魚(yú)腥草臨床應(yīng)用研究進(jìn)展

魚(yú)腥草臨床應(yīng)用研究進(jìn)展

魚(yú)糞草是三白草科植物的一種三白草科植物。“它是新鮮的全草或干燥的土壤。在名醫(yī)的嚴(yán)格記錄中，它被記錄為一開(kāi)始?！薄ｔ~(yú)腥草味辛,微寒,歸肺經(jīng),具有清熱解毒、消癰排膿、利尿通淋的功能,主要用于肺癰吐膿、痰熱喘咳等?，F(xiàn)代研究證明魚(yú)腥草具有較好的抗炎活性,臨床上用于治療呼吸道感染,如結(jié)膜炎、角膜炎、急慢性鼻炎、鼻竇炎等炎癥性疾病。作為傳統(tǒng)的清熱解毒中藥,魚(yú)腥草因其顯著的抗炎、解熱作用,在2003年衛(wèi)生部從上萬(wàn)種中藥中推薦的8種抗SARS中藥中,魚(yú)腥草注射液排在第2位。魚(yú)腥草化學(xué)成分復(fù)雜,主要含有揮發(fā)油、生物堿、黃酮、多糖、有機(jī)酸等。在中醫(yī)臨床實(shí)踐和中藥制藥工業(yè)中,以魚(yú)腥草揮發(fā)油成分的藥用活性?xún)r(jià)值最高。已上市多年的魚(yú)腥草注射液和魚(yú)腥草滴眼液均由新鮮魚(yú)腥草通過(guò)水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油的飽和蒸餾液制成。魚(yú)腥草揮發(fā)油成分主要為甲基正壬酮(methyl-n-nonyiketone)、癸酰乙醛(decanoylacetaldehyde,又名魚(yú)腥草素,其亞硫酸氫鈉加成物稱(chēng)為合成魚(yú)腥草素或魚(yú)腥草素鈉)等脂肪族類(lèi)成分,以及β-月桂烯(β-myrcene)、α-蒎烯(α-pinene)等萜類(lèi)成分。隨著對(duì)魚(yú)腥草研究的不斷深入,對(duì)魚(yú)腥草抗炎作用機(jī)制的研究也取得了一些成果。現(xiàn)對(duì)國(guó)內(nèi)外關(guān)于魚(yú)腥草抗炎作用機(jī)制的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。1魚(yú)腥草水溶液蒸餾提取物對(duì)大鼠抗炎、抗氧化作用的影響細(xì)胞因子是一類(lèi)重要的炎癥介質(zhì),根據(jù)其對(duì)炎癥反應(yīng)的影響與作用分為2類(lèi),即促進(jìn)炎癥反應(yīng)的致炎因子,如腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和白細(xì)胞介素類(lèi)(IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-12、IL-17等),其中TNF-α、IL-1、IL-6是介導(dǎo)炎癥的主要細(xì)胞因子;減輕或抑制炎癥反應(yīng)的抗炎因子(如IL-4、IL-5、IL-10等)。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)魚(yú)腥草制劑、提取物及其單體成分癸酰乙醛、甲基正壬酮等的抗炎作用機(jī)制進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)魚(yú)腥草水提物在質(zhì)量濃度為0.0625、0.125mg/mL時(shí)可抑制TNF-α的分泌(抑制率約30%)。甲基正壬酮?jiǎng)┝恳蕾?lài)性抑制LPS誘導(dǎo)的TNF-α產(chǎn)生。魚(yú)腥草注射液可以抑制血清中TNF-α、IL-1β和IL-8的量,可能是其抗炎解熱作用的機(jī)制之一。大鼠ig給予鮮魚(yú)腥草揮發(fā)油(100mg/kg),可抑制LPS誘導(dǎo)的IL-8、丙二醛(MDA)的產(chǎn)生,從而發(fā)揮其抗炎、抗氧化作用。α-蒎烯可降低LPS誘導(dǎo)的IL-8分泌。炎癥和免疫是機(jī)體對(duì)外界刺激的2種不同反應(yīng),但兩者在炎癥疾病的組織、細(xì)胞、分子水平上是緊密聯(lián)系、不可分割的過(guò)程。魚(yú)腥草水提物可通過(guò)調(diào)節(jié)促炎因子如IL-1、IL-6、TNF-α等的表達(dá)而提高免疫功能。作為一種多功能Th1型細(xì)胞因子,γ干擾素(IFN-γ)有抗炎、抗病毒和抗纖維化的作用。