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§6檢測參數(shù)和結(jié)果顯示§6檢測參數(shù)和結(jié)果顯示1一、檢測參數(shù)三分類血細(xì)胞分析儀的18項(xiàng)參數(shù)五分類血細(xì)胞分析儀新增的一些參數(shù)一、檢測參數(shù)三分類血細(xì)胞分析儀的18項(xiàng)參數(shù)(一)白細(xì)胞系列參數(shù)序號(hào)英文縮寫中文全稱1WBC白細(xì)胞數(shù)2NEUT#中性粒細(xì)胞數(shù)3LYMPH#淋巴細(xì)胞數(shù)4MONO#單核細(xì)胞數(shù)5LYMPH%淋巴細(xì)胞百分率6MONO%單核細(xì)胞百分率7NEUT%中性粒細(xì)胞百分率(一)白細(xì)胞系列參數(shù)序號(hào)英文縮寫中文全稱1WBC白細(xì)胞數(shù)2N(二)紅細(xì)胞系列參數(shù)序號(hào)英文縮寫中文全稱1RBC紅細(xì)胞數(shù)2HGB血紅蛋白量3HCT紅細(xì)胞壓積4MCV平均紅細(xì)胞體積5MCH平均紅細(xì)胞血紅蛋白量6MCHC平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度7RDW紅細(xì)胞體積分布寬度(二)紅細(xì)胞系列參數(shù)序號(hào)英文縮寫中文全稱1RBC紅細(xì)胞數(shù)2H(三)血小板系列參數(shù)序號(hào)英文縮寫中文全稱1PLT血小板數(shù)2MPV平均血小板容積3PDW血小板體積分布寬度4PCT血小板壓積(三)血小板系列參數(shù)序號(hào)英文縮寫中文全稱1PLT血小板數(shù)2M(一)新增分類參數(shù)序號(hào)英文縮寫中文全稱1EO#嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)2BASO#嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)3EO%嗜酸性粒細(xì)胞百分率4BASO%嗜堿性粒細(xì)胞百分率(一)新增分類參數(shù)序號(hào)英文縮寫中文全稱1EO#嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)(二)新增網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)序號(hào)英文縮寫中文全稱1Retic#網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)2Retic%網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率3LFR低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率4MFR中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率5HFR高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率(二)新增網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)序號(hào)英文縮寫中文全稱1Retic#網(wǎng)二、檢測參數(shù)的臨床應(yīng)用紅細(xì)胞系列參數(shù)血小板系列參數(shù)白細(xì)胞系列參數(shù)二、檢測參數(shù)的臨床應(yīng)用紅細(xì)胞系列參數(shù)一)RBC系列參數(shù)一)RBC系列參數(shù)1.鑒別缺鐵性貧血和β-輕型海洋性貧血:1)共同點(diǎn):小細(xì)胞性貧血,峰左移。2)鑒別點(diǎn):a.RDW增高,峰底寬b.RDW正常,峰底窄(一):紅細(xì)胞體積分布寬度(RDW)bNfl100200a1.鑒別缺鐵性貧血和β-輕型海洋性貧血:(一):紅細(xì)胞體積2.診斷缺鐵性貧血為小細(xì)胞低色素性貧血,伴有RDW異常增高者(RDW正常可排除)3.進(jìn)行貧血的新的形態(tài)學(xué)分類(MCV/RDW)大細(xì)胞不均一性正細(xì)胞不均一性小細(xì)胞不均一性異常大細(xì)胞均一性正細(xì)胞均一性小細(xì)胞均一性正常RDW增高正常減低MCV2.診斷缺鐵性貧血大細(xì)胞不均一性正細(xì)胞不均一性小細(xì)胞不均一性(二)網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)1.未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞比率(IRF):用網(wǎng)織紅細(xì)胞分析骨髓造血狀態(tài)優(yōu)于白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血小板計(jì)數(shù)。(1)骨髓抑制:HFR和MFR的減低早于中性粒細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)。骨髓恢復(fù)時(shí),HFR和MFR迅速增高。(二)網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)1.未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞比率(IRF):用網(wǎng)(2)放療和化療時(shí):長期化療,HFR和MFR減低早于LFR。而HFR和MFR的迅速增高是骨髓恢復(fù)的征象。(3)IRF與Ret的變化在不同的疾病中不同:見P125的表3-19。(2)放療和化療時(shí):長期化療,HFR和MFR減低早于LFR2.