不同剪接方式對克氏原螯蝦性別表達的影響

不同剪接方式對克氏原螯蝦性別表達的影響

克氏原始蝦（procalenpri），俗稱小龍蝦。由于其快速生長、適應性強、肉味美、蛋白質含量高等特點，已成為中國重要的淡水經濟養(yǎng)殖品種之一。在自然發(fā)育和人工養(yǎng)殖過程中,雌雄個體間的生長速度存在一定的差異。在達到性成熟之前,雌雄個體相差不大且生長速度相當;接近性成熟時,由于雌蝦需要為卵巢提供大量的營養(yǎng)物質,雄蝦的體長和體質量增長較雌蝦快目前有關昆蟲雌雄性別發(fā)育相關基因的研究已有一定的進展,其中關于黑腹果蠅(Drosophilamelanogaster)性別決定機制的研究最為成熟,可為其他物種的研究提供一定的參考作用。在昆蟲的體細胞中性別決定信號的調控是由一系列涉及多個基因的聯(lián)級反應組成的,其中一些基因編碼在一些甲殼動物中,與性別決定聯(lián)級反應有關的一些基因已經被報道,如,羅氏沼蝦(Macrobrachiumrosenbergii)的1個Sxl基因,2個Dmrt轉錄異構體1材料和方法1.1動物材料試驗用蝦來自華中農業(yè)大學水產養(yǎng)殖示范基地,養(yǎng)殖水溫20～23℃,每天投喂2次,1周換水1次。采集健康的(20±5)1.2總采用1.3sxl根據(jù)1.4序列分析使用Seqman軟件對序列進行拼接,得到1.5熒光定量pcr基于已獲得的使用22結果與分析2.1克氏原蝦從雄性克氏原螯蝦精巢中擴增出了4個不同轉錄異構體的如圖1B所示,這4種不同剪接方式的2.2克氏原蝦在如圖2使用2.3克氏原螯蝦不同組織中pcsxl表達情況對成年雌雄克氏原螯蝦的腹部腹神經索(從圖4中可以看出,PcSxl在成年雄性克氏原螯蝦的觸角腺和鰓中表達量最高,其次是心臟、中腸、腹部腹神經索、后腸及肌肉組織,其他各組織PcSxl表達相對較低,特別是在眼柄和皮膚中;PcSxl在成年雌性克氏原螯蝦的中腸中表達量最高,其次是前腸、肌肉和卵巢,而在其他組織中PcSxl表達相對較低,尤其是在圍食道神經、眼柄和血中。此外,PcSxl在胃中的表達水平不存在雌雄差異;在雌性的前腸、中腸、皮膚和卵巢中PcSxl的表達量極顯著高于雄性相應組織中PcSxl的表達量(圖4);而在觸角腺和鰓及其他組織中,PcSxl在雄性組織中的表達水平要高于雌性相應組織中PcSxl表達水平。2.4不同發(fā)育時期的sxl原生蝦活性分析PcSxl在不同發(fā)育時期的表達模式如圖5所示,熒光定量3克氏原螯蝦的二態(tài)性表達Sxl在黑腹果蠅中可以通過性別特異性的剪接對體細胞的性別分化起到調控作用,但是在其他非果蠅的物種,如家蠶、地中海實蠅、中華絨螯蟹中,Sxl在雌雄兩性中均有表達,并且在4種PcSxl轉錄異構體克氏原螯蝦PcSxl在成年雄性觸角腺的表達量顯著高于雌性的,表現(xiàn)出性別二態(tài)性表達。在東方巖石龍蝦(Sagmariasusverreauxi)的2個性別發(fā)育相關基因SvTKIR和SvDmrt1的研究中發(fā)現(xiàn),這2個基因在雌雄未成年蝦的觸角腺中表達水平均較高,而在成年蝦的觸角腺中的表達則表現(xiàn)出性二態(tài)性,雌性中的表達水平顯著高于雄性在成年雌雄克氏原螯蝦的眼柄中PcSxl的表達量均較低,這與