研究發(fā)現(xiàn),在LPS誘導(dǎo)的急性肺纖維化大鼠模型中IFN-γ的表達(dá)下降,表明免疫系統(tǒng)被抑制,魚(yú)腥草水蒸氣蒸餾提取物在給藥第7~21天時(shí)可上調(diào)IFN-γ的表達(dá),其可能的活性成分經(jīng)鑒定為α-松油醇,且IFN-γ表達(dá)上調(diào)的同時(shí)不伴隨轉(zhuǎn)錄激活因子1(STAT1)的表達(dá)上調(diào),提示魚(yú)腥草水蒸氣蒸餾提取物能抑制促炎STAT1通路,從而減輕肺纖維化;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)是一種多功能Th2型細(xì)胞因子,在肺纖維化過(guò)程中可抑制炎癥、促進(jìn)修復(fù),研究表明魚(yú)腥草水蒸氣蒸餾提取物通過(guò)抑制TGF-β1/Smad2/3信號(hào)通路,從而修復(fù)模型大鼠的肺纖維化。大多數(shù)變態(tài)反應(yīng)如哮喘,在啟動(dòng)后可激活多種炎癥細(xì)胞及其介質(zhì)的釋放,在形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為白細(xì)胞浸潤(rùn)或伴有血管反應(yīng)、滲出、增生、間質(zhì)損害等病變,在病理學(xué)上都屬于急性或慢性炎癥的范疇。鮮魚(yú)腥草揮發(fā)油(30、100、300mg/kg)均能降低哮喘豚鼠肺組織中TNF-α的量,從而減輕氣道慢性炎癥。越來(lái)越多的資料證明動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性的炎癥反應(yīng),在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中可見(jiàn)大量的炎癥介質(zhì)如細(xì)胞因子、趨化因子、黏附分子。癸酰乙醛(魚(yú)腥草素)可明顯降低動(dòng)脈硬化模型大鼠TNF-α、IL-1β、IL-6水平,同時(shí),可提高抗炎因子IL-10的水平,從而發(fā)揮其對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的有益作用。值得注意的是,魚(yú)腥草的抗炎作用不是簡(jiǎn)單的表現(xiàn)為提高抗炎細(xì)胞因子的表達(dá),對(duì)抗炎因子的抑制也可能是其發(fā)揮抗炎作用的機(jī)制。如魚(yú)腥草乙醇提取物在質(zhì)量濃度為100μg/mL時(shí)部分抑制由乙酸肉豆蔻佛波醇(PMA)和CaI刺激的人外周白血病T(JurkatT)細(xì)胞和人肥大細(xì)胞株(HMC-1)中Th2型細(xì)胞因子如IL-4、IL-5的表達(dá),從而發(fā)揮由Th2介導(dǎo)的變應(yīng)性炎癥的抗炎作用。2no在炎癥反應(yīng)中的作用前列腺素類(lèi)是花生四烯酸代謝產(chǎn)物,可部分刺激其他介質(zhì)如組胺和緩激肽的釋放,從而導(dǎo)致炎癥反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn),魚(yú)腥草揮發(fā)油可抑制LPS誘導(dǎo)的小鼠腹膜巨噬細(xì)胞中前列腺素E2(PGE2)的釋放(IC5044.8μg/mL)。家兔給予魚(yú)腥草注射液(10mL/kg)2h后血清中PGE2的量顯著降低,可能是其抗炎解熱作用的機(jī)制之一。NO參與細(xì)胞因子尤其是與炎癥有關(guān)的細(xì)胞因子的調(diào)節(jié),在炎癥反應(yīng)中具有細(xì)胞毒性和抗炎保護(hù)的雙重作用。單核巨噬細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞等在LPS、TNF-α、IL-1等作用下,可產(chǎn)生大量NO。同時(shí),NO可降低血小板的聚集和黏附,抑制肥大細(xì)胞誘發(fā)的炎癥反應(yīng)、減少急性炎癥灶內(nèi)的白細(xì)胞聚集,阻斷NO的產(chǎn)生可促進(jìn)白細(xì)胞的滾動(dòng)和黏著。魚(yú)腥草水提物劑量依賴(lài)性抑制LPS和IFN-γ激活的巨噬細(xì)胞系中NO的產(chǎn)生。小鼠腹腔巨噬細(xì)胞經(jīng)LPS活化24h后,NO的量及誘導(dǎo)型NO合酶(iNOS)mRNA的表達(dá)顯著增高,隔日ig魚(yú)腥草水提物(500mg/kg)4周后,LPS誘導(dǎo)的NO的產(chǎn)生被抑制,表明魚(yú)腥草水提物可同時(shí)在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平調(diào)節(jié)NO的產(chǎn)生。