網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白量(Ret-He):反映Ret的質(zhì)量變化,達(dá)30.5pg為患者需要補(bǔ)充鐵的最佳臨界值,與CHr有很好的相關(guān)性。2.網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白量(Ret-He):3.網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白量(CHr):>29pg/細(xì)胞是患者補(bǔ)鐵指標(biāo),為缺鐵性貧血的靈敏指標(biāo),代表體內(nèi)鐵蛋白代謝的最新進(jìn)展。3.網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白量(CHr):>29pg/細(xì)胞是4.網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積(MRV)和球形細(xì)胞平均體積(MSCV):正常人的MSCV比MCV大,當(dāng)MSCV<MCV時(shí),診斷為遺傳性球形細(xì)胞增多癥的特異性>93.3%.MRV是觀察EPO療效一個(gè)穩(wěn)定且較靈敏的指標(biāo)。4.網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積(MRV)和球形細(xì)胞平均體積(MSCHDW是反映周圍血紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白含量異質(zhì)性參數(shù)。HDW和RDW明顯增高:見于遺傳性球紅細(xì)胞增多癥。另外,HDW對鐮形細(xì)胞貧血、β-輕型海洋性貧血有一定診斷意義。(三)血紅蛋白分布寬度(HDW)HDW是反映周圍血紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白含量異質(zhì)性參數(shù)。HD二)血小板系列參數(shù)二)血小板系列參數(shù)(1)鑒別PLT減低時(shí)的病因:①M(fèi)PV正常或增高:ITP、脾亢、SLE②MPV正?;驕p低:AA。③MPV減低:急性白血病、艾滋病。1.血小板平均體積(MPV)1.血小板平均體積(MPV)(2)評(píng)價(jià)骨髓造血功能恢復(fù)情況:①局部炎癥:MPV正常;敗血癥:MPV減低。②白血病緩解:MPV增高。③MPV和PLT持續(xù)減低:骨髓造血衰竭;骨髓功能恢復(fù):MPV增高。(2)評(píng)價(jià)骨髓造血功能恢復(fù)情況:(3)MPV與血小板功能關(guān)系:明顯相關(guān),大血小板代謝活躍,粘附聚集力強(qiáng)。(4)MPV與PLT:兩者呈非線性負(fù)相關(guān),隨PLT計(jì)數(shù)增高,MPV變小;骨髓受抑時(shí),MPV減低早于PLT減少;骨髓受抑恢復(fù)時(shí),MPV增高又早于PLT增高。(3)MPV與血小板功能關(guān)系:明顯相關(guān),大血小板代謝活躍,IPF反映骨髓增生狀態(tài),更新血小板的速度和細(xì)胞動(dòng)力學(xué)變化,在血小板減少癥的鑒別診斷中有重要意義。骨髓造血功能良好:IPF增高,可見于血栓性血小板減少性紫癜。骨髓造血受抑:IPF減低,可見于AA。2.未成熟血小板比率(IPF)IPF反映骨髓增生狀態(tài),更新血小板的速度和細(xì)胞動(dòng)力學(xué)變化,在3.血小板分布寬度(PDW):鐮形紅細(xì)胞性貧血時(shí)PDW升高。4.血小板成分平均濃度(MPC):反映血小板內(nèi)的密度,減低表示血小板激活,與反映血小板活化的表面抗原CD62P定量(金標(biāo)準(zhǔn)檢測)有很好的相關(guān)性。3.血小板分布寬度(PDW):鐮形紅細(xì)胞性貧血時(shí)PDW升高三)白細(xì)胞系列參數(shù)三)白細(xì)胞系列參數(shù)1、中間細(xì)胞群(MID):包括正常時(shí)的M、E、B;病理時(shí)的各種原始幼稚細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞等。MID異常,必須進(jìn)行復(fù)檢。2、未成熟粒細(xì)胞(IG):主要包括桿狀核、早幼、中幼和晚幼粒,但不包括原始粒細(xì)胞。IG>3%,提示敗血癥。1、中間細(xì)胞群(MID):包括正常時(shí)的M、E、B;病理時(shí)的各三、結(jié)果顯示數(shù)據(jù)圖形報(bào)警三、結(jié)果顯示數(shù)據(jù)圖形報(bào)警(一)數(shù)據(jù)
化驗(yàn)單姓名:程實(shí)性別:男年齡:30歲科室:內(nèi)科結(jié)果臨床診斷:肺炎?RBC4.5×1012/L送檢標(biāo)本:血Hb150g/L送檢目的:血常規(guī)WBC12×109/LDC:N80%L14%E3%M2%B1%送檢醫(yī)師羅春麗報(bào)告醫(yī)師:吳明送檢日期:2007-8-2報(bào)告日期:2007-8-2(一)數(shù)據(jù)(二)圖形血細(xì)胞分析儀常用的圖形有兩類:直方圖和散點(diǎn)圖,分別對應(yīng)不同的原理。分析這些圖形的變化,不僅可以評(píng)估儀器的工作狀態(tài)或儀器是否受非檢測成分的干擾,而且可提示各類細(xì)胞比率的變化或血液內(nèi)出現(xiàn)非正常血細(xì)胞。(二)圖形血細(xì)胞分析儀常用的圖形有兩類:直方圖和散點(diǎn)圖,分別1.電阻法細(xì)胞體積分布直方圖分析細(xì)胞分析儀根據(jù)各類細(xì)胞大小為橫坐標(biāo),以縱坐標(biāo)表示一定體積細(xì)胞的相對頻率,從而獲得RBC、WBC和PLT的直方圖。相對數(shù)表示在Y軸上,體積表示在X軸上,以飛升(fl)為單位。1.