《針刺動物實驗研究報告規(guī)范》（征求意見稿）

T/CAAM00XX-202X1針刺動物實驗研究報告規(guī)范本文件提供了針刺動物實驗研究報告的條目清單和具體條目內(nèi)容要求。本文件適用于以針刺或電針為干預手段的，觀察針刺效應機制的動物實驗報告的寫作。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。ARRIVE指南2.0STRICTA清單2010中華中醫(yī)藥學會團體標準：中醫(yī)藥期刊編排規(guī)范（2017）3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1針刺動物實驗研究報告acupunctureresearchonanimals3.2對照組controlgroup作為與針刺（電針）組進行參照對比的動物群組。對照組與針刺（電針）組之間，除治療方法外，其他條件盡可能相同，對照組可分為陰性對照組或陽性對照組。4條目清單根據(jù)國內(nèi)外已發(fā)表針刺動物實驗文獻的結(jié)構(gòu)，整合ARRIVE指南2.0和STRICTA清單2010，并經(jīng)過兩輪德爾菲調(diào)查建立針刺動物實驗報告規(guī)范條目清單。見表1。表1條目清單條目內(nèi)容條目編號條目要素11.3主要效應部位及效應物質(zhì)名稱1.4穴位或針刺部位T/CAAM00XX-202X2表1條目清單（續(xù)）條目內(nèi)容條目編號條目要素22.1作者姓名2.2作者單位2.3作者在本研究中的貢獻度說明（中英文）3ARRIVE11ARRIVE11ARRIVE11ARRIVE114疾病名稱、干預方法、主要檢測指標名稱或主要檢測指標反映的功能55.1研究背景STRICTA1b為基礎5.2研究假說ARRIVE135.3研究問題和研究目標ARRIVE13實驗動物66.1說明倫理審批機構(gòu)和許可證編號；說明遵循的關愛原則ARRIVE14,156.2動物詳細資料ARRIVE8a6.3動物進一步信息ARRIVE8b6.4飼養(yǎng)場所及飼養(yǎng)場所的潔凈等級6.5簡要說明飼養(yǎng)條件ARRIVE13實驗材料7以STRICTA2g為基礎以STRICTA2g為基礎實驗方法88.1研究設計ARRIVE1，2，4STRICTA1a，2b-3b,58.2造模方法8.3干預措施8.3.1針刺治療的類型STRICTA18.3.2各組穴位名稱（單、雙側(cè)）STRICTA2b8.3.3穴位定位及依據(jù)8.3.4針刺時，動物的狀態(tài)8.3.5進針深度、角度、手法。留針期間如行針，說明行針的具體方法及每次行針的時長、總次數(shù)；如使用電針，給出電針參數(shù)（強度、頻率、波形等）STRICTA2c8.3.6針刺引發(fā)的動物機體反應或操作者的感覺STRICTA2dT/CAAM00XX-202X3條目內(nèi)容條目編號條目要素8.3.7操作時間STRICTA3b8.3.8操作者技術(shù)背景STRICTA58.3.9對照組STRICTA68.4取材的具體過程和時間8.5檢測指標ARRIVE98.6統(tǒng)計方法ARRIVE799.1動物實際納入情況9.2實驗結(jié)果ARRIVE1010.1說明結(jié)果的合理性依據(jù)10.2對結(jié)果的解釋ARRIVE17aARRIVE18ARRIVE17b參考文獻根據(jù)各期刊格式列出參考文獻基金資助報告所有資助基金的名稱、編號利益沖突報告所有利益相關方（資助者、作者、研究人員之間）有無利益沖突ARRIVE21對研究有貢獻但未列入作者席的，在此致謝新增,可選因素操作視頻復雜針刺操作或?qū)嶒灡Ａ魣D像或影像資料可選因素注：除備注為可選因素的條目外，其余條目均為必備要素T/CAAM00XX-202X45條目內(nèi)容解釋5.1題目5.1.1針法電針、內(nèi)熱針法、針刺瀉法。