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耐甲氧西林的葡萄球菌(MRS)檢測(cè)1、 苯唑西林瓊脂篩選試驗(yàn)培養(yǎng)基:MH瓊脂+4%NaCL和苯唑西林(6ug/ml)傾注成平板。方法:對(duì)瓊脂可進(jìn)行“點(diǎn)”接種,或者用棉拭子蘸取相當(dāng)于0.5麥?zhǔn)蠁挝坏木鷳乙哼M(jìn)行,劃線”接種。35笆孵育24小時(shí),為最好地從凝固酶陰性葡萄球菌中檢測(cè)耐甲氧西林菌株,需要獎(jiǎng)平板35°C孵育48小時(shí)。結(jié)果判斷:任何生長(zhǎng)即為MRS質(zhì)控菌株:金黃色葡萄球菌ATCC29213——敏感株2、 紙片擴(kuò)散法(K-B法)苯唑西林和頭孢西丁檢測(cè)mecA基因介導(dǎo)的葡萄球菌耐藥性解釋標(biāo)準(zhǔn)菌種頭孢西丁紙片法(mm) 苯唑西林紙片法(mm)SIRS I R金黃色葡萄球菌和路鄧葡萄球菌凝固酶陰性葡萄球菌N22 — W21N13 11-12W10N25 - W24注:1、用透射光觀察苯唑西林抑菌圈內(nèi)如有任何可見(jiàn)的生長(zhǎng),都表示苯唑西林耐藥,而頭抱西丁用反射光觀察抑菌圈內(nèi)如有任何可見(jiàn)的生長(zhǎng),都表示頭抱西丁耐藥。2、根據(jù)此解釋標(biāo)準(zhǔn)耐藥者既為耐甲氧西林的葡萄球菌藥敏實(shí)驗(yàn)紙片擴(kuò)散法的操作流程于純培養(yǎng)平板上挑取相同的菌落4-5個(gè)放入2ml無(wú)菌生理鹽水中稀釋呈0.5麥?zhǔn)蠁挝?。用無(wú)菌棉簽蘸取菌液在試管壁上擠壓幾次,壓去多余的菌液,涂布整個(gè)MH平板表面,反復(fù)數(shù)次,每次旋轉(zhuǎn)平板60度,使整個(gè)平板涂布均勻。涂布后的平板于室溫中干燥3-5分鐘,用無(wú)菌鑷子取藥敏紙片貼于平板表面,并用鑷尖輕壓一下紙片,使其貼平。每張紙片的間距不小于24mm,紙片的中心距平板的邊緣不小于15mm,90mm的平板上宜貼6張藥敏紙片。將貼好紙片的平板置35o孵育18-24小時(shí)后取出判斷結(jié)果。判斷結(jié)果:根據(jù)(CLSI規(guī)則)抑菌環(huán)的大小,判斷為敏感(SX耐藥(R)、或中度敏感(I)。不應(yīng)報(bào)告為敏感抗生素和微生物組合依據(jù)CLSI規(guī)則第十八版信息下列抗生素/微生物組合在體外可表現(xiàn)活性,但在臨床上無(wú)效,不應(yīng)報(bào)告敏感微生物不應(yīng)報(bào)告為敏感的抗生素藥產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希氏菌、奇異變形桿菌青霉素類,頭孢菌素類及氨曲南沙門菌屬,志賀菌屬i>n代頭孢菌素類和氨基糖甙類耐苯唑西林的葡萄球菌屬青霉素類,&-內(nèi)酰胺類鄧-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合物,頭孢菌素類,碳青霉烯類腸球菌屬氨基糖甙類(除高濃度外),頭
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