電阻法細(xì)胞體積分布直方圖分析細(xì)胞分析儀根據(jù)各類細(xì)胞(1)白細(xì)胞直方圖WBC通過計(jì)數(shù)小孔時(shí),儀器計(jì)算機(jī)部分可以將WBC體積從35~450fL分為256個(gè)通道,每個(gè)通道為1.64fL。細(xì)胞根據(jù)其大小被分別放在不同的通道中,從而得到白細(xì)胞體積分布直方圖。(1)白細(xì)胞直方圖WBC通過計(jì)數(shù)小孔時(shí),儀器計(jì)算機(jī)部分可以將三分群:小細(xì)胞群:成熟淋巴細(xì)胞中間細(xì)胞群:單核細(xì)胞,嗜酸粒細(xì)胞,嗜堿粒細(xì)胞大細(xì)胞群:中性粒細(xì)胞,桿狀核細(xì)胞,中性晚幼粒細(xì)胞兩分群:小細(xì)胞群:淋巴細(xì)胞大細(xì)胞群:粒細(xì)胞三分群:小細(xì)胞群:成熟淋巴細(xì)胞Ⅰ.正常WBC直方圖血液分析儀在35~450fL范圍內(nèi)分析白細(xì)胞,可以看到三個(gè)明顯的細(xì)胞分區(qū)。Ⅰ.正常WBC直方圖①左側(cè)又高又陡的峰,跨越在35~90fL,為淋巴細(xì)胞峰,主要為成熟淋巴細(xì)胞。②最右側(cè)又低又寬的峰從160~450fL,定位中性粒細(xì)胞峰,以N為主要細(xì)胞,也包含桿狀和晚幼粒細(xì)胞。①左側(cè)又高又陡的峰,跨越在35~90fL,為淋巴細(xì)胞峰,主要③兩峰之間的平坦區(qū):90~160fL,定為單個(gè)核細(xì)胞峰,以單核細(xì)胞為主,也含E、B等。血R儀之參數(shù)和結(jié)果課件Ⅱ.直方圖分析應(yīng)注意的問題①溶血?jiǎng)┨幚淼腤BC體積與其自然體積無關(guān),儀器法M體積小于中性粒細(xì)胞原因。②各廠家血液分析儀所用的稀釋液、溶血?jiǎng)┏煞植煌耆嗤?,對白?xì)胞膜的作用程度不同,同一份血液在不同儀器直方圖形狀有所不同,分群的設(shè)置點(diǎn)不同,因此必須使用配套試劑Ⅱ.直方圖分析應(yīng)注意的問題影響體積出入的因素:溶血?jiǎng)┌准?xì)胞計(jì)數(shù)池除加入一定量的稀釋液之外還要加入溶血?jiǎng)t細(xì)胞膜溶解同時(shí)白細(xì)胞膜通透性改變,白細(xì)胞質(zhì)滲出,使細(xì)胞膜緊裹在細(xì)胞核或存在的顆粒物質(zhì)周圍,所以經(jīng)溶血?jiǎng)┨幚砗蠛蓄w粒的粒細(xì)胞比無顆粒的單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞體積大些。影響體積出入的因素:溶血?jiǎng)踂BC體積直方圖不完全相同,但電阻抗法各類儀器白細(xì)胞直方圖病理變化趨勢是一致的,因此,在分析各種病理變化的圖形之前,必須先掌握自己實(shí)驗(yàn)室所擁有的白細(xì)胞正常直方圖。③WBC體積直方圖不完全相同,但電阻抗法各類儀器白細(xì)胞直方圖Ⅲ報(bào)警如果被檢測的標(biāo)本異常,不能滿足實(shí)驗(yàn)室已設(shè)定的各項(xiàng)規(guī)則,則儀器出現(xiàn)報(bào)警。此時(shí),工作人員必須特別注意復(fù)核標(biāo)本??傊瑱z測結(jié)果出現(xiàn)報(bào)警,意味著儀器檢測結(jié)果可靠性已經(jīng)明顯降低,需復(fù)核確認(rèn)。Ⅲ報(bào)警如果被檢測的標(biāo)本異常,不能滿足實(shí)驗(yàn)室已設(shè)定的各項(xiàng)規(guī)則(1)報(bào)警來源:主要有檢測結(jié)果超出實(shí)驗(yàn)室設(shè)定的檢測項(xiàng)目參考值,復(fù)檢標(biāo)本,臨床疾病標(biāo)本異常和患者人群變異。(2)報(bào)警有效性:儀器以參考方法檢測結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn),判斷儀器的檢測性能指標(biāo)包括:靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值、和陰性預(yù)測值總效率。(1)報(bào)警來源:主要有檢測結(jié)果超出實(shí)驗(yàn)室設(shè)定的檢測項(xiàng)目參考值(3)報(bào)警形式:符號(hào)(↑表示增高,↓表示降低),顏色(如紅色表示增高,藍(lán)色表示降低),或直接用文字(在結(jié)果旁注明“增高”、“降低”,或標(biāo)以R1、R2、R3、R4等)(3)報(bào)警形式:符號(hào)(↑表示增高,↓表示降低),顏色(如紅色①L峰左側(cè)區(qū)域異常(R1):可能有血小板聚集、巨大血小板、有核紅細(xì)胞、未溶解紅細(xì)胞、白細(xì)胞碎片、蛋白質(zhì)或脂類顆粒。②L峰與單個(gè)核細(xì)胞峰之間區(qū)域異常(R2):可能有異淋,漿細(xì)胞,原始細(xì)胞,E、B增多。①L峰左側(cè)區(qū)域異常(R1):可能有血小板聚集、巨大血小板、有③單個(gè)核細(xì)胞區(qū)與N峰區(qū)之間區(qū)域異常(R3)
:可能有未成熟N、異常細(xì)胞亞群,E、B增多,核左移。④中性粒細(xì)胞峰右側(cè)區(qū)域異常(R4):可能中性粒細(xì)胞絕對增多。③單個(gè)核細(xì)胞區(qū)與N峰區(qū)之間區(qū)域異常(R3):可能有未成熟N(4)報(bào)警內(nèi)容①紅細(xì)胞系列:RBC大小不均、高/低色素細(xì)胞、大/小紅細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、紅細(xì)胞異常分布、血紅蛋白缺乏等。(4)報(bào)警內(nèi)容②白細(xì)胞系列:桿狀核細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞、過氧化物酶染色異常、核左移、未成熟粒細(xì)胞等。③血小板系列:血小板聚集、大血小板、血小板分布異常、紅細(xì)胞碎片等。④骨髓造血:原始細(xì)胞、幼稚細(xì)胞等。