解釋：如果該研究報告是關于不同針法的比較，或針法是本研究的重要內(nèi)容，宜在題目中報告;如果不是，報告大類即可，比如電針、手針。5.1.2動物模型佐劑性關節(jié)炎大鼠。解釋：包括疾病名稱和動物種類。5.1.3主要效應部位及效應物質(zhì)名稱滑膜組織中白細胞介素6。解釋：如為多個效應部位，寫出與研究目標最相關的一個或多個部位；如為多個效應物質(zhì)，寫出主要效應物質(zhì)反映的功能。5.1.4穴位或針刺部位足三里、三陰交。解釋：多個穴位時，寫主要穴位；多個穴位位于同一條經(jīng)脈上時，宜寫經(jīng)脈名稱。5.2作者5.2.1作者姓名示例：張華，李明。解釋：宜列出全部作者的姓名。5.2.2作者單位中國中醫(yī)科學院針灸研究所，北京100700。解釋：T/CAAM00XX-202X5作者工作單位應按照作者署名順序依次列出,注明單位全稱（到二級單位）及其所在省(自治區(qū)、直轄市)市或縣名和郵政編碼。5.2.3作者在本研究中的貢獻度說明示例：某某參與實驗設計及部分電生理實驗。解釋：按照作者署名順序依次說明作者在本研究中的貢獻度。5.3摘要（中文摘要+英文摘要）5.3.1目的示例：通過觀察……,分析電針改善心肌缺血的機制。解釋：用1-2句話綜合概括研究目的。5.3.2方法將雄性SD大鼠隨機分為假手術(shù)組、模型組和電針組，每組10只。采用……方法，制備……大鼠模型。電針組取“中極”“關元”予以電針治療，1次/d，20min/次，共8d。造模前后及干預后用足底測痛儀測定大鼠雙足縮腿反應潛伏期。解釋：概括動物種屬，分組，每組樣本量，造模方法，治療干預方法（穴位、治療頻次、治療時長等，如有對照干預簡述其方法），檢測指標及方法。5.3.3結(jié)果假手術(shù)組大鼠……；模型組大鼠……；電針組……。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠……降低（P＜0.01）；與模型組比較，電針組大鼠……（P＜0.01）。解釋：先敘述模型組與正常組比較的結(jié)果，再敘述治療組與模型組的比較，如治療組有多個，接著敘述各治療組間的比較。比較的結(jié)果直接說升高或降低，不宜僅寫“有統(tǒng)計學差異”。有統(tǒng)計學差異的指標給出P值。5.3.4結(jié)論電針能減輕……，改善……，其作用機制可能與……有關。解釋：綜合概括研究結(jié)論。5.4關鍵詞（中文+英文，英文關鍵詞宜和中文關鍵詞一一對應）慢性非細菌性前列腺炎；電針；前列腺；肥大細胞；膠原纖維。應包括疾病名稱、干預方法、主要檢測指標名稱或主要檢測指標反映的功能。T/CAAM00XX-202X65.5前言5.5.1研究背景膝關節(jié)骨關節(jié)炎是……的復雜性關節(jié)疾病。疼痛是膝關節(jié)骨關節(jié)炎的首發(fā)癥狀，……，導致患者生活質(zhì)量嚴重下降。電針是緩解KOA慢性痛的有效手段，……。海馬小膠質(zhì)細胞的阿片受體……，在痛情緒過程中發(fā)揮了重要作用。目前海馬小膠質(zhì)細胞是否參與了針刺對KOA的調(diào)節(jié)還不得而知。解釋：包括研究疾病的簡要流行病學背景，針刺治療的臨床依據(jù)，體現(xiàn)研究的必要性和合理性。