甲基正壬酮(0.1~10μg/mL)可劑量依賴(lài)性抑制LPS誘導(dǎo)的NO產(chǎn)生,魚(yú)腥草揮發(fā)油中其他單體成分如α-蒎烯和月桂烯可分別減少I(mǎi)L-1和LPS誘導(dǎo)的NO產(chǎn)生。3魚(yú)腥草揮發(fā)油對(duì)特定黏附分子發(fā)揮其作用白細(xì)胞游出后聚集于損傷部位,是炎癥反應(yīng)的一個(gè)重要特征,具體過(guò)程表現(xiàn)為白細(xì)胞向著化學(xué)刺激物即趨化因子所在部位作定向移動(dòng)?，F(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)的趨化因子有50多種,根據(jù)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)主要分為CC、CXC等幾大類(lèi),其中單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)是一種重要的炎癥趨化因子。特定黏附分子如細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)及其相應(yīng)配體的表達(dá)水平和結(jié)合的親和力是不同類(lèi)型炎癥發(fā)生過(guò)程中重要的分子基礎(chǔ)。經(jīng)不同劑量鮮魚(yú)腥草揮發(fā)油ig后能減少肺炎模型大鼠肺組織中白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞數(shù),降低炎癥程度,尤其是鮮魚(yú)腥草揮發(fā)油高劑量組(100mg/kg),能顯著降低肺炎模型大鼠肺組織中趨化和激活單核細(xì)胞至炎癥部位的CC趨化因子受體2(CCR2)的表達(dá)。魚(yú)腥草素鈉能改善腎臟組織的組織學(xué)情況,降低蛋白尿水平,并能顯著降低腎臟組織中MCP-1的表達(dá)(P<0.001)。魚(yú)腥草抑制結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞ICAM-1的表達(dá),恢復(fù)結(jié)腸壓力和痛閾值至正常水平,從而能治療潰瘍性結(jié)腸炎。魚(yú)腥草乙醇提取物通過(guò)阻斷CCD-986sk細(xì)胞中由HMC-1、IL-4和TNF-α誘導(dǎo)的胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)的產(chǎn)生,從而作用于Th2介導(dǎo)的變應(yīng)性炎癥。4魚(yú)腥草素制劑核因子κB(NF-κB)是一種具有多向性調(diào)節(jié)作用的蛋白質(zhì)分子,它以p50/p65異源二聚體形式存在,廣泛參與基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)與致炎性轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá),全身炎癥反應(yīng)中伴有多器官NF-κB的活化,介導(dǎo)多種炎癥基因的表達(dá)。細(xì)胞處于靜息狀態(tài)時(shí),NF-κB與抑制蛋白IκB家族的成員結(jié)合為p50/p65/IκB異源三聚體存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi),當(dāng)細(xì)胞受外界刺激時(shí),NF-κB迅速?gòu)膒50/p65/IκB異源三聚體中游離、活化后進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi),其亞基形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)與DNA特異位點(diǎn)結(jié)合,啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄,誘導(dǎo)細(xì)胞合成各種炎癥因子如TNF-α、IL-1、IL-6等。