②白細(xì)胞系列:桿狀核細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞、過氧化物酶染色異常、Ⅳ異常白細(xì)胞直方圖舉例①中性粒細(xì)胞比例增高(L比例降低圖1):特征是N峰明顯增大,L峰明顯減少。血涂片檢查以N為主,可達(dá)90%,L只占5%~10%。Ⅳ異常白細(xì)胞直方圖舉例①中性粒細(xì)胞比例增高(L比例降低圖1)圖1中性粒細(xì)胞比例增高圖1中性粒細(xì)胞比例增高②中性粒細(xì)胞比例減低(L比例增高圖2):特征是L峰明顯增大,N峰明顯減少。血涂片檢查以L為主,可達(dá)60~70%,N只占30%左右。②中性粒細(xì)胞比例減低(L比例增高圖2):特征是L峰明顯增大,圖2中性粒細(xì)胞比例減低圖2中性粒細(xì)胞比例減低③單個(gè)核細(xì)胞增多特征:在直方圖90~150fL區(qū)域出現(xiàn)一個(gè)明顯的細(xì)胞峰。③單個(gè)核細(xì)胞增多④原始、幼稚白細(xì)胞增多特征:在直方圖上單核細(xì)胞區(qū)出現(xiàn)一個(gè)高大的細(xì)胞峰,并與淋巴細(xì)胞峰融合,粒細(xì)胞峰變小。白總數(shù)明顯增高。④原始、幼稚白細(xì)胞增多原始、幼稚細(xì)胞增多原始、幼稚細(xì)胞增多⑤聚集血小板干擾
P108,圖3-45特征:直方圖左側(cè)起點(diǎn)高,離橫坐標(biāo)約0.8cm,血小板計(jì)數(shù)值明顯減低并伴有血小板直方圖的圖形異常。⑤聚集血小板干擾P108,圖3-45(2)紅細(xì)胞直方圖
分析紅細(xì)胞直方圖時(shí),要注意觀察曲線峰的增高降低、左移右移、單峰雙峰,曲線寬窄,曲線起始高低尾部抬高延伸等變化。(2)紅細(xì)胞直方圖分析紅細(xì)胞直方圖時(shí),要注意觀察曲線峰正常紅細(xì)胞直方圖是一個(gè)近似正態(tài)分布的單個(gè)峰的光滑曲線,通常位于36~360fL,X軸表示紅細(xì)胞體積,Y軸表示不同體積紅細(xì)胞出現(xiàn)的頻率。Ⅰ.正常紅細(xì)胞直方圖正常紅細(xì)胞直方圖是一個(gè)近似正態(tài)分布的單個(gè)峰的光滑曲線,通Ⅱ異常紅細(xì)胞直方圖①小細(xì)胞不均一性特征:直方圖上波峰左移,峰底變寬。血涂片鏡檢:紅細(xì)胞大小不一,以小細(xì)胞為主。Ⅱ異常紅細(xì)胞直方圖①小細(xì)胞不均一性②大細(xì)胞不均一性特征:直方圖上波峰右移,峰底變寬。血涂片鏡檢:紅細(xì)胞大小不一,以大細(xì)胞為主②大細(xì)胞不均一性③巨幼細(xì)胞性貧血治療有效直方圖雙峰圖特征:由于治療以后,貧血的病情得到了改善,外周血中出現(xiàn)了較多的正常細(xì)胞,使血中存在兩群紅細(xì)胞,導(dǎo)致紅細(xì)胞直方圖顯示為雙峰。波峰右移,峰底變寬。③巨幼細(xì)胞性貧血治療有效直方圖雙峰圖血R儀之參數(shù)和結(jié)果課件(3)血小板直方圖血小板隨紅細(xì)胞一起在一個(gè)檢測系統(tǒng)中檢測,根據(jù)不同的閾值,計(jì)算機(jī)可區(qū)分出血小板和紅細(xì)胞。血小板直方圖范圍在2~30fL之間。分析PLT直方圖的變化對了解PLT的體積變化、血液的抗凝情況及某些干擾因素具有一定的意義。(3)血小板直方圖血小板隨紅細(xì)胞一起在一個(gè)檢測系統(tǒng)中檢Ⅰ.血小板正常直方圖血液分析儀在2~30fL范圍內(nèi)分析PLT。直方圖上正常血小板主要集中在2~20fL范圍內(nèi),呈偏態(tài)分布。Ⅰ.血小板正常直方圖如果標(biāo)本中存在較多的小紅細(xì)胞、巨大血小板或血小板聚集塊等,血小板直方圖會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化,例如:異常:右移----巨大血小板窄峰----血小板減少Ⅱ血小板異常直方圖如果標(biāo)本中存在較多的小紅細(xì)胞、巨大血小板或血小板聚集塊等,血大血小板增多特征:直方圖曲線右移,在35fL處接近X軸,血涂片上可見較多大血小板。大血小板增多2.散點(diǎn)圖散點(diǎn)圖對應(yīng)的是應(yīng)用光散射原理。通常,平面散點(diǎn)圖是二維的(X、Y軸)圖象,而三維(X、Y、Z軸)圖則顯示立體圖象。在二維坐標(biāo)系,X軸和Y軸分別代表一種檢測原理或檢測角度的細(xì)胞信息。在坐標(biāo)象限中的任何一個(gè)散點(diǎn)反映的就是X軸和Y軸的綜合信息。2.散點(diǎn)圖散點(diǎn)圖對應(yīng)的是應(yīng)用光散射原理。通常,平面散點(diǎn)觀察和分析散點(diǎn)圖時(shí)要注意坐標(biāo)上的散點(diǎn)所在象限平面圖上的位置或散點(diǎn)群的疏密。觀察和分析散點(diǎn)圖時(shí)要注意坐標(biāo)上的散點(diǎn)所在象限平面圖上的位置或§7血液分析儀檢測結(jié)果顯微鏡涂片及復(fù)檢規(guī)則§7血液分析儀檢測結(jié)果顯微鏡涂片及復(fù)檢規(guī)則2005年,國際血液學(xué)組織提出了顯微鏡復(fù)檢的41條建議性標(biāo)準(zhǔn)。注意防止兩種傾向:一是過分相信儀器,不鏡檢;而是過分不信任儀器,高鏡檢率。2005年,國際血液學(xué)組織提出了顯微鏡復(fù)檢的41條建議性標(biāo)準(zhǔn)§8質(zhì)量保證、儀器較準(zhǔn)和性能評(píng)價(jià)§8質(zhì)量保證、儀器較準(zhǔn)和性能評(píng)價(jià)一、質(zhì)量保證一、質(zhì)量保證(一)分析前質(zhì)量保證1.做好操作人員崗前培訓(xùn)包括(1)上崗前應(yīng)仔細(xì)閱讀儀器說明書或接受良好的培訓(xùn)。(2)注意分析前、中、后每一個(gè)質(zhì)控步驟。(3)必須具有高度的責(zé)任和事業(yè)心,必須抓好醫(yī)德醫(yī)風(fēng)的建設(shè)。(一)分析前質(zhì)量保證1.做好操作人員崗前培訓(xùn)包括2.按照儀器說明書的要求,選擇合適的儀器安裝環(huán)境。