5.5.2研究假說據(jù)此，提出本研究的科學假說：針刺可能通過調(diào)節(jié)海馬小膠質(zhì)細胞上的阿片受體，參與對KOA的良性干預作用。解釋：研究假說的建立是基礎科研的核心，根據(jù)報告的內(nèi)容，假說可大可小。5.5.3研究問題和研究目標因此本研究重點從海馬小膠質(zhì)細胞介導的神經(jīng)炎性反應參與慢性痛作為切入點，通過……，觀察電針“陽陵泉”對膝關節(jié)骨關節(jié)炎大鼠海馬小膠質(zhì)細胞上主要阿片受體表達的影響，為揭示電針治療KOA的神經(jīng)機制提供實驗依據(jù)。解釋：根據(jù)報告的具體內(nèi)容，研究問題可和研究假說合并。5.6實驗動物5.6.1倫理實驗中動物的使用遵守“3R”原則，實驗過程中對動物的處置嚴格遵守中華人民共和國科學技術(shù)部頒布的《關于善待實驗動物的指導性意見》。解釋：說明倫理審批機構(gòu)和許可方案編號；說明遵循的關愛原則。5.6.2動物詳細資料6周齡SPF級雌性SD大鼠40只，體質(zhì)量……，由……實驗動物有限公司提供，生產(chǎn)許可解釋：T/CAAM00XX-202X7簡要說明動物種屬、健康狀況、級別、雌雄、總數(shù)量、體質(zhì)量、來源、批號、飼養(yǎng)條件、分組、每組數(shù)量。5.6.3動物進一步信息健康雄性CaMKII-Cre小鼠30只，8周齡，由中國科學技術(shù)大學生命科學院張智實驗室提解釋：涉及遺傳信息，基因信息的實驗，要說明健康免疫狀態(tài)、基因修飾狀態(tài)、基因型以及動物的來源等。5.6.4飼養(yǎng)場所及飼養(yǎng)場所的潔凈等級飼養(yǎng)于北京中醫(yī)藥大學SPF級實驗室。5.6.5飼養(yǎng)條件室溫22~24℃,濕度40%~60%，12h光照/12h黑暗的環(huán)境，動物自由攝食、飲水。適應性喂養(yǎng)1周后開始實驗。解釋：簡要說明飼養(yǎng)條件，包括飼養(yǎng)環(huán)境的溫度、濕度、照明、食物（喂養(yǎng)時間、次數(shù)、食量等）、飲水（飲水時間、次數(shù)、飲水量等）等。5.7實驗材料5.7.1關鍵試劑腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子一抗(英國Abcam，ab2345)。解釋：關鍵試劑的名稱、廠家及貨號（要與研究方法對應）。5.7.2關鍵儀器BX53型熒光顯微鏡(日本Olympus)，0.18mm×13mm一次性不銹鋼針灸針(吳江云龍)。解釋：關鍵儀器的名稱、廠家及型號（要與研究方法對應），包括針具類型及規(guī)格、材質(zhì)。5.8實驗方法5.8.1研究設計T/CAAM00XX-202X8適應性喂養(yǎng)1周后，將神經(jīng)功能評分>1分的大鼠按隨機數(shù)字表法隨機分為空白組、模型組和電針組，每組10只。解釋：說明設計分組原則（需設立正常對照組和模型對照組），具體分組方法，每組動物的數(shù)量，排除或納入動物的標準。5.8.2造模方法大鼠稱重后用2%戊巴比妥鈉（0.2mL/100g）腹腔注射麻醉。將動物仰臥位固定在手術(shù)臺上，頸、胸局部剃毛，手術(shù)區(qū)皮膚常規(guī)消毒，用解剖剪剪開頸部皮膚約1cm，用止血鉗鈍性分離頸部的組織和肌肉，暴露氣管，用眼科手術(shù)剪剪開氣管，插入大鼠專用的氣管插管，打開呼吸機電源，動物人工呼吸機進行人工呼吸（呼吸頻率90次/min，呼吸時比1.25∶1，潮氣量6）。