魚(yú)腥草以70℃蒸餾水浸泡5h所得水提取物可抑制抗原誘導(dǎo)的IκB-α的降解和NF-κB的活化,作用于抗原誘導(dǎo)的肥大細(xì)胞內(nèi)IgE受體(FceRI)依賴(lài)的信號(hào)通路中的多個(gè)環(huán)節(jié)蛋白,如Syk、Lyn、LAT、Gab2和PLCc2的磷酸化,及下游Akt和絲裂原活化蛋白激酶(MAPK,ERK1/2和JNK1/2而不是p38MAPK)的磷酸化,是其治療炎癥性疾病的可能機(jī)制。魚(yú)腥草80%乙醇提取物、醋酸乙酯提取物通過(guò)調(diào)節(jié)干細(xì)胞因子(SCF)介導(dǎo)的細(xì)胞移行信號(hào)進(jìn)而抑制SCF誘導(dǎo)的HMC-1細(xì)胞遷移和NF-κB核轉(zhuǎn)移,從而抑制NF-κB活性而發(fā)揮抗炎作用。魚(yú)腥草素可明顯降低動(dòng)脈硬化模型大鼠膽固醇和低密度脂蛋白的水平,抑制模型大鼠動(dòng)脈NF-κB的過(guò)量表達(dá),從而發(fā)揮其對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中慢性炎癥的有益作用。魚(yú)腥草素鈉(60~120mg/kg)劑量依賴(lài)性地降低陽(yáng)離子化牛血清白蛋白(C-BSA)誘導(dǎo)的膜性腎小球腎炎BALB/c小鼠NF-κB和MCP-1的水平,其抗炎作用可能與抑制NF-κB誘導(dǎo)的細(xì)胞因子通路有關(guān)。魚(yú)腥草揮發(fā)油成分α-蒎烯可減少I(mǎi)L-1誘導(dǎo)的核因子的產(chǎn)生,上調(diào)人單核細(xì)胞株THP-1細(xì)胞系NF-κB通路IκB表達(dá)。5治療炎癥疾病的機(jī)制與藥物治療炎癥疾病的作用機(jī)制通過(guò)對(duì)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的調(diào)控,可以在基因水平上闡明炎癥的致病機(jī)制與藥物治療炎癥疾病的作用機(jī)制。魚(yú)腥草水提物(20μg/mL)對(duì)脂磷壁酸(LTA)誘導(dǎo)的人皮膚成纖維細(xì)胞炎癥有抗炎活性,可能與其抑制TNF-αmRNA水平,部分阻斷TNF-α通路有關(guān)。6魚(yú)腥草提取物的抗炎作用環(huán)氧化酶(COX)包括2種異構(gòu)體:COX-1和COX-2。COX-1是結(jié)構(gòu)酶,其底物前列腺素主要參與調(diào)節(jié)機(jī)體的生理功能;COX-2是誘導(dǎo)酶,其底物前列腺素導(dǎo)致炎癥的產(chǎn)生。對(duì)COX-1的選擇性抑制可導(dǎo)致胃腸道、腎臟的不良反應(yīng),對(duì)COX-2的選擇性抑制則發(fā)揮抗炎作用。研究發(fā)現(xiàn),魚(yú)腥草揮發(fā)油對(duì)COX-2有選擇性抑制作用:抑制LPS誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞PGE2的產(chǎn)生,劑量依賴(lài)性抑制LPS誘導(dǎo)的COX-2酶活性和COX-2mRNA、蛋白的表達(dá),對(duì)COX-1無(wú)影響。魚(yú)腥草水提物(20μg/mL)降低LTA和TNF-α誘導(dǎo)的COX-2蛋白水平,從而阻斷TNF-α通路,可能是其發(fā)揮對(duì)LTA誘導(dǎo)的人皮膚成纖維細(xì)胞炎癥的抗炎活性的機(jī)制之一。魚(yú)腥草超臨界二氧化碳萃取物(ig200mg/kg)可降低角叉菜膠氣囊模型小鼠氣囊滲出液和LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞中TNF-α、NO和PGE2的量,表明魚(yú)腥草超臨界二氧化碳萃取物可直接抑制COX-2或阻止炎癥細(xì)胞表達(dá)COX-2,通過(guò)抑制TNF-α-NO和COXII-PGE22個(gè)途徑發(fā)揮抗炎作用。魚(yú)腥草水提物也可通過(guò)調(diào)節(jié)體外COX-2的表達(dá)從而提高免疫功能。7魚(yú)腥草素鈉po誘導(dǎo)因子tlr4信號(hào)級(jí)聯(lián)糖皮質(zhì)激素是體內(nèi)重要的抗炎激素,藥物若能夠促進(jìn)其分泌,則會(huì)表現(xiàn)出抗炎作用。由魚(yú)腥草、板藍(lán)根等中藥的超臨界二氧化碳提取物制得的復(fù)方魚(yú)腥草膠囊具有明顯的抗炎作用,其機(jī)制可能與激動(dòng)下丘腦-垂體-腎上腺軸(HPA軸),減少PGE2和MDA的量,增加糖皮質(zhì)激素的合成有關(guān)。