血液分析儀系精密電子儀器,對安裝環(huán)境有特殊要求,要滿足對空間、溫度(15~25℃)、濕度(<80%)、電源、抗電磁、抗熱源、光線、通風(fēng)等基本條件。2.按照儀器說明書的要求,選擇合適的儀器安裝環(huán)境。3.做好儀器的鑒定工作。儀器安裝或每次維修后,必須安照ICSH公布的血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià)方案對儀器的技術(shù)性能進(jìn)行測試公布。4.做好儀器的校正工作??蓞⒄展嫉年P(guān)于《血液分析儀較準(zhǔn)規(guī)范化的建議》進(jìn)行。3.做好儀器的鑒定工作。儀器安裝或每次維修后,必須安照IC5.標(biāo)本的采集和運(yùn)送①盡可能采用靜脈血,不用皮膚穿刺血。保證血液質(zhì)量和充足用量。②采血容器:盡可能用真空采血系統(tǒng)。③抗凝劑:推薦用EDTA-K2(1.5~2mg/mL)。5.標(biāo)本的采集和運(yùn)送④血液貯存:⑤血液的稀釋:稀釋血液后應(yīng)盡快測定。6.注意受檢者生理狀態(tài)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響④血液貯存:試劑的合理使用原則上應(yīng)使用原儀器配套的試劑。注意測試時(shí)試劑的作用溫度和時(shí)間。標(biāo)本要求:血樣要符合實(shí)驗(yàn)要求,采血管清潔,標(biāo)本要充分混勻。(二)分析中質(zhì)量控制(二)分析中質(zhì)量控制3.認(rèn)真作好室內(nèi)質(zhì)控4.注意儀器的半堵孔現(xiàn)象(1)判斷:完全堵孔,不能計(jì)數(shù),不出結(jié)果,有些儀器會(huì)提示“Clog”.不完全堵孔:①觀察計(jì)數(shù)時(shí)間:延長②看示波器波形:異常波形③聽儀器聲音:不規(guī)則間斷聲④看計(jì)數(shù)指示燈閃爍:不規(guī)律閃動(dòng)。3.認(rèn)真作好室內(nèi)質(zhì)控(2)檢測堵孔的原因及預(yù)防原因:血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測器的微孔,直徑100μm,深70μm,構(gòu)成一個(gè)圓柱形孔道,任何微小的贓物混入標(biāo)本中,均易造成堵孔。①采血時(shí)擦Hb吸管的棉花纖維。(2)檢測堵孔的原因及預(yù)防②采血部位溫度低或穿刺過淺,出血不暢,擠壓造成纖維蛋白絲形成甚至是小血凝塊。③標(biāo)本杯未蓋好,落入灰塵。④使用后小孔管清洗不夠,節(jié)日期間,儀器長時(shí)間不用,試劑中水分蒸發(fā),鹽類結(jié)晶堵孔。②采血部位溫度低或穿刺過淺,出血不暢,擠壓造成纖維蛋①用專用小毛刷輕刷幾次微孔。②邊按儀器的反沖裝置邊刷小孔。③卸下檢測器,裝入水后用吸耳球從頂端輕輕加壓沖洗。④將檢測器內(nèi)裝入少量次氯酸鈉(3%~5%)并浸泡5分鐘左右,然后用吸耳球清洗,再用水把檢測器清洗干凈。處理方法①用專用小毛刷輕刷幾次微孔。處理方法①采血:穿刺部位溫度、深度應(yīng)適宜。②用精細(xì)的衛(wèi)生紙代替棉花擦Hb吸管。③工作環(huán)境應(yīng)無塵,標(biāo)本杯應(yīng)注意防塵。④假日之前把儀器清洗干凈。⑤定期按不同方式清洗干凈檢測小孔。預(yù)防①采血:穿刺部位溫度、深度應(yīng)適宜。預(yù)防5.注意某些病理因素對血液分析儀檢測結(jié)果的影響①多發(fā)性骨髓瘤、白血病、糖尿病等可導(dǎo)致WBC、PLT計(jì)數(shù)值假性增高。②WBC顯著增多會(huì)影響白細(xì)胞計(jì)數(shù),有核紅細(xì)胞出現(xiàn)影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)。③高脂血癥可使Hb假性升高。5.注意某些病理因素對血液分析儀檢測結(jié)果的影響1.保留標(biāo)本備查。2.重視室內(nèi)質(zhì)控。3.加強(qiáng)質(zhì)控小組的責(zé)任。4.分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果各參數(shù)間關(guān)系。5.加強(qiáng)與臨床聯(lián)系。6.積極參加室內(nèi)質(zhì)控。(三)分析后質(zhì)量控制1.保留標(biāo)本備查。(三)分析后質(zhì)量控制二、儀器校準(zhǔn)概述(校準(zhǔn)物、質(zhì)控物概念)血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)的一般要求校準(zhǔn)方法二、儀器校準(zhǔn)概述(校準(zhǔn)物、質(zhì)控物概念)(一)概述
在血細(xì)胞分析儀全面質(zhì)量控制過程中,校準(zhǔn)物和質(zhì)控物是兩種必不可少的物質(zhì)。校準(zhǔn)物是指“一種用于校準(zhǔn)、分度或修正測量值的物質(zhì)或裝置”。這種物質(zhì)或裝置必須跟蹤國家或國際的參考制劑或參考物。(一)概述