沿大鼠胸骨正中線左邊旁開約1cm的皮膚剪開大約3~4cm縱行切口，用止血鉗鈍性分離胸部的肌肉，暴露肋骨，分離第2、3肋間隙，剪斷第3肋，剪開心包膜,在左心耳和肺動脈圓錐下找到冠狀動脈左前降支，用5-0縫合線結(jié)扎。局部的心肌顏色由鮮紅變成暗紫色,心電圖（ECG）ST-T明顯抬高，為心肌缺血模型成功。解釋：要說明公認的造模依據(jù)（引用參考文獻）；造模的主要步驟：動物體位、操作方法等；是否麻醉，如果麻醉需報告麻醉方法、麻醉藥物及其濃度和劑量；造模成功的判斷標準（引5.8.3干預措施5.8.3.1針刺治療的類型電針組給予電針刺激。解釋：說明針刺治療的類型，如電針、內(nèi)熱針法、針刺瀉法，等。5.8.3.2各組穴位名稱（單、雙側(cè)）選取大鼠左后肢的“陽陵泉”，腧穴定位參照文獻。解釋：說明各組治療所用穴位名稱（單、雙側(cè)）。5.8.3.3穴位定位及依據(jù)按照《實驗針灸學》第9版常用實驗動物針灸穴位附圖中的取穴方法定位“足三里”(膝關節(jié)后外側(cè)，腓骨小頭下約5mm處）。T/CAAM00XX-202X9解釋：若為非穴位或無標準名稱，則描述具體刺激位置的解剖學部位。若穴位較多，還要記錄針刺的順序。5.8.3.4針刺開始時，動物的狀態(tài)動物清醒狀態(tài)下，用大鼠固定器將大鼠俯臥位固定。解釋：指動物是否麻醉、是否固定。5.8.3.5具體針刺方法使用0.18mm×13mm一次性針灸針直刺3～5mm，常規(guī)提插捻轉(zhuǎn)后，接電針儀，同側(cè)穴位連接一對導線，疏密波，頻率2Hz/100Hz，強度1~2mA。解釋：進針深度（采用指定的計量單位或特定的組織層面描述）、角度、手法。留針期間如行針，說明行針的具體方法及每次行針的時長、總次數(shù)；如使用電針，給出電針參數(shù)（強度、5.8.3.6針刺引發(fā)的動物機體反應或操作者的感覺大鼠下肢肌肉輕微抖動，以大鼠不掙扎為度。解釋：用可觀察到的動物肢體反應結(jié)合可量化的指標描述，根據(jù)具體研究內(nèi)容，可只寫動物或操作者其中之一，或兩者兼而有之。5.8.3.7操作時間每次15min，1次/d，5次為1個療程，共治療2個療程，每個療程結(jié)束后休息1d進行痛行為學測定，再進行下一療程的治療。解釋：包括干預開始時間、留針時間、治療頻次、總次數(shù)等。和5.8.3.5中“留針期間如行針,說明行針的具體方法及每次行針的時長、總次數(shù)”不同，5.8.3.5指的是單次行針。本條目指總行針時間。5.8.3.8操作者技術(shù)背景針灸推拿專業(yè)研究生。解釋：T/CAAM00XX-202X非針法研究報告，可不報告操作者技術(shù)背景；若進行針法的研究宜記錄操作者的技術(shù)背5.8.3.9對照組西藥組采用美沙拉嗪腸溶片灌胃[參考文獻]，用0.9%氯化鈉溶液配制成0.04g/mL的灌胃液，每次灌胃2mL，每日灌胃2次，共灌胃10d。解釋：由于針灸治療的特殊性，不強制設置陰性對照組或陽性對照組：如果采用假針刺或其他任何一種類似針刺的陰性對照措施，則提供條目5.8.3.1到條目5.8.3.8所要求的詳細信息；如果使用的是西藥，要說明給藥途徑、劑量及給藥方法的參照依據(jù)。5.8.4取材的時間和具體過程最后1次痛行為學測定結(jié)束，禁食24h后1%戊巴比妥鈉麻醉后處死小鼠，快速開胸暴露心臟，……灌流后，待大鼠肺完全變白，在冰上剝離出每組6只大鼠左側(cè)海馬。解釋：說明取材和造?；蛑委煹臅r間關系，取材時是否處死動物，若處死動物，應說明所采用的具體方法，對于復雜部位的取材，描述定位組織的方法。