蛋白質(zhì)的分離純化孫肖_第1頁
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文檔簡介

姓名孫肖蛋白質(zhì)的分離純化1010203選擇含目的蛋白質(zhì)較豐富的材料避免蛋白質(zhì)變性，避免過酸過堿的條件及劇烈攪拌和振蕩除去變性的蛋白質(zhì)和其他雜蛋白蛋白質(zhì)分離純化的一般原則2材料的預(yù)處理及細(xì)胞破碎01蛋白質(zhì)的抽提02蛋白質(zhì)粗制品的獲得03樣品的進(jìn)一步分離純化04分離純化蛋白質(zhì)的一般程序3機(jī)械破碎法滲透破碎法反復(fù)凍融法超聲波法酶法常用破碎組織細(xì)胞的方法4通常選擇適當(dāng)?shù)木彌_溶液把蛋白質(zhì)提取出來。抽提所用的緩沖溶液的PH、離子強(qiáng)度、組成成分等條件應(yīng)根據(jù)欲制備的蛋白質(zhì)的性質(zhì)而定。如膜蛋白的抽提抽提緩沖液中一般要加入表面活性劑（十二烷基磺酸鈉），使膜結(jié)構(gòu)破壞，利于蛋白質(zhì)與膜分離。5根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度的差異等電點(diǎn)沉淀法：不同蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同，可用等電點(diǎn)使它們相互分離鹽析法：不同蛋白質(zhì)鹽析所需的鹽飽和度不同，可通過調(diào)節(jié)鹽濃度使目的蛋白質(zhì)沉淀析出。有機(jī)溶劑沉淀法：中性有機(jī)溶劑如乙醇，它的介電常數(shù)比水低，能使大多數(shù)球狀蛋白質(zhì)在水溶液的溶解度降低，進(jìn)而沉淀出來。此外，有機(jī)溶劑會(huì)破壞蛋白質(zhì)表面的水化膜，促使

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