在血細(xì)胞分析儀全面質(zhì)量控制過程中,校準(zhǔn)物和質(zhì)控物對于血液分析儀來說,校準(zhǔn)物有兩種:一種是標(biāo)準(zhǔn)的儀器,另一種是經(jīng)用參考方法確定的血液或其他人工微粒制品。對于血液分析儀來說,校準(zhǔn)物有兩種:一種是標(biāo)準(zhǔn)的儀器,質(zhì)控物不同于校準(zhǔn)物,它是“一種用于常規(guī)工作中核查分析過程(或儀器)準(zhǔn)確性的物質(zhì)。該物質(zhì)在性質(zhì)方面類似被分析的標(biāo)本并隨病人樣本一起進(jìn)行分析”。質(zhì)控物不同于校準(zhǔn)物,它是“一種用于常規(guī)工作中核查分析過程(或(二)血液分析儀校準(zhǔn)的一般要求1、儀器安裝時(shí)必須由廠家進(jìn)行校準(zhǔn)并提供校準(zhǔn)紀(jì)錄,否則不能用于臨床。2、更換部件進(jìn)行維修后,可能對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性有影響時(shí)需校準(zhǔn)。(二)血液分析儀校準(zhǔn)的一般要求1、儀器安裝時(shí)必須由廠家進(jìn)行校3、室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果顯示系統(tǒng)的檢測結(jié)果有漂移時(shí)(排除儀器故障和試劑的因素后)。4、對于開展常規(guī)檢測的實(shí)驗(yàn)室,要求每6個(gè)月至少進(jìn)行一次校準(zhǔn)。3、室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果顯示系統(tǒng)的檢測結(jié)果有漂移時(shí)(排除儀器故障和試5、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按建議要求建立適合本實(shí)驗(yàn)室使用的血液分析儀校準(zhǔn)程序并寫成文件。6、校準(zhǔn)后的儀器,必須開展室內(nèi)質(zhì)控以監(jiān)測儀器檢測結(jié)果是否發(fā)生漂移。5、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按建議要求建立適合本實(shí)驗(yàn)室使用的血液分析儀校準(zhǔn)程(三)校準(zhǔn)方法利用儀器配套校準(zhǔn)物來校準(zhǔn)利用定值的新鮮血作為校準(zhǔn)物來校準(zhǔn)。(三)校準(zhǔn)方法利用儀器配套校準(zhǔn)物來校準(zhǔn)1、利用該儀器配套校準(zhǔn)物來校準(zhǔn)
使用藥監(jiān)局注冊登記的國際公認(rèn)質(zhì)量可靠的儀器檢測系統(tǒng),才能使用該儀器制造商規(guī)定的配套校準(zhǔn)物,同時(shí)嚴(yán)格按儀器說明書規(guī)定操作。1、利用該儀器配套校準(zhǔn)物來校準(zhǔn)
使用藥監(jiān)局注冊登記的國(1)儀器的準(zhǔn)備
先用清潔劑對儀器內(nèi)部各通道及測試室處理30分鐘。確認(rèn)儀器的背景計(jì)數(shù)、精密度及攜帶污染在說明書規(guī)定的范圍內(nèi)時(shí),才可進(jìn)行校準(zhǔn),否則須查找原因,必要時(shí)請維修人員進(jìn)行檢修。(1)儀器的準(zhǔn)備①將校準(zhǔn)物從冰箱內(nèi)(2—8C)取出后,要求在室溫(18~25℃)條件下放置15分鐘,使其溫度恢復(fù)至室溫。②檢查校準(zhǔn)物是否超出效期,是否有變質(zhì)或污染。(2)校準(zhǔn)物的準(zhǔn)備①將校準(zhǔn)物從冰箱內(nèi)(2—8C)取出后,要求在室溫(18~25③輕輕地將校準(zhǔn)物反復(fù)顛倒混勻,并置于兩手掌間慢慢搓動(dòng),使校準(zhǔn)物充分混勻。④打開瓶塞時(shí),應(yīng)墊上紗布或軟紙,使濺出的血液被吸收。⑤將兩瓶校準(zhǔn)物合在一起,混勻后再分裝于2個(gè)瓶內(nèi)。③輕輕地將校準(zhǔn)物反復(fù)顛倒混勻,并置于兩手掌間慢慢搓動(dòng),使校準(zhǔn)①取1瓶校準(zhǔn)物,連續(xù)檢測11次,第1次檢測結(jié)果不用,以防止攜帶污染。②儀器若無自動(dòng)校準(zhǔn)的功能,則將第2—11次的各項(xiàng)檢測結(jié)果用手工記錄在工作表格中,計(jì)算出均值,均值的小數(shù)點(diǎn)后數(shù)字保留位數(shù)較日常報(bào)告結(jié)果多一位。有自動(dòng)校準(zhǔn)功能的儀器可直接得出均值。(3)用校準(zhǔn)物進(jìn)行儀器校準(zhǔn)①取1瓶校準(zhǔn)物,連續(xù)檢測11次,第1次檢測結(jié)果不用,以防止攜③各參數(shù)均值與定值(說明書中提供)的差異全部等于或小于表中的第一列數(shù)值時(shí),儀器不需進(jìn)行調(diào)整,記錄檢測數(shù)據(jù)即可。計(jì)算公式:(均值—定值)/定值×100%③各參數(shù)均值與定值(說明書中提供)的差異全部等于或小于表中的表一血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)表參數(shù)一列差異(%)二列差異(%)WBC1.510RBC110Hb110HCT210MCV110PLT310表一血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)表參數(shù)一列差異(%)二列差異(%)④若各參數(shù)均值與定值的差異大于表中的第二列數(shù)值時(shí),需請維修人員核查原因并進(jìn)行處理。⑤若各參數(shù)均值與定值的差異在表中第一列與第二列數(shù)值之間時(shí),需對儀器進(jìn)行調(diào)整,調(diào)整方法可按說明書的要求進(jìn)行。④若各參數(shù)均值與定值的差異大于表中的第二列數(shù)值時(shí),需請維修人⑥若儀器無自動(dòng)校準(zhǔn)功能,則將定值除以所測均值,求出校準(zhǔn)系數(shù),將儀器原來的系數(shù)乘以校準(zhǔn)系數(shù)即為校準(zhǔn)后的系數(shù),將校準(zhǔn)后的系數(shù)輸人儀器更換原來的系數(shù)。⑥若儀器無自動(dòng)校準(zhǔn)功能,則將定值除以所測均值,求出校準(zhǔn)系數(shù),將第2管未用的校準(zhǔn)物充分混勻,在儀器上重復(fù)檢測11次,去除第1次結(jié)果,計(jì)算第2-11次檢測結(jié)果的均值,再次與表中的數(shù)值對照。如各參數(shù)的差異全部等于或小于第一列數(shù)值,證明校準(zhǔn)合格。