5.8.5檢測指標取海馬組織上清，BCA法測定樣品蛋白濃度。取50μg蛋白樣品于15%SDS凝膠中電泳分離蛋白，轉(zhuǎn)至PVDA膜，封閉后加入BDNF一抗(1∶1000)、β-actin(1∶5000),4℃孵育過夜；將加入一抗孵育后的PVDF取出，TBST洗滌3次，加入HRP標記的羊抗兔IgG二抗(1∶10000)，室溫孵育1h，TBST洗滌后用ECL化學發(fā)光法顯影，凝膠成像儀曝光成像并拍照。用ImageJ圖像分析軟件分析各條帶灰度值，以β-actin作為內(nèi)參蛋白，以目的蛋白與內(nèi)參蛋白的灰度值比值作為目的蛋白的相對表達量。解釋：明確主要檢測指標及檢測方法,描述程度至其他人可重復（若對標準流程或操作說明書進行了改動，如：對推薦抗體的稀釋濃度進行了改動，需詳細說明）；說明檢測指標的定量方法（如果可以量化的話）。5.8.6統(tǒng)計方法所有數(shù)據(jù)采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理，數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布且方差齊，用均數(shù)±標準差（x士s）表示，組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較用LSD檢驗。以P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義的標準。解釋：宜包括：T/CAAM00XX-202X1）使用的統(tǒng)計軟件及統(tǒng)計方法、數(shù)據(jù)細節(jié)（中位數(shù)、方差分析等）；2）有統(tǒng)計學意義的標準檢測指標。5.9結(jié)果5.9.1動物實際納入情況CCI術(shù)前，4組大鼠患健側(cè)PWLD的差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。CCI術(shù)后7d，模型組、電針組大鼠的PWLD明顯高于正常組（P<0.01)。經(jīng)電針干預后，電針組大鼠的PWLD明顯低于模型組（P<0.05)。解釋：5.9.2實驗結(jié)果和正常組比較，模型組大鼠脊髓中HSP90的表達明顯升高（P<0.05)。和模型組比較，電針組HSP90的表達進一步升高（P<0.05)。見圖3。報告每一結(jié)局指標的分析結(jié)果和統(tǒng)計學信息（通過對照得出，提供但不報告論文原始圖片、數(shù)據(jù)）。宜對每部分結(jié)果提供1—2句話的總結(jié)性語言，讓文章更有邏輯感。5.10討論5.10.1結(jié)果的合理性依據(jù)包括穴位選取的依據(jù)及意義；模型選擇依據(jù)；指標選擇依據(jù)。5.10.2對結(jié)果的解釋宜定性地對本文的主要研究發(fā)現(xiàn)和重要性作簡要總結(jié)，而不是重復結(jié)果部分的數(shù)字，說明研究結(jié)果的科學性及其對研究目的的支持度。5.10.3數(shù)據(jù)可用性引用其他相關的高質(zhì)量研究對實驗結(jié)果進行比較、分析和解釋，宜夾敘夾議體現(xiàn)研究思路和邏輯性實驗與以往結(jié)果的相關性；說明實驗結(jié)果對臨床研究（實踐）的價值。5.10.4實驗局限性包括但不限于：可能存在的偏倚風險及原因；可能存在的任何影響實驗結(jié)果的原因；研究未盡之處。