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離體小腸平滑肌的生理特性第1頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月[目的]通過(guò)觀察化學(xué)物質(zhì)、溫度變化對(duì)離體小腸平滑肌收縮的影響,使學(xué)生掌握離體小腸平滑肌收縮的記錄方法,加深對(duì)平滑肌某些基本特性的理解。[原理]平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外,還具有自動(dòng)節(jié)律性收縮的特性,并且受腸壁內(nèi)神經(jīng)叢與外來(lái)植物性神經(jīng)的支配。離體腸段雖然失去外來(lái)神經(jīng)的支配,但腸壁神經(jīng)叢仍存在,在適宜的條件下,仍能保持平滑肌收縮的特性及腸壁神經(jīng)叢的作用。離體小腸實(shí)驗(yàn)不僅在理論上可以證明平滑肌的生理特性,而且還可用來(lái)研究各種因素對(duì)平滑肌的影響。第2頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月[方法與步驟]一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1.恒溫平滑肌浴槽裝置向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入臺(tái)氏液至浴槽高度的2/3處。外部容器為水浴鍋加自來(lái)水。啟開(kāi)電源,恒溫工作點(diǎn)定在38℃。第3頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2.標(biāo)本制備向兔耳緣靜脈注射空氣(或用木棒猛擊兔的后腦部)使其致死,背位固定于手術(shù)臺(tái)上,腹部剪毛后,沿正中線切開(kāi)皮膚和腹壁,找到胃,以胃幽門(mén)與十二指腸交界處為起點(diǎn),快速沿腸緣剪去腸系膜,然后再剪取20~30cm長(zhǎng)的十二指腸,置于4℃左右的臺(tái)氏液中輕輕漂洗,可用注射器向腸腔內(nèi)注入臺(tái)氏液沖洗腸腔內(nèi)壁,并置于4~6℃臺(tái)氏液中備用。第4頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月3.儀器連接實(shí)驗(yàn)時(shí)將腸管剪成2~3cm的腸段,用棉線結(jié)扎腸段兩端,將一端結(jié)扎線連于浴槽內(nèi)的標(biāo)本固定鉤上,另一端連于張力換能器,適當(dāng)調(diào)節(jié)換能器的高度,使其與標(biāo)本之間松緊度合適。此相連的線必需垂直,并且不能與浴槽壁接觸,避免摩擦。用塑料管將充滿(mǎn)氣體的球膽或增氧泵與浴槽底部的通氣管相連,調(diào)節(jié)塑料管上的螺旋夾,讓通氣管的氣泡一個(gè)一個(gè)的溢出,為臺(tái)氏液供氧。將張力換能器輸入端與系統(tǒng)的通道相連,進(jìn)入生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),選擇對(duì)應(yīng)通道項(xiàng)目為張力。第5頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月二、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目1.觀察、記錄38℃臺(tái)氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。2.觀察、記錄25℃臺(tái)氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。3.待中央標(biāo)本槽內(nèi)的臺(tái)氏液的溫度穩(wěn)定在38℃后,加1:10000腎上腺素1~2滴于中央標(biāo)本槽中,觀察腸段收縮曲線的改變。在觀察到明顯的作用后,用預(yù)先準(zhǔn)備好的新鮮38℃臺(tái)氏液沖洗三次。4.待腸段活動(dòng)恢復(fù)正常后,再加1:10000乙酰膽堿1~2滴于中央標(biāo)本槽中,觀察腸段收縮曲線的改變,作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。第6頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月5.向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入1mol·L-1NaOH溶液1~2滴,觀察腸段收縮曲線的改變。作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。6.向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入1mol·L-1HCl溶液1~2滴,觀察腸段收縮曲線的改變。待作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。7.向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入1%CaCl2溶液2~3滴,觀察腸段收縮曲線的改變。第7頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月[注意事項(xiàng)]1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物先禁食24h,于實(shí)驗(yàn)前1h喂食,然后處死,取出標(biāo)本,腸運(yùn)動(dòng)效果更好。2.標(biāo)本安裝好后,應(yīng)在新鮮38℃臺(tái)氏液中穩(wěn)定5~10min,有收縮活動(dòng)時(shí)即可開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。3.注意控制溫度。加藥前,要先準(zhǔn)備好更換用的新鮮38℃臺(tái)氏液,每個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)束后,應(yīng)立即用38℃臺(tái)氏液沖洗,待腸段活動(dòng)恢復(fù)正常后,再進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。4.實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目中所列舉的藥物劑量為參考劑量,若效果不明顯,可以增補(bǔ)劑量,但要防止一次性加藥過(guò)量。第8頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月結(jié)果與分析第9頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月一、低溫對(duì)離體腸肌活動(dòng)的影響離體腸肌收縮減弱。溫度降低,腸肌細(xì)胞興奮型降低,代謝相關(guān)酶活性降低,腸肌代謝水平降低,腸肌收縮減弱。第10頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月二、滴加腎上腺素離體腸肌收縮減弱。腎上腺素可與腸肌細(xì)胞膜上腎上腺素能受體(α、β型)結(jié)合,一方面可使Ca2+、K+外流增加,細(xì)胞膜電位發(fā)生超極化,興奮性降低;另一方面可促進(jìn)肌膜和肌漿網(wǎng)膜上鈣泵活動(dòng)加強(qiáng),使肌漿內(nèi)Ca2+濃度降低,肌張力減弱。第11頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月三、滴加乙酰膽堿離體腸肌收縮加強(qiáng)。乙酰膽堿可與腸肌細(xì)胞膜上M型受體結(jié)合,使肌膜上Ca2+通道開(kāi)放,Ca2+內(nèi)流,肌漿內(nèi)Ca2+濃度升高,腸肌收縮加強(qiáng)。第12頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月四、滴加NaOH離體腸肌收縮加強(qiáng)。H+濃度降低,促進(jìn)Ca2+通道開(kāi)放,Ca2+內(nèi)流增加;促進(jìn)肌漿網(wǎng)釋放Ca2+;促進(jìn)Ca2+與肌鈣蛋白結(jié)合,最終導(dǎo)致腸肌收縮加強(qiáng)。第13頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月五、滴加HCl離體腸肌收縮減弱。H+濃度升高,抑制Ca2+通道開(kāi)放,Ca2+內(nèi)流減少;抑制肌漿網(wǎng)釋放Ca2+;抑制Ca2+與肌鈣蛋白結(jié)合,最終導(dǎo)致腸肌收縮減弱。第14頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月六、滴加Ca
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