如達(dá)不到要求,須請維修人員進(jìn)行檢修。(4)校準(zhǔn)結(jié)果的驗(yàn)證將第2管未用的校準(zhǔn)物充分混勻,在儀器上重復(fù)檢測11次,去除第2.利用定值的新鮮血作為校準(zhǔn)物進(jìn)行校準(zhǔn)2.利用定值的新鮮血作為校準(zhǔn)物進(jìn)行校準(zhǔn)(1)使用新鮮血作為校準(zhǔn)物的要求①用EDTA·K2為抗凝劑的真空采血管取健康人新鮮血10ml,每ml血需抗凝劑的濃度為1.5~2.2mg。要求新鮮血的Hb、WBC、RBC、Hct和Plt檢測結(jié)果在參考范圍內(nèi)。將新鮮血混勻后分裝于3個(gè)管內(nèi),每管的血量為3ml。(1)使用新鮮血作為校準(zhǔn)物的要求①用EDTA·K2為抗凝劑②取其中1管,用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)*或規(guī)范操作的檢測系統(tǒng)**連續(xù)檢測11次,計(jì)算第2~11次檢測結(jié)果的均值,以此均值為新鮮血的定值(解釋)。③其他2管新鮮血作為定值的校準(zhǔn)物,用于儀器的校準(zhǔn)。②取其中1管,用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)*或規(guī)范操作的檢測系統(tǒng)**連*二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng):直接溯源至參考方法;具備較完善的質(zhì)量保證措施;與國外具有權(quán)威性的參考實(shí)驗(yàn)室定期進(jìn)行比對的檢測系統(tǒng)。**規(guī)范操作的檢測系統(tǒng):使用配套試劑,用配套校準(zhǔn)物定期進(jìn)行儀器校準(zhǔn);規(guī)范地開展室內(nèi)質(zhì)量控制;參加室間質(zhì)量評(píng)價(jià)成績優(yōu)良;人員經(jīng)過培訓(xùn)。*二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng):直接溯源至參考方法;具備較完善的質(zhì)量保(2)新鮮血如何定值:①直接溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)的定值方法:可使用血細(xì)胞分析的參考方法定值,但要建立參考方法的難度較大,在臨床實(shí)驗(yàn)室難以實(shí)施。(2)新鮮血如何定值:②間接溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)的定值方法:取新鮮血用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)或規(guī)范操作的檢測系統(tǒng)對其進(jìn)行定值,用定值的新鮮血作為常規(guī)校準(zhǔn)物。要求在8小時(shí)內(nèi)(溫度條件為18C-25℃)完成定值及儀器的校準(zhǔn)。②間接溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)的定值方法:取新鮮血用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)或(3)利用定值新鮮血的校準(zhǔn)步驟與上述利用該儀器配套校準(zhǔn)物來校準(zhǔn)的步驟相同(略)。(3)利用定值新鮮血的校準(zhǔn)步驟與上述利用該儀器配套校準(zhǔn)物來校三、性能評(píng)價(jià)(一)血液分析儀總體評(píng)價(jià)新儀器安裝后,或每次維修后,必須對儀器的性能進(jìn)行測試、評(píng)價(jià)。三、性能評(píng)價(jià)(一)血液分析儀總體評(píng)價(jià)評(píng)價(jià)內(nèi)容包括:儀器基本情況,儀器手冊,方法學(xué),評(píng)價(jià)步驟;技術(shù)評(píng)價(jià)計(jì)劃包括:校準(zhǔn)、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品概念,試劑,標(biāo)本及處理(如顛倒混勻),常規(guī)血細(xì)胞計(jì)數(shù)研究參考值,記錄原始結(jié)果,預(yù)評(píng)價(jià)、性能評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)內(nèi)容包括:儀器基本情況,儀器手冊,方法學(xué),評(píng)價(jià)步驟;1.稀釋效應(yīng):指測定值與稀釋倍數(shù)是否呈比例關(guān)系。稀釋度應(yīng)覆蓋生理和常見病理范圍。線性關(guān)系范圍越寬越理想。P<0.01,非線性相關(guān);P>0.05,未偏離線性。(二)血液分析儀性能評(píng)價(jià)1.稀釋效應(yīng):指測定值與稀釋倍數(shù)是否呈比例關(guān)系。稀釋度應(yīng)覆蓋2.準(zhǔn)確性(accuracy)
準(zhǔn)確性是指測定結(jié)果與真值一致性的程度。3.總重復(fù)性(overallrepeatability)
指同一份標(biāo)本多次測量的結(jié)果接近的程度。重復(fù)測定1份抗凝靜脈血10次,計(jì)算CV值。2.準(zhǔn)確性(accuracy)4.精密度(precision)
批內(nèi)(within-batch)精密度:同一批樣本重復(fù)測定結(jié)果的評(píng)價(jià)。批間(between-batch)精密度:對兩批或兩批以上樣本重復(fù)測定結(jié)果的評(píng)價(jià)。
