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文檔簡介

陳同生華南師范大學(xué)信息光電子科技學(xué)院熒光共振能量轉(zhuǎn)移

FluorescenceResonanceEnergyTransfer(FRET)分子能級與熒光S0S1T1hn0hn1hn22.熒光（Fluorescence)：當(dāng)處于基態(tài)的分子吸收光能后進(jìn)入激發(fā)態(tài)，并且立即返回基態(tài)并以光的形式釋放能量，這種光稱為熒光。

4.激發(fā)(Excitation,Ex)和發(fā)射(Emission,Em)光譜（Spectra):1.能級（EnergyLevel）：原子的可能狀態(tài)是不連續(xù)的，因此各狀態(tài)對應(yīng)能量也是不連續(xù)的。包含電子能級、振動能級和轉(zhuǎn)動。3.磷光（Phosphorescence）:分子從激發(fā)三線態(tài)返回基態(tài)以光的形式釋放能量。CFPEx.440nmEx.470nmEm.470nmYFPEm.535nm熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)現(xiàn)象3.FRET現(xiàn)象的特征:選擇性激發(fā)供體,卻能檢測到受體發(fā)射的熒光1.供體(Donor,D)Donor2.受體(Acceptor,A)AcceptorFRET原理(Principle)FRET的條件發(fā)生FRET需要三個條件：1、供體分子的發(fā)射光譜和受體分子的吸收光譜必須有顯著的重迭，一般大于30％；2、供體分子和受體分子間的距離必須在1–10nm之間.D和A間的FRET效率：3、供體分子的發(fā)射態(tài)偶極矩與受體分子的吸收態(tài)偶極矩、以及它們的向量必須滿足一定的條件R0:E=50%時供體和受體分子間的距離.對于特定的供體受體對是常數(shù);R:供體和受體分子間的距離.E:FRET效率.對于R特別靈敏.舉例:假設(shè)R0=5nm,

1）R=10nm,E=1.5%2）R=5nm,E=50%3）R=6nm,E=25%

450500550600l

(nm)DEmAEx1)蛋白分子的共定位;2)蛋白分子聚合體;3)轉(zhuǎn)錄機(jī)制;4)轉(zhuǎn)換途徑;5)分子運動;6)蛋白折疊等生物學(xué)問題.FRET的應(yīng)用通過FRET技術(shù)可以獲得有關(guān)兩個蛋白分子之間相互作用的空間信息。常用于解決如下問題:LaserLaserDAFRE

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