魚(yú)腥草揮發(fā)油成分α-蒎烯也同樣需要完整的腎上腺腺體才能發(fā)揮其抗炎活性。Toll細(xì)胞樣受體4(TLR4)是接受生物致炎因素如病原微生物刺激的主要受體之一,可介導(dǎo)LPS的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),該信號(hào)級(jí)聯(lián)導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的激活,誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子的分泌。魚(yú)腥草素鈉(po150mg/kg)可降低LPS所致小鼠肺部炎癥中TLR4的表達(dá)量,減少促炎細(xì)胞因子的分泌,從而減輕肺部炎癥。一些特定蛋白如Syndecan-4蛋白在炎癥反應(yīng)及組織創(chuàng)傷愈合中發(fā)揮著重要的作用。Syndecan-4蛋白是一種跨膜蛋白聚糖,屬于硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPGs)類(lèi)的多配體蛋白聚糖(syndecans)家族,廣泛存在于多系統(tǒng)組織細(xì)胞中。作為一種與生長(zhǎng)因子結(jié)合的共受體,其調(diào)控多種細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng),在細(xì)胞表面的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)和控制細(xì)胞行為如細(xì)胞伸展、識(shí)別、黏附、遷移和增殖等方面都起著重要的作用。研究發(fā)現(xiàn),一種高效低毒的新型魚(yú)腥草素衍生物能夠顯著抑制TNF-α誘導(dǎo)的小鼠血管外膜成纖維細(xì)胞增殖和Syndecan-4蛋白的表達(dá)。8中藥單體成分抗炎作用研究的展望炎癥性疾病或有炎癥性機(jī)制參與的疾病涵蓋了人體多個(gè)系統(tǒng)器官,包括呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)等,部分慢性炎癥還容易誘發(fā)形成惡性腫瘤。傳統(tǒng)治療這類(lèi)疾病因單獨(dú)使用抗炎藥或免疫增強(qiáng)藥,不僅療效不佳,長(zhǎng)期應(yīng)用還可能加重病情。加強(qiáng)藥物治療炎癥性疾病的作用機(jī)制研究具有重要意義,有利于臨床治療方案的確定和抗炎藥物的選擇,并為具有新的作用靶點(diǎn)藥物的研制開(kāi)發(fā)提供新的思路。目前魚(yú)腥草抗炎作用機(jī)制研究的對(duì)象主要集中在不同的溶劑提取物,中藥提取物多為粗制劑,除含有一些特定成分外還有其他多種生物活性物質(zhì),使其構(gòu)效關(guān)系、發(fā)揮藥理作用的分子機(jī)制等研究及開(kāi)發(fā)應(yīng)用受到極大地限制。如魚(yú)腥草水提物可抑制MAPK磷酸化,但未明確水提物中是何種物質(zhì)在起作用;傳統(tǒng)非甾體抗炎藥,如COX-2選擇性抑制劑可能產(chǎn)生一定的水腫,對(duì)高血壓、充血性心衰或血容量不足的病人易引起腎功能損害,還可能引起胃腸道、泌尿、血液、神經(jīng)系統(tǒng)等不良反應(yīng)。中藥具有多效性、雙向調(diào)節(jié)性及不良反應(yīng)小等特點(diǎn),研究報(bào)道魚(yú)腥草揮發(fā)油有選擇性COX-2抑制作用,但尚未明確其中的具體藥效成分,若能對(duì)其進(jìn)行深入研究,可為開(kāi)發(fā)研制新的選擇性抑制COX-2、具有較佳鎮(zhèn)痛和抗炎作用且對(duì)胃腸道及泌尿等系統(tǒng)副作用較小的天然抗炎藥物提供參考。對(duì)中藥單體成分進(jìn)行深入的抗炎作用研究,開(kāi)展藥效物質(zhì)基礎(chǔ)作用特點(diǎn)、作用機(jī)制等綜合研究,可以為人工合成新型的抗炎藥物開(kāi)辟新途徑。由于癸酰乙醛(魚(yú)腥草素)被普遍認(rèn)為是魚(yú)腥草揮發(fā)油中的主要藥效成分,但魚(yú)腥草素性質(zhì)不穩(wěn)定,受熱易被氧化成癸酰乙酸,然后脫羧生成甲基正壬酮。魚(yú)腥草素鈉的性質(zhì)比魚(yú)腥草素穩(wěn)定,又保留了藥理活性,因此目前多集中在對(duì)魚(yú)腥草素鈉的研究。甲基正壬酮被證明是魚(yú)腥草揮發(fā)油中發(fā)揮抗炎作