精確度和準(zhǔn)確度4.精密度(precision)精確度和準(zhǔn)確度5.攜帶污染率(carryover)連續(xù)測定1份高值樣本3次(i1、i2、i3)再測定1份低值樣本3次(j1、j2、j3)攜帶污染率(%)=(j1-j3)/(i3-J3)5.攜帶污染率(carryover)6.標(biāo)本老化:指靜脈標(biāo)本采集后,觀察隨時(shí)間增加測定結(jié)果的變化量。7、儀器對異常標(biāo)本和干擾物的靈敏度。6.標(biāo)本老化:指靜脈標(biāo)本采集后,觀察隨時(shí)間增加測定結(jié)果的變化四、質(zhì)量控制方法Levey-Jennings質(zhì)控法Westgard多規(guī)則質(zhì)控法四、質(zhì)量控制方法Levey-Jennings質(zhì)控法1.Levey-Jennings質(zhì)控法本法應(yīng)用非定值質(zhì)控物,以±2S(包含95%的質(zhì)控結(jié)果)為警告界限,±3S(99.7%)為失控線的一種質(zhì)控方法,其方法簡單方便。本法的作用:①確定重復(fù)性誤差。②可評(píng)價(jià)儀器的穩(wěn)定性③可檢測稀釋誤差和試劑的質(zhì)量。1.Levey-Jennings質(zhì)控法本法應(yīng)用非定值質(zhì)控物,(1)確定質(zhì)控物:①全自動(dòng)血液分析儀可用部分醛化紅細(xì)胞及假白細(xì)胞作質(zhì)控物。②半自動(dòng)血液分析儀可用溶血液作Hb、假白細(xì)胞、醛化血小板或膠乳微粒作血小板測定的質(zhì)控物。(1)確定質(zhì)控物:對質(zhì)控物的要求:①質(zhì)量要穩(wěn)定,半年內(nèi)不能變質(zhì)且保持結(jié)果不變。②同一批次內(nèi)瓶間差異小,Hb質(zhì)控物CV值應(yīng)<1%,細(xì)胞計(jì)數(shù)質(zhì)控物CV值應(yīng)<3%。對質(zhì)控物的要求:(2)確定最佳條件的變異(OCV):OCV即在最理想和最恒定的條件下,對同一種質(zhì)控物進(jìn)行反復(fù)測定所得到的最低變異。OCV的作用:了解和觀察本實(shí)驗(yàn)室的最佳工作質(zhì)量。(2)確定最佳條件的變異(OCV):方法:選擇儀器處在最佳工作狀態(tài)、所用器材和試劑為最理想條件狀態(tài)時(shí)對質(zhì)控物進(jìn)行測定。一般為短時(shí)間內(nèi)分批連續(xù)測定共20次,計(jì)算出平均值(X)、標(biāo)準(zhǔn)差(S)及變異系數(shù)(CV),若有一個(gè)數(shù)值超出±3S,則廢除本批全部數(shù)據(jù),重新測定OCV。方法:選擇儀器處在最佳工作狀態(tài)、所用器材和試劑為最理想條件狀(3)確定常規(guī)條件下變異(RCV):即在常規(guī)條件下每天隨病人標(biāo)本測定質(zhì)控物一次,連續(xù)測20次,數(shù)據(jù)處理同OCV測定,計(jì)算X、S及CV。RCV的作用:反映實(shí)驗(yàn)室日常工作條件下精密度的實(shí)際水平,因此RCV>OCV.(3)確定常規(guī)條件下變異(RCV):即在常規(guī)條件下每天隨病人(4)繪制Levey-Jennings(L-J)質(zhì)控圖:①標(biāo)點(diǎn):在縱坐標(biāo)軸上標(biāo)記出X、X+2S、S-2S、S+3S的標(biāo)志,并將其具體數(shù)值標(biāo)在左側(cè)標(biāo)尺上。(4)繪制Levey-Jennings(L-J)質(zhì)控圖:②畫線:用紅筆畫出X±2S,用藍(lán)筆畫出X±3S線,即成為一張OCV(RCV)的“空圖”。并填齊各種項(xiàng)目,如測定項(xiàng)目,測定單位,血清來源及批號(hào),起止日期,主要儀器及使用波長等。②畫線:用紅筆畫出X±2S,用藍(lán)筆畫出X±3S線,即成為一張③填項(xiàng)目:在圖紙下方“日期”“測定值”和“操作者”欄內(nèi)按原始記錄填入相應(yīng)內(nèi)容。未做測定的節(jié)假日、星期天在圖上作出空格。④畫點(diǎn):畫出每個(gè)檢測值所對應(yīng)的圖點(diǎn),并將各圖點(diǎn)用直線相連。③填項(xiàng)目:在圖紙下方“日期”“測定值”和“操作者”欄內(nèi)①正常情況下每天測定結(jié)果應(yīng)在±2S范圍內(nèi)上、下兩側(cè)波動(dòng)。警告線以內(nèi)的結(jié)果為在控結(jié)果,失控線以外的為失控結(jié)果,介于警告線和失控線之間的結(jié)果為警告結(jié)果。(4)結(jié)果分析①正常情況下每天測定結(jié)果應(yīng)在±2S范圍內(nèi)上、下兩側(cè)波動(dòng)。警告②如控制圖中有連續(xù)5、6點(diǎn)都落在均值的上側(cè)或下側(cè),雖然結(jié)果在控,但說明有“定向改變”,提示可能有系統(tǒng)誤差存在。②如控制圖中有連續(xù)5、6點(diǎn)都落在均值的上側(cè)或下側(cè),雖然結(jié)果在③如在質(zhì)控圖中有連續(xù)5、6點(diǎn)有持續(xù)增高或減低,說明有“傾向改變”,提示應(yīng)檢查試劑或標(biāo)準(zhǔn)液,每月末進(jìn)行質(zhì)控結(jié)果分析,全部進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,CV改變過大或超出允許范圍,應(yīng)查找原因。③如在質(zhì)控圖中有連續(xù)5、6點(diǎn)有持續(xù)增高或減低,說明有“傾向改2.Westgard多規(guī)則質(zhì)控法本法是在Levey-Jennings質(zhì)控基礎(chǔ)上,同時(shí)使用多個(gè)質(zhì)控物和多項(xiàng)規(guī)則來進(jìn)行質(zhì)量控制的方法。能幫助質(zhì)控管理者確定失控原因,尋求解決問題的方法。2.Westgard多規(guī)則質(zhì)控法本法是
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