5.11參考文獻T/CAAM00XX-202X秦瑾,陳海英,叢斌,等.外源性LTB4對CIA小鼠Treg/Th17脾細胞分化的作用[J].中國藥理學通報,2009,25(9):1230-1234.引用的參考文獻應為作者閱讀過的一次文獻，參考文獻格式根據(jù)各期刊具體要求列出。5.12基金資助國家自然科學基金項目（No.12345678）。報告所有資助基金的名稱、編號。5.13利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突。報告所有利益相關方（資助者、作者、研究人員之間）有無利益沖突。5.14致謝對研究有貢獻但未列入作者席的，在此致謝。本條目為非必選條目。5.15復雜針刺操作或?qū)嶒灡Ａ魣D像或影像資料本條目為非必選條目。T/CAAM00XX-202X6具體撰寫要求寫具體格式要求可參考中華中醫(yī)藥學會團體標準：中醫(yī)藥期T/CAAM00XX-202X(資料性)學術(shù)論文構(gòu)成元素A.1構(gòu)成元素學術(shù)論文構(gòu)成元素見表A.1。表A.1學術(shù)論文構(gòu)成元素組成必備性題名提供題名元數(shù)據(jù)信息作者信息提供作者元數(shù)據(jù)信息摘要提供摘要元數(shù)據(jù)信息關鍵詞提供關鍵詞元數(shù)據(jù)信息其他項目部分必備或可選提供管理與利用元數(shù)據(jù)信息主體有則必備致謝可選參考文獻結(jié)構(gòu)元數(shù)據(jù)有則必備結(jié)構(gòu)元數(shù)據(jù)T/CAAM00XX-202X(資料性)ARRIVE指南2.0條目ARRIVE指南2.0關鍵條目見表B.1。附表B.1ARRIVE指南2.0關鍵條目1234567b．描述用于評估數(shù)據(jù)是否能滿足統(tǒng)計假設的任何方法，以及當統(tǒng)計假設8a．提供使用動物種類的詳細資料，包括物種、品系、亞系、雌9,包括：對于每次實驗，包括獨立重復的過程，報告:T/CAAM00XX-202XB.2建議條目ARRIVE指南2.0建議條目見表B.2。附表B.2ARRIVE指南2.0建議條目何相關許可證或方案編號（如適用）。如果沒有尋求或未），b．列出所有的資助來源（包括課題識別號）以及資助方在研究設計、分T/CAAM00XX-202X(資料性)STRICTA清單2010C.1STRICTA清單針刺臨床試驗中報告干預措施時需包含的信息(STRICTA2010)見表C.1。附表C.1STRICTA2010條目細節(jié)1針刺治療的合理性1a)針刺治療的類型(如中醫(yī)針刺、日本漢方醫(yī)學針刺、韓國韓醫(yī)針刺、西醫(yī)針刺、五行針刺、耳針等)1b)提供針刺治療的理由、依據(jù)的歷史背景、文獻來源、和/或共識，均需有適當?shù)膮⒖嘉墨I1c)說明何種治療發(fā)生了改變2針刺細節(jié)2a)每一受試對象每一治療單元用針的數(shù)目(需要時用均數(shù)和范圍表示)2b)使用的穴位名稱(單側(cè)/雙側(cè))(如無標準名稱則說明位置)2c)進針的深度，采用指定的計量單位，或特定的組織層面2d)引發(fā)的機體反應(如得氣或肌肉抽搐反應)2e)針刺激方式(如手工行針刺激和電刺激)2f)留針時間2g)針具類型(直徑、長度和生產(chǎn)廠家或材質(zhì))3治療方案3a)治療單元數(shù)3b)治療單元的頻數(shù)和持續(xù)時間4輔助干預措施4a)對針刺組施加的其它附加干預的細節(jié)(如灸、拔罐、中藥、鍛煉、生活方式建議)4b)治療場所和相關信息，