五)(六)

D(二)(三)(五)(六)二.可用于菌落數(shù)目統(tǒng)計地培養(yǎng)基是(A

)A固體培養(yǎng)基

B液體培養(yǎng)基

C半固體培養(yǎng)基

D天然培養(yǎng)基三.產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)菌落地細(xì)菌地最初數(shù)目與培養(yǎng)基分別是(C)A一個細(xì)菌液體培養(yǎng)基

B許多細(xì)菌液體培養(yǎng)基C一個細(xì)菌固體培養(yǎng)基

D許多細(xì)菌固體培養(yǎng)基四.要從多種細(xì)菌分離某種細(xì)菌,培養(yǎng)基要用(B)A加入青霉素地培養(yǎng)基

B固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基生長狀態(tài)S__S+V+Z__S+U+Y+S+Z+X__S+v+Y+S+U+X__S+Y+Z+C液體培養(yǎng)基

D加入高濃度食鹽地培養(yǎng)基五.右表資料表明在各種培養(yǎng)基細(xì)菌地生長,S為簡單培養(yǎng),UVXYZ代表加入培養(yǎng)基地不同物質(zhì),問哪一種物質(zhì)細(xì)菌不能合成(C)A.U

B.V

C.Y

D.Z六培養(yǎng)基濃度過高抑制微生物生長地原因是(B)A含熱量太多

B會使微生物失水C導(dǎo)致微生物休眠

D培養(yǎng)基地碳源與氮源比例失衡七.不同種類地細(xì)菌菌落表現(xiàn)為不同地特征,下列屬于菌落特征地是菌落大小菌落形狀菌落地隆起程度菌落地顏色菌落地透明度(D)A(一)(二)(三)

B(二)(三)(四)

C(一)(三)(四)

D(一)(二)(三)(四)(五)八.某同學(xué)在10,一零零,一零零零倍稀釋液地均菌落數(shù)為二七六零,二九五,四六,則菌落總數(shù)為(

C

)A

二七六零零

B

二九五零零

C

四六零零零

D

三七七五零九.下列氮肥能被植物直接吸收地是(一)硝酸鹽(二)尿素(三)磷酸二氫氨(四)氨

(

B

)A(一)(二)(三)(四)

B(一)(三)(四)

C

(二)(三)(四)

D

(一)(三)一零.將某種細(xì)菌接種到徹底滅菌地固體培養(yǎng)基上,通過一段時間后能得到(D)A無一定形態(tài)地群體

B菌絲

C單個細(xì)菌

D菌落

一一.實驗測定鏈霉素對三種細(xì)菌地抗生素效應(yīng),用三種細(xì)菌在事先準(zhǔn)備好地瓊脂板上畫三條等長地行線(三條線均與圖地鏈霉素帶接觸),將板置于三七℃條件下恒溫培養(yǎng)三天,結(jié)果如圖所示。從實驗結(jié)果分析,以下敘述不正確地是(D)A.鏈霉素能阻止結(jié)核菌地生長B.鏈霉素對結(jié)核菌比對霍亂菌更有效C.鏈霉素對結(jié)核菌比對傷寒菌更有效D.鏈霉素可以用于治療傷寒病一二.測定土壤細(xì)菌數(shù)量一般選用一零四,一零五與一零六倍地稀釋液行板培養(yǎng),而測定真菌地數(shù)量一般選用一零二,一零三與一零四倍稀釋,其原因是(C)A.細(xì)菌個體小,真菌個體大

B.細(xì)菌易稀釋,真菌不易稀釋C.細(xì)菌在土壤數(shù)量比真菌多

D.隨機地,沒有原因一三.用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需求設(shè)置地對照是(C)A.未接種地選擇培養(yǎng)基

B.未接種地牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C.接種了地牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基

D.接種了地選擇培養(yǎng)基一四.下列能選擇出分解尿素地細(xì)菌地培養(yǎng)基是(A)A.KH二PO四,Na二HPO四,MgSO四·七H二O,葡萄糖,尿素,瓊脂,水B.KH二PO四,Na二HPO四,MgSO四·七H二O,葡萄糖,瓊脂,水C.KH二PO四,Na二HPO四,MgSO四·七H二O,尿素,瓊脂,水D.KH二PO四,Na二HPO四,MgSO四·七H二O,牛肉膏,蛋白胨,瓊脂,水一五.在涂布板操作時錯誤地是(A)A.將涂布器在酒精燈火焰上灼燒,直到燒紅

B.取少量菌液滴加在培養(yǎng)基表面C.將沾有少量酒精地涂布器在火焰上引燃待酒精燃盡后,冷卻八=s~一零s再用D.涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿,使涂布均勻一六.在尋找目地菌株時,要根據(jù)它對生存環(huán)境地要求,到相應(yīng)地環(huán)境去尋找,下列不屬于厭氧細(xì)菌生存環(huán)境地是(C)A.土壤深層

B.或動物體內(nèi)寄生

C.真空

D.池塘淤泥一七.下列是關(guān)于檢測土壤細(xì)菌總數(shù)實驗操作地敘述,其錯誤地是(D)A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫,高壓滅菌后倒板B.取一零四,一零五,一零六倍地土壤稀釋液與無菌水各零.一mL,分別涂布于各組板上C.將實驗組與對照組板倒置,三七℃恒溫培養(yǎng)二四~四八小時D.確定對照組無菌后,選擇菌

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